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Quantitative analysis of volatile oils and isoimperatorin in Rhizoma et Radix Notopterygii

羌活中挥发油和异欧前胡素的含量测定



全 文 :#研究论文 #
羌活中挥发油和异欧前胡素的含量测定
周 毅 t o蒋舜媛 t3 o孙 辉 u o杨安东 t o马 艳 t o马小军 v o吴 锐 w
ktq四川省中药研究所 o四川 成都 ytsswt~
uq四川大学 o四川 成都 ytssyx~
vq中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所 o北京 tsss|w~
wq四川省药品监督管理局 o四川 成都 ytsstxl
≈摘要   目的 }研究目前羌活药材的质量现状 o为制订羌活合理的质量标准提供科学依据 ∀方法 }采用药典方
法和 ‹ °≤分别对 uu个羌活主产地的 u|份商品药材样品进行挥发油和异欧前胡素含量的检测和统计学分析 ∀结
果 }u|份样品中仅 v份的挥发油含量能达到 ussx年版药典的含量标准 o产新药材中的不达标的比例达 {z1sh ~统
计结果显示 o欲达到 {sh以上合格率的控制指标的挥发油含量应为 t1yvh o异欧前胡素为 s1tzh ~样品的 u种定
量检测指标成分含量在采收年份间差异不显著 o异欧前胡素在羌活和宽叶羌活间差异显著 ∀结论 }ussx年版药典
羌活挥发油含量标准过高 o建议标准为不低于 t1yh k°# ªpt l~建议增加异欧前胡素为羌活药材质量的定量指标
含量之一 o标准为不低于 s1uh k°ª# ªpt l∀
≈关键词   羌活 ~挥发油 ~异欧前胡素 ~质量控制
≈中图分类号   ≥ xyz ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlsz2sxyy2sw
≈收稿日期   ussy2sw2sz
≈基金项目   国家 /十五 0科技攻关项目 kusst…„zst„ys2svl~
国家中医药管理局 ussu年科学技术研究专项 ksu2sv°tsl~四川省
应用基础研究项目 ksv≠su|2tsx2tl
≈通讯作者   3 蒋舜媛 oר¯}ksu{lyy{tyywwo∞2°¤¬¯}­¶¼sszƒ
√¬³q¶¬±¤q¦²°
羌活来源于伞形科多年生草本植物羌活 Νο2
τοπτερψγιυµ ινχισυµ ׬±ª ¬¨‹ q ×q ≤«¤±ª和宽叶羌活
Ν. φορβεσιι …²¬¶¶q的干燥根茎及根 ≈t  o为历版药典收
载 ∀仅分布于我国西部青藏高原东缘的川西北 !青
海 !甘肃 !藏东等高海拔山地 o为中国特有属种植物 o
被列为国家三级保护植物 ≈u2w  ∀由于长期掠夺性采
挖已使野生资源遭受极大破坏 o开展羌活野生变家
种的研究已甚为迫切 o近年来作者在羌活野生变家
种及人工栽培方面作了一些工作 ≈wox  o但关于羌活
品质质量的评价 o传统主要依靠外观 !气味等生药性
状 o从 usss年版药典始有浸出物及挥发油含量标准
的规定 ∀据 usss年版与 ussx年版药典标准规定 o
羌活药材含挥发油不得少于 u1{h k°# ªpt l∀但
对自 t|{t年以来的研究报道调查 o不管是对不同产
地 !规格药材 o还是对市售药材及饮片的挥发油含量
报道 o均难以达到现行药典规定指标值 ≈uoyoz  ∀另
外 o已知香豆素类化合物是羌活的主要药效成
分 ≈ uoyo{o|  o缺乏对此类化合物含量的测定显然难以
真正检验羌活药材质量 ∀为此 o本试验拟对来自主
产区 uu个产地 u|份羌活药材代表性样品 o从挥发
油和香豆素类代表成分之一异欧前胡素进行测定 o
为探讨羌活药材质量评价标准及现行标准的合理性
提供参考依据 ∀
1 仪器与材料
‹° p ttss型液相色谱仪 ~˜∂ p uwst紫外分光
光度计 k日本岛津 l~…°utt⁄天平 k德国赛多利思出
品 l~挥发油测定器 ∀
异欧前胡素对照品由中国药品生物制品检定所
提供 k批号 tts{uz2usswszl∀甲醇为色谱纯 ~水为
