全 文 ：４　讨论
曾选用蒸馏水作为接受液，结果大黄素和大黄
酚透过量很少，甚至没有，这可能与大黄素与大黄酚
在水中的溶解度有关。为了增大溶解度，改用５０％
乙醇溶液作为经皮渗透的接受液。说明接受液的性
质会直接影响透皮试验中成分的透过。
实验动物所取皮肤的位置和皮肤处理对实验结
果影响较大，因此应选取动物同一性别、同一部位的
皮肤（本实验为雄性大白鼠腹部皮肤），剥离后一定
要除尽皮下组织，以免影响药物渗透，而使实验结果
偏低。在向扩散池中加装接受液时，一定要排净气
泡，以便使接受液与动物皮肤充分接触，以减少误
差。
中药外用复方制剂在进行透皮实验时，测定指
标往往不易选择，不仅是因为成分的复杂性，而更主
要的是因为其成分含量低透过量少而不易测出，大
黄为本药君药，其主要有效成分大黄素、大黄酚药理
作用与本方功能相符，但含量较低。故本实验采用
ＨＰＬＣ法测定其累积透皮量，作为透皮吸收的指标，
具有良好的代表性。
本实验曾在冬季进行，测得数据较其他季节偏
低，推测可能由于大鼠皮毛因冬季保暖，增厚所致，
有待进一步深入研究。
［参考文献］
［１］　赵　莉，晁若冰．ＨＰＬＣ测定大黄通便胶囊中大黄素和大黄酚
［Ｊ］．华西药学杂志，２００３，１８（４）：２８３．
［２］　王　勇，贾晓斌，李　霞，等．复方香黄巴布膏体外透皮吸收研
究［Ｊ］．中成药，２００６，２８（９）：１２５４．
［３］　许景峰，赵维娟．月桂氮酮促安非拉酮的透皮吸收作用［Ｊ］．中
国医院药学杂志，１９９４，１４（６）：２６９．
［４］　毛超一，伊博文，闫小平，等．ＨＰＬＣ测定痤疮乳膏中大黄素、大
黄酚的含量［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２００７，１３（１０）：１．
［责任编辑　鲍　雷］
［收稿日期］　２００７０７２４
［通讯作者］　董慧茹，Ｅｍａｉｌ：ｄｏｎｇｈｒ＠ｍａｉｌ．ｂｕｃｔ．ｅｄｕ．ｃｎ
溶剂浮选分离富集厚朴中总厚朴酚的研究
刘西茜１，２，董慧茹１
（１．北京化工大学 理学院，北京 １０００２９；２．青海师范大学 化学系，青海 西宁 ８１０００８）
　　中药材厚朴为木兰科植物厚朴 Ｍａｇｎｏｌｉａｏｆｉｃｉ
ｎａｌｉｓＲｅｈｄ．ｅｔｗｉｌｓ．或凹叶厚朴 Ｍ．ｏｆｉｃｉｎａｌｉｓＲｅｈｄ．
ｅｔｗｉｌｓ．ｖａｒ．ｂｉｌｏｂａＲｅｈｄ．ｅｔＷｉｌｓ．的干燥干皮、枝皮
或根皮，具有抗病毒、抗肿瘤、防龋齿、抗菌及抗溃疡
等作用［１］。厚朴酚与和厚朴酚为厚朴中的主要活
性成分，两者为同分异构体。
近年来国内外对厚朴的研究进行了大量工作，
其应用范围越来越广，有效成分提取方法的研究也
有了较大的进展［２］。溶剂浮选法是近２０年发展起
来的一种新型分离富集技术，它具有分离与富集同
时完成的特点，在水中痕量金属离子以及有机污染
物的测定方面已有多篇文献报道［３５］，但采用溶剂浮
选法对厚朴中总厚朴酚进行分离富集，目前尚未见
报道。厚朴酚与和厚朴酚分子中都含有疏水基团苯
基与乙烯基，还含有亲水基团羟基，这种结构特别适
于溶剂浮选。本研究利用厚朴中厚朴酚类的这种疏
水亲气性来进行浮选，即在浮选过程中，水相中的总
厚朴酚可被大量气泡所产生的“气液”界面吸附，并
随气泡上升至浮选柱上部，待气泡破裂后溶解于上
层有机相中，收集有机相减压浓缩至干，即得到产物
总厚朴酚。作者对溶剂浮选法分离富集厚朴中总厚
朴酚进行了较详细的研究，优化了浮选溶剂、氮气流
