全 文 ：猫人参有效部位对小鼠移植性肿瘤 ‹uu的
抑制作用及机制探讨
张亚妮 o刘 岭 o凌昌全 3
k第二军医大学 长海医院 中药学部 o上海 usswvvl
≈摘要  目的 }研究猫人参抗肿瘤活性部位k „ o…l对小鼠皮下移植性肿瘤 ‹uu的生长抑制作用 o并对其作
用机制进行初步的探讨 ∀方法 }利用小鼠皮下移植性肿瘤模型观察猫人参中提取的 u个有效部位  „ o…的体内
抗肿瘤作用 o并运用流式细胞术和末端脱氧核苷转移酶介导的 §2˜×°缺口末端标记法k ט‘∞法l检测它们对肿瘤
细胞周期的影响及诱导凋亡作用 ∀结果 }  „ o…高 !中 !低 v个剂量组对小鼠移植性肿瘤都具有抑制作用 o使肿瘤
细胞阻滞于 Šs2Št期而使 ≥期细胞减少 o并有诱导细胞凋亡的作用 ∀结论 }猫人参有效部位  „ o…能够抑制小鼠
移植性肿瘤的生长 o其机制可能与影响细胞周期及诱导凋亡有关 ∀
≈关键词  猫人参 ~有效部位 ~抗肿瘤作用 ~细胞周期 ~凋亡
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltt2s|t{2sv
≈收稿日期  ussx2sv2ts
≈基金项目   上海市科学技术委员会科研计划项目
ksw⁄t|{s{l
≈通讯作者  3凌昌全 oר¯ }ksutluxszs{{t
猫人参是猕猴桃科植物对萼猕猴桃k镊合猕猴
桃 l Αχτινιδια ϖαλϖατα ⁄∏±± 或 大 籽 猕 猴 桃
Α1 µαχροσπερµα ≤1ƒ1¬¤±ª的根茎 o主要产于浙江 !江
西等地 o民间常用于治疗骨髓炎和消化道癌症 o但
其成分和药理作用目前尚不清楚 ∀笔者此前观察到
猫人参水提液在体外对几种肝癌细胞株具有一定的
抑制作用≈t  o在此基础上 o作者通过体外活性筛选实
验进一步提取分离了猫人参中具有抗肿瘤活性的有
效部位 o观察其在体内对小鼠移植性肿瘤的抑制作
用 o并对作用机制进行初步探讨 o为拓展猫人参的临
床应用及开发奠定基础 ∀
1 材料
111 药物 猫人参活性部位 „k主要为蒽醌类物
质l !…k主要为皂苷类物质l由上海市中药研究所
化学室提取 ∀x2氟尿嘧啶kx2ƒ∏l o批号 swsxsw o上海
旭东海普药业有限公司出品 ∀
112 试剂 • °Œ2tyws培养基为 Š¬¥¦²公司产品 ~
小牛血清为杭州四季青公司产品 ~碘化丙啶k°Œl购
自上海普飞生物技术有限公司 ~原位凋亡检测试剂
盒购自 •²¦«¨ 公司 ∀
113 细胞株 小鼠肝癌细胞株 ‹uu购自中国科学
院上海细胞所 o上海长海医院中医科实验室保存 ∀
114 动物 昆明种小鼠 {s只 o雄性 o体重 t{ ∗ uu
ªo第二军医大学实验动物中心提供 o合格证号 ≥≤÷Ž
k沪lussu2sssy ∀
2 方法
211 猫人参有效部位 „ o…对小鼠皮下移植性
肿瘤的抑制作用 小鼠肝癌细胞株 ‹uu复苏后培
养传代 o收集对数生长期的细胞 o以生理盐水调整含
量至 t ≅ tsyr°o以每只 s1x °接种于小鼠腹腔中 ∀
z §后抽取小鼠腹水 o用生理盐水稀释成 tΒw的细胞
悬液 o以 s1u °r只接种于小鼠右前肢腋部皮下 ∀uw
«后将已接种的小鼠随机分为 {组 }生理盐水阴性
对照组k‘≥l ox2ƒ∏阳性对照组kx2ƒ∏ovs °ª#®ªptl o
„高 !中 !低剂量组ktss oxs oux °ª#®ªptl o…高 !
