全 文 :Εφφεχτ ον εξπρεσσιον οφ µ ιχε αλπηα2ηεµ ογλοβιν σταβιλιζινγ προτειν ιν διφφερεντ
δεϖελοπµ ενταλσταγεσ τρεατεδ ωιτη Ψισυι Σηενγξυε γρανυλεσ
≠²±ª2° ¬¨t o • «¬2®∏¬t o ≤ ¬2°¬±u o ÷¬±2«∏¤v o ¬±t o ≤∞≠∏2¼¬±ªt o ∂ ÷¬±2¬¬¤t o ÷¬¤²2¼∏±t
(t. ∆επαρτµ εντ οφ Βιολογψ, Γυανγ . ανµ εν Ηοσπιταλ, Χηινα Αχαδεµ ψ οφ Χηινεσε ΜεδιχαλΣχιενχεσ, Βειϕινγ tsssxv, Χηινα;
u. Οπητηαλµ ολογψ Ηοσπιταλ, Χηινα Αχαδεµ ψ οφ Χηινεσε ΜεδιχαλΣχιενχεσ, Βειϕινγ tsssxv, Χηινα;
v. ∆επαρτµ εντ οφ Βλοοδ, vsv ΗοσπιταλοφΠΛΑ, Ναννινγ xvssut, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ §¬¶¦∏¶¶·«¨ ©¨©¨¦·²©≠¬¶∏¬≥«¨ ±ª¬∏¨ ªµ¤±∏¯ ¶¨²± ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©¤¯³«¤2«¨ °²ª¯²¥¬± ¶·¤¥¬¯¬½¬±ª³µ²·¨¬±
k ≥°l ° ¬± §¬©©¨µ¨±·§¨ √¨¯²³° ±¨·¤¯ ¶·¤ª¨ ¶°¬¦¨q Μετηοδ : ׫¨ ·²·¤¯ ¶º µ¨¨ ¬¨·µ¤¦·¨§©µ²° ·«¨ ¥²±¨°¤µµ²º ®¤µ¼²¦¼·¨ ²©
±²µ°¤¯ ¤§∏¯·°¬¦¨ ¤±§·«¨ ®¤µ¼²¦¼·¨ ²©©¨·∏¶ ¬¯√ µ¨¤±§©¨·∏¶¶³¯¨¨ ± ¬± ³µ¨ª±¤±·¨§°¬¦¨ k³µ¨ª±¤±·¨§ut §¤¼¶l ¤±§©¨·¤¯ °¬¦¨ k³µ¨ª±¤±2
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° ¤¨¶∏µ¨§¥¼ µ¨¤¯2·¬°¨°≤ q Ρ εσυλτ: ׫¨ ¬±·¨µ√ ±¨·¬²± ²©≠¬¶∏¬≥«¨ ±ª¬∏¨ ªµ¤±∏¯ ¶¨¦²∏¯§¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ ∏³2µ¨ª∏¯¤·¨§·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ¯¨ √¨¯¶
²© ≥° ° ¬± ±²µ°¤¯ ¤§∏¯·°¬¦¨q Χονχλυσιον: ׫¨ µ¨¶∏¯·µ¨√ ¤¨¯ §¨·«¤·²±¨²©³²¶¶¬¥¯¨°²¯ ¦¨∏¯¤µ° ¦¨«¤±¬¶° ²©·«¨ ©¨©¨¦·¶¦¤∏¶¨§
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[ Κεψ ωορδσ] ≠¬¶∏¬≥«¨ ±ª¬∏¨ ªµ¤±∏¯ ¶¨~ Β2·«¤¯¤¶¶¨°¬¤~ ¤¯³«¤2«¨ °²ª¯²¥¬± ¶·¤¥¬¯¬½¬±ª³µ²·¨¬±k ≥°l~ ª¨ ±¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²±
≈责任编辑 刘
≈收稿日期 ussy2s|2uz
≈基金项目 国家自然科学基金项目 kvsvssu{wovswssx|ul~黑龙江省自然科学基金重大项目 k≠sv2swl
