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Effect of isopropyl 3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-hydroxypropanoate on
rat pulmonary artery smooth muscle

丹参素异丙酯对大鼠肺动脉平滑肌的作用



全 文 :wereestablishedbyinjectingtheembolusofbloodpowderthroughtherightexternalcarotidarteryintotheinternalcarotidartery,rats
wererandomlydividedintofivegroups(n=12ineach):normal,shamoperation,model,Chinesemedicinetreatment,andWestern
medicinetreatment.Qingnaodroppilula(133.28mg·kg-1),nimodipine(7.25mg·kg-1)wereadministeredrespectivelytoChi
nesemedicinetreatmentgroupandWesternmedicinetreatmentgroupbygavage,equalvolumeofnormalsalineweregiventothree
groups.Ratsweretreatedwithdrugsstartingat3rddaybeforetheoperation,onetimeperday.Observingmorphologicchangesinhip
pocampusbyopticalmicroscopeandelectronmicroscope.DetectingexpressionlevelofMARCKSmRNAinhippocampusbysemiquan
tificationPCRmethod.Result:Hippocampuscelsarangetidy,administrativelevelswerecompactnessinnormalgroup,whichcels
diferentialyimpairedinmodelgroup,ChinesemedicinetreatmentgroupandWesternmedicinetreatmentgroup.Hippocampuscels
damageofChinesemedicinetreatmentgrouphavemorerecklessthanthemodelgroupinhistopathology.TheMARCKSmRNAwereex
pressonedinmodelgroupvsmedicationtreatmentgroups,inChinesemedicinetreatmentgroupvsthemodelgroup.Conclusion:Qing
naodroppilulacanaleciatehistomorphologylesionofhippocampuswhenoccuringacutemultiinfarction,toturnslowerMARCKS
mRNAexpression,mayplayaneuroprotectiveefectrolethroughaccommodatingPKCMARCKSsignaltransductionsystem.
[Keywords] Qingnaodroppilula;acutemulticerebralinfarction;MARCKSmRNA;regulationfuction
[责任编辑 古云侠]
[收稿日期] 20080120
[基金项目] 国家自然科学基金项目(30770785);国家重点基
础研究发展计划(973计划)(2007CB512005);教育部科技创新工程
重大项目培育资金项目(705045)
[通讯作者] 马欣,Tel:(029)82655165,Email:maxin0131@
tom.com
丹参素异丙酯对大鼠肺动脉平滑肌的作用
李 静,马 欣,臧伟进
(西安交通大学 医学院 药理学系,陕西 西安 710061)
[摘要] 目的:研究丹参素异丙酯对离体血管平滑肌的作用。方法:制备大鼠肺动脉条,采用离体血管灌流方
法,观察丹参素异丙酯对去甲肾上腺素(NE)预收缩动脉的舒张作用以及对多种血管收缩药量效曲线的影响。结
果:丹参素异丙酯可浓度依赖性舒张NE预收缩的完整内皮血管,去内皮后该作用明显降低;对5羟色胺(5HT)、
内皮素(ET1),U46619和KCl量效曲线均表现浓度依赖性抑制。结论:丹参素异丙酯可内皮依赖性地舒张大鼠肺
动脉,机制可能与调节钙通道活动有关。
[关键词] 丹参素异丙酯;肺动脉;钙通道
[中图分类号]R285.5 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)24294204
  丹参 Salviamiltiorhiza为唇形科鼠尾草属植物
的干燥根部,包括水溶性和脂溶性两大类有效成
分[1],具有增强心功能、扩血管、抗血小板聚集、改
善微循环以及增加机体对缺氧的耐受力等作用[24]。
目前有关丹参制剂的研究较为广泛,但对丹参的体
内活性代谢物了解较少。丹参素异丙酯(isopropyl
3(3,4dihydroxyphenyl)2hydroxypropanoate)是西
北大学中草药现代化研究及工程中心研究复方丹参
滴丸在人体内的相关代谢产物过程中发现的,结构
为β(3,4二羟基苯基)α羟基丙酸异丙酯,是丹参
的水溶性成分丹参素在体内的主要代谢产物[5]。
