全 文 ：°≥r≤¤诱导血栓形成与血瘀证病证结合
模型的炎症机制
梁爱华 tou3 o黄璐琦 tou o于长安 t o薛宝云 t o王金华 t o李春英 t
ktq中国中医科学院 中药研究所 o北京 tsszss~
uq澳门科技大学 o澳门 l
≈摘要   目的 }探讨内毒素 k°≥l与角叉菜胶 k≤¤l联合诱导血栓形成与血瘀证病证结合动物模型的炎症机
制 ∀方法 }将大鼠随机分成 u组 }正常组 o°≥r≤¤模型组 ∀模型组大鼠先腹腔注射 ≤¤ux °ª# ®ªpt oty «后再静脉
注射给予 °≥ xs Λª# ®ªpt ∀正常组给予同体积生理盐水 ∀于造模后不同时间点 o取血 o测定血液中的血栓素
k×÷ …u loy2酮 2前列环素 ky2®¨ ·²2°ŠƒtΑl和炎性因子 בƒΑoŒ2y浓度 o观察这些指标的动态变化过程 ∀结果 }°≥r≤¤
联合造模后 u «o血浆 ×÷ …u和 y2®¨ ·²2°ŠƒtΑ增高 ouw «后 ×÷ …u的浓度降低 ow{ «后 二者接近正常组 ∀血液中的炎性
因子 בƒΑ和 Œ2y浓度于造模后 u «和 w «显著增高 o但持续时间不长 o于造模后 { «恢复至正常水平 ∀病理学检查
可见在造模后 u ∗ uw «尾部小动 !静脉和肺 !肝微小血管内有白细胞黏附于血管壁 otu ∗ uw «后可见血栓形成 ∀结
论 }炎症是 °≥r≤¤诱导血栓形成模型的主要发病机制 o炎性因子 בƒΑ和 Œ2y在血栓形成中起着关键作用 ∀
≈关键词   血栓形成 ~血瘀证 ~动物模型 ~炎症 ~炎性因子
≈中图分类号   • u{x1x ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlst2sswx2sw
≈收稿日期   ussy2sv2tu
≈基金项目   国家科技部 |zv重大计划 kŠt|||sxwwszl
≈通讯作者   3 梁爱华 oר¯}kstsl{wsvxy{vo∞2°¤¬¯} ¬¯¤±ª¤¬«∏¤
ƒ ¶¬±¤q¦²°
前期已经报道 o采用内毒素 k°≥l与角叉菜胶
k≤¤l联合用药建立了一种大鼠血栓形成模型 o这种
模型同时还表现出急性血瘀 !慢性血瘀的广泛病理
过程 o具有长期的血液流变学改变 !微循环障碍 !凝
血功能改变以及血液细胞学变化等病理生理学特
征 o是一种血栓形成与血瘀证病证结合模型 ≈tou  ∀
已知内毒素是一种致炎物质 o其能够引起体内
单核 2巨噬细胞系统激活 o从而引发炎症反应 ≈v  ∀传
统上认为炎症与血栓形成是两个互相独立的病理过
程 ∀近年来人们发现炎症与血栓形成之间存在着密
切的联系 o认为炎症引发促凝作用以及凝血 2炎症网
络的相互作用所致的恶性循环可能是血栓形成的重
要发病机制 ∀一些促炎物质如内毒素 oבƒΑ oŒ2t≈w 
等可引起单核细胞 r巨噬细胞和血管内皮细胞表达
组织因子 k׃l∀ ׃途径不仅主导生理性止血中凝
血过程的启动 o而且在病理条件下的血栓形成过程
中也起着关键作用 ≈x  ∀为了了解炎症在 °≥r≤¤造
成的血栓形成与血瘀证病证结合模型的发病中所起
的作用 o本研究观察了该模型形成过程中炎性因子
产生的动态过程 o以探讨该模型形成的炎症机制 ∀
1 材料
1q1 动物 ≥⁄大鼠 o≥°ƒ级 o雄性 o体重 t{s ∗ uss
ªo由北京维通利华实验动物有限公司提供 o合格证
≥≤Ž÷ k京 lussu2ussvo以标准颗粒饲料饲养 k北京九
江口饲料厂 l∀
1q2 试剂 细菌脂多糖 k°≥o来源于大肠杆菌
’ttt }…wl和角叉菜胶 k≤¤l均购自美国 ≥¬ª°¤公司 ∀
将 °≥用生理盐水配制成 t °ª# °pt贮存液 o用
s1uu Λ°滤膜除菌后 os ∗ x ε 冰箱保存备用 o临用
前用生理盐水稀释成 xs Λª# °pt使用 ∀将 ≤¤用
生理盐水配成 ts °ª# ®ªpt o用沸水浴使之溶解 o冷
却后放置于 s ∗ x ε 冰箱保存备用 ∀血栓素
k×÷…u loy2酮 2前列环素 ky2®¨ ·²2°ŠƒtΑ l由解放军总
医院采用放免法测定 ∀ בƒΑ和 Œ2y酶联免疫试剂
