全 文 ：星点设计效应面法优化丹参须根
有效成分的酶法提取工艺
陆 刚１，杜国栋１，王俊儒１，２，梁宗锁２
（１．西北农林科技大学 理学院，陕西 杨凌 ７１２１００；
２．陕西省中药指纹图谱与天然产物库研究中心，陕西 杨凌 ７１２１００）
［摘要］ 目的：研究丹参须状细根中有效成分的酶法提取工艺，同时优化酶解工艺的参数。方法：采用纤维素
酶酶解再超声促提来提取丹参须状细根中的有效成分，通过星点设计效应面法优化酶解参数，并利用多元线性回
归和多项式回归建立预测模型。结果：利用优选出的酶解工艺所得到的丹参须状细根提取液中总丹参酮和总丹酚
酸的收率较非酶法分别提高了１１３９２％和３０６４％，并且薄层检测表明纤维素酶酶解对提取液中的有效成分无质
的影响；同时，建立的数学模型的复相关系数较高，并且通过检验。结论：采用纤维素酶酶解再超声促提的方法可
以充分地提取出丹参须状细根中的有效成分，同时，利用多项式回归所建立模型有较好的预测性。
［关键词］ 星点设计效应面法；丹参；须根；纤维素酶
［中图分类号］Ｒ２８３．６９ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１６１９７６０６
［收稿日期］ ２００８０２０９
［基金项目］ ２００５年西北农林科技大学青年学术骨干支持计
划
［通讯作者］ 王俊儒，Ｔｅｌ：１３４７４６４５１１６，Ｅｍａｉｌ：ｗａｎｇｊｒ０７＠
１６３．ｃｏｍ
丹参（ＲａｄｉｘＥｔＲｈｉｚｏｍａＳａｌｖｉａｅＭｉｌｔｉｏｒｈｉｚａｅ）为
唇形科（Ｌａｂｉａｔａｅ）鼠尾草属 Ｓａｌｖｉａ植物丹参 Ｓａｌｖｉａ
ｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａＢｇｅ．的干燥根及根茎。丹参饮片产生过
程中剩余的下脚料中包含大量须根，有研究［１］表
明，丹参须根中丹参酮ⅡＡ和丹酚酸 Ｂ的含量较丹
参其它部位高；丹参酮ⅡＡ与丹酚酸 Ｂ在丹参药材
中的分布有一定的规律［２］：二者在丹参根中的横向
分布以皮层为高，纵向分布均以根的下端高于上端，
须根含量最高。因此，有必要对丹参须根中的有效
成分提取工艺进行研究。
随着中药现代化的深入，为快速有效地从中药
材中提取分离和纯化低含量成分并保持其高活性，
新的强化提取技术（如微波技术、超声波技术、酶工
程技术和超临界技术等）应用研究发展迅速，并取
得了显著的成效。其中，酶工程技术尤为突出。在
提取药用植物有效成分过程中，有效成分向提取介
质扩散时，必须克服细胞壁及细胞间质的双重阻力。
众多研究［３８］表明，酶在植物的提取过程中可显著提
高其有效成分的提取率。其中，张村等［３］研究表
明：纤维素酶酶解后对丹参的化学成分无影响，且丹
参酮ⅡＡ的提取率较对照提高了 １８９２４％；Ｓｈｅｅｔａｌ
ＭＣｈｏｕｄｈａｒｉ等［８］研指出酶促提取可以从番茄加工
利用后的废弃物中得到数量相当可观的番茄红素。
酶促提取技术具有反应特异性高、快速、高效、反应
条件温和等优点。在试验设计上，国内大多采用正
交设计和均匀设计，这２种方法虽实验次数较少，但
二者多用线性数学模型，且精度不如星点设计，预测
性较差。星点设计方法简便，且在模型建立上采用
非线性数学模型拟合，复合相关系数较高，预测值更
接近真实值。
本实验旨在利用星点设计效应面法优化丹参
须根有效成分的纤维素酶酶解工艺的参数，并建立
预测模型，可为丹参须根中有效成分的提取提供依
据，促进丹参不同部位（根结、须根及地上茎叶）资
源综合利用，这对于进一步提高丹参资源的深加工
技术和拓展综合利用途径具有重要意义。
１ 材料与方法
１．１ 材料 丹参须根，２００５年４月由天士力商洛
丹参药源基地提供，自然阴干，粉碎后备用。
ＳＰ－２１００ＵＶ型紫外可见分光光度计（上海光
谱仪器有限公司）；ＦＹ１３０型药物粉碎机（天津市泰
