全 文 ：八角果实及枝叶亚临界 ＣＯ２萃取挥发油化学成分的 ＧＣＭＳ分析
缪剑华１，郭 勇１，宋芸娟１，肖培根２
（１．广西药用植物园，广西 南宁 ５３００２３；
２．中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所，北京 １０００９４）
［收稿日期］ ２００７０７２４
［基金项目］ 国家科技攻关计划“西部开发”重大项目（２００５Ｂ
Ａ９０１Ａ０９）
［通讯作者］ 缪剑华，Ｔｅｌ：（０７７）１５６０１１３９，Ｆａｘ：（０７７）１５６１１３５２，Ｅ
ｍａｉｌ：ｍｊｈ１９６２＠ｖｉｐ．１６３．ｃｏｍ
八角 ＩｌｉｃｉｕｍｖｅｒｕｍＨｏｏｋ．ｆ．，为木兰科八角属
植物，又叫八角茴香（《本草纲目》）、大茴香、唛角
（广西壮语），是我国南方重要的“药食同源”经济树
种，主产于广西，福建、广东，云南也有部分种植［１］。
八角是我国传统著名的调味香料，也供药用，其味
辛、性温，有祛风理气、和胃调中、温阳散寒、理气止
痛等功效，用于中寒呕逆、腹部冷痛、胃部胀闷等
症［１３］。近年来的研究表明，八角还具有较好的抑
菌、镇痛、杀虫活性及抗自由基氧化等作用［４８］。
八角果实、枝、叶中均含芳香油，称八角茴香油，
不但在香精和食品工业应用广泛，在医药上也广泛
用作健胃剂，以及合成雌激素己烷雌酚的原
料［１，３，４８］。长期以来生产上都是采用水蒸气蒸馏法
提取八角茴香油，得率低、耗时耗能，且由于蒸馏过
程中温度高、受热时间长，部分呈香物质容易被分
解，所得产品难以保持原有的天然芳香和天然色调。
采用超临界 ＣＯ２萃取技术则能较好的解决上述矛
盾［９，１０］，但由于萃取压力高、设备投资大、仪器运行
消耗的能源和 ＣＯ２费用高，严重制约着超临界 ＣＯ２
萃取工业化生产八角茴香油的发展。为降低设备投
资和生产成本，本试验采用二因素随机区组实验筛
选萃取压力较低的亚临界ＣＯ２萃取八角茴香油的最
佳条件，并结合气相色谱质谱技术［１１，１２］对从八角果
实、枝、叶中所得茴香油进行成分分析，以期为亚临
界ＣＯ２工业化生产八角茴香油提供依据。
１ 仪器与材料
ＨＬ５＋１Ｌ／５０ⅡＡＱ型超临界ＣＯ２萃取装置（杭
州华黎泵业有限公司）；ＣＰ－３８００型气相色谱仪
（美国ＶＡＲＩＡＮ公司）；Ｓａｔｕｒｎ２０００型离子阱质谱仪
（美国ＶＡＲＩＡＮ公司）；ＤＨＧ－９２４０Ａ型电热鼓风恒
温干燥箱（上海精密试验设备有限公司）；水分测定
器（５００ｍＬ）（上海建强玻璃仪器有限公司）；ＣＯ２
（纯度≥９９９％，水分含量≤２０×１０－６）；高纯氦
（纯度≥９９９９％）；无水乙醇（分析纯）；无水硫酸
钠（分析纯）。八角果实、枝条、叶片采自广西壮族
自治区防城港市十万林场。经广西药用植物园资源
室主任余丽莹副研究员鉴定为木兰科八角属植物八
角Ｉ．ｖｅｒｕｍ的果实。
２ 方法
２．１ 原料的干燥
将八角鲜果、枝条和叶片置于 ６０℃烘箱中烘
干，采用《中国药典》２００５年版一部附录Ⅸ Ｈ甲苯
法测定水分法［３］测定其水分含量。控制原料水分
含量为５０％，粉碎，过２０目筛，密封保存于干燥器
中以备亚临界ＣＯ２萃取用。
２．２ 八角茴香油的亚临界ＣＯ２萃取提取
以八角干燥果粉为实验材料，在采用正交实验
筛选出的最佳超临界 ＣＯ２萃取工艺的基础上，保持
分离釜温度和压力不变，进一步对萃取温度和萃取
压力进行二因素随机区组实验设计，以期筛选出萃
取压力更低的最佳亚临界ＣＯ２萃取条件。控制分离
釜Ⅰ压力为７ＭＰａ、温度为３０℃，分离釜Ⅱ压力５
ＭＰａ，温度２５℃，萃取时间２０ｈ，以得油率为考察
指标，每个实验方案重复３次。极差分析表明，采用
亚临界ＣＯ２萃取法萃取八角茴香油，对茴香油得率
的影响程度大小为：萃取温度 ＞萃取压力；经 ＬＳＤ
法进行显著性检验，Ｔ１Ｐ２萃取方案八角茴香油的得
率极显著的高于其余萃取方案，为最佳的亚临界
ＣＯ２萃取方案，即亚临界 ＣＯ２萃取八角茴香油的最
佳萃取温度为２５℃、萃取压力 ７ＭＰａ、解析压Ⅰ７
ＭＰａ、解析温度Ⅰ３０℃、解析压力Ⅱ５ＭＰａ、解析温
度Ⅱ２５℃，萃取时间２０ｈ。
分别称取八角干燥果粉、枝粉和叶粉２００ｇ，在
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第３３卷第９期