盒为美国 …⁄公司生产 ∀
1q3 仪器 …¬²µ¤§wxs型酶标仪 k美国 lo‹∏°¤±2
¼¯½¨ µusss半自动生化分析仪 k德国 l∀
2 方法
2q1 动物分组和造模 将动物随机分成 u组 }正常
组 ~°≥r≤¤模型组 ∀ °≥r≤¤模型组的大鼠先经腹
#xw#
第 vu卷第 t期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ t
¤±∏¤µ¼o ussz
腔注射 k¬³l≤¤ux °ª# ®ªpt ∀ ty «后 o再静脉注射
k¬√l °≥ xs Λª# ®ªpt k°≥为 xs Λª# °pt o给药
体积 t1s °# ®ªpt l∀正常组给予同体积生理盐
水 ∀以 °≥ ¬√即刻作为试验的 s «∀
2q2 对大鼠血浆 ×÷…u oy2®¨ ·²2°ƒŠtΑ的影响 分别于
试验的 uouwow{otww «o给大鼠腹腔注射戊巴比妥钠
vs °ª# ®ªpt使之麻醉 o从腹主动脉取血 o分离血浆 o
采用放射免疫法测定血浆 ×÷…u oy2®¨ ·²2°ŠƒtΑ含量 ∀
2q3 体内炎性细胞因子水平的测定 于给予 °≥
后 uowo{otwow{ «从眼眶静脉丛取血 o分离血清 o采
用 ∞Œ≥„方法测定血清 בƒΑ和 Œ2y含量 ≈y  ∀
2q4 血管炎症观察和外周血白细胞计数 于造模
后不同时间 o从眼眶静脉丛取血 o用全自动血球计数
仪分析血液中的白细胞总数 ∀取尾部血栓发生部位
及主要脏器 o进行血管及周围组织的病理学检查 o观
察血管炎症反应和血栓形成 ∀
2q5 统计分析 数据以 cξ ? σ表示 ∀采用 ≥·∏§¨ ±·j¶τ
检验比较正常组与造模组的差异 ∀
3 结果
3q1 °≥r≤¤造模后大鼠血液 ×÷…uo y2®¨ ·²2°ŠƒtΑ的
变化动态 °≥r≤¤造模组的血浆 ×÷…u水平在试验
u «较正常组显著增高 kΠ  s1sxlo但这种增高为一
过性 o于 uw «反而转变为显著低于正常组 kΠ 
s1sxlo随后于 w{ ∗ tww «与正常组接近 ∀于实验 u
« ×÷…u升高的同时 oy2®¨ ·²2°ŠƒtΑ也呈一过性显著增
高 kΠ s1sxlouw ∗ tww «的 y2®¨ ·²2°ŠƒtΑ水平与正
常组无显著差异 ∀ ×÷…u ry2®¨ ·²2°ŠƒtΑ在所有检测时
间点均与正常组无显著差异 k表 tl∀
表 t 大鼠血浆 ×÷ …u oy2®¨ ·²2°ŠƒtΑ的变化 kcξ ? σl
组别
时间点
r« ν
×÷ …u
r³ª# °pt
y2®¨ ·²2°ŠƒtΑ
r³ª# °pt
×÷ …u ry2®¨ ·²2°ŠƒtΑ
正常 s tu xx1|w ? t|1yu {y1xx ? v{1yx s1y{ ? s1wu
°≥r≤¤ u z tsy1xz ? vy1zztl uvv1u| ? ttv1t{tl s1{v ? s1|y
uw z uu1yw ? ts1u|tl {t1|z ? yu1v{ s1wx ? s1u{
w{ z z{1zs ? {s1tv yu1{w ? uy1xw t1yw ? t1|x
tww y xy1ww ? uz1z{ y{1ws ? us1vw s1{z ? s1w{
注 }与正常组比较 tl Π  s1stk表 uov同 l
3q2 °≥r≤¤造模后大鼠体内炎性因子变化动态
正常大鼠的血液中测不到炎性因子 בƒΑ和 Œ2y∀
而 °≥r≤¤联合造模后 o在一定时间阶段在血液中
可检出高浓度炎性因子 בƒΑ和 Œ2y∀ בƒΑ和 Œ2y
产生的高峰时间均为给予 °≥后 u «k与正常组比
较 Π s1sxoΠ s1stl∀ בƒΑ和 Œ2y在血液中持续
时间较短 o造模 { «即已恢复正常 k表 ul∀
表 u 大鼠经 °≥r≤¤造模后血液 בƒΑoŒ2y动态变化
kcξ ? σoν € zl
组别 时间点 r« בƒΑ r±ª# °pt Œ2yr±ª# °pt
正常 s p p
°≥r≤¤ u t1sts ? s1u|wtl t1{z| ? s1|{ytl