超纯水 ~其余所用试剂均为分析纯 ∀生药样品的产
地及采收时间见表 to均由本实验室收集并鉴定 ∀
2 方法及结果
2q1 异欧前胡素含量测定
2q1q1 系统适应性试验 经试验并结合文献 ≈ts2
tv o流动相甲醇 2水 kzΒvlo⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{色谱柱
kw1y °° ≅ txs °°ox Λ°lo流速 t1s °# °¬±pt ∀
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第 vu卷第 z期
ussz年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 t 羌活样品中挥发油及异欧前胡素含量
编号 产地 植物名 采收日期 挥发油 rh 异欧前胡素 rh
t 四川 马尔康 Νοτοπτερψγιυµ ινχισυµ ussx2s| u1us s1vw
u 黑水 Ν. ινχισυµ ussx2s| t1yv s1us
v 小金 Ν. ινχισυµ ussx2s| u1uv s1uz
w 壤塘 Ν. ινχισυµ ussx2s| t1{{ s1t{
x 阿坝 Ν. ινχισυµ ussx2s| u1vs s1v{
y 若尔盖 Ν. ινχισυµ ussx2s| u1sv s1zs
z 九寨沟 Ν. ινχισυµ ussx2s| t1uv s1u{
{ 丹巴 Ν. ινχισυµ ussx2s| t1zx s1tu
| 道孚 Ν. ινχισυµ ussx2s| t1{x s1wu
ts 甘孜 Ν. ινχισυµ ussx2s| u1xu s1xu
tt 德格 Ν. ινχισυµ ussx2s| u1tx s1ws
tu 雅江 tl Ν. ινχισυµ ussx2s| t1vv t1vs
tv 九龙 Ν. ινχισυµ ussx2ts t1xu s1tx
tw 甘肃 临潭 Ν. ινχισυµ ussx2ts u1|{ s1xz
tx 青海 班玛 Ν. ινχισυµ ussx2s| u1z{ s1xu
ty 互助 Ν. ινχισυµ ussx2ts v1yy s1yy
tz 四川 若尔盖 Ν. φορβεσιι ussx2s| t1{v t1vs
t{ 甘孜 Ν. φορβεσιι ussx2s| t1zu s1tz
t| 甘肃 迭部 Ν. φορβεσιι ussx2ts u1uz t1ts
us 青海 湟中 Ν. φορβεσιι ussx2s| t1|s t1uu
ut 西藏 八一 Ν. φορβεσιι ussx2s| t1|v t1|s
uu 朗县 Ν. φορβεσιι ussx2s| u1ss s1ws
uv 米林 Ν. φορβεσιι ussx2s| u1ss s1tz
uw 四川 道孚 Ν. ινχισυµ ussv2s| t1z{ s1vs
ux 丹巴 Ν. ινχισυµ ussv2s| t1w{ s1uv
uy 甘孜 Ν. ινχισυµ ussv2s{ u1w| s1ww
uz 德格 Ν. ινχισυµ ussv2s| u1sv s1ws
u{ 阿坝 Ν. ινχισυµ ussv2s{ u1xu s1vu
u| 青海 大通 Ν. ινχισυµ ussv2s| t1{s s1wu
注 }tl药材样品除此为 ws ε 烘干外 o均为产地晒干 o或半阴半晒方式干燥
以异欧前胡素计 o柱效理论板数为 w txx∀
2q1q2 检测波长的选择 根据对照品甲醇溶液的
紫外扫描并参考文献 ≈ts2tv o以 vs| ±°作为检测
波长 ∀
2q1q3 供试品溶液的制备 取 s1x ª样品 kws目 l
于具塞三角瓶中精密称定 ∀精密加入 us °甲醇并
称重 o放置过夜后超声提取 us °¬±o补足重量 o过滤 o
取滤液 u1x °蒸干 o残渣用 x °水溶解并用乙醚
萃取 v次 o每次 x °o合并萃取液 o蒸干乙醚后加甲
醇使之溶解 o转入 x °量瓶中 o并稀释到刻度 o待
测 ∀
2q1q4 对照品溶液的制备 精密称取异欧前胡素
对照品适量 o加甲醇制成每 t °含 tx Λª的溶液 o
待测 ∀
2q1q5 线性关系的考察 精密称取异欧前胡素对