２００８年５月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ９
Ｍａｙ，２００８
上述最佳萃取条件下萃取，收集萃取物，于室温下自
然解冻后，计算八角果实、枝条、叶片的得油率分别
为１２５８％，１７６％，３１１％。用无水硫酸钠脱水，
精密称取脱水后的茴香油１００００ｇ，加入３ｍＬ无
水乙醇（分析纯），超声波震荡１０ｍｉｎ后用０４５μＬ
孔径的微孔滤膜过滤，收集滤液供ＧＣＭＳ分析用。
２．３ 八角茴香油的ＧＣＭＳ分析
２．３．１ ＧＣＭＳ分析条件 ＣＰｗａｘ５２毛细管色谱柱
（０２５ｍｍ×３０ｍ，０２５μｍ），载气为高纯氦气
（９９９９９％），流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，进样口温度２６０
℃，进样量 １μＬ，分流比为 ５０∶１。起始柱温为 ８０
℃，保留２ｍｉｎ，然后以５℃·ｍｉｎ－１升温至２５０℃，
保留１４ｍｉｎ，总分析时间为５０ｍｉｎ。采用ＥＩ电离方
式，电子能量７０ｅＶ，离子阱温度２３０℃，质量扫描
范围ｍ／ｚ４０～３５０，质谱检测时间０５～５０ｍｉｎ，ＧＣ
ＭＳ传输杆温度为２８０℃。
２．３．２ 八角茴香油的 ＧＣＭＳ分析 以 ＥＩ为电离
源，对采用亚临界ＣＯ２萃取的八角果实、枝条和叶片
所得茴香油进行 ＧＣＭＳ分析，并采集所得质谱图，
通过ＳａｔｕｒｎＧＣＭＳＷｏｒｋｓｔａｔｉｏｎ（Ｖｅｒｓｉｏｎ５５２）工作
站，运用ＮＩＳＴＬｉｂｒａｒｙ（２００２版）与 Ｓａｔｕｒｎ标准谱库
对质谱数据进行检索，并结合参考文献对检出成分
进行定性分析。依据总离子流色谱图中的色谱峰面
积，按面积归一化法来计算茴香油中各成分的相对
含量。
分别从果实、枝条、叶片萃取所得茴香油中鉴定
出了８２，５５和５６种化合物，被鉴定化合物的峰面积
分别占总峰面积的９８９５％，９８５５％，９３９２％。从
果实萃取所得茴香油中萜类化合物相对质量百分数
为 ５０８％，芳香族化合物相对质量百分数为
９４３２％，非萜类脂肪族化合物相对质量百分数为
０６０６７％；从枝条萃取所得茴香油中萜类化合物占
１３５％，芳香族化合物占９７５５％，非萜类脂肪族化
合物１１１％；从叶片萃取所得茴香油中萜类化合物
占总量的２２８％，芳香族化合物占９４８８％，非萜类
脂肪族化合物占２９４％。３种原料所得茴香油中均
是芳香族化合物的相对含量最高（占总量的９０％
以上），为亚临界ＣＯ２萃取八角果实、枝条、叶片所得
茴香油的最主要构成物质。
３ 结果与讨论
根据八角茴香油的国际标准［ＩＳＯ１１０１６：１９９９
（Ｅ）］［１３］和出口八角茴香油标准（ＳＮ／Ｔ００３９
１９９２）［１４］，反式茴香脑为八角茴香油的最主要化学
成分和呈香物质，也是八角茴香油质量的最主要评
价指标，在亚临界 ＣＯ２萃取八角果实、枝条、叶片所
得茴香油中，反式茴香脑的相对质量百分数分别为：
９１２１７８％，８９９８５３％，８９８７４３％，均达到标准规
定（≥８６％），表明采用亚临界 ＣＯ２萃取，无论是八
角果实、枝条还是叶片，所得茴香油的品质均较好。
在 八 角 茴 香 油 中，反 式α香 柠 檬 烯
（０１９５３％）、β石竹烯（０２７７５％）、顺式茴香脑
（０４１３ ６％）、草 蒿 脑 （０１５４ ７％）、茴 香 醛
（０２６６０％）和小茴香灵（１０４１２％）等６种化合物
是构成茴香油特殊香味的主要化合物，也是上述标
准规定的衡量八角茴香油天然芳香度的重要呈香物
质（本研究中６种成分含量均达标）；但在八角枝条
萃取 所 得 茴 香 油 中，只 检 测 到 顺 式 茴 香 脑
（１７２３１％）、草 蒿 脑 （００３０ ５％）、茴 香 醛
（０８６２２％）和小茴香灵（１３２８９％）等 ４种化合
物，在八角叶片萃取所得茴香油中，也只检测到顺式
茴香脑（１９１３５％）、草蒿脑（０３２６５％）、茴香醛
（０６９７６％）和小茴香灵（１２７９７％）４种化合物。
表明以果实为原料萃取所得茴香油芳香气味更丰
富、更接近八角的真实风味，而以枝条和叶片为原料
萃取所得茴香油的芳香度稍差。
从茴香油的得率来看：以果实为原料，得油率可
达１２５２％，远高于目前生产上采用水蒸气蒸馏法
提取八角茴香油４％～６％的得油率，以枝条和叶片