丹参素具有显著的舒张血管作用[6],而代谢产物丹
参素异丙酯是否同样具有舒张血管的作用,尚未见
相关报道。本实验旨在观察丹参素异丙酯对离体大
鼠肺动脉的作用,并探讨其可能的作用机制。
1 材料与方法
1.1 动物 健康SD大鼠,体重260~320g,雌雄兼
用,由西安交通大学实验动物中心提供,合格证号陕
医动字第08005。
1.2 药品及试剂 丹参素异丙酯由西北大学中草
药现代化研究及工程中心提供,纯度985%。去甲
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肾上腺素(norepinephrine,NE;天津金耀氨基酸有限
公司,批号0608071);乙酰胆碱(acetylcholine,ACh;
上海三爱思试剂有限公司,批号20030620);U46619
(Cayman公司);5羟色胺(5hydroxytryptamine,5
HT;Sigma公司);内皮素(endothelin1,ET1;Sigma
公司);其他试剂均为国产分析纯。
1.3 仪器及设备 ASB240U生物医学实验系统
(成都遨生电子有限责任公司),包括软件 ASB240U
软件及硬件4通道桥式放大器;JH-2型张力换能
器(北京航天医学工程研究所);SC-15恒温浴槽
(宁波江南仪器厂);XTG型连续变倍体式显微镜
(北京泰克公司)。
1.4 方法[78] SD大鼠,脱臼处死,开胸,迅速取出
肺脏,浸入预冷(4℃)氧饱和的 KH营养液(mmol
·L-1:NaCl118,KCl47,NaHCO324,MgSO412,
CaCl225,KH2PO412和glucose10),洗净残血,解
剖显微镜下游离出肺小动脉,剥除外膜脂肪及结缔
组织;去内皮组用细金属丝在血管内穿行4~5次,
去除内皮。处理好的血管选取直径为05~15mm
的部位,剪成长约2mm的血管环,套在浴槽中2个
平行的L型金属针上,其中一个连接张力换能器,
另一个连接微调装置(调节负荷张力)。安装好的
血管环置于(37±1)℃恒温浴槽中,持续通入95%
O2和5% CO2的混合气体,pH73~75。调节基础
张力均为500mg,平衡90min,在此过程中孵育血
管环的液体每15min换1次,并使前负荷维持500
mg。然后以60mmol·L-1KCl检验动脉环收缩性,
前后2次收缩幅度相差 <10%的用于实验。以1×
10-7mol·L-1ACh检测内皮功能,舒张率 >75%者
视为内皮完整,<15%者视为内皮完全去除。
血管环经活性验证后分别进行如下操作:1×
10-7mol·L-1NE预收缩血管,稳定后,以浓度累计
法加入丹参素异丙酯获得舒张量效曲线;以浓度累
计法向浴槽中加入5HT,ET1,U46619,KCl等血管
收缩剂,得到收缩量效曲线,作为对照;冲洗标本,
待血管张力恢复后加入不同浓度丹参素异丙酯
(1×10-5,10-4,10-3mol·L-1)作用 10min后,同
法加入上述血管收缩剂,获得丹参素异丙酯作用下
的量效曲线。
1.5 统计学分析 所有数据均以 珋x±s表示,收缩
剂诱发的最大稳定收缩幅度定为标准值100%,血
管舒张/收缩的幅度以占标准值的百分比来表示。
结果以SPSS130统计分析软件进行单因素方差分
析和t检验,P<005为差异有统计学意义。应用
GraphPadPrism40软件进行图表绘制。
2 结果
2.1 对 NE预收缩血管的舒张作用 丹参素异丙
酯在1×10-10~10-3mol·L-1内可浓度依赖性地舒
张NE预收缩的血管。对不同性别大鼠的肺动脉舒
张率略有差别(雌性 >雄性),但无显著性差异,当
浓度为1×10-3mol·L-1时,P<001。比较内皮完
整和去内皮血管,去内皮组舒张率明显降低,最大舒
张率(Rmax)为(3053±493)%,显著低于内皮完整
组(5563±1909)%,P<001(图1,2)。
与雄性组相比P<0.01(n=6)
图1 丹参素异丙酯对不同性别大鼠NE预收缩
肺动脉的舒张量效曲线
与去内皮组相比P<0.05,P<0.01(n=6)
图2 丹参素异丙酯对NE预收缩大鼠肺动脉
内皮完整和去内皮血管的舒张量效曲线
2.2 对 5HT量效曲线的影响 可使 5HT
(1×10-8~10-5mol·L-1)量效曲线显著右移,最
大效应(Emax)减小,呈浓度依赖性非竞争性抑制作
用(图3)。
2.3  对 ET1量效 曲 线 的 影 响   对 ET1
(1×10-12~3×10-9mol·L-1)诱导的收缩呈一定
的抑制作用,可浓度依赖性使量效曲线右移,Emax减
小,但仅在高浓度时(1×10-3mol·L-1)该作用具
有显著性意义(图4)。
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与对照组相比P<0.05,P<0.01(n=6)(图4~6同)
图3 丹参素异丙酯对5HT量效曲线的影响
图4 丹参素异丙酯对ET1量效曲线的影响
2.4 对 U46619量效曲线的影响 可显著抑制
U46619(1×10-9~10-6mol·L-1)诱导的收缩,使
量效曲线右移,Emax减小,呈明显浓度依赖性
(图5)。
图5 丹参素异丙酯对U46619量效曲线的影响
2.5 对KCl量效曲线的影响 低浓度丹参素异丙
酯(1×10-5,1×10-4mol·L-1)对 KCl(10,20,40,
60,80mmol·L-1)量效曲线无明显影响,高浓度丹
参素异丙酯(1×10-3mol·L-1)可显著抑制 KCl
量效曲线(图6)。
3 讨论
本实验发现,丹参素异丙酯对离体大鼠肺动脉
具有显著的剂量依赖性舒张作用。其舒血管作用呈
现一定的性别差异,即雌性优于雄性,但无统计学显
著性。比较对NE预收缩的内皮完整和去内皮肺动