≈通讯作者 3 季宇彬 oר¯}kswxtl{w{yyssto∞2°¤¬¯}¼¥ «µ¥¦∏q §¨∏q¦±
西兰花中异硫氰酸盐诱导人肝癌细胞
³¨2u凋亡作用及其机制的研究
季宇彬 t3 o池文杰 u o邹 翔 t o郎 朗 t o王志举 u
ktq哈尔滨商业大学 生命科学与环境科学研究中心 o黑龙江 哈尔滨 txsszy~
uq哈尔滨商业大学 药物研究所博士后科研工作站 o黑龙江 哈尔滨 txsszyl
≈摘要 目的 }探讨西兰花中异硫氰酸盐 k¬¶²·«¬²¦¼¤±¤·¨¶o×≤≥l诱导人肝癌细胞 ³¨2u凋亡过程中的作用及
其可能机制 ∀方法 }不同浓度 ×≤≥处理人肝癌细胞 ³¨2uo应用 ××法检测 ×≤≥对 ³¨2u细胞增殖的影响 ~流
式细胞仪检测活性氧 !线粒体膜电位 k∃Ω°l和细胞亚二倍体凋亡峰变化情况 ∀结果 }×≤≥可明显抑制 ³¨2u细
胞增殖 ~txovsoysotusouws Λª# °pt的 ×≤≥作用于 ³¨2u细胞 uw «后 o细胞内活性氧分别为 kuv1t ? t1{lh o
kxv1v ? v1vlh okxz1| ? u1slh okz|1| ? v1wlh ok|v1w ? u1ylh ~∃Ω°分别为 k|w1{ ? x1xlh ok|t1{ ? x1wlh o
kyy1s ? x1ylh okyx1x ? y1ylh okww1v ? u1zlh ~ysotusouws Λª# °pt的 ×≤≥作用于 ³¨2u细胞 w{ «后可见
细胞凋亡率分别为 kty1y ? u1{lh okut1| ? w1wlh okzs1u ? x1vlh ∀结论 }×≤≥能够通过刺激 ³¨2u细胞内活
性氧的产生 o损伤线粒体 o使其膜电位下降 o引起 ³¨2u细胞凋亡 ∀
≈关键词 西兰花 ~异硫氰酸盐 ~细胞凋亡 ~活性氧 ~线粒体膜电位
#uty#
第 vu卷第 z期
ussz年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ z
³µ¬¯o ussz
≈中图分类号 u{xqx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusszlsz2sytu2sw
研究表明西兰花中硫苷的水解产物异硫氰酸盐
k¬¶²·«¬²¦¼¤±¤·¨¶o×≤≥l具有高度的生物活性 o是西
兰花中最主要的抗癌活性成分 ∀同时也发现异硫氰
酸盐能诱导一些人类细胞系产生细胞凋亡 ∀但目前
对于其诱导肿瘤细胞凋亡的机制尚不很清楚 o而且
其在不同细胞系中诱导细胞凋亡的信号转导机制也
可能有所不同 ≈v ∀本研究主要探讨西兰花中异硫
氰酸盐诱导人肝癌细胞 ³¨2u凋亡的作用及其可
能机制 ∀
1 材料
1q1 主要药品和试剂 异硫氰酸盐从西兰花中提
取获得 o由哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研
工作站提供 ∀ ° 2tyws培养基干粉 k美国
≤
公司 l∀胰蛋白酶 !噻唑蓝 k ×× l!二甲基亚砜
k⁄ ≥ l!溴化丙啶 k°l和 酶购于 ≥¬ª°¤公
司 ∀ uχozχ2二氯荧光素双乙酸盐 k⁄≤ƒ 2⁄l和罗丹
明 tuv购于北京碧云天公司 ∀其他试剂皆为国产分
析纯 o实验用水为 ¬¯¬2±自制超纯水 ∀
1q2 细胞培养 将人肝癌细胞株 ³¨2u培养于
含 tsh胎牛血清的 ° 2tyws培养液中 ovz ε oxh
≤u o相对湿度 tssh ~u ∗ v §传代 t次 o取对数生长
期细胞进行实验 ∀
2 方法
2q1 ××法检测 ×≤≥对 ³¨2u细胞增殖的影响
肿瘤细胞株在 vz ε oxh ≤u条件培养箱中用 |y
孔板培养 uw «后 o每孔分别加入 tss Λ药物 k空白