斯特仪器有限公司）；ＳＨＨ－Ｗ２１－４２０型三用电热
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恒温水浴箱（天津市泰斯特仪器有限公司）；ｐＨＳ－３
精密ｐＨ计（上海雷磁）；ＳＢ５２００Ｔ型超声波清洗机
（宁波新芝生物科技股份有限公司）。
纤维素酶（绿色木酶，国药集团化学实剂有限
公司，酶活力≥１５０００Ｕ·ｇ－１）；丹参酮ⅡＡ对照品
（自制）；没食子酸对照品（国药集团化学实剂有限
公司）；无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝和氢氧化钠等
其他化学实剂均为国产分析纯。
１．２ 提取工艺和有效成分收率测定 整个工艺分
为原料酶解和超声提取 ２个阶段。酶解主要研究
ｐＨ、加酶量、酶解温度和时间对有效成分收率的影
响。同时，比较超声提取条件下酶解的影响。
总丹参酮 取０１ｇ丹参须根，加入适量纤维
素酶，２ｍＬ一定 ｐＨ的０２ｍｏｌ·Ｌ－１ＮａＯＡｃＨＯＡｃ
缓冲液，在一定温度水浴中酶解一定时间，离心残渣
后再加２０倍量无水乙醇，于４０℃超声提取３次，每
次１５ｍｉｎ。合并提取液，定容至１０ｍＬ，备用。以不
进行酶解处理为对照。鉴于总丹酚酸在２７０ｎｍ附
近也有吸收，直接在此波长下测定会对结果造成影
响。根据文献［９］，在３００～５００ｎｍ对样品液进行
波长扫描。结果表明，总丹参酮在（４２４±２）ｎｍ处
有最大吸收。精确移取２ｍＬ样品液，置于１０ｍＬ具
塞试管中，于４２４ｎｍ处测定吸光度 Ａ。并以丹参酮
ⅡＡ为对照品绘制标准曲线，得回归方程为 Ｃ＝
０１３８５Ａ＋００００５（ｒ＝０９９９５），在００２～００８ｇ
·Ｌ－１线性关系良好。总丹参酮收率 Ｙｔ（％）＝
（０１３８５Ａ＋００００５）×１０×１０／（２ｍ×１０００）×
１００％（ｍ为样品质量／ｇ，下同）。
总丹酚酸 取０１ｇ丹参须根，加入适量纤维
素酶，２ｍＬ一定ｐＨ０２ｍｏｌ·Ｌ－１ＮａＯＡｃＨＯＡｃ缓
冲液，在一定温度水浴中酶解一定时间后，于４０℃
超声提取３次，每次１５ｍｉｎ。离心合并上清夜，加入
等体积的无水乙醇静置０５ｈ，离心取上清液，定容
至２０ｍＬ，备用。以不进行酶解处理为对照。
鉴于丹酚酸类化合物均含有邻二酚羟基结构，
根据文献［１０１１］，采用 ＮａＮＯ２Ａｌ（ＮＯ３）３ＮａＯＨ体
系测定总丹酚酸含量。精确移取２ｍＬ样品液，置于
１０ｍＬ具塞试管中，加入２５ｍＬ１％ ＮａＮＯ２溶液，摇
匀，暗处静置５ｍｉｎ；再加入０２５ｍＬ２０％ Ａｌ（ＮＯ３）３
溶液，摇匀，暗处静置５ｍｉｎ；之后再加入４０ｍＬ１
ｍｏｌ·Ｌ－１ＮａＯＨ溶液，蒸馏水稀释至刻度，摇匀，暗
处静置１５ｍｉｎ。以空白液作参比，于５００ｎｍ下测定
吸光度Ａ，并以没食子酸为对照品绘制标准曲线，得
回归方程Ｃ＝０１８５５Ａ＋００２０７（ｒ＝０９９９１），在
００７５～０１７５ｇ·Ｌ－１线性关系良好。总丹酚酸收
率Ｙｓ（％）＝（０１８５５Ａ＋００２０７）×１０×２０／（２ｍ×
１０００）×１００％。
１．３ 星点实验设计优化酶解条件 中药酶解反应
底物较复杂，影响酶解反应的因素较多。单因素实
验表明ｐＨ、加酶量和酶解温度对丹参须根有效成分
的收率影响较大，而酶解时间各水平（０５，１０，１５，
２０，２５ｈ）之间没有显著性差异，故取其最低水平
０５ｈ。选取单因素考察中对酶解反应影响较大，且
作用效果不易预测的３个因素（ｐＨ、加酶量和酶解
温度），通过星点实验设计来优化酶解条件。因素
水平设置及星点设计见表１～３。
表１ 酶法提取总丹参酮的因素水平
水平
Ｘ１
／ｐＨ
Ｘ２
／加酶量／ｍｇ／０１ｇ
Ｘ３
／温度／℃
－１７３２ ４００ ５００ ４０
－１ ４４２ ６０５ ４６
０ ５００ ７５０ ５５
１ ５５８ ８９４ ６４