w s1uyy ? s1uvw t1vzs ? t1t{y
{ p p
uw p p
w{ p p
3q3 血管炎症反应 °≥r≤¤联合造模后 o可迅速
造成外周血白细胞总数显著降低 k表 vl∀白细胞降
低发生的时间最早见于 °≥ ¬√后 u «o{ «后恢复正
常 ∀随后 o于 °≥ ¬√后 uw «白细胞总数又反转为显
著增高 ∀白细胞增高的持续时间较长 o至少可持续
至 °≥ ¬√后 w{ «∀
表 v °≥r≤¤联合造模后白细胞总数的变化 kcξ ? σoν € zl
组别 造模后时间 r« • …≤ r≅ ts|个 r
正常 p |1{s ? w1ss
°≥r≤¤ u x1zw ? t1||tl
w w1|s ? t1z|tl
{ ts1tz ? x1tx
uw t|1|v ? z1tttl
w{ uw1yt ? y1s{tl
对尾部血管和主要脏器组织 k心 !肝 !脾 !肺 !
肾 l进行病理学观察 o可见早在静脉注射 °≥后 u
«o尾部和肺间质血管内就有明显的炎症反应 o有大
量白细胞黏附于血管壁 o腔内有纤维素渗出 o可见血
管内皮细胞肿胀 ∀随后在尾部 !肺 !肝 !肾 !脑组织可
见典型的血栓形成 o以尾部和肺间质小静脉和小动
脉混合型血栓为多见 k图 tl∀
4 小结和讨论
有人提出炎症也可能是某些血栓性疾病的危险
因素之一 ≈z  ∀临床上有些病理学和血清学方面的
研究为炎症与静脉血栓之间的相关性提供了一些证
据 o在有些临床病例和实验性静脉血栓动物模型上 o
观察到静脉壁炎症细胞浸润和血液中某些炎症标记
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图 t °≥r≤¤造模后大鼠尾部动静脉和肺间质血管内炎症反应和血栓形成 k‹∞染色 o ≅ vvsl
„q造模后 u «肺间质血管内炎性细胞黏附和血管内纤维素渗出 ~ …q造模后 uw «肺间质血管内血栓形成 ~
≤q造模后 uw «尾部小静脉血栓形成 ~ ⁄q造模后 uw «尾部小动脉壁炎性细胞黏附 !内皮损伤和血栓形成
物的表达 ≈{o|  ∀但是 o目前在炎症与血栓关系的基
础研究方面缺乏理想的动物模型 ∀在前期研究中 o
采用炎症因素成功建立了一种稳定性和重复性良好
的体内血栓形成模型 ≈t  ∀本研究显示 o该模型伴有
明显的炎症标记物升高 o这为炎症与血栓形成的相
关性提供了直接的证据 ∀同时该模型为深入探讨炎
症参与血栓形成的发病机制 o以及从抗炎的角度 o探
讨血栓栓塞性疾病的治疗和筛选抗炎类抗血栓药物
等提供了重要的工具 ∀
×÷…u是一种活性很强的血小板聚集剂 o而 °ŠŒu
是体内最强的抗血小板聚集物质 o二者的平衡在诱
导血小板聚集和血栓形成过程中起着重要作用 ∀在
本模型上 o造模早期 k给予 °≥后 u «l×÷…u迅速增
高 o但在 uw «后又转而降低 ∀ ×÷…u降低与造模后外
周血中的血小板数降低有关 ∀在以往的试验观察
到 o造模后 { ∗ uw «o由于血栓形成消耗了大量的血
小板 o外周血中的血小板数目显著减少 ≈t  ∀由于
×÷…u是血小板内花生四烯酸的代谢产物 o因此血小
板数目的显著减少也同时造成了 ×÷…u的产生减少 ∀
°≥r≤¤联合用药后早期还可短期引起 y2®¨ ·²2°ŠƒtΑ
增高 o这一变化可能与激活血管壁内皮细胞中的花
生四烯酸代谢有关 ∀在造模后的整个过程中 o
×÷…u ry2®¨ ·²2°ŠƒtΑ均保持相对恒定的关系 o表明体
内 ×÷…u水平与 y2®¨ ·²2°ŠƒtΑ水平存在着反馈调节 ∀
内毒素可激活巨噬细胞 !单核细胞等 o从而释放
大量的炎性因子 ≈tsott  ∀本研究结果显示 o°≥r≤¤
造模后 u ∗ w «迅速引起血液中炎性因子 בƒΑ和
Œ2y浓度显著增高 o以造模后 u «最为显著 ∀但炎
性因子增高的持续过程较短 o{ «后即恢复正常 ∀
在与炎性因子增高相对应的时间点 ku ∗ w «lo外周
血白细胞计数显著降低 o随后白细胞计数转为增高 ∀
在组织病理学观察中可见明显的血管炎症反应 o造
模后早期有大量的白细胞黏附于血管壁 o这可能是
