全 文 ：迁地保护黄檗群体的遗传多样性评价
闫志峰，张本刚，张 昭
（中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所，北京１０００９４）
［摘要］ 目的：评价迁地保护黄檗群体的遗传多样性水平。方法：利用８对荧光引物，对１０个迁地保护黄檗群
体共计６７株个体进行ＡＦＬＰ分析。结果：共扩增１５７４条谱带，其中多态带１３５４条；黄檗物种水平的遗传多样性高于
迁地保护群体水平，多态位点百分率ＰＰＬ分别是８６０２，４１５５，有效等位基因数Ｎｅ分别为１４２７５，１２３７６，Ｎｅｉ基因
多样性指数Ｈ分别是０２３１２，０１４００，Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数Ｉ分别是０３９７３，０２１１３。结论：初步评价了黄檗迁地保护
效果。
［关键词］ 珍稀濒危药用植物；黄檗；迁地保护；ＡＦＬＰ；遗传多样性；
［中图分类号］Ｒ２８２．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１０１１２１０６
［收稿日期］ ２００７０３１０
［基金项目］ 国家中医药管理局科学技术研究专项（０４－
０５ＺＰ０７）；北京市教委重点学科共建项目（ＸＫ１００２３０４４８）
［通讯作者］ 张昭，Ｔｅｌ：（０１０）６２８９９７７３，Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｚｈａｏ１９６２＠
ｔｏｍ．ｃｏｍ
黄檗ＰｈｅｌｏｄｅｎｄｒｏｎａｍｕｒｅｎｓｅＲｕｐｒ．为芸香科黄檗
属植物，系第三纪古热带植物区系的孑遗植物［１］，为
常用中药材关黄柏的基源植物［２］，是我国珍贵的药用
和用材树种。曾广泛分布于我国东北的吉林、黑龙
江、辽宁等地，由于长期过量的林木采伐和不合理药
材采收，资源量越来越少，野生黄檗的生存状况十分
严峻，极易陷入濒危的状态，在《中国植物红皮书———
稀有濒危植物》第１册中［３］，黄檗被列为渐危种，国家
２级保护植物。根据作者多年野外调研发现，野生黄
檗多散生分布，且成年树下很少有实生苗出现，分布
区持续缩小，因此开展黄檗保护研究已是势在必行。
ＤＮＡ分子标记技术已广泛用于濒危植物遗传
多样性研究［４，５］，目前在评价迁地保护群体遗传多
样性上也有利用［６］。扩增的限制性片段长度多态
性（ａｍｐｌｉｆｉｅｄｆａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ，ＡＦＬＰ）［７］
是一种高效的显性遗传标记，结合了 ＲＦＬＰ的专一
性和 ＲＡＰＤ技术的随机性、高效性，是新一代的分
子标记技术，本实验采用荧光标记引物扩增产物在
自动测序仪上扫描鉴定［８］，分析和评价了迁地保护
黄檗群体的遗传多样性和保护效果。
１ 材料与方法
１．１ 材料
在以往迁地保护以及调查研究的基础上［９，１０］，
选取来自１０个地区的黄檗迁地保护群体个体进行
实验（表１）。中国医学科学院北京药用植物园所保
护的７个迁地保护群体（ＴＨＡ，ＴＨＢ，ＪＨ，Ｑ，Ｗ，Ｆ，
ＢＪ）及中国科学院植物研究所植物园（南）（Ｘ）和北
京植物园（北）（Ｙ）所保护的２个迁地保护群体的样
品采幼嫩叶片放入自封袋中，－２０℃迅速冷冻保
存；哈尔滨国家森林植物园（Ｈ）的样品采用１０倍量
的变色硅胶（青岛海洋化工有限公司）１２ｈ内快速
干燥。实验采用北京鼎国生物技术有限公司的
ＦＩＳＨＡＦＬＰ试剂盒。
表１ 黄檗迁地保护群体的取样情况
种源地 群体编号 采集地 取样数／株
通化 ＴＨＡ 中国医学科学院药用植物园 １０
通化 ＴＨＢ 中国医学科学院药用植物园 ９
抚松 Ｆ 中国医学科学院药用植物园 １０
蛟河 ＪＨ 中国医学科学院药用植物园 ６
泉阳 Ｑ 中国医学科学院药用植物园 ３
湾沟 Ｗ 中国医学科学院药用植物园 ５
不详 ＢＪ 中国医学科学院药用植物园 ９
不详 Ｙ 北京植物园 ６
不详 Ｘ 中国科学院北京植物所植物园 ４
不详 Ｈ 哈尔滨国家森林植物园 ５
１．２ 总ＤＮＡ制备
本实验称取材料０２ｇ，采用ＣＴＡＢ法［１１，１２］提取