中 !低剂量组ktss oxs oux °ª#®ªptl ∀各组均每日腹
腔注射给药 o连续给药 ts §o停药 uw «后用颈椎脱
臼法处死小鼠 o剥取瘤块称重 o按公式计算抑瘤率 ∀
抑瘤率k h l € k对照组平均瘤重 p治疗组平均瘤重lr对
照组平均瘤重 ≅ tss h
212 „ o…对荷瘤鼠肿瘤细胞增殖周期及凋亡的
影响 将所有取出的瘤块各取 t ∗ u °°v左右研磨
制成细胞悬液 o用 °…≥洗 v次 ozs h ow ε 冷乙醇固
定 o°Œ染色 o用流式细胞仪kƒ≤l分析细胞周期各期
分布情况及凋亡细胞所占的比例 ∀
213  „ o…诱导荷瘤鼠肿瘤原位凋亡作用 每组
#{t|#
第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tt
∏±¨ oussy
取 x只小鼠的瘤块固定切片 o按 ט‘∞试剂盒说明
操作 o用下述方法计算凋亡指数k„Œl }光镜下避开坏
死区 o选 ts个高倍视野k ≅ wssl凋亡典型区域 o计数
t sss个细胞 o其中阳性细胞数百分比即为 „Œ∀
214 统计学处理 数据用 cξ ? σ表示 o数据处理用
单因素方差分析 o均数间两两比较采用 θ检验 ∀
3 结果
311 „ o…对小鼠皮下移植性肿瘤的抑制作用
实验结果表明 o猫人参提取物 „ o…对小鼠移
植性肿瘤具有较好的抑制效果 o各给药组的抑瘤率
与生理盐水组相比差异均有统计学意义 o其中  „ o
…高剂量组与阳性对照药 x2ƒ∏组的抑瘤率相近 o
差异没有统计学意义 ∀从实验结束时除瘤体重的比
较来看 o„ o…高剂量组及 x2ƒ∏组小鼠体重与生
理盐水组相比差异具有统计学意义 o其余给药组体
重与生理盐水组差异无统计学意义 ∀实验过程中观
察到 ox2ƒ∏组小鼠食欲明显下降 o少动 o毛散乱 !无
光泽 o其余各组上述情况则不明显k表 tl ∀
表 t 猫人参有效部位对小鼠移植性肿瘤k‹uul
的抑制作用kcξ ? σl
组别
剂量
r°ª#®ªpt
动物数
k始r终l
体重rª
k始r终l
瘤重
rª
抑瘤率
r h
‘≥组 p tsr| uu qxrvv qywl u qsz ? s qyx
 „组 ux tsrts uu qvrvt qzwl t qw{ ? s qwv u{ qxst owl
xs tsrts uu qurvv qtwl s q|y ? s qvz xv qyuul
tss tsrts ut q{ruy q{u owl s q{s ? s qvv yt qvxul
…组 ux tsrts ut q{rvt qzwl t qx| ? s qy{ uv qt|t owl
xs tsr| uu qwrvu qtwl t qty ? s quv wv q|yu ovl
tss tsr| uu qtruw qzu ovl s q{z ? s qww xz q|zul
x2ƒ∏组 vs tsr{ ut qyrus qsul s qww ? s quw z{ qzwul
注 }与 ‘≥ 组相比tl Π  s1sx oul Π  s1st ~与 x2ƒ∏组相比vl Π 
s1sx owl Π s1stk表 u同l
312 „ o…对荷瘤鼠肿瘤细胞增殖周期及凋亡的
影响 ƒ≤  分析结果表明 o„ 中 !高剂量组和 …
高剂量组 Šs2Št期细胞增多 o≥期细胞减少 ~„ o…
中 !高剂量组的凋亡细胞比例较高 o与对照组相比差
异具有统计学意义 ~两者对 Šu2 期细胞影响较小
k表 ul ∀
表 u 猫人参有效部位对小鼠移植性肿瘤k‹uul细胞增殖周期及凋亡的影响kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量r°ª#®ªpt Šs2Št期r h Šu2 期r h ≥期r h 凋亡细胞r h
‘≥组 p uw q|y ? w qvw tt qw{ ? { qvyvl yv qxx ? | q|u t qw{ ? s qzu
 „组 ux t| qyv ? t qzwvl tx q{{ ? s quwvl xv qvy ? tx quz u qss ? s quw
xs vz qvs ? z quwu ovl tz qyy ? v qywvl wx qsx ? y q||u ovl w qvz ? t qwwt ovl
