全 文 ：·制剂·
超声强化亚临界水提取脱脂葡萄籽中原花青素的
工艺及其抗氧化研究
李超１，王卫东１，虞海燕１，李姣姣１，杨日福２
（１徐州工程学院 食品工程学院，江苏 徐州 ２２１００８；
２华南理工大学 理学院，广东 广州 ５１０６４０）
［摘要］ 目的：优化超声强化亚临界水提取脱脂葡萄籽中原花青素的最佳工艺参数，研究其抗氧化活性，并与传统方法
进行比较。方法：采用自行设计的２Ｌ超声强化亚临界水提取设备，研究影响超声强化亚临界水提取原花青素的几个因素，包
括提取温度、提取时间和提取压力，并通过响应曲面法优化出最佳工艺参数；通过其对ＤＰＰＨ自由基和亚硝酸钠清除作用研究
了抗氧化活性。结果：超声强化亚临界水提取原花青素的最佳工艺参数为提取温度１４５℃，提取时间１８ｍｉｎ和提取压力１４
ＭＰａ，此时得率为４０５％；此条件下得到的原花青素对ＤＰＰＨ自由基和亚硝酸钠都有较好的清除作用；与传统索氏提取和热回
流提取相比，超声强化亚临界水提取具有提取时间短、得率高等优点。结论：采用超声强化亚临界水提取技术提取脱脂葡萄
籽中原花青素是可行的。
［关键词］ 超声强化亚临界水提取；原花青素；响应曲面法
［收稿日期］ ２００９０９３０
［基金项目］ 国家自然科学基金项目（２０７７６０４７）；徐州工程学院培
育项目（ＸＫＹ２００８３２２）
［通信作者］ 王卫东，讲师，博士，研究方向为功能性食品添加剂
及配料，Ｅｍａｉｌ：ｗｗｄ１２３＠１６３ｃｏｍ
［作者简介］ 李超，讲师，博士，研究方向为天然产物化学，Ｅｍａｉｌ：
ｃｈａｏｇｅ００２＠１６３ｃｏｍ
原花青素是葡萄籽中主要的多酚类物质，是由
黄烷３醇和黄烷３，４二醇的配位缩合或聚合而成
的低聚或多聚物［１２］。它具有抗氧化、抗衰老、抗肿
瘤，抗辐射，防止血小板凝结，增强心血管活性等多
种生物活性和药理作用［３７］。常用的原花青素提取
方法有索氏提取和热回流提取等，这些方法都存在
提取时间长等缺点。水是一种对环境无害的萃取溶
剂，常温常压下水是极性很大的溶剂，随着温度的升
高，水的极性会降低，对中极性和非极性有机物的溶
解能力也会增加［８］。在适度的压力下，将水加热到
１００℃以上临界温度３７４℃以下的高温，水体仍然
保持在液体状态，它的极性会随温度变化而改变，这
种水称为亚临界水［９］（ｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，
ＳＷＥ），也称之为高温水、超加热水、高压热水或热
液态水。亚临界水与常温常压下的水在性质上有较
大差别，控制温度和压力可以调节亚临界水的极性，
从而达到选择性提取目标成分，例如当温度为２５０
℃，压力１０ＭＰａ时，水的极性与甲醇相当。作为一
种新型提取技术，具有提取时间短、效率高、环境友
好等优点，在国外作为一种绿色环保技术已应用于
环境样品中植物有效成分的提取、有机污染物的萃
取等领域［１０１３］。超声波具有空化效应、机械效应和
热效应，能够强化传质过程，因此本研究以酿酒和果
汁加工的下脚料葡萄籽为研究对象，尝试用超声强
化亚临界水提取这一新技术来提取葡萄籽（首先超
临界ＣＯ２萃取脱脂）中原花青素，旨在为原花青素的
提取提供一种绿色高效的新型技术。
１ 材料
葡萄籽（石家庄金牛饲料有限公司），儿茶素对
照品 （中国药品生物制品检定所，批号 ８７７
２００００１），香草醛（广东汕头市西陇化工厂），无水乙
醇和浓硫酸皆为分析纯，水为去离子水。
２Ｌ超声强化亚临界水提取设备（华南理工大
学理学院自制，见图１）。标准检验筛（浙江上虞华
美仪器纱筛厂）；风选中药粉碎机（山东省青州市精
诚机械制造有限公司）；ＦＡ２１０４Ｎ电子分析天平（上
海精密科学仪器有限公司）；ＳＥＮＣＯＲ２０１Ｌ旋转蒸
发器（上海申生科技有限公司）；ＸＭＴ１５２电热恒温
干燥箱（上海跃进医疗器械厂）；ＳＨＪＭ１数显恒温
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搅拌电热套（山东省鄄城现代实验仪器厂）；索氏提
取器（自行组装）；数显式电热恒温水浴锅（上海跃
进医疗器械厂）；ＨＡ１２１５００１型超临界 ＣＯ２萃取装
置（南通市华安超临界萃取有限公司）；ＣＯ２体积分
数＞９９５％（徐州市鼓楼区中北气站）。
１．纯水装置；２．蓄水池；３．压力泵；４．预加热器；５．萃取器；６．超