为原料得油率分别为１７６％和３１１％，也远高于水
蒸气蒸馏法不足１％的得油率，且茴香油的芳香味
明显较水蒸气蒸馏法所得茴香油更浓郁，更接近八
角的真实香味。
综上所述，采用亚临界ＣＯ２萃取，八角茴香油的
品质好、天然芳香度高、得油率远高于目前生产上采
用的水蒸气蒸馏法。同时，由于大幅度降低了萃取
压力（仅７ＭＰａ），设备投资及仪器运行成本均较超
临界ＣＯ２萃取低，克服了生产成本过高这一制约超
临界ＣＯ２萃取工业化生产八角茴香油的瓶颈问题，
在生产上推广利用前景广阔。尽管以枝条和叶片为
原料得油率远较以果实为原料低，但枝叶生物量大、
采收周期长、原料成本低廉，可作为市场上八角果实
供应不足或价格过高时的备用原料。
［参考文献］
［１］ 中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志［Ｍ］．第３０
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第３３卷第９期
２００８年５月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
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１２（１）：２０．
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ｖｅｒｕｍＨｏｏｋ．ｆ．）［Ｓ］．ＩＳＯ１１０１６：１９９９（Ｅ）．
［１４］ 中华人民共和国专业标准．出口八角茴香油［Ｓ］．ＳＮ／Ｔ００３９
１９９２．
［责任编辑 王亚君］
［收稿日期］ ２００７０７２６
［基金项目］ 国家自然科学基金项目（３０５６０１９０）
［通讯作者］ 美丽万·阿不都热依木，Ｔｅｌ：１３８９９８７９０６８，Ｅ
ｍａｉｌ：ｍｅｉｌｉｗａｎ＠１２６．ｃｏｍ
维药老鼠瓜中白花菜苷的含量测定
美丽万·阿不都热依木１，姜丽娟１，阿吉艾克拜尔·艾萨２
（１．新疆医科大学 药学院，新疆 乌鲁木齐 ８３００５４；
２．中国科学院 新疆理化技术研究所 新疆植物资源化学重点实验室，新疆 乌鲁木齐 ８３００１１）
老鼠瓜 ＣａｐｐａｒｉｓｓｐｉｎｏｓａＬ．为白花菜科山柑属
植物，又名槌果藤、刺山柑、野西瓜。在我国主要分
布在新疆、甘肃和西藏［１］。其味辛苦，性温，具有祛
风、散寒、除湿、止痛、调经、消肿的作用，维吾尔医用
老鼠瓜治疗风湿性关节炎和痛风。现代药理学研究
表明，老鼠瓜水提物具有保肝、降糖、降血脂、抗菌和
清除自由基等作用。白花菜苷是老鼠瓜的主要成
分［２，３］，本研究对白花菜苷建立了的高效液相色谱
分析方法，并以此为基础，考察测定了新疆７个不同
产地老鼠瓜不同部位中该成分含量的变化。
１ 仪器与试药
ＳＨＩＭＡＤＺＵＬＣ－２０Ａ高效液相色谱仪（日本岛
津公司），ＳＨＩＭＡＤＺＵＳＰＤ－Ｍ２０Ａ紫外检测器（日
本岛津公司），电子分析天平（德国 Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司），
ＫＱ－２０ＫＤＥ高功率数控超声波清洗器（昆山市超
声仪器有限公司）。白花菜苷对照品（自制，ＨＰＬＣ
检测其纯度为９９５％）。甲醇和乙腈为色谱纯，其
他试剂均为分析纯，水为重蒸馏水。
老鼠瓜药材分别于２００７年６月采集于新疆７
个不同产地，经中国科学院新疆生态与地理研究所
标本馆克里木研究员鉴定为白花菜科山柑属植物老
鼠瓜Ｃ．ｓｐｉｎｏｓａ。药材于１００℃干燥４ｈ，粉碎过４０
目筛后，置干燥器内备用。
２ 方法和结果
２．１ 色谱条件 ＰｈｎｏｍｅｎｅｘＯＤＳ柱（４６ｍｍ×２５０
ｍｍ，５μｍ）；流动相甲醇０００２ｍｏｌ·Ｌ－１氯化钾水
溶液（１５∶８５）；流速０８ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长２２４
ｎｍ；柱温２５℃。色谱图见图１。
图１ 白花菜苷及老鼠瓜药材高效液相色谱图
Ａ．白花菜苷；Ｂ．药材；１．白花菜苷
２．２ 供试品溶液的制备 取样品０１ｇ，精密称定，
·２９０１·
第３３卷第９期
２００８年５月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ９
Ｍａｙ，２００８