全 文 ：供试品溶液及芍药苷对照品溶液在１２ｈ内稳定性
良好。
２．７ 重复性试验
取同一批号的样品（批号２００２０１０１）５份，按样品
测定方法，分别测定，结果平均值为６４８ｍｇ·ｇ－１，
ＲＳＤ为１７６％，上述试验表明，该方法重复行较好。
２．８ 加样回收试验
精密 称 取 已 知 含 量 的 样 品 细 粉 （批 号
２００２０１０１，质量分数６５５ｍｇ·ｇ－１）０２５ｇ，６份，分
别精密加入芍药苷对照品（０５１６６ｍｇ·ｍＬ－１）
２４，３０，３６ｍＬ，蒸干，按样品测定项下的方法测
定，结果见表１。
表１ 芍药苷加样回收率
取样量
／ｇ
样品中
质量／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
０２５５２ １６７１６ １２３９８２８８６６ ９８０ ９８７ １６４
０２５７３ １６８５３ １２３９８２９１２７ ９９０
０２５４１ １６６４４ １５４９８３２１３８ １０００
０２５３３ １６５９１ １５４９８３２２００ １００７
０２５１０ １６４４０ １８５９８３４７７８ ９８６
０２５２１ １６５１２ １８５９８３４３８６ ９６１
２．９ 样品测定
样品标示量为每粒２ｇ，按拟定的测定方法测定
３批样品（ｎ＝２），结果分别为每粒含芍药苷１３０７，
１２２４，１３１７ｍｇ。
３ 讨论
流动相分别选择了甲醇异丙醇醋酸水（２５∶
２∶２∶７１），甲醇００５ｍｏｌ·Ｌ磷酸二氢钾溶液（４０∶
６５），甲醇００５ｍｏｌ·Ｌ磷酸二氢钾溶液醋酸异丙
醇（６７∶１７３∶４∶４），结果供试品中芍药苷能与其他杂
质峰完全分离，分离度大于１５，阴性无干扰，以甲
醇异丙醇醋酸水（２５∶２∶２∶７１）为流动相所得峰形
对称，分离度好，故确定以甲醇异丙醇醋酸水
（２５∶２∶２∶７１）为流动相，进行测定。
根据本品所含成分选用甲醇、乙醇、５０％甲醇、
稀乙醇溶媒进行提取并测定，结果以甲醇、乙醇、
５０％甲醇、稀乙醇提取含量差异较小，甲醇、乙醇提
取溶出成分较多，其杂质峰较多，而以稀乙醇提取杂
质峰较少，峰形对称，且与流动相匹配，故确定以稀
乙醇为提取溶媒。
取供试品０５ｇ，４份，精密称定，精密加入稀乙
醇５０ｍＬ，分别超声处理１０，２０，３０，４０ｍｉｎ，测定，结
果以超声１０，２０ｍｉｎ测定结果较小，而以超声３０，４０
ｍｉｎ测定结果基本无变化，故选择超声３０ｍｉｎ。
［参考文献］
［１］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：１０９．
［２］ 赵陆华．高效液相色谱法分析中药成分手册［Ｍ］．北京：中国
医药科技出版社，１９９４：３４５．
［３］ 南京中医药大学．中药大辞典［Ｍ］．上海：上海科学技术出版
社，２００６：９４６．
［责任编辑 鲍 雷］
高山红景天酶解工艺研究
郭建鹏１，２，张红梅１
（１．延边大学 药学院，吉林 延吉 １３３０００；
２．延边大学 长白山生物功能因子省部共建教育部重点实验室，吉林 延吉 １３３００２）
［收稿日期］ ２００６１１２７
［通讯作者］ 郭建鹏，Ｔｅｌ：（０４３３）２６６０６０７，Ｅｍａｉｌ：ｇｊｐ８０７＠
ｙｂｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
高山红景天系景天科植物高山红景天的干燥根
及根茎，主要成分为红景天苷及多糖，具有抗疲劳、
耐缺氧等药理作用［１，２］。为增加红景天苷转移率，
该药材的提取工艺多采用醇提法［３］，但醇提法存在
着生产成本高，多糖保留率低等缺点。
酶解法是近年来应用于中药提取的一项新技
术，选用适当的酶，可较温和地将植物组织分解，加
速有效成分的溶出，从而提高提取效率［４，５］。本实
验选用纤维素酶，通过正交试验优选酶解法提取红
景天苷的工艺条件，并与水提法进行对比，为纤维素
酶在高山红景天提取中的应用提供实验依据。
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第３２卷第１７期
２００７年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １７
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００７