ＤＮＡ，０８％琼脂糖电泳检测ＤＮＡ纯度、完整性及产
量，ＤＮＡ质量浓度大约为５０ｎｇ·μＬ－１。
１．３ ＡＦＬＰ实验
ＡＦＬＰ方法参照ＶＯＳ等［７］的方法，其中酶切和连
接采用一步法进行，预扩增反应参考北京鼎国生物技
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术有限公司ＦＩＳＨＡＦＬＰ试剂盒说明。利用２组ＤＮＡ
样品从６４对ＡＦＬＰ引物中（ＰｓｔⅠ／ＭｓｅⅠ）（表２）筛选出
扩增图谱清晰的８对引物对进行选择性扩增反应，分
别是ＰＧＡＡ／ＭＣＴＧ，ＰＧＡＡ／ＭＣＴＴ，ＰＧＡＣ／ＭＣＴＴ，
ＰＧＡＣ／ＭＣＡＣ，ＰＧＴＴ／ＭＣＡＡ，ＰＧＴＴ／ＭＣＡＣ，Ｐ
ＧＴＴ／ＭＣＴＧ，ＰＧＴＴ／ＭＣＴＴ。
表２ ＡＦＬＰ接头和引物序列
ＤＮＡ接头和引物 核苷酸序列 备注
ＰｓｔⅠ接头１ ５′ＣＴＣＧＴＡＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＡＴＧＣＡ３′ 连接接头
ＰｓｔⅠ接头２ ５′ＴＧＴＡＣＧＣＡＧＴＣＴＡＣ３′ 连接接头
ＭｓｅⅠ接头１ ５′ＧＡＣＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＧ３′ 连接接头
ＭｓｅⅠ接头２ ５′ＴＡＣＴＣＡＧＧＡＣＴＣＡＴ３′ 连接接头
ＰｓｔⅠ引物、ＰｓｔＩ预扩引物 ５′ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＡＴＧＣＡＧ３′ 预扩增
ＰＧＡＡ ＰｒｉｍｅｒｐＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＡＴＧＣＡＧＡＡ 选择性扩增
ＰＧＡＣ ＰｒｉｍｅｒｐＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＡＴＧＣＡＧＡＣ
ＰＧＡＧ ＰｒｉｍｅｒｐＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＡＴＧＣＡＧＡＧ
ＰＧＡＴ ＰｒｉｍｅｒｐＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＡＴＧＣＡＧＡＴ
ＰＧＴＡ ＰｒｉｍｅｒｐＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＡＴＧＣＡＧＴＡ
ＰＧＴＣ ＰｒｉｍｅｒｐＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＡＴＧＣＡＧＴＣ
ＰＧＴＴ ＰｒｉｍｅｒｐＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＡＴＧＣＡＧＴＴ
ＰＧＴＧ ＰｒｉｍｅｒｐＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＡＴＧＣＡＧＴＧ
ＭｓｅⅠ（蓝色荧光）、ＭｓｅⅠ预扩引物 ５′ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＧＴＡＡＣ３′ 预扩增
ＭＣＡＡ ＦＡＭ标记ＭｓｅⅠ１∶５′ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＧＴＡＡＣＡＡ 选择性扩增
ＭＣＡＣ ＦＡＭ标记ＭｓｅⅠ２∶５′ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＧＴＡＡＣＡＣ
ＭＣＡＧ ＦＡＭ标记ＭｓｅⅠ３∶５′ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＧＴＡＡＣＡＧ
ＭＣＡＴ ＦＡＭ标记ＭｓｅⅠ４∶５′ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＧＴＡＡＣＡＴ
ＭＣＴＡ ＦＡＭ标记ＭｓｅⅠ５∶５′ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＧＴＡＡＣＴＡ
ＭＣＴＣ ＦＡＭ标记ＭｓｅⅠ６∶５′ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＧＴＡＡＣＴＣ
ＭＣＴＧ ＦＡＭ标记ＭｓｅⅠ７∶５′ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＧＴＡＡＣＴＧ
ＭＣＴＴ ＦＡＭ标记ＭｓｅⅠ８∶５′ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＧＴＡＡＣＴＴ
１．３．１ 酶切和连接 在０５ｍＬ离心管中加入（反
应体系总体积为 ２０μＬ）４μＬＤＮＡ，２５μＬ１０×
ｂｕｆｅｒ，２５μＬＡＴＰ（１０ｍｍｏｌ·Ｌ－１），１μＬ接头，２
μＬＰｓｔＩ／ＭｓｅⅠ内切酶对，１μＬＴ４ＤＮＡ连接酶，７
μＬＡＦＬＰＷａｔｅｒ。混匀离心数秒，３７℃保温５ｈ，８℃
保温４ｈ，４℃过夜。
１．３．２ 预扩增和选择性扩增 预扩增参考 ＡＦＬＰ
试剂盒说明。选择性扩增体系（反应体系总体积为
２５μＬ）２μＬ预扩模板，２５μＬ１０×ＰＣＲＢｕｆｅｒ，０５
μＬｄＮＴＰｓ（１０ｍｍｏｌ·Ｌ－１），１μＬＰｓｔＩｐｒｉｍｅｒ（５０ｎｇ
·μＬ－１），１μＬＭｓｅⅠ ｐｒｉｍｅｒ（５０ｎｇ·μＬ－１），０５
μＬＴａｑ（５Ｕ·μＬ－１），补足１７５μＬｄｄＨ２Ｏ。按下列
参数在 ＧｅｎｅＡｍｐＰＣＲＳｙｓｔｅｍ９６００（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，
ＵＳＡ）进行 ＰＣＲ循环，第１个循环扩增参数：９４℃
３０ｓ，６５℃ ３０ｓ，７２℃ ８０ｓ；以后每轮循环温度递减
０７℃，扩增１２轮；最后按下列参数扩增２３轮：９４
℃ ３０ｓ，５５℃ ３０ｓ，７２℃ ８０ｓ。
１．３．３ 扩增产物的凝胶电泳分析 取１μＬＰＣＲ产
物＋１μＬ内标（ＧＥＮＥＭＡＲＫ５００，红色），在４％的
变性聚烯酰胺凝胶条件下，利用３７７ＤＮＡ自动测序
仪电泳２４ｈ，得到清晰的 ＡＦＬＰ指纹图谱，在 Ｇｅｎｅ
Ｓｃａｎ软件下自动采集电泳凝胶图（图１）。
１．４ 数据分析
利用ＧｅｎｅＳｃａｎＲ３１软件将６７个个体，８对引物产
生的电泳凝胶图转化为０，１数据矩阵，采用ＮＴＳＹＳｐｃ
ｖｅｒｓｉｏｎ２１１ｆ软件包进行结果分析，根据内标确定片段
大小，计算样品间的 Ｎｅｉ和 Ｌｉ相似性系数 ＤＩＣＥ
［ＤＩＣＥ＝２ａ／（２ａ＋ｂ＋ｃ）］［１３］，并进行聚类分析。
利用ＰＯＰＥＧＥＮＥｖｅｒｓｉｏｎ１３２软件［１４］计算如下
遗传多样性参数：①多态位点百分率ＰＰＬ，②等位基
因平均数Ｎａ，③有效等位基因数 Ｎｅ，④Ｎｅｉ基因多
样性指数Ｈ，Ｓｈｏｎｎｏｎ信息指数 Ｉ，Ｎｅｉ的遗传距离 Ｄ
和遗传一致度 Ｉ，并采用 ＭＥＧＡ３０软件［１５］对遗传
距离Ｄ进行非加权算术平均聚类分析（ＵＰＧＭＡ）。
２ 结果
２．１ 个体遗传相似性系数及其聚类分析
利用ＮＴＳＹＳｐｃｖｅｒｓｉｏｎ２１１分析软件对０，１数
据计算出ＤＩＣＥ相似系数，进行 ＵＰＧＭＡ聚类分析。
其中，Ｗ４与ＴＨＡ８相似系数最小，为０３２６７，遗传距
离最大。Ｗ２与 Ｗ５相似系数最大为０８４３７。从聚
类图上可以看出，来自同一地区进行迁地保护的个
体聚为一类，如来自抚松（Ｆ）、湾沟（Ｗ）、蛟河
（ＪＨ）、泉阳（Ｑ）、通化（ＴＨＡ，ＴＨＢ）、哈尔滨森林植
物园（Ｈ）地区的已知群体聚在一起，遗传距离较近。
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图１ 引物对ＰＧＡＣ／ＭＣＴＴ对的扩增结果
群体编号同表１，下标为个体编号
２．２ 物种和群体水平的遗传多样性
扩增片段长度为５０～５００ｂｐ，６７个黄檗个体经
过８对荧光引物扩增共得到１５７４条清晰的谱带，
其中多态带１３５４条，多态位点百分率为８６０２。每
对引物扩增出１４４～１９３条多态带，平均１９６７５条，
黄檗的迁地保护群体共有带占总带数的１４１９％。
黄檗物种水平Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数Ｉ＝０３９７３，Ｎｅｉ基