１７３２ ６００ １０００ ７０
表２ 酶法提取总丹酚酸的因素水平
水平
Ｘ１
／ｐＨ
Ｘ２
／加酶量／ｍｇ／０１ｇ
Ｘ３
／温度／℃
－１７３２ ４００ １００ ４０
－１ ４３２ １８５ ４４
０ ４７５ ３００ ５０
１ ５１８ ４１５ ５６
１７３２ ５５０ ５００ ６０
１．４ 模型拟合与工艺优化 以总丹参酮收率
（Ｙｔ％）为因变量，ｐＨ、加酶量和酶解温度为自变量，
利用统计软件ＳＡＳ（８０１）进行多元线性回归和二次
多项式拟合。
以总丹酚酸收率（Ｙｓ％）为因变量，ｐＨ、加酶量
和酶解温度为自变量，利用统计软件 ＳＡＳ（８０１）进
行多元线性回归和二次多项式拟合。
多元线性模型：Ｙ＝ｂ０＋ｂ１Ｘ１＋ｂ２Ｘ２＋ｂ３Ｘ３；
二次多项式模型：Ｙ＝ｂ０＋ｂ１Ｘ１＋ｂ２Ｘ２＋ｂ３Ｘ３＋
ｂ４Ｘ１２＋ｂ５Ｘ２２＋ｂ６Ｘ３２＋ｂ７Ｘ１Ｘ２＋ｂ８Ｘ１Ｘ３＋ｂ９Ｘ２Ｘ３；
对所拟合的模型进行模型的适合性检验，以通
过检验的合适的数学模型为基础，描绘三维效应面。
由于三维效应面只能表达含２个自变量函数的曲面
图，文中分别固定３个自变量中１个，并设其值为中
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表３ 三因素五水平星点实验设计
Ｎｏ．
Ｘ１
／ｐＨ
Ｘ２
／加酶量ｍｇ／０１ｇ
Ｘ３
／酶解温度／℃
１ －１ －１ －１
２ １ －１ －１
３ －１ １ －１
４ １ １ －１
５ －１ －１ １
６ １ －１ １
７ －１ １ １
８ １ １ １
９ －１７３２ ０ ０
１０ １７３２ ０ ０
１１ ０ －１７３２ ０
１２ ０ １７３２ ０
１３ ０ ０ －１７３２
１４ ０ ０ －１７３２
１５～２０ ０ ０ ０
值，代入原方程，绘制三维曲面图，并从效应面上选
取最佳工艺条件。
２ 结果与分析
２．１ 酶法提取总丹参酮的星点实验设计结果与模
型拟合分析 总丹参酮收率（Ｙｔ％）对 ｐＨ（Ｘ１）、加
酶量（Ｘ２）和酶解温度（Ｘ３）分别进行多元线性回归
和二次多项式拟合。酶法提取总丹参酮的多元线性
模型为Ｙｔ＝２０４６７０－００５０９０Ｘ１＋０１１９１３７Ｘ２＋
０００２５１Ｘ３，Ｒｔ≈０６９７＞Ｒ００１＝０６４７；该模型的 Ｒｔ
在Ｐ＜００１水平上显著，但数值偏低，说明模型拟
合度不佳，预测性较差。
２２ 酶法提取总丹参酮的二次多项式模型为 Ｙｔ＝
２１７３１０－０３０２２７Ｘ１＋００６２８０Ｘ２＋００３１６５Ｘ３＋
００３２８９Ｘ１２ －００３１３０Ｘ２２ －００００８９７９５Ｘ３２ －
０００３６３Ｘ１Ｘ２－００００９１４０６Ｘ１Ｘ３＋０００９８９Ｘ２Ｘ３，
Ｒｔ≈０８８７＞Ｒ００１＝０６４７；该模型的 Ｒｔ均在 Ｐ＜００１
水平上显著，且较多元线性模型的复相关系数高，说
明二次多项式模型较线性模型的拟合度高，预测性
好。另外，由该模型的标准残差｜ｅｉ′｜＜３（表４）可以
初步判定无离群值出现，即它们所对应的观测值无
异常；再者，由该模型的 ｒａｎｋｉｔ图（图１）可知，ｒａｎｋｉｔ
图线性关系良好，其相关系数分别为 ｒｔ≈０９８４２＞
ｒ００１（１８）＝０５６１，则可直观判断残差服从正态分
布，从而说明该模型是适合的。总之，复相关系数、
标准残差以及ｒａｎｋｉｔ图均表明这个二次多项式模型
是合适的。
２２ 酶法提取总丹酚酸的星点实验设计结果与模型
表４ 酶法提取总丹参酮的星点设计结果及残差分析
序号
Ｙｔ观测
／％
Ｙｔ预测
／％
残差
ｅｉ
标准残差
ｅ′ｉ
顺序残差
êｉ
ｕｉ
１ ２５９ ２７４ －０１５ －１１１ －０１５ －１８７
２ ２６３ ２７０ －００７ －０５２ －０１２ －１４０
３ ２７３ ２８３ －０１０ －０７９ －０１１ －１１３
４ ２７０ ２７８ －００７ －０５４ －０１０ －０９２