１ 仪器与试药
岛津ＳＰＤ－１０ＡｔＶＰ高效液相色谱仪；红景天苷对
照品（含量测定用，中国药品生物制品检定所，批号
８１８９４０１）；纤维素酶（０５Ｕ·ｍｇ－１，Ｓｉｇｍａ公司，北京化
学试剂公司）甲醇为色谱纯；水为重蒸馏水；其余试剂
均为分析纯；高山红景天采于吉林省安图县，经延边大
学药学院刘永镇教授鉴定为景天科植物高山红景天
ＲｈｏｄｉｏＬａｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓ的干燥根及根茎。
２ 方法
２．１ 色谱条件［６８］
色谱柱为依利特 ＳｉｎｏＣｈｒｏｍＯＤＳＢＰ柱（４６
ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），流动相为甲醇水（２０∶８０），流
速１ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长２７５ｎｍ，柱温３０℃。
分别取对照品溶液（红景天苷 ０５１ｍｇ·
ｍＬ－１）、供试品溶液和阴性样品溶液各１０μＬ，注入
色谱仪，测定，见图１。理论塔板数按红景天苷峰计
算不低于２０００。
图１ 红景天苷的ＨＰＬＣ图
Ａ．对照品；Ｂ．样品；Ｃ．阴性对照品；１．红景天苷
２．２ 线性关系的考察
精密量取对照品溶液２，４，６，１０，１４，１８，２０μＬ，
注入色谱仪，测定峰面积，以峰面积（Ｙ）对进样量
（Ｘ）进行回归，回归方程Ｙ＝７０７１１Ｘ
３２９１０，ｒ＝
０９９９９。结果表明，在１２０～１０２０μｇ，红景天苷
进样量与峰面积呈良好的线性关系。
２．３ 样品的制备
２．３．１ 水提法 称取过１４目的高山红景天粗粉
１５ｇ，加水浸泡２ｈ后按表１进行提取，收集提取液，
滤过，滤液定容至５００ｍＬ，即得。
２．３．２ 酶解法 称取过１４目的高山红景天粗粉
１５ｇ，加水浸泡 ２ｈ后，加热煮沸 ５ｍｉｎ，冷却，用
１０％乙酸调ｐＨ为５０，置恒温水浴锅中，按表２条
件酶解，酶解结束后加热回流提取 ２次，每次 ４５
ｍｉｎ，收集提取液，滤过，滤液定容至５００ｍＬ，即得。
２．４ 样品的测定
表１ 水提法试验因素水平
水平
Ａ
提取次数
Ｂ
水用量／倍
Ｃ
提取时间／ｍｉｎ
１ １ １４ ６０
２ ２ １０ ９０
３ ３ ６ １２０
表２ 酶解法试验因素水平
水平
Ａ
酶解时间／ｍｉｎ
Ｂ
酶的用量／％
Ｃ
酶解温度／℃
１ ４５ １ ４５
２ ７５ １７５ ５５
３ １０５ ２５ ６５
精密量取样品５０ｍＬ减压浓缩至稠膏，用甲醇
４０ｍＬ超声３０ｍｉｎ溶解，滤过，定容至５０ｍＬ，照上
述方法测定，计算供试品中的红景天苷含量。
２．５ 结果
２．５．１ 水提法 水提法正交试验及方差分析结果
见表３和表４，结果表明，影响水提取的主次因素为
Ａ＞Ｂ＞Ｃ，即提取次数＞水用量 ＞提取时间；水提法
的最佳工艺为Ａ２Ｂ１Ｃ１，即用药材１４倍量的水，提取
高山红景天２次，每次６０ｍｉｎ。
表３ 正交试验结果
Ｎｏ．
红景天苷提取量／ｍｇ
水提法 酶解法
１ ８９８ １７５０
２ ７３４ ２５３５
３ １０４９ ２１５９
４ ７６３ １８７６
５ １１５７ ２１４３
６ ９８４ ２２１１
７ １２５３ ２４０５
８ １４６２ ２０００
９ ８９５ １８７１
表４ 统计分析结果
提取
方法
方差
来源
离差
平方和
自由度 方差 Ｆ Ｐ
酶解法 Ａ ３１１３ ２ １５５７ ３７９４
Ｂ ３５９４１ ２ １７９７０ ４３８０１ ＜００５
Ｃ １３５９９ ２ ６８００ １６５７３
误差 ０８２１ ２ ０４１０
水提法 Ａ ３７４０４ ２ １８７０２ ６６７１４３ ＜００１
Ｂ ６２０４ ２ ３１０２ １１０６５８ ＜００１
Ｃ １２２４ ２ ０６１２ ２１８３２ ＜００５
误差 ００５６ ２ ００２８
２．５．２ 酶解法 酶解法正交试验及方差分析结果
见表３和表４，结果表明，影响酶解法提取的主次因
素为Ｂ＞Ｃ＞Ａ，即酶的用量 ＞酶解温度 ＞酶解时
间；酶解法的最佳工艺为 Ａ１Ｂ２Ｃ３，即酶解时间 ４５
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ｍｉｎ，纤维素酶用量为１７５％，酶解温度为６５℃。
２．５．３ 水提法与酶解法的比较 对比表３中２种
不同提取方法的结果可知，酶解法对红景天苷的提