因多样性指数 Ｈ＝０２３１２，有效等位基因数 Ｎｅ＝
１４２７５（表３），物种水平具有较高的遗传多样性。
ＰＰＬ是应用很广泛的多样性指标，在参试群体
中，北京植物园的最高为５２８１％，泉阳群体的最低
为２６２５，平均多态位点百分率为 ４１５５。Ｓｈａｎｎｏｎ
信息指数（Ｉ）分析结果显示，北京植物园的群体最
高为０２７４８，泉阳群体最低为０１４２４，平均 Ｓｈａｎ
ｎｏｎ信息指数 Ｉ＝０２１１３，有效等位基因数 Ｎｅ＝
１２３７６。
２．３ 群体遗传分化
Ｎｅｉ基因多样性指数（Ｈ）是衡量群体遗传分化
最常用的指标之一，为总的遗传变异中群体间变异
表３ ＡＦＬＰ选择性扩增引物产生的条带多态性（群体编号同表１）
群体编号 样本数 ＰＰＬ／％ 观察等位基因数Ｎａ 有效等位基因数Ｎｅ Ｎｅｉ基因多样性Ｈ Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数Ｉ
Ｆ １０ ４７１７ １４７１７ １２５４４ ０１５０３ ０２２８３
ＢＪ ９ ４９３１ １４９３１ １２７３８ ０１６１６ ０２４４７
Ｘ ４ ２８２８ １２８２８ １１７０７ ０１００３ ０１５０７
ＴＨＢ ９ ４７８２ １４７８２ １２６８３ ０１５７４ ０２３７７
Ｗ ５ ４１２２ １４１２２ １２５５０ ０１４７６ ０２２０５
ＪＨ ６ ３４６７ １３４６７ １２０６９ ０１２０９ ０１８１３
Ｙ ６ ５２８１ １５２８１ １３１４５ ０１８３１ ０２７４８
Ｑ ３ ２６２５ １２６２５ １１５６７ ００９４６ ０１４２４
Ｈ ５ ３８８２ １３８８２ １２２８０ ０１３４５ ０２０２６
ＴＨＡ １０ ４９１９ １４９１９ １２４８２ ０１５００ ０２３０５
群体水平 － ４１５５ １４１５５ １２３７６ ０１４００ ０２１１３
物种水平 ６７ ８６０２ １８９８１ １４２７５ ０．２３１２ ０３９７３
所占的比例。１０个迁地保护群体的 Ｎｅｉ基因多样
性指数为Ｙ（０１８３１）＞ＢＪ＞ＴＨＢ＞Ｆ＞ＴＨＡ＞Ｗ＞
Ｈ＞ＪＨ＞Ｘ＞Ｑ（００９４６）。
２．４ 群体间遗传一致度、遗传距离和 ＵＰＧＭＡ聚类
分析
Ｎｅｉ的遗传一致度Ｉ和遗传距离 Ｄ反映了群体
间的遗传分化程度（表 ４），群体的遗传一致度在
０８２２３～０９６７５，遗传距离在００３３１～０１９５９，
说明群体间的相似程度较高，遗传距离较小，其中，
中国医学科学院北京药用植物园来自通化地区的迁
地保护群体与哈尔滨森林植物园迁地保护群体之间
的遗传距离最小为００３３１，相似性最高。北京植物
所与中国医学科学院药用植物园来自泉阳群体的遗
传距离最大为０１９５９，遗传分化程度较大。根据
１０个群体的遗传距离进行ＵＰＧＭＡ聚类分析结果显
示（图２），１０个迁地保护群体明显分为两类，其中
北京地区除 Ｑ和 ＴＨＡ与 Ｈ聚为一类外，其他的群
体聚为一类。
３ 讨论
３．１ 遗传多样性水平
本实验利用８对荧光引物共扩增了１５７４条多
态带，多态位点百分率为８６０２，平均每对引物检测
到１９６７５个，说明本实验选择的引物具有很高的多
态性［１６］，黄檗物种水平具有较高的遗传多样性，
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表４ 黄檗迁地保护群体的遗传距离
群体 Ｆ ＢＪ Ｘ ＴＨＢ Ｗ ＪＨ Ｙ Ｑ Ｈ ＴＨＡ
Ｆ ０９５４８ ０９４１０ ０９４３２ ０９２４２ ０９４３４ ０９４１５ ０８３９９ ０８４９９ ０８５０８
ＢＪ ００４６３ ０９６３８ ０９５９６ ０９１０２ ０９２６１ ０９４０３ ０８４４３ ０８５７２ ０８６１９
Ｘ ００６０９ ００３６９ ０９３９６ ０８８１６ ０９０２６ ０９１５６ ０８２２３ ０８３５１ ０８３９９
ＴＨＢ ００５８６ ００４１３ ００６２４ ０９２１４ ０９３２０ ０９４０８ ０８６６５ ０８７３３ ０８７３７
Ｗ ００７８９ ００９４４ ０１２６４ ００８２３ ０９６１４ ０９４７１ ０８２８９ ０８３４２ ０８３７３
ＪＨ ００５８３ ００７６９ ０１０２７ ００７０６ ００３９４ ０９５６４ ０８２５５ ０８３３６ ０８４１７
