全 文 ：Εφφεχτ οφ Ηυανγλιαν ϑιεδυτανγ ον εξπρεσσιον οφ ηιπποχαµ πυσ προτεοµ ιχσ
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(Ινστιτυτε οφ Πηαρµ αχολογψ ανδ Τοξιχολογψ, Αχαδεµ ψ οφΜιλιταρψΜεδιχαλΣχιενχεσ, Βειϕινγ tss{xs, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ©¨©¨¦·²©‹∏¤±ª¯¬¤± ¬¨§∏·¤±ªk‹⁄×l ²± «¬³³²¦¤°³¤¯ ³µ²·¨¬± ¬¨³µ¨¶¶¬²±¶¬± ¶¨± ¶¨2
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[ Κεψ ωορδσ] ‹∏¤±ª¯¬¤± ¬¨§∏·¤±ª~ ¶¨± ¶¨¦¨±¦¨ ¤¦¦¨¯¨ µ¤·¨§°²∏¶¨~ «¬³³²¦¤°³∏¶~ ³µ²·¨²°¬¦¶
≈责任编辑 刘  
≈收稿日期   ussz2sz2us
≈基金项目   国家自然科学基金面上项目 kvsxzuwwtl
≈通讯作者   3 沈霖 oר¯}ksuzl{xzuyv|xo∞2°¤¬¯}¶«¨ ± ¬¯±«¥ƒ
¼¤«²²q¦²°q¦±
从益气活血方拆方对健康人血小板聚集功能
的影响探讨方剂组成
石 威 o沈 霖 3 o秦 铀 o卢芙蓉 o高 兰 o潘腊梅
k华中科技大学 附属协和医院 o湖北 武汉 wvssuul
≈摘要   目的 }观察益气活血方及其拆方对健康人血小板聚集功能的影响来探讨其配伍规律 ∀方法 }健康献
血者静脉采血抗凝 o制备富血小板血浆 k³¯¤·¨¯ ·¨µ¬¦« ³¯¤¶°¤o°• °l和贫血小板血浆 k³¯¤·¨¯ ·¨³²²µ³¯¤¶°¤o°°°lo然后
在比浊管中加药孵育 o用血小板聚集仪检测二磷酸腺苷 k¤§¨ ±²¶¬±¨§¬³«²¶³«¤·¨o„⁄°l!血小板活化因子 k³¯¤·¨¯ ·¨¤¦2
·¬√¤·¬±ª©¤¦·²µo°„ƒl!花生四烯酸 k¤µ¤¦«¬§²±¬¦¤¦¬§o„„ l诱导的最大聚集率 ∀结果 }益气活血方能显著提高 „⁄°o
°„ƒ诱导的血小板聚集功能 o其中黄芪 !当归配伍为方中主药 o益气药与活血药相须为用才能发挥促聚作用 ∀结
论 }益气活血方体外实验能增强健康人血小板聚集功能 o但确切作用机制有待进一步实验验证 ∀
≈关键词   益气活血方 ~拆方 ~血小板聚集功能
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlut2uu|w2sw
益气活血方是沈霖教授 us世纪 |s年代初针对 出血性血小板病 ≈t 通过大量体外筛选和临床实践 o
最终研制出的方剂 ∀经 ts余年临床验证 o该方在控
制本病临床出血症状 o纠正血小板聚集缺陷及降低
停药 t年后复发率等方面均明显优于常规西药安络
血 !维生素 ≤o°oŽ等 ∀近期临床药物实验表明在受
体蛋白水平上调节部分血小板膜糖蛋白的表达 o是
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第 vu卷第 ut期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ ut
‘²√ °¨¥¨ µo ussz