tss v{ qx{ ? x qxvu ovl tv qyu ? y q{xvl wz q{s ? tt qzxu ovl v qyw ? t q{wtl
…组 ux t{ qzw ? u q|xt ovl tw qtu ? tt qsuvl yz qtw ? { qxs t qvu ? t qwx
xs t| q{t ? y quxvl ut quw ? tv qz{wl x{ q|x ? tu qsu w quu ? t qvvt ovl
tss v| qzy ? ts qwtt ovl tx qvu ? t qxzvl ww q|v ? tt qswu ovl v qxt ? t q{wt ovl
x2ƒ∏组 vs u| qvv ? y qxy u qyw ? s q{vtl y{ qsv ? ts quz u qs| ? s qvx
313  „ o… 诱导荷瘤鼠肿瘤原位凋亡作用
ט‘∞分析结果表明 o„高 !中剂量组凋亡指数明
显高于对照组 o差异具有统计学意义 o其余各组凋亡
指数与对照组相比差异无统计学意义 ~x2ƒ∏组镜下
观察大多为坏死 o凋亡细胞很少k表 vl ∀
表 v 猫人参有效部位诱导荷瘤鼠肿瘤
细胞凋亡作用kcξ ? σ, ν € xl
组别 剂量r°ª#®ªpt „Œr h
‘≥组 s t q{u ? t qsw
 „组 ux w q|y ? u qts
xs z qwu ? v qv{t oul
tss { qvz ? x qswt oul
…组 ux u qxw ? t qux
xs v qsv ? t qtx
tss v qtt ? t quv
x2ƒ∏组 vs s qzz ? s qyv
注 }与 ‘≥组相比tl Π s1sx ~与 x2ƒ∏组相比ul Π s1sx
4 讨论
猕猴桃类药用植物资源及种类日益受到国内外
医学界的重视 o有报道猫人参的近缘种软枣猕猴桃
茎多糖≈u 及中华猕猴桃根多糖复合物≈v 有一定的抗
感染和抗肿瘤作用 ~也有人用猕猴桃根中提取的蒽
醌类物质进行体外细胞毒实验 o结果表明其对白血
病及结肠癌细胞株具有一定的生长抑制作用≈w  ∀笔
者此前的研究证实 o猫人参水提液在体外对多种肿
瘤细胞株具有抑制作用 o但所需浓度较高 ∀为进一
步确定猫人参中发挥抗肿瘤作用的有效部位以提高
抗肿瘤效果 o作者通过体外活性筛选 o提取了猫人参
有效部位  „ 及 …o进行了动物体内的抗肿瘤实
验 o结果表明其具有较为明显的抗肿瘤活性 o两者的
抑瘤率均达到 xs h 以上 o抑瘤作用呈现剂量依赖
性 ∀与化疗药 x2ƒ∏相比 o高剂量的  „ o…抑瘤率
与之相近而毒副反应较轻 o有利于保证患者的生存
#|t|#
第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tt
∏±¨ oussy
质量 ∀
为探讨猫人参抗肿瘤机制 o将实验小鼠的肿瘤
标本进行了 ט‘∞染色及细胞周期分析 o发现其具
有诱导肿瘤细胞凋亡的作用 o能使肿瘤细胞阻滞于
Šs2Št期 o而使进入 ≥期的细胞减少 o这些作用与剂
量呈现相关性 ∀因此 o通过影响细胞周期进而诱导
细胞凋亡可能是猫人参抗肿瘤的作用机制之一 o但
凋亡发生的通路及传导途径等具体机制还有待于进
一步深入研究 ∀
恶性肿瘤的发病率越来越高 o中医药对于肿瘤
的治疗有其独特的优势 o如减轻放化疗毒副反应 !治
疗并发症等≈x  o因此对抗肿瘤中药的开发具有重要
意义 ∀作者的实验结果提示 o猫人参是一种极具开
发前景的抗肿瘤天然药物 o为进一步分离纯化和拓
展应用提供了初步的理论依据 ∀
≈参考文献 
≈t  万旭英 o张亚妮 o张 晨 q猫人参注射液体外抗肝癌实验研
究 q浙江中医学院学报 oussw ou{kul }wx q
≈u  侯芳玉 o陈 飞 o陆 意 o等 q长白山产软枣猕猴桃茎多糖抗
感染和抗肿瘤作用的研究 q白求恩医科大学学报 ot||x out
kxl }wzu q
≈v  林佩芳 q中华猕猴桃多糖复合物的抗肿瘤作用 q中华肿瘤杂
志 ot|{{ otskyl }ts| q
≈w  邹益友 o谭桂山 o谢兆霞 q猕猴桃根抑制肿瘤细胞的实验研
究 q湖南中医药导报 ot||| oxkwl }vz q
≈x  凌昌全 q肿瘤治疗存在的问题及中西医结合的研究重点 q中