造成外周血白细胞计数明显降低的主要原因 ∀以上
证据均说明炎症是 °≥r≤¤血栓模型最早的病理生
理特征 o是关键的发病机制 ∀可以推测 °≥r≤¤诱
导血栓形成模型的发展过程为 }血管炎症 ψ炎性因
子大量释放 !白细胞激活和黏附 ψ血栓形成 ∀
从中医的观点来说 o/毒邪 0包括外来毒邪和内
生毒邪 o°≥r≤¤血栓模型所使用的内毒素为外来之
毒 o作用于机体以后产生内源性的炎性因子以及血
栓素等对机体有害的物质 o属于内生毒邪 ∀以往在
某些血栓性疾病如脑中风病机的认识上对 /毒邪 0
尚未充分重视 ∀近年来 o有一些学者提出 /毒邪 0是
脑中风的病机 o主张临床上可以从 /毒邪 0入手寻求
提高脑中风疗效的突破口 ≈tuotv  ∀本模型提供直接
的证据证明了 /毒邪 0是血栓形成的直接致病因素 o
因此在血栓性疾病的治疗中加入驱除 /毒邪 0 k抗
炎 l的措施 o可能对改善血栓性疾病的预后具有重
要意义 ∀
≈参考文献  
≈t  梁爱华 o丁晓霜 o薛宝云 o等 q血瘀证与血栓形成病证结合动
物模型的研究 ≈ q中国中药杂志 oussxovskusl}tytvq
≈u  梁爱华 o于长安 o李春英 o等 q血瘀证与血栓形成病证结合动
物模型的动物差异性比较研究 ≈ qussyovtktl}xzq
≈v  雷祚荣 q细菌毒素分子生物学 ≈  q北京 }中国科学技术出版
社 ot||v}tq
≈w   ¤·¶¶²± ∞o ‹ µ¨º¤¯§‹ o ∞ª¨ ¶·¨± „q ≥∏³¨ µ¤±·¬ª¨ ±¶©µ²° ¶·¤³«¼2
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¤¦∏·¨¦²µ²±¤µ¼ ¶¼±§µ²° ≈¨ q °«¼¶¬²¯ • ¶¨o ussvokxul}zt|q
≈y  梁爱华 o大野尚仁 o宿前利郎 q头孢他啶诱导的细菌溶解和内
毒素释放 ≈ q中国抗生素杂志 ot|||ouwkvl}t|xq
≈z  … ¦¨¤·¬±¬≤o „ª±¨¯ ¬¯Šq °¤·«²ª¨ ± ¶¨¬¶²©√ ±¨²∏¶·«µ²°¥²¨ °¥²¯¬¶°
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³²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ≈ q ≥«²¦®o t||wou}uvxq
≈tt  梁爱华 q抗菌药诱导的内毒素释放作用 ≈ q国外医药 #抗生
素分册 ousstouukxl}utzq
≈tu  王永炎 q关于提高脑血管疾病疗效难点的思考 ≈ q中国中西
医结合杂志 ot||zotzkwl}t|xq
≈tv  刘 毅 o赵 虹 o李如奎 q缺血性中风从毒论治 ≈ q湖北中医
杂志 ousstouvktl}txq
Ινφλαµ µ ατορψ µ εχηανισµ φορ τηροµ βοσισανδ βλοοδ στασισανιµ αλµ οδελ
ινδυχεδ βψ ενδοτοξιν ιν χοµ βινατιον ωιτη χαρραγεεναν
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(t. Ινστιτυτε οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα, Χηινα Αχαδεµ ψ οφ Χηινεσε ΜεδιχαλΣχιενχεσ, Βειϕινγ tsszss, Χηινα;
u. Μαχαυ Υνιϖερσιτψ οφ Σχιενχε ανδ Τεχηνολογψ, Μαχαυ, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¬¨³¯²µ¨ ·«¨ ¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ° ¦¨«¤±¬¶° ©²µ·«µ²°¥²¶¬¶¤±§¥¯²²§¶·¤¶¬¶¤±¬°¤¯ °²§¨ ¯¬±§∏¦¨§¥¼ ±¨§²2