脉环的舒张作用,去内皮组舒张率显著降低,提示丹
  
图6 丹参素异丙酯对KCl量效曲线的影响
参素异丙酯的舒血管作用具有一定的内皮依赖性。
5HT,ET1及血栓素(TXA2)均为内源性缩血
管物质,三者相互协调,共同维持血管正常舒缩活
动,在病理状态下对肺动脉高压的发生发展有着重
要影响。5HT,ET1及 TXA2可分别结合血管平滑
肌细胞膜上的5HT2A受体、ETA受体和 TP受体,这
三类受体被激活后,均通过偶联的 Gq蛋白活性放
大作用激活磷脂酶C(PLC)而促进二酰甘油(DAG)
和三磷酸肌醇(IP3)生成,后者诱导肌浆网 Ca
2+释
放,同时激活细胞膜上受体操纵性钙通道(receptor
operatedcalciumchannel,ROCC)使外 Ca2+内流,引
起血管收缩[911]。本实验发现,丹参素异丙酯可抑
制5HT,ET1以及 TP受体激动剂 U46619的缩血
管作用,提示其可能通过影响“受体(5HT2A受体、
ETA受体或TP受体)PLCIP3&DAG内 Ca
2+释放 &
外Ca2+内流”途径舒张血管。
细胞外高 K+可使细胞膜超极化,激活血管平
滑肌细胞膜上的电压依赖性钙通道(voltagedepend
entcalciumchannel,VDCC),使细胞外 Ca2+内流而
增加胞内Ca2+浓度,引起血管收缩。实验发现高浓
度丹参素异丙酯可抑制 KCl量效曲线,说明其在较
高浓度水平可抑制外钙经VDCC内流。
综上所述,丹参素的代谢产物丹参素异丙酯,具
有内皮依赖性舒张血管作用,并可抑制多种缩血管
物质的作用,机制可能与调节钙通道活动有关。
[参考文献]
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Efectofisopropyl3(3,4dihydroxyphenyl)2hydroxypropanoateon
ratpulmonaryarterysmoothmuscle
LIJing,MAXin,ZANGWeijin
(DepartmentofPharmacology,MedicalschoolofXi'anJiaotongUniversity,Xi'an710061,China)
[Abstract] Objective:Toinvestigatetheefectofisopropyl3(3,4dihydroxyphenyl)2hydroxypropanoateonvascularsmooth
muscle.Method:Isolatedratpulmonaryarterywasperfusedandthetensionofthevesselwasmeasured,theefectofisopropyl3(3,
4dihydroxyphenyl)2hydroxypropanoateonthepulmonaryarteryprecontractedbynoradrenaline(NE)andconcentrationresponse
curvesof5hydroxytryptamine(5HT),endothelin1(ET1),U46619andKClwasalsoobserved.Result:Isopropyl3(3,4di
hydroxyphenyl)2hydroxypropanoateexertedrelaxationefectontheendotheliumintactarteryprecontractedbyNEinaconcentration
dependentmanner,whichwasinhibitedwithdenudedendothelium.Therightshiftoftheconcentrationresponsecurvesof5HT,ET
1,U46619andKCl.Conclusion:Isopropyl3(3,4dihydroxyphenyl)2hydroxypropanoatehaverelaxationactiononratpulmonary
arteryinthewayofendotheliumdependance,themechanismofrelaxationactionbyisopropyl3(3,4dihydroxyphenyl)2hydroxypro
panoatemayberelatedtocalciumchannels.
[Keywords] isopropyl3(3,4dihydroxyphenyl)2hydroxypropanoate;pulmonaryartery;calciumchannel
[责任编辑 古云侠]
《中国中药杂志》被国内外数据库收录情况和引证数据
1 国外数据库收录
美国SciFinder数据库:进入医学索引MEDLINE;进入《化学文摘》(CA);荷兰 Elsevier公司 Scopus数据库;《国际药学文
摘》(IPA);《毒物学文摘》(ToxFile);俄罗斯《文摘杂志》(AJ);波兰《哥白尼索引》(IC);WHO西太平洋地区医学索引
(WPRIM)。
2 国内数据库收录
“中国科学引文数据库”来源期刊;“中国学术期刊综合评价数据库”来源期刊;中国自然科学核心期刊;中国中文核心期
刊;中国科技核心期刊;《中国学术期刊文摘》中、英文版。
3 主要引证数据或数据库统计结果
《中国中药杂志》在中国知网(CNKI)的2007年浏览量为37万,下载量为21万,国内外用户达到2000余家。
据中国科学技术信息研究所分析研究中心发布的中国科技期刊核心版引证报告(2007):影响因子为0.693,总被引频次3
937,基金论文比0.53,被引半衰期5.68;扩展版:影响因子1.052;引文频次6853。
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