Ｙ ００６０３ ００６１６ ００８８３ ００６１１ ００５４５ ００４４７ ０８５０７ ０８６２０ ０８７２６
Ｑ ０１７４７ ０１６９５ ０１９５９ ０１４３７ ０１９１２ ０１９２８ ０１６２４ ０９５６８ ０９４６６
Ｈ ０１６３１ ０１５４８ ０１８０７ ０１３６２ ０１８５６ ０１８３８ ０１４９６ ００４４２ ０９６７５
ＴＨＡ ０１６１７ ０１４８８ ０１７４６ ０１３５２ ０１８００ ０１７３３ ０１３６９ ００５５０ ００３３１
注：三角形上为遗传一致度，下为遗传距离
图２ １０个迁地保护黄檗群体的ＵＰＧＭＡ聚类分析图
但迁地保护黄檗比野生黄檗遗传多样性低（ＰＰＬ＝
９２７７，Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数 Ｉ＝０４２７５，Ｎｅｉ基因多样
性指数Ｈ＝０２３１６，有效等位基因数 Ｎｅ＝１９７４９）
（另文报道），这可能与迁地保护个体数量较少有
关，因此要达到有效保护，还需要进一步增加保护样
本数量，丰富种质圃规模。
研究结果表明迁地保护群体内遗传多样性偏
低，黄檗迁地保护群体水平遗传多样性低于濒危植
物元宝山冷杉［５］的遗传多样性（ＰＰＬ＝５０９６，Ｈ＝
０１５１０，Ｉ＝０１７３５），说明濒危植物黄檗迁地保护
群体具有较低的遗传多样性。与迁地保护的金花
茶［６］相比（ＰＰＬ＝２４１４，Ｉ＝０１５２８）具有稍高的遗
传多样性，可见黄檗的迁地保护种质圃基本保存了
该种的遗传多样性，但为有效保护黄檗，还需要进一
步比较分析其野生群体的遗传结构，增加迁地保护
样本数量。
３．２ 遗传结构
根据遗传距离的聚类分析结果，来自各个地区
的迁地保护群体分别聚为一类，说明地理因素对黄
檗影响很大。由此推测中国科学院北京植物所（Ｘ）
的群体可能来自抚松地区，北京植物园（Ｙ）的群体
可能来自蛟河或湾沟地区，而中国医学科学院药用
植物园（ＢＪ）的成年大树可能部分来自抚松，部分来
自通化，由于时间久远，目前没有资料可以查阅，因
此以后迁地保护应该更加重视相关的信息记录。
哈尔滨森林植物园（Ｈ）、中国医学科学院药用
植物园ＴＨＡ、中国医学科学院药用植物园 Ｑ等聚为
一类，与其他类明显分开，可能与迁地保护时的采样
方式和数量有关。
３．３ 遗传多样性保护
了解物种的遗传结构和遗传多样性，对探讨物
种濒危机制、指导迁地保护和引种栽培、自然保护区
的规划及评估特定群体的保护价值等有着重要价
值。根据本实验结果，黄檗在物种水平具有较高遗
传多样性，但群体间遗传分化较大，不同产地黄檗具
有不同的遗传特征。因此在进行黄檗的迁地保护
时，应根据地理和植被特点，在黄檗的自然分布范围
内，选择黄檗分布较集中，生境具有一定差异，并且
相距较远的长白山、完达山、大兴安岭、小兴安岭、千
山以及燕山山脉的云蒙山等不同生态环境的地区采
集样本。同时，充分考虑其遗传结构和道地性因子
及品质特征［１７］，进行合理取样，增大样本数量，加强
黄檗种质资源收集工作，丰富现有种质圃规模，对更
好地保护黄檗的珍贵种质将会起到很好的效果［１８］。
为了使植物园在迁地保护时发挥应有的作用，应该
注重记录和信息管理，采集保育环境下植物物种、形
态、发育、分类、利用、引种、栽培、生态等实物信息，
整合植物园空间固有信息，以及原产地的生态环境
信息，建立濒危药用植物引种驯化与保护档案记录
系统，指导科研和保护工作的开展。
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ＰｈｅｌｏｄｅｎｄｒｏｎａｍｕｒｅｎｓｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＡＦＬＰｍａｒｋｅｒｓ
ＹＡＮＺｈｉｆｅｎｇ，ＺＨＡＮＧＢｅｎｇａｎｇ，ＺＨＡＮＧＺｈａｏ
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＰｌａｎｔＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅａｎｄＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，
Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９４，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｆｒｏｍｅｘｓｉｔｕｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｏｆＰｈｅｌｏｄｅｎｄｒｏｎａｍｕｒｅｎｓｅ．
Ｍｅｔｈｏｄ：Ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｉｎ６７ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓｆｒｏｍｅｘｓｉｔｕｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｏｆＰ．ａｍｕｒｅｎｓｅｗｅｒｅａｓｓｅｓｓｅｄｕｓｉｎｇＡＦＬＰｔｅｃｈｎｉｑｕｅ
ｂｙｅｉｇｈｔｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｌａｂｅｌｅｄｐｒｉｍｅｒｇｒｏｕｐｓ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｅｉｇｈｔｐｒｉｍｅｒｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓｇｅｎｅｒａｔｅｄａｔｏｔａｌｏｆ１５７４ｂａｎｄｓ，ｏｆｗｈｉｃｈ１３５４
ｗｅｒｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ．ＡｓｆｏｒＰ．ａｍｕｒｅｎｓｅａｔｓｐｅｃｉｅｓｌｅｖｅｌ，ｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃｌｏｃｉ（ＰＰＬ）ｗａｓ８６０２，ｔｈｅｅｆｅｃｔｉｖｅｎｕｍｂｅｒｏｆ
ａｌｅｌｅｓｐｅｒｌｏｃｕｓ（Ｎｅ）ｗａｓ１４２７５，ｔｈｅＮｅｉ＇ｓｇｅｎｅｄｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｈ）ｗａｓ０２３１２，ａｎｄｔｈｅＳｈａｎｎｏｎ＇ｓｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ（Ｉ）ｗａｓ０３９７３．
Ａｔｔｈｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｌｅｖｅｌ，ｔｈｅｅｓｔｉｍａｔｅｓＰＰＬ＝４１５５，Ｈ＝０１４００，Ｎｅ＝０２３７６ａｎｄＩ＝０２１１３．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｐｒｅｓｅｎｔ
ｅｘｓｉｔｕｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎｗａｓｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙａｓｓｅｓｓｅｄ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｒａｒｅａｎｄｅｎｄａｎｇｅｒｅｄｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔ；Ｐｈｅｌｏｄｅｎｄｒｏｎａｍｕｒｅｎｓｅ；ｅｘｓｉｔｕｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ；ＡＦＬＰ；ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
［责任编辑 张宁宁
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第３３卷第１０期
２００８年５月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １０
Ｍａｙ，２００８