组分别加入 tss Λ的培基 lo使药物的终浓度分别
为 toxsotssotxs Λª# °pt o每个剂量设 y个复孔 ∀
再让给药后细胞在培养箱中连续培养 zu «o倒去培
基和药液后 o分别加入 tss Λs1x °ª# °pt的
××溶液 o继续培养 w «o然后吸去上清液 o每孔加
入二甲基亚砜 tss Λo轻轻振荡以使溴代噻唑蓝完
全溶解 o约 u °¬±后在 xzs ±°波长处用酶标仪测其
吸光度 kΑl值 o依据测得的吸光度值计算细胞存活
率 o进而计算抑制率 ≈w ∀
细胞生长抑制率 kh l kt p样品组吸光度 r对照组吸
光度 l ≅ tssh
2q2 流式细胞仪检测 ×≤≥对 ³¨2u细胞内活性
氧 k ≥l的影响 ⁄≤ƒ 2⁄是一种自身不发荧光
的化合物 o它能自由透过细胞膜 o被胞内活性氧氧化
为 ⁄≤ƒk§¬¦«¯²µ²©¯∏²µ¨¶¦¨¬±l∀ ⁄≤ƒ能发出很强的荧
光 o其强度可反映细胞内活性氧的总体生成水平 ∀
将 u ≅ tsx个对数生长期细胞接种于 y孔培养板置于
vz ε oxh ≤u条件培养箱中 ouw «后加入不同浓度
的 ×≤≥k使其终浓度分别为 sotxovsoysotusouws
Λª# °pt lo每个剂量设 y个复孔 ∀ uw «后细胞用
胰蛋白酶消化 o°
≥洗 u次 ovss目尼龙网过滤后用
ƒ≤检测细胞荧光强度 o以加药为对照组 ∀在检测
vs °¬±前分别加入终浓度 x Λ°²¯# pt的 ⁄≤ƒ 2⁄
置于 vz ε 孵育 ∀激发波长 w{{ ±°o发射波长 xux
±°≈x ∀
2q3 流式细胞仪检测 ×≤≥对 ³¨2u细胞线粒体
膜电位 k∃Ω°l的影响 罗丹明 tuv是一种特异性
膜电位标记的荧光染料 o对膜具有通透性 o荧光信号
主要集中于线粒体 o其荧光强度的变化反映了 ∃Ω°
的变化 ∀将 u ≅ tsx个对数生长期细胞接种于 y孔培
养板置于 vz ε oxh ≤u条件培养箱中 ouw «后加入
不同浓度的 ×≤≥k使其终浓度分别为 sotxovsoyso
tusouws Λª# °pt lo每个剂量设 y个复孔 ∀ uw «
后细胞用胰蛋白酶消化 o°
≥洗 u次 ovss目尼龙网
过滤后用 ƒ≤ 检测细胞荧光强度 o以加药为对照
组 ∀在检测 vs °¬±前分别加入终浓度 x Λª# °pt
的罗丹明 tuvo置于 vz ε 孵育 ∀激发波长 w{{ ±°o
发射波长 xux ±°≈y ∀
2q4 流式细胞仪检测 ×≤≥诱导 ³¨2u细胞凋亡
作用 细胞凋亡时有 ⁄的断裂丢失 o细胞 ⁄
的含量较二倍体少 oƒ≤ 检测时出现在 t期前 o称
为 ≥∏¥2t期 ∀将 u ≅ tsx个对数生长期细胞接种于 y
孔培养板置于 vz ε oxh ≤u条件培养箱中 ouw «后
加入不同浓度的 ×≤≥k使其终浓度分别为 sotxovso
ysotusouws Λª# °pt lo每个剂量设 y个复孔 ∀ w{
«后细胞用胰蛋白酶消化 o°
≥洗 u次 o用 zsh乙醇
固定 ow ε 过夜 o用 xs Λª# °pt的 °染色 ovz ε 避
光培养 vs °¬±ovss目尼龙网过滤后上机检测 o检测
细胞数为 tsw个 ∀激发波长 w{{ ±°o发射波长 yvs
±°≈z ∀
2q5 统计学处理 实验数据均用 cξ ? σ表示 o统计
方法为方差分析 o数据分析采用 ≥°≥≥tt1s统计软件
处理 ∀
3 结果
#vty#
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ z
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3q1 ×≤≥对 ³¨2u细胞增殖的影响 西兰花中
×≤≥对 ³¨2u细胞增殖有明显的抑制作用 o其