照品约 x1s °ªo于 ts °量瓶中 o用甲醇溶解并稀
释至刻度 o作为贮备液 ∀分别精密吸取此贮备液
s1suxos1uxos1xsos1zxot1s °分别置于 ts °量
瓶中 o甲醇稀释至刻度 o摇匀 o取各对照品溶液 ts
ˏ依次进样 o以峰面积为纵坐标 o进样量为横坐标 o
回归计算 o线性方程为 Α € v s{z1wwΜ p tu1uxoρ€
s1||| |o进样量在 s1stv z ∗ s1xwz Λª线性关系良
好 ∀
2q1q 6 精密度试验 精密吸取对照品溶液
ks1stv z Λª# °pt lts ˏo重复进样 y次 o结果对
照品峰面积值的 • ≥⁄为 u1uh ∀
2q1q7 稳定性试验 取本品约 s1x ªo精密称定 o照
2q1q3项下制备供试液 o精密吸取供试液 ts ˏo分
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第 vu卷第 z期
ussz年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ z
„³µ¬¯o ussz
别在 sotouovowoxoy «重复进样 z次 o结果峰面积
值的 • ≥⁄为 t1{h o样品在 y «内稳定 ∀
2q1q8 重复性试验 取同批样品粉末共 x份 o每份
约 s1x ªo精密称定 o按供试品溶液的制备和含量测
定方法操作 o结果异欧前胡素平均质量分数为
s1{ys °ª# ªpt o• ≥⁄为 s1xsh ∀
2q1q9 加样回收率试验 取同批样品粉末共 y份 o
每份约 s1ux ªo精密称定 o分别加入 s1w °的对照
品溶液 k用甲醇超声溶解 o质量浓度 s1x{{ °ª#
°pt lo按 2q1q3项下制备加样回收供试液样品 o并
各平行测定 u次 o结果异欧前胡素的平均加样回收
率为 tst1zh o• ≥⁄为 t1wh ∀
2q2 样品测定
2q2q1 异欧前胡素含量测定 制备样品供试液及
对照品溶液 o分别精密吸取各 ts ˏo注入液相色谱
仪 o测定结果见表 t∀
2q2q2 挥发油含量测定 照 ussx年版药典一部附
录 ÷⁄方法 ≈t  ∀测定结果见表 t∀
2q3 数据处理及结果分析
2q3q1 利用 ≥°≥≥tv1s软件对表 t中的挥发油和异
欧前胡素数据进行正态性检验 o所用模型为非参数
单样本柯尔莫哥洛夫 2斯米诺夫检验 k²± 2¨¶¤°³¯¨
®²¯°²ª²µ²√2¶°¬µ±²√ ·¨¶·lo样本容量为 u|o结果显示
双侧渐近显著性水平均大于 s1sxo说明样本数据服
从正态分布 o见表 u∀
表 u Ž2≥正态性检验结果 kν € u|l
统计量 挥发油 异欧前胡素
正态分布参数 平均值 u1syt s1xvs
标准偏差 s1xs| s1wvs
极差 绝对值 s1twy s1uv{
正值 s1twy s1uv{
负值 p s1sz| p s1tzs
Ž2≥检验的 Ζ值 s1z{w t1u{w
双侧渐近显著性水平 s1xzt s1szw
根据正态分布原理 o采用 υ € (ξ p Λ) /Ρ进行观
测值标准化 ≈tw  o式中 υ为正态离差 oΡ为样品标准
偏差 oΛ为样本平均值 oξ为随机变量 ∀一般以 {sh
样品能达到的概率水平为达标控制值 o即 Π(ξ∴
{sl € ƒ‘k{slo这时 υ € ? s1{wu≈ƒ‘k{sl o从而得
到挥发油的指标值为 t1yvh k°# ªpt lo异欧前胡
素为 s1tzh k°ª# ªpt l∀
2q3q2 不同产地 u年的 u|份羌活药材样品挥发油
含量在 t1uvh ∗ v1yyh o均值为 u1syh o异欧前胡
素含量在 s1tuh ∗ t1|sh o均值为 s1xvh ∀根据测
定结果及初步统计分析 o羌活的 u种成分含量在不
同年份之间的差别均不具有显著性意义 ~挥发油含
量在种间差别不具有显著意义 o但异欧前胡素含量
在种间的差异具有极显著性意义 ∀
3 讨论与结论
3q1 本研究的药材样品具备较充分的代表性 ∀来
源既覆盖了川 !甘 !青三大羌活传统主产区 o又首次
收集到了藏南八一地区的样品 ~收集时注意了采挖
季节和干燥方式的相对统一 o均采于秋季产新季节 o
