全 文 ：菝葜总皂苷元超声萃取研究
吕金海 t o舒孝顺 u3 o高中洪 v o杨祥良 v
ktq湖南怀化学院 生物工程系 o湖南 怀化 wt{sss~
uq长沙理工大学 生物与食品工程系 o湖南 长沙 wtsszy~
vq华中科技大学 药物研究所 o湖北 武汉 wvsszwl
≈收稿日期 ussx2sy2uz
≈通讯作者 3 舒孝顺 o ר¯}tvstytyxu{|o∞2°¤¬¯}¶¬¶zvu ¼¤2
«²²1¦²°1¦±
菝葜为百合科菝葜属植物的根茎 o具有消肿止
痛 !祛风利湿 !活血化瘀及抗肿瘤等作用 ≈t2v o临床单
用或与其他药物配伍用于各种炎症性疾病 ∀皂苷类
成分是菝葜属植物的主要成分 o其中主要是甾体皂
苷 ≈w o大量药理学研究发现其具有抗炎 !抗肿瘤等
重要药理活性 ≈xo y o显示其具有很好的开发前景及
利用价值 ∀
总皂苷元的传统萃取方法多采用有机溶剂回流
或浸取法 o得率往往较低 o而且生产周期长 o能耗高 ∀
超声波萃取与传统方法相比 o具有收率高 !生产周期
短 !不用加热 !有效成分不被破坏等优点 ≈z ∀本研
究用正交设计法 o以筛选菝葜总皂苷元超声萃取的
最佳工艺条件 ∀
1 仪器与试剂
≠|{ p ¶型超声仪 k宁波新芝科器研究所 o功
率 u sss • l~
≥vss≥型电子分析天平 ~电热恒温水
浴锅 k武汉琴台医疗器械厂 l~tst型数显电热鼓
风干燥箱 k上海浦东荣丰科学仪器有限公司 l~ƒ p
tsu型植物粉碎 ~ ∞ p xu旋转蒸发仪 k上海亚荣生
化仪器厂 l~菝葜根茎 o产于湖南邵阳地区 o经华东
科技大学生命科学院韩定献副教授鉴定 o粉碎干燥
备用 ~|xh乙醇为化学纯 ∀
2 方法与结果
2q1 样品的水解 精确称取预先处理好的菝葜根
茎粉末 k过 ts目筛 luss ªo放入 u sss °烧瓶中 o
加入 vh u ≥w溶液 t sss °o于恒温水浴锅中 tss
ε 恒温回流水解 ts «o水解结束后置于冷水中冷却 o
再以 ≤¤k lu中和至 ³ zo过滤 o同时用水反复冲
洗 o再置于 ys ε 恒温电热鼓风干燥箱中干燥 o称重
得水解干燥物 tvv1x ª∀
2q2 水解物总皂苷元的萃取 精确称取 ts ª水解
干燥物 o先以 xs °相应溶剂浸泡 t «o再按表 t的
设计进行超声萃取 o过滤 o滤渣再用 xs °相应溶剂
洗涤 !过滤 o合并滤液在旋转蒸发仪上浓缩得浓缩
液 ∀
表 t 超声萃取因素水平
水平
Α
溶媒
Β
萃取次数
Χ
超声功率
r®•
∆
超声时间
r°¬±
t 石油醚 t s1{ ts
u 氯仿 u t1u us
v |xh乙醇 v t1y vs
2q3 薯蓣皂苷元标准曲线的制备 精密称取薯蓣皂
苷元对照品 o用氯仿配成 ut{ Λª# °pt的对照品溶
液 o分别精密吸取 s1to s1txo s1uso s1uxo s1vso
s1vx °对照品溶液及 s1vx °氯仿于 z支 ts °试
管中 o于 zs ε 恒温水浴锅上水浴蒸干 o各试管再分
别加入 s1us °xh香草醛冰醋酸溶液 ! s1{s °高
氯酸 o摇匀后置于 zs ε 恒温水浴锅中保温 tx °¬±o
取出迅速加入 w °冰醋酸摇匀 o在 wxw ±°处测定
吸光度 kΑlo以加氯仿管为空白对照 o以质量浓度
kΧl对 Α回归 o得回归方程 Α s1su{ v Χ n s1x{|o
ρs1||| {o样品在 w ∗ us Λª# °pt线性良好 ∀
214 总皂苷元含量的测定 ≈{ 样品浓缩液转移至
色谱柱 o固定相中性氧化铝 o流动相氯仿 2苯 ktΒ
wl≈| o收集含皂苷元的洗脱液 k薄层分析确定 l∀
洗脱液浓缩后水浴蒸干 o用氯仿定容至 tss °o
作为样品液 ∀精密吸取样品液 s1u °置具塞试管
内 k以下操作同标准曲线 lo于 wxw ±°处测定其
吸收度 o根据回归方程求得总皂苷元含量 o结果见
表 u∀
结果说明用于萃取的溶剂是影响萃取得率的最
大影响因素 o其他因素影响都较小 o其中 ∆因素即
萃取时间对萃取总皂苷元得率的影响最小 ∀
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第 vu卷第 u期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 u 正交试验结果