５ ２４３ ２５４ －０１１ －０８０ －００８ －０７４
６ ２４０ ２４８ －００８ －０５５ －００７ －０５９
７ ３０３ ３１５ －０１２ －０８１ －００７ －０４５
８ ３０４ ３０７ －００３ －０２２ －００５ －０３１
９ ３１９ ３００ ０１９ １３８ －００３ －０１９
１０ ２９５ ２８９ ００６ ０４１ －００２ －００６
１１ ２５７ ２４２ ０１５ １０７ －００１ ００６
１２ ３１１ ３０２ ００９ ０７１ ００２ ０１９
１３ ２８３ ２６７ ０１６ １１４ ００２ ０３１
１４ ２８６ ２７５ ０１１ ０７９ ００４ ０４５
１５ ２８９ ２９１ －００２ －０２０ ００６ ０５９
１６ ２８６ ２９１ －００５ －０３５ ００９ ０７４
１７ ２９３ ２９１ ００２ ０１０ ０１１ ０９２
１８ ２９３ ２９１ ００２ ０１５ ０１５ １１３
１９ ２９０ ２９１ －００１ －０１０ ０１６ １４０
２０ ２９５ ２９１ ００４ ０２５ ０１９ １８７
注：标准残差ｅ′ｉ＝ｅｉ／ＳＱＲＴ（ＭＳｅ），顺序残差êｉ为残差ｅｉ按从小
到大排序得到；Ф（ｕｉ）＝（ｉ－０３７５）／（ｎ＋０２５），ｉ为序号，ｎ为实验
处理总数（ｎ＝２０），由ｉ和ｎ计算出Ф（ｕｉ），然后反查标准正态分布
表得到ｕｉ［１２］。下同
图１ 酶法提取总丹参酮二次多项式模型的ｒａｎｋｉｔ图
拟合分析 总丹酚酸收率（Ｙｔ％）对 ｐＨ（Ｘ１）、加酶
量（Ｘ２）和酶解温度（Ｘ３）分别进行多元线性回归和
二次多项式拟合。酶法提取总丹酚酸的多元线性模
型为 Ｙｓ＝２２８８７０＋０９１６８３Ｘ１＋０２４８０４Ｘ２＋
００６３９８Ｘ３，Ｒｓ≈０８３４０＞Ｒ００１＝０６４７；该模型的
Ｒｓ在Ｐ＜００１水平上显著，但数值偏低，说明模型拟
合度不佳，预测性较差。
酶法提取总丹酚酸的二次多项式模型为 Ｙｓ＝
１４２５８６９＋１３４６９９Ｘ１＋２３０３５２Ｘ２－０５７９５５
Ｘ３－０２３４０４Ｘ１２ －００３９８６Ｘ２２ ＋０００１９３Ｘ３２ －
０６８６３７Ｘ１Ｘ２＋００７６９９Ｘ１Ｘ３＋００２８８７Ｘ２Ｘ３，Ｒｓ≈
０９５９３＞Ｒ００１＝０６４７；该模型的 Ｒｓ在 Ｐ＜００１水
平上显著，且较多元线性模型的复相关系数高，说明
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二次多项式模型较线性模型的拟合度高，预测性好。
另外，由该模型的标准残差｜ｅｉ′｜＜３（表５）可以初步
判定无离群值出现，即它们所对应的观测值均无异
常；再者，由该模型的ｒａｎｋｉｔ图（图２）可知，ｒａｎｋｉｔ图
线性关系良好，其 ｒｓ≈０９８５７＞ｒ００１（１８）＝０５６１，
则可直观判断残差服从正态分布，从而说明该模型
是适合的。总之，复相关系数、标准残差以及 ｒａｎｋｉｔ
图均表明这个二次多项式模型是合适的。
图２ 酶法提取总丹酚酸二次多项式模型的ｒａｎｋｉｔ图
表５ 酶法提取总丹酚酸的星点设计结果及残差分析
Ｎｏ．
Ｙｔ观测
／％
Ｙｔ预测
／％
残差
ｅｉ
标准残差
ｅ′ｉ
顺序残差
êｉ
ｕｉ
１ ９４５ ９５６ －０１１ －０４２ －０３１ －１８７
２ １０７１ １０６５ ００６ ０２２ －０２２ －１４０
３ １０２９ １０４３ －０１４ －０５８ －０２１ －１１３
４ １０３０ １０１５ ０１５ ０５９ －０１５ －０９２
５ ９２４ ９５５ －０３１ －１２４ －０１４ －０７４
６ １１３９ １１４１ －００２ －００７ －０１１ －０５９
７ １０９７ １１１９ －０２２ －０８７ －０１０ －０４５
８ １１６２ １１６８ －００６ －０２３ －００６ －０３１
９ １０１６ ９７９ ０３７ １４８ －００５ －０１９