≤xs为 vt1wu| Λª# °pt o而且此作用呈现剂量依赖
性 o具有继续开发研究的价值 k表 tl∀
表 t ×≤≥对 ³¨2u细胞增殖的影响 kcξ ? σ, ν yl
组别 剂量 rΛª# °pt Α 抑制率 rh
对照 p s1yvv ? s1tt p
×≤≥ t s1zx| ? s1s|tl p t|1|
xs s1uzv ? s1svul xy1|
tss s1tv{ ? s1swul z{1u
txs s1tvs ? s1svul z|1x
注 }与对照组比较 tl Π s1sxoul Π s1stk表 u同 l
3q2 ×≤≥对 ³¨2u细胞内活性氧的影响 经不
同浓度的 ×≤≥作用于 ³¨2u细胞 uw «后 o用 ƒ≤
测得细胞内的荧光强度可以反映相应的活性氧生
成 ∀随着 ×≤≥药物浓度的增加 o荧光较强的细胞数
逐渐增多 o与对照组比较 o各给药组细胞活性氧增加
具有非常显著性差异 kΠ s1stlk表 ul∀
3q3 ×≤≥对 ³¨2u细胞线粒体膜电位的影响
经不同浓度的 ×≤≥作用于 ³¨2u细胞 uw «后 o用
ƒ≤检测细胞内荧光强度的变化 o发现 ×≤≥处理
过的 ∞°2u细胞中强荧光部分细胞所占百分比逐
渐减少 oysotusouws Λª# °pt的 ×≤≥组线粒体膜
电位降低较对照组具有非常显著性差异 kΠ s1stl
而且随着药物浓度的升高其比例的减少更加显著 o
呈一定的剂量依赖关系 k表 ul∀
表 u ×≤≥对 ³¨2u细胞内活性氧及细胞线粒体膜
电位的影响 kcξ ? σ, ν yl
组别 剂量 rΛª# °pt 活性氧 rh ∃Ω° rh
对照 p u1t ? t1w |y1v ? x1v
×≤≥ tx uv1t ? t1{ul |w1{ ? x1x
vs xv1v ? v1vul |t1{ ? x1w
ys xz1| ? u1sul yy1s ? x1yul
tus z|1| ? v1wul yx1x ? y1yul
uws |v1w ? u1yul ww1v ? u1zul
3q4 ×≤≥诱导 ³¨2u细胞凋亡作用的研究 so
ysotusouws Λª# °pt的 ×≤≥作用于 ³¨2u细胞
w{ «后可见细胞凋亡率分别为 kx1w ? v1ylh o
kty1y ? u1{lh o kut1| ? w1wlh okzs1u ? x1vlh o
且 ³¨2u细胞的凋亡率随着 ×≤≥浓度的增大而升
高 o即成一定的剂量依赖关系 k图 tl∀
4 讨论
流行病学研究结果表明经常食用西兰花能够降
低人们患肺癌和肠道癌得危险 ∀这主要是因为西兰
花中的芥子油苷在黑芥子酶的作用下能降解产生异
硫氰酸盐 ≈{ ∀异硫氰酸盐能够有效的防止饮食中
的多种致癌物如多环芳烃 !杂环胺和亚硝胺所引起
的 ⁄损伤和癌症 ∀同时 o异硫氰酸盐还具有如杀
菌 !抑制血小板聚集等许多生物活性 ≈| ∀研究表
明 o异硫氰酸盐可以在肿瘤发生发展的各个阶段起
到抑制作用 o还可以通过多种不同的途径诱导肿瘤
细胞凋亡 ∀但目前对于西兰花中异硫氰酸盐诱导肿
瘤细胞凋亡的具体机制尚很不清楚 ∀
图 t ×≤≥诱导 ³¨2u细胞凋亡的作用
q对照组 ~
q×≤≥ ys Λª# °pt组 ~≤q×≤≥ tus Λª# °pt组 ~⁄q×≤≥ uws Λª# °pt组
近年研究表明氧化应激参与了细胞凋亡的过
程 o并起了关键作用 ∀活性氧是体内一类氧的单电
子还原产物 o在凋亡中的作用日益受到重视 ∀很多
证据提示在促凋亡信号作用下活性氧的升高可能作
为第二信使上调促凋亡蛋白表达 o促进线粒体通透
性转变孔的开放 o激活天冬氨酸特异的半胱氨酸酶
k¦¤¶³¤¶¨lo参与 ≤¤u n途径等 o诱导细胞凋亡 ∀同时
活性氧的水平可能通过影响 ¦¤¶³¤¶¨的活性和三磷