消瘀止血片 k益气活血方 l治疗出血性血小板病的
疗效机制之一 ≈u  ∀为更清楚地分析益气活血方全
方具体作用环节以及可能存在的协同作用 o本实验
以健康成年人为研究对象通过管中加药的方法 o研
究全方 !配伍组和单味药组对 v条经典途径血小板
聚集功能影响 o来探讨该方的组成原理 ∀
1 研究对象及材料
1q1 研究对象 健康献血员 o两周未服用过影响血
小板聚集功能的中 !西药 o共 zu名 o男 v|名 o女 vv
名 o年龄 us ∗ xx岁 ∀随机分为 tu组 o每组 y名 ∀
1q2 主要试剂和设备 二磷酸腺苷 k北京 ¶∏¦¦¨¶¶
公司 lo血小板活化因子 k美国 ≤¤¯¥¬²¦«¨ °公司 lo花
生四烯酸 k美国 ≤¤¯¥¬²¦«¨ °公司 lo≥≤ p usss血小
板聚集仪 k北京 ¶∏¦¦¨¶¶公司 lo⁄⁄p x型低速冷冻
离心机 k上海安亭科学仪器厂 l∀
1q3 中药拆方分组 益气活血方全方由黄芪 !党
参 !当归 !白芍 !桃仁 !甘草按照 tΒtΒtΒs1xΒs1xΒs1u
组成 ∀方中黄芪为豆科植物黄芪 Αστραγαλυσµ εµ βρα2
ναχευσkƒ¬¶¦«ql …ª¨ 的干燥根 o党参为桔梗科党参
Χοδονοπσισπιλοσυλα kƒµ¤±¦«ql ‘¤±±©q的干燥根 o当归
为伞形科植物当归 Ανγελιχα σχινεσισ k’ ¬¯√ql ⁄¬¨ ¶¯的
干燥根 o白芍为毛莨科植物芍药 Παεονια λαχτιφεορα
°¤¯ q¯的干燥根 o桃仁为蔷薇科桃属植物桃 Πρυνυσ
περσιχα kql …¤·¶¦«的干燥成熟种子 o甘草为豆科植
物甘草 Γλψχψρρηιζα υραλενσισ ƒ¬¶¦«q的干燥根及根茎 ∀
中药饮片均购自湖北省中药材公司 o由华中科技大
学同济医学院协和医院药剂科陈东生主任药师鉴
定 ∀各拆方组合为 }全方组 o黄芪 ts ª!党参 ts ª!当
归 ts ª!白芍 x ª!桃仁 x ª!甘草 u ª~益气活血组 k全
方去甘草 lo黄芪 ts ª!党参 ts ª!当归 ts ª!白芍 x
ª!桃仁 x ª~黄芪当归组 o黄芪 ts ª!当归 ts ª~益气
组 o黄芪 ts ª!党参 ts ª~活血组 o当归 ts ª!白芍 x
ª!桃仁 x ª~黄芪组 o黄芪 ts ª~党参组 o党参 ts ª~当
归组 o当归 ts ª~白芍组 o白芍 x ª~桃仁组 o桃仁 x ª~
甘草组 o甘草 u ª∀
1q4 药物的制备 ≈v  中药用 uss °清水浸泡 tu
«o武火煮沸 o文火煮 s1x «o取出药液后 o再加入 uss
°清水 o武火煮沸 o文火煮 s1x «o取药液 o将 u次药
液合并 o浓缩至较高浓度 ∀再按体积比 uΒv加入无
水乙醇 ow ε 静置 uw «o用无菌滤纸滤去残渣 o再用
旋转蒸发仪蒸发至无醇味 o并进一步将各组药液浓
缩至 ts °o调整 ³‹ 为 y1{ ∗ {1x分装于无菌瓶
中 ow ε 保存备用 ∀
2 实验方法
2q1 °• °和 °°°的制备 本实验通过 …²µ±比浊
法 ≈w 完成 ∀首先制备 °• °和 °°°o静脉采血 y °o
以 ts| °°²¯# pt枸橼酸钠 ktΒ|l抗凝 o然后 t sss µ
# °¬±pt o离心 { °¬±o取上层液即为 °• °∀剩余部分
以 w sss µ# °¬±pt o离心 s¯ °¬±o取上清液即为 °°°o
并用 °°°将 °• °血小板数调至 txs ≅ ts|个 r≈x  ∀