１０ １１０１ １１１６ －０１５ －０６１ －００４ －００６
１１ １００９ ９９６ ０１３ ０５６ －００３ ００６
１２ １１０２ １０９４ ００８ ０３１ －００２ ０１９
１３ １００９ １０１４ －００５ －０２１ ００６ ０３１
１４ １１７３ １１４６ ０２７ －１０８ ００７ ０４５
１５ １０４０ １０６１ －０２１ －０８５ ００８ ０５９
１６ １０９２ １０６１ ０３１ １２５ ０１３ ０７４
１７ １０５８ １０６１ －００３ －０１０ ０１５ ０９２
１８ １０６８ １０６１ ００７ ０２８ ０２７ １１３
１９ １０５１ １０６１ －０１０ －０４０ ０３１ １４０
２０ １０５７ １０６１ －００４ －０１８ ０３７ １８７
２．３ 酶法提取总丹参酮工艺参数优化 根据酶法
提取总丹参酮的二次多项式模型绘制其效应面和等
高线（见图３～５）。ｐＨ和温度的交互作用既正性相
关，又有负相关（图３）。随着 ｐＨ的降低，升高温度
才能提高样品中总丹参酮的收率（Ｙｔ％），但当 Ｙｔ％
到达最大值后，再升高温度，Ｙｔ％反而降低。不过，
ｐＨ和加酶量呈负相关（图４）。在降低 ｐＨ的同时，
提高加酶量才能提高 Ｙｔ％，且 ｐＨ并未对 Ｙｔ％产生
较大影响；值得注意的是，加酶量和温度二者呈正相
关（图５）。增大加酶量的同时，升高温度会提高
Ｙｔ％。
图３ ｐＨ与温度（℃）的效应面（左）
和等高线（右）
图４ ｐＨ与加酶量（ｍｇ／０．１ｇ）的效应面（左）
和等高线（右）
图５ 温度／℃与加酶量（ｍｇ／０．１ｇ）的
效应面（左）和等高线（右）
结合图３～５的分析结果，选取高Ｙｔ％的较佳工
艺参数范围为：Ｘ１（ｐＨ）：４０～４３；Ｘ２（加酶量／ｍｇ／
０１ｇ）：８４～１００；Ｘ３（温度／℃）：５３～６５。考虑在
生产中注重投入产出比，故确定丹参须根脂溶性成
分（总丹参酮）的最优纤维素酶酶解工艺为：纤维素
酶用量 ８４ｍｇ·ｇ－１须根，缓冲液 ｐＨ４２，温度
５３℃。
２．４ 酶法提取总丹酚酸工艺参数优化 根据酶法
提取总丹酚酸的二次多项式模型绘制其效应面和等
高线（见图６～８）。ｐＨ和温度的交互作用呈正相关
（图６左）。随 ｐＨ的增加，升高温度才能提高总丹
酚酸收率（Ｙｓ％），且在接近 ｐＨ和温度的区间最大
值附近，Ｙｓ％增加速率加快，由等高线密集程度（图
６右）可直观地看出这一点。在ｐＨ和加酶量均取中
下水平时，二者呈正相关（图７左），而当ｐＨ取高水
平时，低水平的加酶量将会使 Ｙｓ％取得较大值，反
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之，当加酶量取高水平时，低水平的ｐＨ也会使Ｙｓ％
取得较大值。加酶量和温度的交互作用呈正相关
（图８左）。只是在温度（或加酶量）取低水平时，加
酶量（或温度）的增加并未使 Ｙｓ％有明显提高，而当
温度（或加酶量）取高水平时，加酶量（或温度）的增
加会使Ｙｓ％有显著性提高。
图６ ｐＨ与温度（℃）的效应面（左）
和等高线（右）
图７ ｐＨ与加酶量（ｍｇ／０．１ｇ）的效应面（左）
和等高（右）线
图８ 温度（℃）与加酶量（ｍｇ／０．１ｇ）的效应
面（左）和等高线（右）
结合图６～８的分析结果，选取高 Ｙｓ％的较佳
工艺范围：Ｘ１（ｐＨ）：５４～５５；Ｘ２（加酶量／ｍｇ／０１
ｇ）：２５～３５；Ｘ３（温度／℃）：５５～６０。考虑在生产
中注重投入产出比，故确定丹参须根中总丹酚酸的
最优纤维素酶酶解工艺参数为：纤维素酶用量 ２５
ｍｇ·ｇ－１须根，缓冲液ｐＨ５４，温度５５℃。
２．５ 验证实验 按所得出的最优工艺条件做３次
平行验证实验，结果取其平均值。与非酶法相比，纤
维素酶法提取得到的样品液中总丹参酮和总丹酚酸
的收率分别提高了１１３９２％和３０６４％（表６），并
且通过薄层检测，二者薄层行为一致，说明纤维素酶