酸腺苷水平决定细胞对促凋亡信号的效应 o或凋亡 o
或坏死 o或耐受 ≈ts ∀本实验结果显示 ³¨2u细胞
在不同浓度异硫氰酸盐的作用下 o其活性氧含量有
了显著的提高 o同时提示了西兰花中异硫氰酸盐诱
导 ³¨2u细胞凋亡的机制与活性氧的增多有关 o
氧化应激参与了这一致凋亡过程 ∀
研究表明线粒体功能改变与细胞凋亡密切相
关 ≈tt ∀而线粒体跨膜电位能直接反映线粒体功能
的改变 ∀在凋亡诱导因子的作用下 o细胞核在表现
出特征性凋亡变化之前 o其线粒体跨膜电位即开始
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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降低 ∀本实验结果证实 o在西兰花中异硫氰酸盐的
作用下 ³¨2u细胞线粒体膜电位有所下降 o与活
性氧含量的提高一致 o表明其诱导细胞凋亡的机制
与线粒体膜电位有关 ∀
综上所述 o西兰花中异硫氰酸盐对人肝癌细胞
有较强的抑制作用 o其诱导 ³¨2u细胞凋亡的作
用机制与其可通过增加 ³¨2u细胞内活性氧的产
生 o引起线粒体膜电位下降有关 ∀
≈参考文献
≈t 汪俏梅 q异硫代氰酸盐的抗癌机理及其相关研究 ≈ q细胞生
物学杂志 oussuouwkvl}tztq
≈u 刘 薇 o林文翰 o季宇彬 q青龙衣毒性作用及体外抗肿瘤作用
的实验研究 ≈ q中国中药杂志 ousswou|k|l}{{zq
≈v µ°¶·µ²±ª≥o ≥·¨¬±¤∏¨ µo ²µ±∏±ª
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§∏¦¬±ª¤¦·¬√¨¦²°³²± ±¨·¶©µ²° Χορβιχυλα φλυµ ινεα ·«µ²∏ª« ¤¦·¬√¤2
·¬²± ²©¦¤¶³¤¶¨2u ¤±§³µ²§∏¦·¬²± ²©µ¨¤¦·¬√¨²¬¼ª¨ ± ¶³¨ ¦¬¨¶¬± «∏2
°¤± ¯¨∏®¨ °¬¤ 2ys ¦¨¯¯¶≈ q ƒ²²§ ≤«¨ ° ײ¬¬¦²¯o ussyoww
k{l}tuytq
≈y 季宇彬 o池文杰 o邹 翔 o等 q西兰花中萝卜硫素提取 !分离与
抗癌活性研究 ≈ q哈尔滨商业大学学报 k自然科学版 loussxo
utkvl}uzsq
≈z 张清峰 o姜子淘 o李 荣 q辣根等十字花科蔬菜中硫甙水解产
物异硫氰酸酯的生物活性 ≈ q事物研究与开发 oussxouykvl}
{vq
≈{ 杨 洁 o高 飞 o易 静 q活性氧与细胞凋亡的研究进展 ≈ q
国外医学 #肿瘤学分册 oussuou|kwl}uw{q
≈| 童 彤 o詹启敏 q线粒体在细胞凋亡中的作用及分子机制 ≈ q
国外医学 #遗传学分册 ousswouzkxl}uyvq
Στυδψ ον αποπτοσισεφφεχτ ινδυχεδ βψ ισοτηιοχψανατεσ ιν Βροχχολι ον
ΗεπΓ 2u χελλσανδ ιτσ µ εχηανισµ
≠∏2¥¬±t o ≤ • ±¨2¬¨u o ÷¬¤±ªt o ¤±ªt o • «¬2∏u
(t. Ρ εσεαρχη Χεντερον Λιφε Σχιενχεσ ανδ Ενϖιρονµ ενταλΣχιενχεσ, Ηαρβιν Υνιϖερσιτψ οφ Χοµ µ ερχε, Ηαρβιν txsszy, Χηινα;
u. ΠοστδοχταλΠρογραµ µ ε οφ τηε Ινστιυτε οφΜατερια Μεδιχα, Ηαρβιν Υνιϖερσιτψ οφ Χοµ µ ερχε, Ηαρβιν txsszy, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ¤³²³·²¶¬¶ ©¨©¨¦·²©¬¶²·«¬²¦¼¤±¤·¨¶k×≤≥l ²± «∏°¤± ¬¯√ µ¨¦¤±¦¨µ¦¨¯¯¶ ³¨2uo ¤±§