速、试液ｐＨ、浮选时间等实验条件。实验结果表明，
溶剂浮选法具有分离速度快、富集倍数大、回收率
高、操作简便、有机溶剂用量少及成本低廉等特点，
为中草药有效成分的分离富集提供了一条新途径。
１　仪器和材料
Ｕ－３０１０紫外可见分光光度计（日本日立公
司），７５２Ｎ紫外可见分光光度计（上海精密科学仪
器有限公司），安捷伦液相色谱仪１１００系列（美国
安捷伦公司），ＡＶＡＴＡＲ３７０傅立叶变换红外光谱仪
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（美国尼高力公司），ＰＨＳ－２５型ｐＨ计（上海精密科
学仪器有限公司），溶剂浮选柱自制，溶剂浮选装置
如图１所示。
图１　溶剂浮选装置
１．氮气钢瓶；２．转子流量计；３．溶剂浮选柱；
４．玻砂滤板（Ｇ４）；５．皂膜流量计
　　氮气（北京普利斯通公司），氢氧化钠、氯化钠、
盐酸、正丁醇、正辛醇、甲苯、醋酸乙酯、石油醚和正
己烷均为分析纯（北京化工厂），甲醇为色谱纯（天
津西华特种试剂厂），娃哈哈纯净水（杭州娃哈哈集
团有限公司），厚朴样品购自北京嘉事堂药店樱花
西街分店，厚朴酚（批号１１０７２９２００３１０）与和厚朴
酚（批号１１０７３０２００４０８）对照品由中国药品生物制
品检定所提供。
２　方法与结果
２．１　前处理方法
称取２ｇ厚朴粗粉，用５０ｍＬ甲醇加热回流２
次，每次１ｈ，过滤，合并滤液，回收甲醇；将甲醇提取
物用１００ｍＬ水溶解，再用１００ｍＬ正己烷萃取以除
去色素及脂类杂质，水相于２５０ｍＬ量瓶定容，作为
储备液，生药质量浓度８ｍｇ·ｍＬ－１；使用时再稀释
至生药质量浓度００２ｍｇ·ｍＬ－１，作为样品溶液。
２．２　溶剂浮选条件优化实验
采用厚朴酚与和厚朴酚为对照品，分别配置
０１４３，００９１ｍｇ·ｍＬ－１的厚朴酚及和厚朴酚标准
储备液，再将两者按４∶６的比例配成混合标准溶液；
移取适量混合标准溶液用水配成０１４３μｇ·ｍＬ－１
（厚朴酚）和 ０１３７μｇ·ｍＬ－１（和厚朴酚）的混合标
准工作溶液。移取该液 ２００ｍＬ于２５０ｍＬ烧杯中，
用０１ｍｏｌ·Ｌ－１盐酸溶液和０１ｍｏｌ·Ｌ－１氢氧化钠
溶液调节试液至所需的 ｐＨ值，搅拌均匀后转移至
浮选柱中，加入１０ｍＬ浮选溶剂，以适当流速通入氮
气；浮选结束后，吸出上层有机相，于１０ｍＬ量瓶中
定容；取此液于１ｃｍ石英比色皿中，以浮选溶剂为
参比，于２９０ｎｍ波长处测其吸光度。
２．３　总厚朴酚的溶剂浮选分离富集方法
移取２．１制备的样品溶液２００ｍＬ于２５０ｍＬ烧
杯中，用０１ｍｏｌ·Ｌ－１盐酸和０１ｍｏｌ·Ｌ－１氢氧化
钠溶液调节试液的ｐＨ值至２，搅拌均匀后转至浮选
柱中，加入１０ｍＬ正丁醇，以５０ｍＬ·ｍｉｎ－１流速通
入氮气，浮选５０ｍｉｎ后，静置片刻，用吸管取出上层
有机相于１００ｍＬ烧杯中备用。将多次浮选收集物
转移至旋转蒸发仪中，减压蒸发，残留物用甲醇重结
晶，得总厚朴酚，产率８１８％（产率为富集液中总厚
朴酚的质量与样品溶液中总厚朴酚的质量比）。
２．４　溶剂浮选条件的优化
２．４．１　吸收曲线　按实验方法２．２进行混合标准
工作溶液的溶剂浮选，于２００～４００ｎｍ测其紫外吸
收光谱，峰值吸收分别位于２３９，２９０ｎｍ处，与厚朴
提取液的紫外吸收光谱一致，故选择２９０ｎｍ为测定
波长，以此波长处的吸光度作为评价浮选效果的指
标。
２．４．２　浮选溶剂的选择　分别选用正丁醇、正辛