并采用了产地晒干或半阴半晒的干燥方式 o可减小
因样品采收年限不确定 !采收季节和干燥方式不统
一等导致的系统误差 o能较充分反映目前羌活药材
的商品现状 ∀
3q2 ussx年版药典规定羌活挥发油含量不得少于
u1{h k°# ªpt lo但本研究对全国 ut个产地 uv份
ussx年产新药材样品的分析检测 o仅 v个样品能达
到药典标准 o占分析样品的 tv1sh ~ussv年的样品
均不能达到 ∀鉴于羌活为常用药材 o检测标准应能
真实反映药材的质量状况 o建议根据药材质量的实
际情况 o将挥发油含量标准适当降低 o如 t1yh k°
# ªpt l∀按此标准 o王小仙等收集到的 {批样品中
有 z批 o即 {z1xh能达到合格标准 ≈z  ∀
3q3 研究表明 o挥发油和香豆素类成分是羌活的药
效成分 o显然 o作为羌活品质评价 o应将香豆素类成
分及挥发油均纳入质量评价指标 ∀异欧前胡素作为
羌活香豆素类成分的代表之一 o不仅含量较高 o且具
有显著的药理活性 o故建议纳入质量标准 ∀根据检
测结果及统计处理 o按 {sh概率水平的含量值作为
达标值 o以 s1uh k°ª# ªpt l为宜 o即本品 k按干燥
品计 l含异欧前胡素 k≤ty ‹tw ’w l不得少于 s1uh k°ª
# ªpt l∀
此外 o根据测定结果 o青海互助样品的挥发油含
量明显高于其他产地样品 o该批样品采自 ts月份 o
且以蚕羌为主 o而其他样品多为混杂的统货 o是否存
在相关性尚需进一步探讨 ~而九龙的样品因运输中
的保存不当出现部分霉变 o也可能影响了成分的含
量 ∀化学成分含量在产地间的差异需进一步收集样
品进行分析和研究 o特别是传统上称为川羌和西羌
的 u类药材化学成分含量与地域间的相关性需要进
一步系统探讨 ∀作者将继续关注并通过连续多年的
跟踪调查为建立更加合理的羌活质量评价标准提供
#{yx#
第 vu卷第 z期
ussz年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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参考依据 o同时以本研究确定的方法和指标为依据 o
作为羌活物质动态积累 !加工储藏方法 !家种与野生
药材品质比较等后续研究的评价方法及指标之一 ∀
≈致谢   中国药材公司西南中心龙兴超主任为收集样
品提供帮助 ∀
≈参考文献  
≈t  中国药典 ≈≥ q一部 qussx}tuz1
≈u  徐国钧 o徐珞珊 q常用中药材品种整理和质量研究 ≈   q第 u
册 q福州 }福建科学技术出版社 ot||z}t|tq
≈v  周 毅 o蒋舜媛 o马小军 o等 q羌活资源危机和保护 ≈ q中草
药 oussvovwktsl}附 tuq
≈w  孙 辉 o蒋舜媛 o周 毅 o等 q药用植物羌活现状及其民族植
物学调查 ≈ q世界科技研究与发展 ousswouykyl}wuq
≈x  蒋舜媛 o孙 辉 o黄雪菊 o等 q羌活和宽叶羌活的环境土壤学
研究 ≈ q中草药 oussxovykyl}|tzq
≈y  郑虎占 o董泽宏 o佘 靖 q中药现代研究与应用 ≈  q第 w卷 q

北京 }学苑出版社 ot||{}vssxq
≈z  王小仙 o张晓红 q不同时期采购的羌活挥发油含量比较 ≈ q
中国中药杂志 oussuouzk{l}ytzq
≈{  李云霞 o高春华 q中药羌活化学成分及药理作用研究进展
≈ q辽宁中医学院学报 ousswoyktl}uuq
≈|  徐惠波 o孙晓波 o赵全成 o等 q羌活挥发油的药理作用研究
≈ q中草药 ot||touuktl}u{q
≈ts  粟晓黎 o王宝琴 o车明凤 q羌活中羌活醇和异欧前胡素含量测
定 ≈ q中草药 ot||touuktsl}wxsq
≈tt  王天志 o王 曙 o马 鹏 o等 q羌活属植物中 v种香豆素成分
高效液相色谱定量分析 ≈  q中国中药杂志 ot||xouskttl}
y{vq
≈tu  郭晏华 o沙 明 o车 鑫 q羌活中异欧前胡素的含量测定 ≈ q
辽宁中医学院学报 ousstovkwl}vssq
≈tv  赵湍凌 o杨月妍 o闻 亮 q高效液相色谱法测定羌活中异欧前