¬·¶° ¦¨«¤±¬¶°q Μετηοδ : ³¨2u ¦¨¯¯¶º µ¨¨ ·µ¨¤·¨§º¬·«§¬©©¨µ¨±·¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¶²©×≤≥q ×× ¤¶¶¤¼ º¤¶∏¶¨§·² √¨¤¯∏¤·¨ ·«¨ ¬±©¯∏2
±¨¦¨ ²©×≤≥ ²± ¦¨¯¯ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²±q ƒ ²¯º ¦¼·²° ·¨µ¼ º¤¶∏¶¨§·² ·¨¶· ≥ ¯¨ √¨¯¶o ¬±·µ¤¦¨¯¯∏¯¤µ°¬·²¦«²±§µ¬¤¯ ·µ¤±¶° °¨¥µ¤±¨ ³²·¨±·¬¤¯
k∃Ω°lo ¤±§«¼³²§¬³¯²¬§¤³²³·²¶¬¶³¨ ¤®¬± ³¨2u ¦¨¯¯¶q Ρ εσυλτ: ×≤≥ ²¥√¬²∏¶¯¼ ¬±«¬¥¬·¨§³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ²© ³¨2u ¦¨¯¯¶q • «¨ ± ·µ¨¤2
·¨§º¬·«txo vso yso tuso uws Λª# °pt ²©×≤≥ ©²µuw «o ≥ ¯¨ √¨¯¶º µ¨¨ kuvqt ? t1{lh o kxv1v ? v1vlh o kxz1| ? u1slh o
kz|1| ? v1wlh o k|v1w ? u1ylh µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼~ ¤±§ ∃Ω° º µ¨¨ k|w1{ ? x1xlh o k|t1{ ? x1wlh o kyy1s ? x1ylh o kyx1x ?
y1ylh ¤±§kww1v ? u1zlh µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼~ º«¨ ± ·µ¨¤·¨§ º¬·« yso tuso uws Λª# °pt ²©×≤≥ ©²µw{ «o ¦¨ ¯¯ ¤³²³·²·¬¦µ¤·¨¶º µ¨¨
kty1y ? u1{lh o kut1| ? w1wlh ¤±§ kzs1u ? x1vlh µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼q Χονχλυσιον: ×≤≥ ª¨ ± µ¨¤·¨¶ ≥ ¬± ª¤¶·µ¬¦¦¤±¦¨µ ³¨2u
¦¨¯¯¶o º«¬¦«¦¤∏¶¨¶°¬·²¦«²±§µ¬¤¯ ° °¨¥µ¤±¨³¨ µ° ¤¨¥¬¯¬½¤·¬²± ¤±§∃Ω° §¨ ¦µ¨¤¶¨o ·«¨ µ¨©²µ¨o ¯¨ ¤§¶·²¤³²³·²¶¬¶²© ³¨2u ¦¨¯¯¶q
[ Κεψ ωορδσ] Βροχχολι~ ¬¶²·«¬²¦¼¤±¤·¨¶~ ¤³²³·²¶¬¶~ µ¨¤¦·¬√¨²¬¼ª¨ ± ¶³¨ ¦¬¨¶~ °¬·²¦«²±§µ¬¤¯ ·µ¤±¶° °¨¥µ¤±¨³²·¨±·¬¤¯
≈责任编辑 刘
5中国中药杂志 6发表的论文 /基于地理信息系统的苍术道地药材气候
生态特征研究 0k作者 }郭兰萍 o黄璐琦 o阎 洪 o等 lo被评为 /第四届中国科
协期刊优秀学术论文 0 ∀
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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