2q2 血小板聚集实验 将制备的 °• °和 °°°一一
对应 o各取 vss ˏ加入不同的比浊管中 ~然后在盛
放 °°°和 °• °的空白对照组比浊管中各加入 us ˏ
生理盐水 o实验组比浊管中各加入 us ˏ中药液 ovz
ε 孵育 x °¬±∀最后用各自 °°°调零各通道后 o分
别放入对应的 °• °o再在 °• °中加入诱聚剂 ts ˏo
用 ≥≤ p usss血小板聚集仪分别检测 v种诱聚剂
„⁄°o°„ƒo„„诱导的血小板聚集率 ots °¬±后记录
血小板最大聚集率 ∀整个实验过程中检测温度控制
在 kvz ? s1xl ε o对每组 °• °从制备到检测均在 v
«内完成 ∀因前期预实验结果表明全方组在稀释
t sss倍时 k终浓度为 w1u °ª# °pt l对血小板聚集
功能的影响最为显著 o所以各实验组中药液均稀释
t sss倍后进行血小板聚集实验 ∀
2q3 统计学处理 数据统计采用 ≥³¶¶tu1s软件中
的 ²±¨º¤¼ p „‘’∂ „完成 o与空白组比较采用 ⁄∏±2
± ·¨检验 o两两比较满足方差齐性资料采用 ≥⁄法 o
不满足方差齐性资料采用 ⁄∏±± ·¨. ¦法 ∀血小板聚
集抑制率按照以下公式计算 ∀
血小板聚集抑制率 kh l €
对照管血小板最大聚集率 p给药管血小板最大聚集率
对照管血小板最大聚集率 ≅
tssh
3 结果
表 t结果显示 o与空白组相比 o„⁄°诱导血小
板最大聚集率全方组 !益气活血组 !黄芪当归组和活
血组明显增加 kΠ  s1stlo益气组及各单味药组变
化没有统计学意义 ~°„ƒ诱导血小板最大聚集率全
方组 !益气活血组和黄芪当归组均明显增加 kΠ 
s1stoΠ s1sxlo益气组 !活血组 !党参组 !桃仁组和
甘草组则明显减弱 kΠ  s1stl~但 „„诱导血小板
最大聚显率除桃仁组明显降低 kΠ  s1sxl外 o其余
各组最大聚集率改变均无统计学意义 ∀
为进一步研究有显著性影响各组之间的差异 o
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第 vu卷第 ut期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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‘²√ °¨¥¨ µo ussz
表 t 拆方对 „⁄°o°„ƒo„„诱导血小板聚集功能的影响
kcξ ? σ, ν € yl
组别
血小板最大聚集率 rh
„⁄° °„ƒ „„
生理盐水 xs1vu ? ts1|z yz1y{ ? z1ts {|1{v ? t1{u
全方 zt1yx ? ts1vvul z|1wu ? w1yxul |y1uv ? v1{x
益气活血 {x1sx ? {1tuul zs1z{ ? z1zsul |w1zs ? x1wu
黄芪当归 z{1|s ? {1w{ul {{1yx ? u1zwtl {x1x{ ? w1ww
益气 wt1vz ? z1ys vx1y{ ? ts1sttl yy1sz ? tw1xx
活血 zz1sx ? z1uxul vw1vz ? w1s{ul {s1tx ? {1uy
黄芪 vy1xv ? tt1ux zs1sv ? x1zw |u1|s ? v1yy
党参 wz1ys ? tx1{x uv1s{ ? y1zwul {w1z{ ? w1yy
当归 yv1uz ? v1zt zs1v{ ? w1sy |v1sz ? y1t|