试验号
总皂苷元 t
r°ª# ªpt k水解干燥物 l
总皂苷元 u
r°ª# ªpt k生药 l
t t1xx t1sw
u u1vx t1xz
v v1vv u1us
w v1zs u1wz
x w1tz u1z{
y w1x| v1sy
z {1ys x1zw
{ {1ys x1zw
| {1sw x1vz
2q5 正交试验设计超声萃取 用正交试验优选最
佳萃取工艺 o根据预试验结果 o选用影响提取效果的
w个主要因素 }溶媒 kΑl!萃取次数 kΒl!超声功率
kΧl!超声时间 k∆lo每一个因素各选 v个水平 o见
表 t∀选用正交设计表 | kvw l安排试验 o考察指标
为菝葜水解干燥物总皂苷元和菝葜总皂苷元 o结果
见表 u∀
3 结果分析
3q1 直观分析 通过比较各因素的极差值 o影响菝
葜总皂苷元得率的因素顺序为 Α Β Χ ∆o以水
解干燥物和生药计 o其中 Α因素 t和 v两水平间的
差值最大 o即用 |xh乙醇萃取的总皂苷元量远远大
于用石油醚萃取的的总皂苷元量 k分别高出
uw{1|yh和 uxs1syh l∀
312 方差分析 实验结果经 ≥°≥≥统计学软件处理 o
同时参照统计学分析方法分析 ≈ts o结果见表 vo萃取
时间影响最小 o当作误差 o比较各因素的 Φ值可以看
出 oΑ因素两水平间具有显著性差异 kΠ s1stlo而其
他因素两水平间均没有达到显著性差异 o其中 Χ因素
的 Φ值最小 o结果表明萃取溶剂对总皂苷元得率影响
最大 o即在一定极性范围内 o萃取的总皂苷元得率随
溶剂极性增大而增大 o与后者成正比 o其后依此为萃
取次数 !超声波功率和萃取时间 ∀
表 v 方差分析表
方差来源
离均差
平方和
自由度 方差 Φ Π
总皂苷元 t Α xz1uuz u u{1ytv {|1tvz s1st
Β s1zxu u s1vzy t1tzt
Χ s1zst u s1vxt t1s|v
∆k误差 l s1ywu u s1vut
总皂苷元 u Α ux1xzt u tu1z{y |z1ysv s1st
Β s1vuu u s1tyt t1uu|
Χ s1u|z u s1tw| t1tvz
∆k误差 l s1uyu u s1tvt
注 }Φs1sx kuoul |1so Φs1st kuoul ||1s
直观分析和方差分析基本一致 o对菝葜总皂苷
元萃取得率影响最大的因素都为萃取溶剂 o其后依
此为萃取次数 !超声波功率和萃取时间 ∀考虑到菝
葜总皂苷元为主要的药效成分 o并综合总皂苷元得
率和生产周期 !成本等指标考虑 o最终确定的最佳提
取条件为 Αv ΒvΧv ∆u o即萃取溶剂为 |xh乙醇 o超声
波功率 t1y ®• o超声萃取 v次 o每次 us °¬±∀
≈参考文献
≈t 王学江 o文朝阳 o丰 平 o等 q复方菝葜的抑瘤机制 ≈ q中国
病理生理学杂志 ot||yotukwl}ytwq
≈u 张玉良 o陈华庭 o彭方林 q三种提取物对小白鼠角叉菜胶型关
节炎的抗炎作用比较 ≈ q新兴医药 ot||yotkyl}uwuq
≈v 吕永宁 o陈东生 o徐楚鸿 q菝葜活血化瘀药理作用研究 ≈ q中
国医院药学杂志 oussuouuk|l}xv{q
≈w 刘虎歧 o高锦明 o邱明华 q菝葜属生物和化学研究进展 ≈ q天
然产物研究与开发 ousstotvktl|sq
≈x 陈东生 o吕永宁 o王 杰 q菝葜的抗炎作用 ≈ q中国医院药学
杂志 ousssousk|l}xwwq
≈y 李 忌 o陈俊杰 o巨 勇 o等 q天然甾体皂苷化合物的抗肿瘤
活性 ≈ q天然产物研究与开发 ot||zottktl}twzq
≈z 郭孝武 q超声与常规法对部分中药苷成分提取率的比较 ≈ q
中国医药工业杂志 ot||{ou|kul}xtq
≈{ 陈东升 o吕永宁 q菝葜总皂苷元的含量测定 ≈ q中药材 o
usstouwkul}tttq
≈| 林启寿 q中草药成分化学 ≈ q北京 }科学出版社 ot|zz}wtuq
≈ts 李连友 o王晓林 q统计学原理 ≈ q北京 }法律出版社 ot||x}
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≈责任编辑 鲍 雷
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