西医结合学报 oussv otkvl }ty{ q
Ινηιβιτιον εφφεχτ οφ αχτιϖεφραχτιον φροµ Αχτινιδια ϖαλϖατα ον γροωτη
οφ τρανσπλανατεδ µ ουσετυµ ορ χελλσ ανδ πρελιµιναρψστυδψ οφιτσ µεχηανισµ
‹„‘Š ≠¤2±¬oŒ˜ ¬±ªoŒ‘Š ≤«¤±ª2 ∏´¤±
( ∆επαρτµεντ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Χηανγηαι Ηοσπιταλ, Σεχονδ Μιλιταρψ Μεδιχαλ Υνιϖερχιτψ, Σηανγηαι usswvv , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ ¬±«¬¥¬·¬²± ©¨©¨¦·²©¤¦·¬√¨©µ¤¦·¬²±©µ²° °¤²µ¨±¶«¨ ±k „ o …l²±·«¨ ªµ²º·«²©·µ¤±¶³¯¤±·¨§°²∏¶¨
·∏°²µ¦¨¯¯¶‹uu ¤±§¬·¶° ¦¨«¤±¬¶° q Μετηοδ : ׫¨ ·µ¤±¶³¯¤±·¨§°²∏¶¨ ·∏°²µ°²§¨¯ ιν ϖιϖο º¤¶∏¶¨§·²²¥¶¨µ√¨·«¨ ¤±·¬·∏°²µ¤¦·¬√¬·¼ ²© „ o
…1 ׫¨ ¦¨¯¯ ¦¼¦¯¨§¬¶·µ¬¥∏·¬²±¶º µ¨¨ §¨·¨µ°¬±¨ §¥¼©¯²º ¦¼·²° ·¨µ¼kƒ≤ l1 ׫¨ ¤³²³·²¶¬¶¬±·∏°²µº¤¶° ¤¨¶∏µ¨§¥¼ ק×2° §¨¬¤·¨§¥¬²·¬±¼¤·¨§2
§˜×° ±¬¦® ±¨§2¯ ¤¥¨ ¬¯±ªkט‘∞l ° ·¨«²§q Ρεσυλτ :  „ o … ¶«²º §¨¤±·¬·∏°²µ¤¦·¬√¬·¬¼ ²±·µ¤±¶³¯¤±·¨§ °²∏¶¨ ·∏°²µq׫¨ ¼ ¦²∏¯§ °¤®¨ ¦¨¯¯¶
¤µµ¨¶·¨§¤·Šs2Št ³«¤¶¨ o§¨¦µ¨¤¶¨ ¦¨¯¯¶³¨µ¦¨±·¤ª¨ ¤·≥ ³«¤¶¨ o¤±§¬±§∏¦¨ ·«¨¬µ¤³²³·²¶¬¶qΧονχλυσιον :  „ o …©µ²° °¤²µ¨±¶«¨ ± «¤√¨¤±·¬2
·∏°²µ ©¨©¨¦·²±·«¨ ·µ¤±¶³¯¤±·¨§ °²∏¶¨ ·∏°²µo¤±§·«¨ ° ¦¨«¤±¬¶° °¤¼ ¥¨ ·«µ²∏ª«·«¨ º¤¼ ²©¬±©¯∏¨ ±¦¬±ª¦¨¯¯ ¦¼¦¯¨¤±§¬±§∏¦¬±ª¤³²³·²¶¬¶q
[ Κεψ ωορδσ] Αχτινιδια ϖαλϖατα~¤¦·¬√¨©µ¤¦·¬²±~¤±·¬·∏°²µ ©¨©¨¦·~¦¨¯¯ ¦¼¦¯¨~¤³²³·²¶¬¶ ≈责任编辑 古云侠 
制药工业近红外分析检测技术应用研讨会通知
为了配合5中华人民共和国药典6ussx年版附录/近红外分光光度法指导原则0 o加快近红外光谱分析技术在医药行业的
应用 o提高制药企业的产品质量 o降低生产成本 o促进制药工业的发展 o提高制药工程技术含量 o增强制药工业整体实力 o推动
制药工程技术产学研结合和成果转让 o浙江省药学会特举办 / 制药工业近红外分析检测技术应用研讨会0 o诚邀相关制药企
业 !科研技术人员投稿并参加会议 ∀
一 !会议研讨主要内容 }
≠现代近红外光谱分析技术基础及应用 ~近红外技术原理及在制药企业各个环节的应用案例 ~≈ 近红外技术在中药质
量评价及生产过程质量监测中的应用 ~…近红外在国际著名制药企业的应用及案例分析
二 !会议时间 !地点 }ussy年 y月 ty p t{日 o浙江省杭州市 k具体地点待定l
三 !参会人员可获 y个继续教育学分
四 !联系人及联系电话 }谢志鹏k浙江大学药学院lsxzt p {{uzvy{s ~孙国君k浙江工业大学药学院lsxzt p {{vusvus
五 !通讯地址 !电子邮件 }杭州市浙大路 v{号 o¬½³ƒ ½­∏q¨§∏q¦±
六 !主办单位 }浙江省药学会
七 !承办单位 }浙江大学药学院 !浙江工业大学药学院
#su|#
第 vt卷第 tt期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tt
∏±¨ oussy