白芍 ys1y{ ? x1zw zs1ss ? z1uz {x1s{ ? v1|t
桃仁 vx1vx ? y1uy tu1|x ? w1|wul v{1u{ ? tw1xvtl
甘草 ws1us ? ts1ts us1uv ? {1ttul {s1tx ? y1{x
注 }与生理盐水组比较 tl Π  s1sx ul Π  s1st
采用 ≥⁄法对促进血小板聚集功能的各组做了两
两比较 ∀结果显示 „⁄°诱导全方组最大聚集率明
显高于黄芪当归组 kΠ  s1sxlo与益气活血组和活
血组相比都没有统计学意义 ~益气活血组与活血组
和黄芪当归组相比也没有统计学意义 ~黄芪当归组
与活血组相比也没有统计学意义 ∀ °„ƒ诱导全方组
的最大聚集率明显高于黄芪当归组 kΠ  s1stlo与
益气活血组相比无统计学意义 ~益气活血组与黄芪
当归组相比也没有统计学意义 ∀而对 °„ƒ诱导有
明显抑制作用的益气组 !活血组 !党参组 !桃仁组和
甘草组先按公式计算出血小板聚集抑制率 o再对各
组做两两比较 ∀结果显示 }益气组与活血组相比聚
集抑制率差别没有统计学意义 o但明显低于单味药
党参组 kΠ  s1stl~活血组的抑制率明显低于单味
药桃仁组 kΠ s1stl~党参组明显低于桃仁组 kΠ 
s1sxlo但同甘草组相比差别没有统计学意义 ~桃仁
组与甘草组相比差别也没有统计学意义 ∀
4 讨论
通过对 „⁄°o°„ƒo„„ v种诱聚剂诱导的健康
人血小板聚集功能的研究 o研究者发现全方和各配
伍组对 „„诱导的血小板聚集功能无明显影响 o这
可能与 „„诱导的基础聚集率较高有关系 ∀而全
方 !益气活血组与黄芪当归组均能明显增强 „⁄°o
°„ƒ诱导的聚集反应 ∀特别是黄芪当归组 o当黄芪 !
当归单独使用时并无明显的聚集增强作用 o但 tΒt
配伍后就能产生明显的增强作用 o虽然明显弱于全
方组 o但二药益气养血活血共为方中主药的特性得
到了验证 ∀
益气组和活血组单独研究时 o活血组对 „⁄°有
聚集促进作用 o而两组对 °„ƒ均有聚集抑制作用 ~
但是当益气组和活血组配伍成为益气活血组后对
„⁄°o°„ƒ均表现出明显的聚集增强作用 ∀由此 o进
一步验证了本方益气摄血 !化瘀生新的方意 o同时也
表明这两类药物相须为用 !相辅相成的科学性 ∀
有研究发现 o甘草对 „⁄°!„„诱导的血小板聚
集具有抑制作用 o其抑制作用甚至强于同浓度的桃
仁 ~对 °„ƒ诱导的血小板聚集 o随浓度不同 o表现为
双相作用 ≈y  ∀ 而且报道的有效浓度 ks1sv °ª#
°pt l和本研究 ks1u °ª# °pt l相近 ∀所以 o本研
究将全方去甘草 k益气活血组 l单列一组 o并对甘草
在全方中的地位进行了研究 ∀研究结果表明 o全方
去甘草与全方组相比 o差别没有统计学意义 ~而且甘
草组对 „⁄°o„„诱导的血小板聚集功能影响不明
显 o对 °„ƒ反而起到了聚集抑制作用 ∀其余明显影
响血小板聚集功能的单味药有党参 !桃仁 o特别是桃
仁能同时抑制 „„o°„ƒ诱导的血小板聚集 o而且对
°„ƒ诱导的聚集其抑制作用明显强于党参 ~同时当
党参和黄芪配伍 !桃仁和当归白芍配伍后抑制作用
明显减弱 ∀
据有关文献报道 o诱聚剂 „⁄°与血小板表面
°u¬to°u¼to°uׄ≤ v种亚型的受体结合后 o通过 Š¬和
Š´信号通路激活血小板纤维蛋白原受体 o引起血小
板聚集 o同时还促进血小板内致密颗粒释放 „⁄°等
促聚因子 o通过正反馈机制放大了血小板的聚集反