醇、甲苯、醋酸乙酯和石油醚为浮选溶剂，其他按
２２方法进行。实验结果表明，以正丁醇为溶剂时，
浮选效果最佳。
２．４．３　ｐＨ的影响　用０１ｍｏｌ·Ｌ－１盐酸 和０１
ｍｏｌ·Ｌ－１氢氧化钠溶液，在１～８调整混合标准工作
溶液的ｐＨ，其他按实验方法２．２进行，结果如图２
所示。
图２　试液ｐＨ对总厚朴酚浮选效果的影响
　　由图２可见，试液 ｐＨ为２时的浮选效果最佳，
这是因为在ｐＨ２条件下，试液中酚类是以分子状态
存在，疏水性好，特别适宜于溶剂浮选，随着试液ｐＨ
值的增加，酚羟基因不同程度的解离而使其亲水性
增加，故浮选效率下降；而当 ｐＨ≤１时，酚羟基会与
Ｈ＋作用形成氧
$
离子，增加了酚类的亲水性，不利
于浮选；故本实验选择试液的 ｐＨ为２。试液 ｐＨ对
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厚朴酚类存在形态的影响可表示如下：
２．４．４　氮气流速的影响　改变氮气流速，其他按
２．２方法进行，结果如图３所示。
图３　氮气流速对总原朴酚浮选效果的影响
　　由图３可见，随着氮气流速的升高，浮选效率增
大，当流速为５０ｍＬ·ｍｉｎ－１时，浮选效果最佳；若继
续升高流速，浮选效率下降。这是因为，在较低流速
时，氮气流速升高有利于自水相至有机相的传质速
率提高，故浮选效率升高；当氮气流速超过某个临界
值时，气泡将沿器壁上升，在水相与空气界面上破
裂，气泡上携带的总厚朴酚分子直接返回水相，而不
进入有机相，不利于浮选进行。故选择氮气流速为
５０ｍＬ·ｍｉｎ－１。
２．４．５　浮选时间的选择　改变浮选时间，其他按
２．２方法进行，结果如图４所示。
图４　浮选时间对总厚朴酚浮选效果的影响
由图４可见，当浮选时间为５０ｍｉｎ时，浮选基
本达到平衡；若继续增加浮选时间，浮选效率增加不
大，故选择浮选时间为５０ｍｉｎ。
２．４．６　电解质氯化钠的影响　研究了氯化钠不同
加入量对浮选效率的影响。由图５可见，电解质氯
化钠的加入对浮选效率影响不大，故不需加入电解
质。
图５　ＮａＣｌ对总厚朴酚浮选效果的影响
２．５　浮选效果评价
通过上述条件实验，可确定总厚朴酚的最佳浮
选条件为：浮选溶剂为正丁醇，试液的ｐＨ为２，氮气
流速为５０ｍＬ·ｍｉｎ－１，浮选时间为５０ｍｉｎ，不加入
电解质。在最佳条件下对混合标准工作溶液进行溶
剂浮选，利用下述公式，求出厚朴中总厚朴酚的浮选
效率（注：２５中的萃取效率也是用此式计算得到）。
Ｅ＝（１－ＣＣ０
）×１００％
式中，Ｅ为浮选（或萃取）效率，Ｃ为浮选（或萃
取）后水相浓度，Ｃ０为浮选（或萃取）前水样浓度。
实验平行测定３次，测得的总厚朴酚浮选效率分别
为８７３％，８５２％和８７１％，平均浮选效率８６５％，
ＲＳＤ１３２％。
２．６　产物的结构鉴定
２．６．１　红外光谱分析　按２．３方法制得产物总厚
朴酚，测其红外光谱，如图６所示。
图６　产物的红外光谱
图６中３３６６，１２２１ｃｍ－１处的强峰分别由产物
分子中的ＯＨ与ＣＯ伸缩振动引起，说明酚羟基的
存在；１６００，１５０３ｃｍ－１是苯环骨架碳碳伸缩振动吸
收峰，说明产物分子中存在苯环结构；１６３６ｃｍ－１是
乙烯基的Ｃ＝Ｃ双键伸缩振动峰，９９２ｃｍ－１处的中
等强度峰与９１３ｃｍ－１处的强峰，说明乙烯基是单取
代，即分子中存在ＣＨ＝ＣＨ２基团；这些基团恰是厚
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朴酚类的分子结构特征。将图６与厚朴酚及和厚朴