声波换能器；７．恒温装置；８．冷却器；９．收集器；１０．压力测定器；
１１．温度测定器；１２．冷却器进水口；１３．冷却器出水口；１４～２０．
调节阀门；２１．控制面板；２２．超温超压报警安全系统；２３．电源开
关；２４．压力调节控制器；２５．温度调节控制器。
图１ 超声强化亚临界水提取设备流程图
２ 方法
２１ 标准曲线的绘制
按文献［１４］方法稍加修改：精密称取儿茶素１０
ｍｇ，置于５０ｍＬ量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，
配成０２ｇ·Ｌ－１的对照品储备液。精密量取对照品
储备液 ０，０５，１０，１５，２０，２５ｍＬ，分别置于 １０
ｍＬ量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，配成 ０００，
００１，００２，００３，００４，００５ｇ·Ｌ－１的儿茶素甲醇
溶液，分别取０５ｍＬ于１０ｍＬ比色管中，再先后加
入３％香草醛甲醇溶液和３０％Ｈ２ＳＯ４各２５ｍＬ，３０
℃反应１５ｍｉｎ后，于波长５００ｎｍ处测定吸光度，另
取甲醇溶液作为空白对照。以儿茶素浓度为横坐
标，吸光度值为纵坐标，得回归方程 Ａ＝３３７７１Ｃ－
００００３，Ｒ２＝０９９９０。结果表明在 ０～０００４５５
ｇ·Ｌ－１线性良好。
２２ 超声强化亚临界水提取
２２１ 工艺流程
葡萄籽粉碎后过８０目筛，超临界ＣＯ２脱脂后称
取５０ｇ置于２Ｌ萃取罐中，提取一定时间后收集提
取液，蒸发浓缩定容后测定。
２２２ 工艺优化设计
２２２１单因素试验 分别以提取温度、提取时间
和提取压力为影响因素考察其对得率的影响。
２２２２ ＢｏｘＢｅｈｎｋｅｎ试验设计 根据 ＢｏｘＢｅ
ｈｎｋｅｎ试验设计原理，在单因素试验的基础上，选取
提取温度、提取时间和提取压力３个影响因素，采用
３因素３水平的响应曲面分析方法，试验因素与水
平设计见表１。共１５个试验点：其中１２个为析因
点，３个为中心点。
表１ 因素水平表
水平
ｘ１
提取温度／℃
ｘ２
提取时间／ｍｉｎ
ｘ３
提取压力／ＭＰａ
－１ １３５ １４ ９
０ １４５ １７ １２
１ １５５ ２０ １５
设该模型通过最小二乘法拟合的二次多项方程
为：
式中，ＥＹ为
〈
预测响应值，ｘｉ和 ｘｊ为自变量代码
值，β０为常数项，βｉ为线性系数，βｉｊ为交互项系数，βｉ
为二次项系数，ε为随机误差。按照 ＢｏｘＢｅｈｎｋｅｎ
试验设计的统计学要求，对上述方程的各项回归系
数进行回归拟合。
２２３ 抗氧化活性的测定
２２３１ 对ＤＰＰＨ自由基清除率的测定 按文献
［１５］方法稍加修改：取最佳工艺参数下脱脂葡萄籽
提取物稀释液（质量浓度分别为１０１，２０２，４０５，
８１０，１６２０，３２４０ｍｇ·Ｌ－１）１ｍＬ及 １４４×１０－４
ｍｏｌ·Ｌ－１的 ＤＰＰＨ溶液４ｍＬ加入同一具塞试管中
（共６支）摇匀，用纯溶剂作参比，于５１７ｎｍ波长下
测定吸光度。根据下列公式计算每种提取液对 ＤＰ
ＰＨ自由基的清除率：清除率（％）＝［１－（Ａｉ－Ａｊ）／
Ａ０］×１００。其中：Ａ０为不加提取物稀释液只加 ＤＰ
ＰＨ溶液的吸光度；Ａｉ为加提取物稀释液反应后 ＤＰ
ＰＨ溶液的吸光度；Ａｉ为不加ＤＰＰＨ只加提取物稀释
液的溶液的吸光度。
２２３２ 对亚硝酸钠清除率的测定 按文献［１６］
方法稍加修改：取最佳工艺参数下脱脂葡萄籽提取
物稀释液（质量浓度分别为１０１，２０２，４０５，８１０，
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１６２０，３２４０ｍｇ·Ｌ－１）１ｍＬ及 ５０ｍｇ·Ｌ－１的
ＮａＮＯ２溶液１０ｍＬ加入同一具塞试管中（共６支）
摇匀，３７℃恒温反应１５ｍｉｎ。加入０４％的对氨基
苯磺酸１０ｍＬ摇匀，静置，５ｍｉｎ后再加入０２％盐
酸萘乙二胺０５ｍＬ，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，静
置１５ｍｉｎ后，在 ５３８ｎｍ处测定吸光度。清除率
（％）＝［（Ａ０－Ａｉ）／Ａ０］×１００。式中：Ａ０为不加提取
物稀释液的反应物吸光度；Ａｉ为加提取物稀释液的
反应液的吸光度。
２３ 其他提取方法
２３１ 索氏提取