应 ≈z  ~„„在环氧化酶和血栓素 „u合成酶的作用下转
变为血栓素 „u k׬ „u lo׬ „u作用于血小板上的
×°Αo×°Β受体通过 Š´信号通路激活血小板 o并促使 Α
致密颗粒释放 „⁄°o从而激活 Š¬信号通道诱导血小
板凝聚集 ≈{  ~°„ƒ则作用于另外的机制激活血小
板 ≈|  o能与特异性受体结合促进血小板分泌 ׬„u通
过特殊的钙通道调节 ≤¤u n内流 o与百日咳病毒不敏
性感 ŠkŠ´rttl蛋白结合 o促进蛋白激酶 ≤ k°Ž≤l的
生成 o从而诱导血小板聚集 ≈ts  ∀而且本研究前期实
验已经证实 o益气活血方体内给药后 o能提高患者的
Š° Œ¥oŠ° Œ¥r¼ oŠ°¶ ¤及 ≤⁄yu³表达水平 kŠ°´ ¥
为血小板高亲和力凝血酶受体 l≈u  ∀而本研究结果显
示 o益气活血方能明显增强 „⁄°o°„ƒ诱导的血小板
聚集 o对 „„诱导的聚集无明显影响 ∀所以 o研究者
认为益气活血方提高血小板聚集功能的机制可能与
上调了某些促聚因子受体的表达水平有关系 o但确切
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的机制还有待进一步的研究证实 ∀
≈参考文献  
≈t  沈 迪 o凌柱三 q临床出血病学 ≈   q北京 }科学技术文献出
版社 o |¯|y}wvq
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患者膜糖蛋白表达的影响 ≈ q×≤ oussxowykwl}uzsq
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细胞分泌功能的影响探讨方剂组成原理 ≈ q中国药学杂志 o
ussxowskutl}tyuuq
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社 oussu}tu{tq
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血小板聚集方法探讨 ≈ q临床血液学杂志 ot||towkwl}t{zq
≈y  崔国惠 o沈 迪 q桃仁 !甘草对血小板聚集功能的双相作用
≈ q血栓与止血杂志 ot||xoukvl}tssq
≈z  ¤° ¶¨⁄o ≤¤µ²¯ ⁄o ¬± Šo ·¨¤¯q  ²¯ ¦¨∏¯¤µ…¤¶¬¶©²µ„⁄°2¬±2
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≈{  … ±¨­¤°¬±  ≥ °o ¬± Šo ≥¤·¼¤ ° Žq  ²¯ ¦¨∏¯¤µ° ¦¨«¤±¬¶° ²©
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Στυδψ ον χοµ ποσινγ µ εχηανισµ βψ εφφεχτ οφ δισασσεµ βλεδ χοµ ποσιτιονσ
οφΨιθι Ηυοξυε δεχοχτιον ον πλατελετ αγγρεγατιον οφ ηεαλτη αδυλτσ
≥‹Œ• ¬¨o ≥‹∞‘¬±o ± Œ‘≠²∏o ˜ ƒ∏2µ²±ªo Š„’ ¤±o °„‘¤2° ¬¨
(Υνιον ΜεδιχαλΗοσπιταλ, Ηυαζηονγ Υνιϖερσιτψ οφ Σχιενχε ανδ Τεχηνολογψ, Ωυηαν wvssuu, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨ ¤±§ ¬¨³¯¤¬± ·«¨ ¦²°³²¶¬±ª° ¦¨«¤±¬¶° ¥¼ ²¥¶¨µ√¬±ª ±¨«¤±¦¨° ±¨·³µ²³¨ µ·¼ ²©§¬¶¤¶¶¨°2