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בƒΑ ¤±§Œ2y º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§¤·§¬©©¨µ¨±··¬°¨¤©·¨µ°≥ ¬√ ¤±§·«¨ §¼±¤°¬¦¦²∏µ¶¨¶²©·«¨ ¶¨ ¬±§¨ ¬¨ ¶º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨q Ρ εσυλτ: ׫¨ ¥¯²²§
¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²©×÷ …u ¤±§y2®¨ ·²2°ŠƒtΑ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ ¬±¦µ¨¤¶¨§¤·u «¤±§¦²±·µ¤§¨ ¦µ¨¤¶¨§¤·uw «¤©·¨µ°≥ ¬√q ׫¨ ¯¨ √¨¯¶²©×÷ …u o
y2®¨ ·²2°ŠƒtΑ¬± °²§¨ ¯ªµ²∏³º µ¨¨ ¦¯²¶¨ ·²·«¤·¬± ¦²±·µ²¯ ªµ²∏³¤©·¨µw{ «²©°≥ ¬√q ׫¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²©×‘ƒΑ ¤±§Œ2y ¬± ¥¯²²§²¥√¬2
²∏¶¯¼ ¥∏·²± ¼¯ ·µ¤±¶¬·²µ¬¯¼ ¬±¦µ¨¤¶¨§¤·u «¤±§w «¤©·¨µ°≥ ¬√o ¤±§¥²·«º µ¨¨ ∏±§¨ ·¨¦·¤¥¯¨¤©·¨µ{ «²©°≥ ¬√q  ²µ³«²¯²ª¬¦¤¯ ²¥¶¨µ√¤2
·¬²± ¶«²º §¨·«¤·±∏° µ¨²∏¶º«¬·¨ ¥¯²²§¦¨¯¯¶¤§«¨ µ¨§²± ·²·«¨ ¶∏µ©¤¦¨ ²©¥¯²²§√ ¶¨¶¨¯º¤¯¯¤·u2uw «¤±§·«µ²°¥²¶¬¶¦²∏¯§¥¨ ©²∏±§¬±
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[ Κεψ ωορδσ] ·«µ²°¥²¶¬¶~ ¥¯²²§¶·¤¶¬¶¶¼±§µ²° ~¨ ¤±¬°¤¯ °²§¨ ~¯ ¬±©¯¤°°¤·¬²±~ ³µ²¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ©¤¦·²µ¶
≈责任编辑 刘  
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¤±§¶¨¶´∏¬·¨µ³¨ ±²¬§¶¬¶«¬ª«¨ ¶·¬± ·«¨ ¶·¨° ¦²µ·¨¬²©Μ. οφφιχιναλισ²©tx ¤ª¨ ¶q Χονχλυσιον: Œ©·¤®¬±ª·«¨ ¦²±·¨±·²©√²¯¤·¬¯¨ ²¬¯¤±§¬·¶
²¬¬§¨ §¨ µ¬√¤·¬√ ¶¨²©°²±²·¨µ³¨ ±²¬§¶¤±§¶¨¶´∏¬·¨µ³¨ ±²¬§¶¤¶¶·¤±§¤µ§o ·«¨ ³µ¨©¨µ¤¥¯¨³¨ µ¬²§²©·«¨ «¤µ√ ¶¨·¦²µ·¨¬¬¶¤¥²∏·tx2us ¼¨ ¤µ¶o
¤±§·«¨ µ²²·¦²µ·¨¬o ·«¨ ¶·¨° ¦²µ·¨¬¤±§·«¨ ¥µ¤±¦«¦²µ·¨¬²©Μ. οφφιχιναλι󶫲∏¯§¥¨ °¬¬¨ §©²µ∏¶¨q
[ Κεψ ωορδσ] Μαγνολια οφφιχιναλισ~ ¦²µ·¨¬~ √²¯¤·¬¯¨ ²¬¯~ ¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²°³²± ±¨·~ ¦²±·¨±·
≈责任编辑 戴 畅  
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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