葡萄籽粉碎后过８０目筛，超临界ＣＯ２脱脂后称
取５ｇ葡萄籽粉末，用滤纸包好，放入索氏提取器
中，定量加入８０％乙醇溶液１００ｍＬ，电热套加热提
取５ｈ，将提取液过滤，蒸发浓缩定容后测定。
２３２ 乙醇回流提取
葡萄籽粉碎后过８０目筛，超临界ＣＯ２脱脂后称
取５ｇ葡萄籽粉末，放置于２５０ｍＬ圆底烧瓶中，加
１００ｍＬ８０％乙醇溶液，电热套加热提取２ｈ后，将
提取液过滤，蒸发浓缩定容后测定。
２３３ 得率（ＥＹ）的计算
ＥＹ＝原花青素的质量葡萄籽的质量 ×１００％
３ 结果与分析
３１ 单因素试验
３１１ 提取温度的影响
在超声强化亚临界水提取过程中，温度是影响
提取效果的重要因素之一。本试验在提取时间１７
ｍｉｎ和提取压力６ＭＰａ的条件下分别进行了固定温
度的提取试验，固定温度分别为１１５，１２５，１３５，１４５，
１５５，１６５℃，每个温度条件下萃取１７ｍｉｎ。试验结
果表明当温度低于１４５℃时，随着温度的升高原花
青素的得率逐渐升高，当温度为１４５℃时，原花青素
的得率达到了最大，此后随着温度的升高原花青素
的得率逐渐降低。这是由于温度的升高削弱了水分
子间的氢键作用力，导致氢氧键键角变大，水分子中
的正负电荷中心的间距变小，水分子的极性就随之
减弱，其性质越来越类似于有机溶剂，这样就可将原
料中的成分按极性由高到低依次萃取出来。原花青
素的成分多且复杂，既有极性较大的成分，也有极性
较小的成分，由于原花青素的成分大多极性较强，升
高温度可使水的极性减弱从而接近原花青素的极
性，有利于提取，所以出现了原花青素的得率随着温
度升高逐渐增加的现象；但当温度过高，其中热稳定
性差的成分就会发生热降解，反而降低了原花青素
的得率，所以当温度高于１４５℃时，不但原花青素的
得率明显降低，而且还伴随有一股烧焦的味道，提取
液的颜色也随之加深。这一试验结果与一些报
道［１７１８］相吻合。因此选择提取温度 １４５℃作为后
面的试验继续考察。
３１２ 提取时间的影响
静态提取的条件下考察提取时间对原花青素提
取效果的影响，结果开始时原花青素的得率随着时
间的延长显著增加，当提取时间为１７ｍｉｎ时，原花
青素得率达到最大，而后随着提取时间的延长反而
开始降低。超声强化亚临界水提取固体物料中有效
成分的传质过程，是一个活性成分在溶剂作用下通
过分子扩散运动达到固液相平衡的过程，到达平衡
状态需要一定的时间，因此平衡前适当地延长提取
时间有利于更多成分的溶出，可提高提取得率，但当
达到平衡后，由于葡萄籽中的成分多为一些强极性
原花青素，时间过长会导致部分成分发生降解，致使
提取得率降低。理论上提取时间越长，萃取效率应
该越好，但实际并非如此，Ｌｉｎ等［１９］在用亚临界水从
刺五加中提取丁香苷的研究中也发现了这一现象。
因此，实际操作中要根据所提取的目标物来选择最
佳提取时间。因此选择提取温度１７ｍｉｎ作为后面
的试验继续考察。
３１３ 提取压力的影响
本试验在静态提取、提取温度１４５℃、提取时间
１７ｍｉｎ的条件下，考察提取压力对原花青素提取的
影响，结果提取压力对原花青素的得率的影响很小：
随着提取压力的升高，原花青素得率的增幅很小，这
是因为在超声强化亚临界水提取过程中，压力只是
用来让水处于液体状态的，它的变化对水的极性影
响很小，所以提取压力对提取效果影响不大。这一
试验结果与一些报道［２０２１］相吻合。此外，压力大对
设备的材质要求就高，势必会增加成本。因此试验
选择１２ＭＰａ作为最优压力。
３２ ＢｏｘＢｅｈｎｋｅｎ试验
３２１ 模型的建立及其显著性检验
利用 ＤｅｓｉｇｎｅｘｐｅｒｔＶ７００统计软件通过逐步
回归对表２试验数据进行回归拟合，得到原花青素
得率对以上３个因素的二次多项回归模型为：
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ＥＹ（％）＝３９６＋００６ｘ１＋００６ｘ２－０００２５ｘ３
－００１７ｘ１ｘ２－００３８ｘ１ｘ３＋０００７５ｘ２ｘ３－０２３ｘ
２
１－
０１５ｘ２２－００９１ｘ
２
３。
对该模型进行方差分析，结果见表３。
表２ ＢｏｘＢｅｈｎｋｅｎ试验结果 ％
Ｎｏ 得率 Ｎｏ 得率
１ ３６５ ９ ３８５
２ ３７２ １０ ３８２
３ ３８１ １１ ３８４
４ ３８２ １２ ４０２
５ ３７４ １３ ４０２