¥¯ §¨¦²°³²¶¬·¬²±¶²©≠ ¬´¬‹∏²¬∏¨ §¨ ¦²¦·¬²± k≠ ± ‹ ÷⁄l ²± ³¯¤·¨¯ ·¨¤ªªµ¨ª¤·¬²± ²©«¨ ¤¯·«¤§∏¯·¶q Μετηοδ : ∂ ±¨²∏¶º«²¯¨¥¯²²§º¤¶²¥2
·¤¬± §¨©µ²° «¨ ¤¯·«¼ «∏°¤± ¶∏¥­¨¦·¶¤±§¤±·¬2¦²¤ª∏¯¤·¨§o ¤±§·«¨ ± ¦¨±·µ¬©∏ª¨ §·²³µ²§∏¦¨ ³¯¤·¨¯ ·¨2µ¬¦«³¯¤¶°¤k°• °l ¤±§³¯¤·¨¯ ·¨2³²²µ
³¯¤¶°¤k°°°lq ⁄¬¶¤¶¶¨°¥¯ §¨¦²°³²¶¬·¬²±¶²©≠ ± ‹ ÷⁄ ¤±§¶²§¬∏° ¦«¯²µ¬§¨ º µ¨¨ ³¯¤¦¨§¬± §¬©©¨µ¨±··µ¤±¶¯∏¦¨±··∏¥¨ ¶¦²±·¤¬±¬±ª°• °
¤±§°°°o ¦¤¯¦∏¯¤·¨§·«¨ °¤¬¬°∏° ³¨ µ¦¨±·¶²©³¯¤·¨¯ ·¨¤ªªµ¨ª¤·¬²± ¶·¬°∏¯¤·¨§ ¥¼ ³¯¤·¨¯ ·¨¤ª²±¬¶·¶} ¤§¨ ±²¶¬±¨ §¬³«²¶³«¤·¨ k„⁄°lo
³¯¤·¨¯ ·¨¤¦·¬√¤·¬±ª©¤¦·²µk°„ƒl ¤±§¤µ¤¦«¬§²±¬¦¤¦¬§k„„lq Ρ εσυλτ: ׫¨ °¤¬¬°∏° ³¨ µ¦¨±·¶²©³¯¤·¨¯ ·¨¤ªªµ¨ª¤·¬²± ¬±§∏¦¨§¥¼ „⁄°
¤±§°„ƒ º µ¨¨ ¤¯µª¨ ¼¯ ¬°³µ²√ §¨¥¼ ≠ ± ‹ ÷⁄o ¥²·« ¤¶·µ¤ª¤¯∏¶° °¨¥µ¤±¤¦¨∏¶¤±§„±ª¨ ¬¯¦¤ ≥¦¬± ¶¨¬¶³¯¤¼¨ §·«¨ °²¶·¬°³²µ·¤±·µ²¯ ¶¨¬±
·«¨ §¨ ¦²¦·¬²±o ·«¨ «¨ µ¥¶²©≠ ¬´¬¤±§‹∏²¬∏¨ °∏¶·º²µ®·²ª¨·«¨ µ·² ±¨«¤±¦¨ ³¯¤·¨¯ ·¨¤ªªµ¨ª¤·¬²±q Χονχλυσιον: Ιν ϖιτρο ¶·∏§¼o ≠ ± ‹ ÷⁄
¦¤± °¤µ®¨ §¯¼ ¬°³µ²√¨³¯¤·¨¯ ·¨¤ªªµ¨ª¤·¬²± ²©«¨ ¤¯·«¤§∏¯·¶o ¥∏··«¨ ¬¨¤¦·° ¦¨«¤±¬¶° ¶«²∏¯§¥¨ ³µ²√ §¨¥¼ ©∏µ·«¨ µ ¬¨³¨ µ¬° ±¨·¶q
[ Κεψ ωορδσ] ≠ ¬´¬‹∏²¬∏¨ §¨ ¦²¦·¬²±~ §¬¶¤¶¶¨°¥¯ §¨³µ¨¶¦µ¬³·¬²±¶~ ³¯¤·¨¯ ·¨¤ªªµ¨ª¤·¬²±
≈责任编辑 刘  
5中国中药杂志 6近况简介
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5中国中药杂志 6荣获第三届国家期刊奖百种重点期刊 ~荣获国家中医药管理局 /以岭杯 0第三届全国中医药优秀期刊评
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第 vu卷第 ut期
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中 国 中 药 杂 志
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