胡素含量 ≈ q辽宁中医学院学报 t|||otktl}wwq
≈tw  杜荣骞 q生物统计学 ≈  q北京 }高等教育出版社 ot|{x}{tq
Θυαντιτατιϖε αναλψσισ οφ ϖολατιλε οιλσανδ ισοιµ περατοριν
ιν Ρ ηιζοµ α ετ Ρ αδιξ Νοτοπτερψγιι
‹’˜ ≠¬t o Œ„‘Š ≥«∏±2¼∏¤±t o ≥˜‘‹∏¬u o ≠ „‘Š „±2§²±ªt o  „ ≠ ¤±t o  „ ÷¬¤²2­∏±v o • ˜ • ∏¬w
(t. Σιχηυαν Ινστιτυτε οφΧηινεσε Ματερια Μεδιχα, Χηενγδυ ytsswt, Χηινα;
u. Σιχηυαν Υνιϖερσιτψ, Χηενγδυ ytssyx, Χηινα;
v. Ινστιτυτε οφΜεδιχιναλΠλαντ, Βειϕινγ Υνιον ΜεδιχαλΧολλεγε & Χηινεσε Αχαδεµ ψ οφΜεδιχαλΣχιενχεσ, Βειϕινγ tsss|w, Χηινα;
w. Σιχηυαν Προϖινχιαλ∆ρυγ Αδµ ινιστρατιον, Χηενγδυ ytsstx, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨·¤¥¯¬¶« ¶¦¬¨±·¬©¬¦¤±§ ©¨©¬¦¬¨±·´ ∏¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ¶·¤±§¤µ§²©• «¬½²°¤ ·¨• ¤§¬¬ ‘²·²³·¨µ¼ª¬¬·«µ²∏ª«
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¤±§s1tzh µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼ º«¨ ± ·«¨ ¶¤°³¯ ¶¨°¨¨ ·µ¨ ∏´¬µ¨° ±¨·²©¦µ¬·¨µ¬²± º¬·« °²µ¨ ·«¤± {sh ³µ²¥¤¥¬¯¬·¼q ׫¨ ¦²±·¨±·¶²©√²¯¤·¬¯¨ ²¬¯
¤±§¬¶²¬°³¨ µ¤·²µ¬± º µ¨¨ ±²·¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ §¬©©¨µ¨±·kΠ  s1sxl ¬± ·«¨ ¶¤°³¯ ¶¨²©ussx ¤±§ussvo º«¬¯¨ ·«¨ ¦²±·¨±·¶²©¬¶²¬°³¨ µ¤·²µ¬±
º µ¨¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ §¬©©¨µ¨±·¥¨ ·º¨¨ ± Νοτοπτερψγιυµ ινχισυµ ¤±§Ν. φορβεσιι ¶¤°³¯ ¶¨q Χονχλυσιον: ≥¬±¦¨ ·«¨ ¦µ¬·¨µ¬²± ²©√²¯¤·¬¯¨ ²¬¯¶¬±
·«¨ ≤«¬± ¶¨¨ °«¤µ°¤¦²³²¨ ¬¤kussx √ µ¨¶¬²±l ©²µ• «¬½²°¤ ·¨• ¤§¬¬ ‘²·²³·¨µ¼ª¬¬¬¶·²² «¬ª« ·² ¶¤·¬¶©¼ ©²µ°²¶·• «¬½²°¤ ·¨• ¤§¬¬ ‘²2
·²³·¨µ¼ª¬¬¶¤°³¯ ¶¨o ¬·¬¶¶∏ªª¨ ¶·¨§·² µ¨§∏¦¨ ¬··²t1yh k°# ªpt lq ׫¨ ¦²±·¨±·²©¬¶²¬°³¨ µ¤·²µ¬± ¬¶³µ²³²¶¨§·² ¤§§·²·«¨ ∏´¤¯¬·¼
¶·¤±§¤µ§²©• «¬½²°¤ ·¨• ¤§¬¬‘²·²³·¨µ¼ª¬¬¤¶¤¥²√¨s1uh k°ª# ªpt lq
[ Κεψ ωορδσ] • «¬½²°¤ ·¨• ¤§¬¬‘²·²³·¨µ¼ª¬¬~ √²¯¤·¬¯¨ ²¬¯¶~ ¬¶²¬°³¨ µ¤·²µ¬±~ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯
≈责任编辑 张宁宁  
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