６ ３７５ １４ ４０４
７ ３８７ １５ ４０９
８ ３９１
表３ 响应曲面二次回归方程模型方差分析
变异来源 平方和 自由度 均方 Ｆ Ｐ
模型 ０２３ ９ ００２６ ２３３２ ０００１５
ｘ１ ２１１２×１０－３ １ ２１１２×１０－３ １９３ ０２２３５
ｘ２ ００２１ １ ００２１ １９１９ ０００７２
ｘ３ ００２９ １ ００２９ ２６３０ ０００３７
ｘ１ｘ２ ００００９ １ ００００９ ０８２ ０４０６２
ｘ２ｘ３ ２２５×１０－４ １ ２２５×１０－４ ０２１８ ０６６９３
ｘ１ｘ３ ００１１ １ ００１１ １００７ ００２４７
ｘ２１ ０１２ １ ０１２ １１２３１ ００００１
ｘ２２ ００５１ １ ００５１ ４６５５ ０００１０
ｘ２３ ９２３１×１０－３ １ ９２３１×１０－３ ８４３ ００３３７
残差 ５４７５×１０－３ ５ １０９５×１０－３
失拟项 ２８７５×１０－３ ３ ９５８３×１０－４ ０７４ ０６１９５
误差项 ０００２６ ２ ０００１３
总和 ０２４ １４
由该模型的方差分析表３可见：模型具有高度
的显著性（Ｐ＜００１），失拟项不显著以及 Ｒ２Ａｄｊ＝
０９３４９和Ｓ／Ｎ（信噪比）为１４１５７远大于４，可知
回归方程拟合度和可信度均很高，试验误差较小，故
可用此模型对超声强化亚临界水提取原花青素的工
艺结果进行分析和预测。
３２２ 响应曲面分析与优化
根据回归方程，作响应曲面图，考察所拟合的响
应曲面的形状，分析提取温度，提取时间和提取压力
对得率的影响。其响应曲面见图２～４，３组图直观
地反映了各因素对响应值的影响。
比较３组图并结合表３中 Ｐ可知：模型的一次
项ｘ２（Ｐ＜００１）和 ｘ３（Ｐ＜００１）都极显著，ｘ１不显
著；交互项 ｘ２ｘ３（Ｐ＜００５）显著，其他交互项不显
著；二次项ｘ２１（Ｐ＜００１）和ｘ
２
２（Ｐ＜００１）都极显著，
图２ 提取温度、提取时间及其相互
作用对得率影响的响应面图
图３ 提取温度、提取压力及其相互
作用对得率影响的响应面图
图４ 提取时间、提取压力及其相互
作用对得率影响的响应面图
ｘ２３（Ｐ＜００５）显著，表明各影响因素对原花青素得
率的影响不是简单的线性关系。
为进一步确定最佳提取工艺参数，对所得方程
进行逐步回归，删除不显著项，然后求一阶偏导，并
令其为０，可得最佳工艺参数为提取温度１４５℃，提
取时间１８ｍｉｎ和提取压力１４ＭＰａ，此时原花青素得
率为４０８％。为检验ＢｏｘＢｅｈｎｋｅｎ试验设计所得结
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果的可靠性，采用上述优化出的工艺参数提取３次，
实际测得的平均得率为 ４０５％，与理论预测值相
比，其相对误差约为 ００９％。因此，基于 ＢｏｘＢｅ
ｈｎｋｅｎ试验设计所得的最佳工艺参数准确可靠，具
有实用价值。
３３ 抗氧化活性
脱脂葡萄籽中原花青素对ＤＰＰＨ自由基清除率
和亚硝酸钠清除率随其浓度的增加而增加；当原花
青素质量浓度为３２４ｍｇ·Ｌ－１时，ＤＰＰＨ自由基清
除率和亚硝酸钠清除率达到最大值分别为９５４％
和８１０％，说明原花青素对 ＤＰＰＨ自由基和亚硝酸
钠都有较好的清除作用。
３４ 不同提取方法比较
超声强化亚临界水提取脱脂葡萄籽中原花青素
得率是索氏提取得率的９８１％，而比乙醇回流提取
得率高３９７％；而超声强化亚临界水提取时间仅仅
１８ｍｉｎ，而其他提取方法则需要２ｈ以上，提取时间
大大缩短。由此可知，超声强化亚临界水提取是一
种非常有效的提取原花青素的方式。
４ 结论
由单因素试验和ＢｏｘＢｅｈｎｋｅｎ试验设计及其分
析结果获得的超声强化亚临界水提取原花青素的最
佳工艺参数为提取温度１４５℃，提取时间１８ｍｉｎ和
提取压力１４ＭＰａ，此时原花青素得率为４０５％；此
原花青素对ＤＰＰＨ自由基和亚硝酸钠都有较好的清
除作用。
实验还讨论比较了超声强化亚临界水提取与其
他提取方法的效果差异，结果表明，超声强化亚临界
水提取原花青素时间短，得率高。
［参考文献］
［１］ ＲｉｃａｒｄｏｄａｓｌｉｖａＪＭ，ＤａｒｍｏｎＮ，ＦｅｒｎａｎｄｅｚＹ，ｅｔａｌＯｘｙｇｅｎｆｒｅｅ
ｒａｄｉｃａｌｓｃａｖｅｎｇｅｒｃａｐａｃｉｔｙｉｎａｑｕｅｏｕｓｍｏｄｅｌｓｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔｐｒｏｃｙａ
ｎｉｄｉｎｓｆｒｏｍｇｒａｐｅｓｅｅｄｓ［Ｊ］ＪＡｇｒｉｃＦｏｏｄＣｈｅｍ，１９９１，３９（９）：
１５４９
［２］ ＳａｉｔｏＭ，ＨｏｓｏｙａｍａＨ，ＡｒｉｇａＴ，ｅｔａｌＡｎｔｉｕｌｃｅｒａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｇｒａｐｅ
ｓｅｅｄｅｘｔｒａｃｔａｎｄｐｒｏｃｙａｎｉｄｉｎｓ［Ｊ］ＪＡｇｒｉｃＦｏｏｄＣｈｅｍ，１９９８，４６
（４）：１４６０
［３］ ＴｅｉｓｓｅｄｒｅＰＬ，ＦｒａｎｋｅｌＥＮ，ＷａｔｅｒｈｏｕｓｅＡＬ，ｅｔａｌＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆ
ｉｎｖｉｔｒｏｈｕｍａｎＬＤＬｏｘｉｄａｔｉｏｎｂｙｐｈｅｎｏｌｉｃａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓｆｒｏｍ
ｇｒａｐｅｓａｎｄｗｉｎｅｓ［Ｊ］ＪＳｃｉＦｏｏｄＡｇｒｉｃ，１９９６，７０（１）：５５
［４］ ＢａｇｃｈｉＤ，ＢａｇｃｈｉＭ，ＳｔｏｈｓＳＪ，ｅｔａｌＯｘｙｇｅｎｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｓｃａｖｅｎ
ｇｉｎｇａｂｉｌｉｔｉｅｓｏｆｖｉｔａｍｉｎｓＣａｎｄｖｉｔａｍｉｎｓＥ，ａｎｄａｇｒａｐｅｓｅｅｄｐｒｏ
ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎｓｅｘｔｒａｃｔｉｎｖｉｔｒｏｒｅｓｅａｒｃｈ［Ｊ］ＲｅｓＣｏｍｍｕｎＭｏｌ
ＰａｔｈｏｌＰｈａｒｍａｃｏｌ，１９９７，９５（２）：１７９
［５］ ＲｉｇｏＡ，ＶｉａｎｅｌｏＦ，ＣｌｅｍｅｎｔＧ，ｅｔａｌＣｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｐｒｏａｎｔｈｏｃｙ
ａｎｉｄｉｎｓｔｏｔｈｅｐｅｒｏｘｙｒａｄｉｃａｌｓｃａｖｅｎｇｉｎｇｃａｐａｃｉｔｙｏｆｓｏｍｅＩｔａｌｉａｎ
ｒｅｄｗｉｎｅｓ［Ｊ］ＪＡｇｒｉｃＦｏｏｄＣｈｅｍ，２０００，４８（６）：１９９６
［６］ ＫｏｎｇＪＭ，ＣｈｉａＬＳ，ＧｏｈＮＫ，ｅｔａｌＡｎａｌｙｓｉｓａｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃ
ｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｓ［Ｊ］Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００３，６４（５）：９２３
［７］ ＹｏｏＭＡ，ＫｉｍＪＳ，ＣｈｕｎｇＨＫ，ｅｔａｌＴｈｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ
ｖａｒｉｏｕｓｃｕｌｔｉｖａｒｓｏｆｇｒａｐｅｓｋｉｎｅｘｔｒａｃｔ［Ｊ］ＪＦｏｏｄＳｃｉＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，
２００７，１６（６）：８８４
［８］ ＹａｎｇＹ，ＢｅｌｇｈａｚｉＭ，ＬａｇａｄｅｃＡ，ｅｔａｌＥｌｕｔｉｏｎｏｆｏｒｇａｎｉｃｓｏｌｕｔｅｓ
ｆｒｏｍｄｉｆｅｒｅｎｔｐｏｌａｒｉｔｙｓｏｒｂｅｎｔｓｕｓｉｎｇｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒ［Ｊ］Ｊ
ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡ，１９９８，８１０（１／２）：１４９
［９］ ＬｉＢ，ＹａｎｇＹ，ＧａｎＹＸ，ｅｔａｌＯｎｌｉｎｅｃｏｕｐｌｉｎｇｏｆｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌ
ｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗｉｔｈｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｖｉａ
ｓｏｌｉｄｐｈａｓｅｔｒａｐｐｉｎｇ［Ｊ］ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡ，２０００，８７３（２）：１７５
［１０］ ＲｉｃｈｔｅｒＰ，ＳｅｐúｌｖｅｄａＢ，ＯｌｉｖａＲＳｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ
ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓｉｎｓｏｉｌｕｓｉｎｇｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄ
ｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ［Ｊ］ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡ，
２００３，９９４（１／２）：１６９
［１１］ ＧａｒｃíａＭＭ，ＲｉｖａｓＧＪＣ，ＩｂáňｅｚＥＲｅｃｏｖｅｒｙｏｆｃａｔｅｃｈｉｎｓａｎｄ
ｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎｓｆｒｏｍｗｉｎｅｒｙｂｙｐｒｏｄｕｃｔｓｕｓｉｎｇｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］ＡｎａｌＣｈｉｍＡｃｔａ，２００６，５６３（１／２）：４４
［１２］ ＭｏｈａｍｍａｄＨＥ，ＦｅｒｅｓｈｔｅｈＧ，ＳｏｏｓａｎＲＳｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃ
ｔｉｏｎｏｆｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓｆｒｏｍｃｏｒｉａｎｄｅｒｓｅｅｄｓ（Ｃｏｒｉａｎｄｒｕｍｓａｔｉｖｕｍ
Ｌ）［Ｊ］ＪＦｏｏｄＥｎｇ，２００７，８０（２）：７３５
［１３］ ＭｕｓｔａｆａＺＯ，ＦａｈｒｅｔｉｎＧ，ＡｌｉｓｔａｉｒＣＬＳｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃ
ｔｉｏｎｏｆｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓｆｒｏｍＴｈｙｍｂｒａｓｐｉｃａｔａ［Ｊ］ＦｏｏｄＣｈｅｍ，
２００３，８２（３）：３８１
［１４］ 霍文兰高梁米糠中原花青素的提取、纯化及其抗氧化性研
究 ［Ｊ］食品科技，２００８（１０）：１４５
［１５］ 张尊昕，杨伯伦，刘谦光，等野葛根异黄酮成分的超声萃取
及抗氧化作用 ［Ｊ］食品科学，２００２，２３（５）：３１
［１６］ 赵二劳，王晓妮，张海容，等山楂清除亚硝酸盐及阻断亚硝
胺合成的研究 ［Ｊ］食品与发酵工业，２００６，３２（１０）：５０３
［１７］ ＥｉｋａｎｉＭＨ，ＧｏｌｍｏｈａｍｍａｄＦ，ＲｏｗｓｈａｎｚａｍｉｒＳＳｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓｆｒｏｍｃｏｒｉａｎｄｅｒｓｅｅｄｓ（Ｃｏｒｉａｎｄｒｕｍｓａｔｉ
ｖｕｍＬ）［Ｊ］ＪＦｏｏｄＥｎｇ，２００７，８０（２２）：７３５
［１８］ ＨａｔａＳ，ＷｉｂｏｏｎｓｉｒｉｋｕｌＪ，ＭａｅｄａＡ，ｅｔａｌＥｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｄｅｆａｔｅｄ
ｒｉｃｅｂｒａｎｂｙｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔ［Ｊ］ＢｉｏｃｈｅｍＥｎｇＪ，
２００８，４０（１）：４４
［１９］ ＬｉｎＣＣ，ＨｓｉｅｈＳＪ，ＨｓｕＳＬ，ｅｔａｌＨｏｔｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃ
ｔｉｏｎｏｆｓｙｒｉｎｇｉｎｆｒｏｍＡｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓａｎｄｉｎｖｉｔｒｏａｃｔｉｖａ