取优于水提法。影响酶解法提取红景天苷的主要因
素为酶的用量和酶解温度。为了进一步考查工艺的
可行性和实用性，分别按上述酶解法和水提法筛选
出的最佳提取工艺条件提取红景天苷，重复进行３
次平行试验。结果表明，酶解法红景天苷提取量为
（２５５８±００１７）ｍｇ，与正交试验最大值２５３５ｍｇ
接近，证明酶解工艺稳定、可行；水提法红景天苷提
取量为（１５３６±００１３）ｍｇ，与正交试验最大值
１４６２ｍｇ接近，证明工艺优化成功；酶解法较水提
法对红景天苷的提取量提高了１６６５４％。
３ 讨论
酶解法提取红景天苷的最佳工艺条件为，酶解
时间４５ｍｉｎ，酶用量１７５％，酶解温度６５℃，酶解
后用水回流提取２次。优化后的提取工艺稳定、可
行，与水提法相比提取量提高了１６６５４％。
目前提取红景天苷多采用７０％乙醇回流，转移
率一般为８０％左右，按本研究优化工艺提取转移率
为７９７％，与醇提法接近。
［参考文献］
［１］ 明海泉，夏光成．红景天研究进展［Ｊ］．中成药，１９８８，１９（５）：
３７．
［２］ ＤｉｎｇＳＬ，ＺｈｕＺＹ．ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＲｈｏｄｉｏ
ｌａｒｏｓｅｕＬ［Ｊ］．ＷｏｒｌｄＰｈｙｔｏｍｅｄ，１９９２，７（５）：１９８．
［３］ 曹 ．保健食品原料红景天的开发利用研究［Ｊ］．食品开发，
２００６，９（１）：８．
［４］ 傅博强，谢明勇，周 鹏，等．纤维素酶法提取茶多糖［Ｊ］．无锡
轻工大学学报，２００２，７（２１）：４．
［５］ 宋 波，邓晓皋，施雷霆．纤维素酶的研究进展［Ｊ］．上海环境
科学，２００３，２２（７）：４９１．
［６］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：１０６．
［７］ 张早华，林文翰，王小逸．高效液相色谱法测定红景天注射液
中红景天苷的含量［Ｊ］．中国中医药信息杂志，２００５，１２（１１）：
３４．
［８］ 卢永昌，林鹏程，鲍寿海．大花红景天中红景天苷的提取及含
量测定［Ｊ］．青海师范大学学报，２００５，１５（１）：３４．
［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００７０５１３
［通讯作者］ 马红，Ｔｅｌ：（０１０）６６１８４２６１２１７０，Ｅｍａｉｌ：ｍａ
ｈｏｎｇ５３５＠ｓｉｎａｃｏｍ
扶正益肺巴布膏中延胡索乙素的含量测定
马 红
（北京中医药大学 附属护国寺中医医院，北京 １０００３５）
扶正益肺膏（三伏贴膏）系北京中医药大学附
属护国寺中医医院根据冬病夏治理论，经过２０多年
的临床研究而成的院内制剂，由延胡索，细辛，穿山
龙，地龙，白芥子，干姜等６味中药组成，功能化痰、
理气、祛风、活血，主治哮喘，在减少病人发病次数，
减轻发病症状，提高患者生存质量方面有显著疗效。
但原始剂型使用不便，剂量不易控制，易污染衣物，
易过敏，不利于药效发挥，因此决定将其进一步开
发，研制成用药更安全，使用更方便的经皮给药新剂
型———巴布贴膏。本实验用高效液相色谱法测定制
剂中延胡索乙素的含量［１４］，为该药的质量提供了保
证。
１ 仪器与试药
ＡｇｉｌｅｎｔＨＰ１１００高效液相色谱仪；瑞士 ＭＥＴ
ＴＬＥＲＡＥ－２４０电子天平；延胡索乙素对照品（批号
１１０８３１２００３０２）购于中国药品生物制品检定所。样
品自制（批号０３１００７，０３１０１２，０３１０１５）；甲醇为色谱
纯；水为超纯水；其他试剂均为分析纯。
２ 方法与结果
２．１ 供试品溶液制备 取本品适量，剪碎（０５
ｃｍ×０５ｃｍ），混匀，精密称取４ｇ，置圆底烧瓶中，
精密加入００５ｍｏｌ·Ｌ－１硫酸溶液 ５０ｍＬ，浸泡 ３０
ｍｉｎ，加热回流提取２ｈ，放冷，滤过，精密量取续滤液
２５ｍＬ，加入氨试液２ｍＬ，加氯仿振摇提取４次，每
次３０ｍＬ，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶
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第３２卷第１７期
２００７年９月
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