全 文 ：清风痛胶囊液相色谱指纹图谱测定条件的研究
张永欣 t o杨 华 t o张启伟 t3 o易 红 t o陈贵品 u
ktq中国中医科学院 中药研究所 o北京 tsszss~
uq北京紫辰宣医药经营有限公司 o北京 tssszxl
≈摘要   目的 }建立清风痛胶囊的色谱指纹图谱测定方法 ∀方法 }采用高效液相色谱梯度洗脱法 o色谱柱为
⁄¬¤°²±¶¬¯≤t{柱 kw1y °° ≅ uxs °°ox Λ°l~流动相 „ s1t °²¯# pt磷酸二氢钾 o流动相 …甲醇 o线性梯度洗脱 } s ∗ u
°¬±otsh …~u ∗ wu °¬±~tsh ∗ |sh …∀流速 t °# °¬±pt ~检测波长 uyu ±°∀结果 }在上述色谱条件下测定的色谱
指纹图谱各色谱峰分离较好 o方法学考察基本达到指纹图谱要求 ∀结论 }所建指纹图谱测定条件可用于产品的检
测 o但用于质量控制尚需作进一步的工作 ∀
≈关键词   清风痛胶囊 ~指纹图谱 ~‹ °≤
≈中图分类号   • u{wqt ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszluv2uw|u2su
≈收稿日期   ussz2sz2us
≈通讯作者   3 张启伟 oר¯}kstslywstwwtt2u{w{o∞2°¤¬¯}½«¤±2
ª´ ºt|xxƒ tyvq¦²°
清风痛胶囊是由青风藤 !丹参 !淫羊藿等中药经
提取精制而成的中药成方制剂 ∀其功能为祛风散
寒 o活血化瘀 o通络止痛 o补益肝肾 ∀临床用于治疗
类风湿关节炎 ∀本研究通过实验建立了清风痛胶囊
成品 !半成品 !单味药材指纹图谱的测定方法并进行
了方法学考察 ∀文中所建立的方法基本符合指纹图
谱的要求 o进一步完善了清风痛胶囊质量标准 ∀
1 仪器与试药
‹°ttss色谱系统 o配置 Štvtt„ 四元泵 o
Štvuu„在线脱气机 oŠtvtt„自动进样器 oŠtvty„
柱温控制器 oŠtvtx„光电二级管阵列检测器和色
谱工作站 ∀色谱用甲醇 k色谱级 o天津四友试剂公
司 l!水 k‹°≤oƒ¬¶«¨ µlo磷酸二氢钾 k分析纯 o北京
化学试剂公司 l无水乙醇 k分析纯 o北京化学试剂公
司 l∀
清风痛胶囊 u批和半成品由本所剂型室提供 o
所用饮片购于北京卫仁中药饮片厂 o经本所冯学峰
副研究员鉴定均为药典品种 ∀青藤碱对照品购自中
国药品生物制品检定所 k批号 szzw2||swl∀
2 方法与结果
2q1 色谱条件 ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{色谱柱 kw1y °° ≅
uxs °°ox Λ°lo柱温 vx ε ~流动相 „ s1t °²¯# pt
磷酸二氢钾水溶液 o流动相 …甲醇 o线性梯度洗脱 o
s ∗ u °¬±otsh …~u ∗ wu °¬±~tsh ∗ |sh …∀流速 t
°# °¬±pt ~检测波长 uyu ±°∀
2q2 供试品溶液的制备 取胶囊内容物约 s1tx ªo
精密称量 o准确加入 zsh乙醇 x °o称重 o超声提取
ts °¬±o放至室温 o补足质量 o摇匀 o用 s1wx Λ°滤膜
滤过 o取续滤液备用 ∀
2q3 对照品溶液的制备 精密称取青藤碱对照品
t1zv °ªo加入 zsh乙醇 o溶解 o并定容于 x °量瓶
k质量浓度为 s1vwy °ª# °pt l∀
2q4 样品指纹图谱的测定 精密吸取供试品溶液
v ˏo注入液相色谱仪 o按上述方法分析测定 o记录
色谱图 ∀见图 t∀
图 t 清风痛成品的 ‹ °≤指纹图谱
2q5 指纹图谱中主要色谱峰的归属 采用相同的
色谱条件 o单味药饮片及缺味阴性样品 o均按处方
量 !配比和工艺条件加工 o并按供试品溶液制备方法
制备 o进行分析 ∀
经过与对照品 !单味药及缺味样品比较 o可以从
成品指纹图谱中指认出主要共有色谱峰来源 ∀来自
青风藤的 v个色谱峰 k峰 ≥otouloτ•分别为 tu1xo
#u|wu#
第 vu卷第 uv期
ussz年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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⁄ ¦¨¨°¥¨ µo ussz
tw1votz1v °¬±o峰强度较大 o峰面积百分比分别为
tyh ouvh o|1xh ~来自丹参的色谱峰 t个 k峰 vlo
τ•为 ut1y °¬±o峰面积百分比为 tsh ~来自淫羊藿的
色谱峰 t个 k峰 wloτ• vw °¬±o峰面积百分比约为
v1xh ∀
2q6 精密度试验 取供试品溶液 o连续进样 y次 o