ｔｉｏｎｏｎｒａｔｂｌｏｏｄｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ［Ｊ］ＢｉｏｃｈｅｍＥｎｇＪ，２００７，３７
（２）：１１７
［２０］ ＳｏｔｏＡｙａｌａＲ，ＬｕｑｕｅｄｅＣａｓｔｒｏＭＤＣｏｎｔｉｎｕｏｕｓｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｓａｕｓｅｆｕｌｔｏｏｌｆｏｒｉｓｏｌａｔｉｏｎｏｆｅｄｉｂｌｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓ
［Ｊ］．ＦｏｏｄＣｈｅｍ，２００１，７５（１）：１０９
［２１］ ＪｉｍéｎｅｚＣａｒｍｏｎａａＭＭ，ＵｂｅｒａｂＪＬ，ＬｕｑｕｅｄｅＣａｓｔｒｏａＭＤ
Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｈｙｄｒｏ
ｄｉｓｔｉｌａｔｉｏｎｏｆｍａｒｊｏｒａｍｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌ［Ｊ］ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡ，１９９９，
８５５（２）：６２５
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第３５卷第８期
２０１０年４月
Ｖｏｌ３５，Ｉｓｓｕｅ ８
Ａｐｒｉｌ，２０１０
Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄａｓｓｉｓｔｅｄｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎｓ
ｆｒｏｍｄｅｆａｔｅｄｇｒａｐｅｓｅｅｄａｎｄｉｔｓａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ
ＬＩＣｈａｏ１，ＷＡＮＧＷｅｉｄｏｎｇ１，ＹＵＨａｉｙａｎ１，ＬＩＪｉａｏｊｉａｏ１，ＹＡＮＧＲｉｆｕ２
（１ＣｏｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＸｕｚｈｏｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｘｕｚｈｏｕ２２１００８，Ｃｈｉｎａ；
２ＣｏｌｅｇｅｏｆＳｃｉｅｎｃｅ，ＳｏｕｔｈＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６４０，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｔｈｅｕｌｔｒａｓｏｕｎｄａｓｓｉｓｔｅｄｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＵＳＷＥ）ｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａ
ｎｉｄｉｎｓｆｒｏｍｄｅｆａｔｅｄｇｒａｐｅｓｅｅｄ，ｓｔｕｄｙａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎｓａｎｄｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆＵＳＷＥａｎｄｏｔｈｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓＭｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ２ＬｅｑｕｉｐｍｅｎｔｏｆＵＳＷＥｗａｓｄｅｓｉｇｎｅｄａｎｄｕｓｅｄｔｏｅｘｔｒａｃｔｔｈｅｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎｓＴｈｅｆａｃｔｏｒｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇｅｘ
ｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅａｎｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｒｅｓｓｕｒｅｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄＴｈｅｂｅｓｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｗａｓｆｏｕｎｄｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｒｅｓｐｏｎｓｅ
ｓｕｒｆａｃｅｄｅｓｉｇｎＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎｓｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｂｙｉｔｓＤＰＰＨｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌａｎｄＮａＮＯ２ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｃｔｉｏｎＲｅｓｕｌｔ：
ＴｈｅＵＳＷＥｐａｒａｍｅｔｅｒｓｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ１４５℃，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ１８ｍｉｎ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｒｅｓｓｕｒｅ１４ＭＰａａｎｄｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｙｉｅｌｄ
（ＥＹ）ｗａｓ４０５％ ｕｎｄｅｒｔｈｉｓｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎ．Ｔｈｅｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｕｎｄｅｒｔｈｉｓｏｐｔｉｍｉｚｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｈａｄｂｅｔｅｒ
ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｃｔｉｏｎｏｎＤＰＰＨｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌａｎｄＮａＮＯ２．Ａｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌｓｏｘｈｌｅｔ′ｓｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｈｅａｔｒｅｆｌｕｘｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，
ｔｈｅＵＳＷＥｃｏｓｔｌｅｓｓｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ，ａｎｄｐｏｓｓｅｓｓｅｄｈｉｇｈｅｆｉｃｉｅｎｃｙａｎｄｓｏｏｎＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＵＳＷＥｉｓｈｉｇｈ
ｌｙｆｅａｓｉｂｌｅｔｏｅｘｔｒａｃｔｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎｓｆｒｏｍｄｅｆａｔｅｄｇｒａｐｅｓｅｅｄ
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄａｓｓｉｓｔｅｄｓｕｂｃｒｉｔｉｃａｌｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎｓ；ｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ
ｄｏｉ：１０．４２６８／ｃｊｃｍｍ２０１００８０６
［责任编辑 周驰］
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第３５卷第８期
２０１０年４月
Ｖｏｌ３５，Ｉｓｓｕｅ ８
Ａｐｒｉｌ，２０１０