酶解对丹参须根提取液中的有效成分无质的影响。
表６ 验证实验结果
指标
酶法收率
Ｙ酶法／％
非酶法收率
Ｙ非酶法／％
提高率
／％
总丹参酮 ３４２ １６０ １１３９２
总丹酚酸 １２６２ ９６６ ３０６４
３ 讨论
在酶解提取总丹酚酸的单因素试验中，发现随
着酶解温度从３５℃上升到８５℃，Ｙｓ％一直增加，而
纤维素酶作为一种酶，它是有相对较窄的最适温度
范围。据文献［１３］报道，来源于嗜温真菌的纤维素
酶的最适作用温度在４０～５５℃，而实验中所用纤维
素酶正是来源于一种嗜温真菌———绿色木酶，因此，
当温度高于 ５５℃时，纤维素酶的活性会降低，则
Ｙｓ％应会随着温度的升高而降低。鉴于这种相反的
实验结果，再结合丹酚酸类化合物的结构以及含量
测定方法，推测虽然在温度较高时，酶活性的降低会
导致酶解程度的减轻，但是某些空间结构复杂的丹
酚酸类化合物中酯键水解程度的增加会使这些分子
更多地降解成空间结构简单的分子，从而增加与显
色剂的结合位点，导致吸光度增加。另外，实验结果
表明，当ｐＨ取低水平较低时，Ｙｓ％也较低，而ｐＨ为
高水平时，Ｙｓ％较高，这也充分说明体系的酸度会影
响丹酚酸类化合物的存在状态，从而影响其在水中
溶出率。
鉴于丹参中丹参酮类化合物和丹酚酸类化合物
性质不稳定，长时间受热和见光会发生变化，因此试
验采用先酶解再超声提取的方法来提取其中有效成
分的工艺，在较低温度下，较短时间内完成，这样尽
可能减少有效成分变化，既缩短了提取时间，又大幅
度地提高了有效成分收率。另外，针对丹参中２大
类有效成分———总丹参酮和总丹酚酸，本实验采取
高浓度乙醇提取总丹参酮，水提取总丹酚酸，工业上
也可以采用这种联合提取思路，先用较高浓度乙醇
提取总丹参酮，接着用水从残渣中提取总丹酚酸，从
而达到降低成本、充分利用丹参资源的目的。对于
联合工艺中酶解条件的优化需要进一步探讨。
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第３３卷第１６期
２００８年８月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
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ｆｉｂｒｏｕｓｒｏｏｔｓｏｆＳａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａｂｙｃｅｎｔｒａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｅｄｅｓｉｇｎａｎｄ
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（１．ＴｈｅＣｏｌｅｇｅｏｆＳｃｉｅｎｃｅ，ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＡ＆ＦＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ７１２１００，Ｃｈｉｎａ；
２．ＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｒｅｏｆＴＣＭＦｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔａｎｄＮＰＬｉｂｒａｒｙ，７１２１００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ ＴｈｅｆｉｂｒｏｕｓｒｏｏｔｓａｒｅｔｈｅｒｅｓｉｄｕｅｓｏｆｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｃｕｔｃｒｕｄｅｄｒｕｇｏｆＤａｎｓｈｅｎ（Ｓａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａ）．