记录色谱图 o以青藤碱峰为参照峰 k≥lo计算其他 w
个共有峰的相对比值的 • ≥⁄∀
结果表明 }各色谱峰的相对保留时间稳定 o• ≥⁄
均小于 s1yh ∀相对峰面积比值的 • ≥⁄均小于
x1sh ∀说明方法精密度良好 ∀
2q7 稳定性试验 取供试品溶液 o分别于 sotouo
vowoyouw «进样 o记录色谱图 o分别计算共有色谱峰
保留时间 o峰面积的 • ≥⁄∀
结果表明 }考察的 x个色谱峰保留时间变化不
大 o• ≥⁄均小于 th o峰面积的相对标准偏差 o除 uf
峰为 y1wh o其余均小于 vh ∀说明供试品溶液在
uw «内稳定 ∀
2q8 重复性试验 取同一批成品 x份 o精密称定 o
制备供试品溶液 o进行分析 o分别以青藤碱峰为参照
峰 k≥l计算其他 w个共有峰相对比值的 • ≥⁄∀
结果表明 }各个色谱峰相对保留时间稳定 o• ≥⁄
均小于 s1th ∀相对峰面积比值的 • ≥⁄值略偏大 o
在 u1|h ∗ z1zh o说明方法重复性尚好 ∀
3 讨论
比较了甲醇 2水 o甲醇 2vh醋酸水溶液 o甲醇 2磷
酸三乙胺缓冲液 k³‹ z1sl和甲醇 2s1st °²¯# pt磷
酸二氢钾系统 o以甲醇 2磷酸二氢钾系统较好 ~比较
了成品在 ≤«µ²°¤¶¬¯ ≤t{ o⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{和 ≠ • Š ≤t{ v
种色谱柱上的分离情况 o最终选择了 ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{
柱 ~比较了成品在 x个波长 kuxwouyuou{sovtvovwx
±°l检测的图谱 o确定了出峰较多的 uyu ±°为成品
指纹图谱的检测波长 ∀
根据成品的制备工艺 o采用 zsh乙醇超声提取 o
并考察了超声提取的时间 o确定了文中的提取条件 ∀
清风痛胶囊为多味中药组成的口服制剂 o所含
化学成分很多 o给指纹图谱测定条件的建立带来一
定的困难 ∀通过实验表明 o建立中药复方口服制剂
的色谱指纹图谱是可行的 ∀通过对清风痛胶囊色谱
指纹图谱的测定 o可以检测药物中多种成分的存在
和其比例关系 o与仅用青藤碱单一含量测定指标相
比较 o可为质量控制提供更多的药物内在信息 o并为
确保药物批与批的一致提供参考 ∀如何制定指纹图
谱的标准 o应在进行化学成分与药效 k谱 2效 l相关研
究之后才能制定 ∀因此指纹图谱测定方法的建立仅
仅是向着完善质量控制迈出的一小步 o还有许多工
作有待进一步研究探索 ∀
∆ετερµ ινατιον οφ ΗΠΛΧ φινγερπριντ οφ Θινγφενγτονγ χαπσυλε
‹„‘Š ≠²±ª2¬¬±t o ≠ „‘Š ‹∏¤t o ‹ „‘Š ± Œ2º ¬¨t o ≠ Œ‹²±ªt o ≤‹∞‘Š∏¬2³¬±u
(t. Ινστιτυτε οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα, Χηινα Αχαδεµ ψ οφ Χηινεσε ΜεδιχαλΣχιενχεσ, Βειϕινγ tsszss, Χηινα;
u. Βειϕινγ Ζιχηενξυαν Πηαρµ αχευτιχαλ∆εαλΧο. Λτδ. , Βειϕινγ tssszx, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«¤©¬±ª¨ µ³µ¬±·¤±¤¯¼¶¬¶° ·¨«²§²©±¬±ª©¨±ª·²±ª¦¤³¶∏¯¨¥¼ ‹°≤q Μετηοδ : ׫¨ ¶¤°³¯ ¶¨
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µ¨ ∏´¬µ¨° ±¨·¶©²µ·«¨ ©¬±ª¨ µ³µ¬±·¶q Χονχλυσιον: ׫¨ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §° ·¨«²§¦¤± ¥¨ ∏¶¨§©²µ·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²©±¬±ª©¨±ª·²±ª¦¤³¶∏¯ ¶¨q
[ Κεψ ωορδσ] ±¬±ª©¨±ª·²±ª¦¤³¶∏¯ ~¨ ¦«µ²°¤·²ªµ¤³¯¬¦©¬±ª¨ µ³µ¬±·¶~ ‹°≤
≈责任编辑 鲍 雷  
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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