酚混标的红外谱图相对照，发现两者吸收峰的位置
和峰形基本一致。
２．６．２　紫外光谱分析　按２．３方法制得产物总厚
朴酚，将其溶解于正丁醇中，测其紫外吸收光谱，如
图７所示。
图７　产物的紫外吸收光谱
　　图７中，２３９和２９０ｎｍ处的两个吸收峰分别由
两个相连苯环的共轭π→π跃迁产生，将其与厚朴
酚及和厚朴酚混标的紫外吸收光谱相对照，发现两
者吸收峰的位置及峰形基本一致。
２．６．３　ＨＰＬＣ分析　按２．３方法制得产物总厚朴
酚，溶解于正丁醇中，进行 ＨＰＬＣ分析。图８中，组
分Ａ和Ｂ的保留时间与和厚朴酚及厚朴酚标准品
的保留时间一致。
根据上述结构分析结果，可以确定中药材厚朴
经溶剂浮选后得到的产物为其有效成分总厚朴酚。
２．７　溶剂浮选法与溶剂萃取法的比较
在相同的前处理条件下，分别采用溶剂浮选法
和溶剂萃取法对厚朴中总厚朴酚进行分离富集，实
验测得溶剂浮选法和溶剂萃取法的浮选和萃取效率
分别为８６５％，６５８％，ＲＳＤ１３２（ｎ＝３）和１９４
（ｎ＝３）；有机相与水相的体积比依次为１∶２０和１∶
１，处理时间为１ｈ和５ｈ。由此可见，溶剂浮选法对
厚朴中总厚朴酚的分离富集效果明显优于溶剂萃取
法。这是因为溶剂浮选两相间分配平衡常数远大于
溶剂萃取，另外，溶剂浮选加入的有机溶剂量不受母
　　
图８　浮选产物的ＨＰＬＣ图
Ａ．和厚朴酚，ｔＲ＝５７５ｍｉｎ；
Ｂ．厚朴酚，ｔＲ＝１２７１ｍｉｎ；Ｃ．溶剂峰
液影响，视浮选柱的横截面积而定，而萃取加入的溶
剂量则由母液的体积所决定，因而溶剂浮选的富集
倍数高、处理的试样量大，并可节省大量溶剂。
３　讨论
在实验中，发现经前处理后的厚朴样品溶液在
溶剂萃取过程中易乳化，需放置４小时后才能分层，
这是因为有效的萃取需要合适的接触面，因而就需
要足够的萃取剂液滴，而溶剂的液滴太小，又极易导
致乳化；而溶剂浮选不存在乳化问题，因此分离时间
比溶剂萃取短，有效地节省了处理时间；此外，在溶
剂浮选中有机溶剂在水相的溶解损失较溶剂萃取
小，这是由溶剂在水相的非平衡溶解所致。由此可
见，对厚朴中总厚朴酚的分离富集，溶剂浮选法比溶
剂萃取法更有效。
［参考文献］
［１］　王承南，夏传格．厚朴药理作用及综合利用研究进展［Ｊ］．经济
林研究，２００３，２１（３）：８０．
［２］　张健和，符伟玉，莫丽儿．中药厚朴及其提取工艺的研究概况
［Ｊ］．时珍国医国药，２００４，１５（５）：３１３．
［３］　ＣｈｅｎｇＱ，ＤｏｎｇＨＲ．Ｓｏｌｖｅｎｔｓｕｂｌａｔｉｏｎｕｓｉｎｇｄｉｔｈｉｚｏｎｅａｓａｌｉｇａｎｄ
ｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｒａｃｅｅｌｅｍｅｎｔｓｉｎｗａｔｅｒｓａｍｐｌｅｓ［Ｊ］．Ｍｉｃｒｏ
ｃｈｉｍＡｃｔａ，２００５，１５０（１）：５９．
［４］　董慧茹，张利静，刘国文．溶剂浮选法分离富集工业废水中痕
量有机污染物的研究［Ｊ］．分析试验室，２００５，２４（５）：１９．
［５］　吕玉娟，朱锡海．溶剂气浮分离技术研究现状与发展方向［Ｊ］．
化学进展，２００１，１３（６）：４４１．
［责任编辑　王亚君］
更正
因“柿叶黄酮类成分的ＨＰＬＣ指纹图谱研究”一文重复刊登在今年５，６期上，特向读者致歉。
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