Ｅｎｚｙｍａｔｉｃｐｒｅ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔａｎｄｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｒｅｂｅｎｅｆｉｃｉａｌｔｏｅｘｔｒａｃｔｅｆｅｃｔｉｖｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍｆｉｂｒｏｕｓｒｏｏｔｓｍｏｒｅｅｆｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｐｒｅｓｅｎｔｒｅ
ｓｅａｒｃｈｗａｓｔｏｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｅｎｚｙｍａｔｉｃｐａｒａｍｅｔｅｒｓｂｙｔｈｅｃｅｎｔｒａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｅｄｅｓｉｇｎａｎｄｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｍｅｔｈｏｄ．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｂｅｓｔｃｏｎｄｉ
ｔｉｏｎｓ，ｔｈｅｙｉｅｌｄｓｏｆｔｏｔａｌｔａｎｓｈｉｎｏｎｅｓａｎｄｔｏｔａｌｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃａｃｉｄｓｉｎｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｓｏｆｅｎｚｙｍａｔｉｃｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ１１３９２％ ａｎｄ
３０６４％，ｃｏｍｐａｒｉｎｇｗｉｔｈｔｈｅｎｏｎｅｎｚｙｍａｔｉｃｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴＬＣａｎａｌｙｓｉｓａｌｓｏｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｔｙｐｅｓｏｆｅｆｅｃｔｉｖｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ
ｉｎｔｈｅｔｗｏｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｎｏｔａｆｅｃｔｅｄｂｙｅｎｚｙｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅｃｏｍｐｌｅｘｃｏｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔｓｏｆｔｈｅｍａｔｈｅｍａｔｉｃａｌｍｏｄ
ｅｌｓｗｅｒｅｈｉｇｈ，ｗｈｉｃｈｐｒｏｖｉｄｅｄａｇｏｏｄｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｃｅｎｔｒａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｅｄｅｓｉｇｎａｎｄｒｅｓｐｏｎｓｅｓｕｒｆａｃｅｍｅｔｈｏｄ；Ｓａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａ；ｆｉｂｒｏｕｓｒｏｏｔｓ；ｃｅｌｕｌａｓｅ
［责任编辑 鲍 雷
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