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Effect of Daming capsule on expression of connexin43 isoforms in hyperlipemic rat’s cardiac muscle

大明胶囊对高脂血症大鼠心肌间隙连接蛋白43表达水平的影响



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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨¦·¶²©¤¶·µ¤ª¤¯∏¶° °¨¥µ¤±¤¦¤∏¶¬±­¨¦·¬²± ²± ·«¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²©·«¨ ¬±·¨¶·¬±¤¯ °∏¦²¶¤¯ °¤¶·
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≈责任编辑 古云侠  
≈收稿日期   ussy2sz2uy
≈基金项目   重大基础研究前期专项 kussw≤≤„syzssl~国家自然科学基金重点项目 kvswvsz{sl
≈通讯作者   3 杨宝峰 oר¯}kswxtl{yyztvxwoƒ¤¬}kswxtl{yyy|w{uo∞2°¤¬¯}¼¤±ª¥©ƒ °¨¶q«µ¥°∏q¨ §∏q¦±
大明胶囊对高脂血症大鼠心肌间隙连接
蛋白 wv表达水平的影响
邢 妍 o岳 朋 o孙丽华 o赵文晓 o王 莹 o张 勇 o刘 鑫 o
吕延杰 o杨宝峰 3
k哈尔滨医科大学 药理教研室 黑龙江省生物医药工程重点实验室 2省部共建国家重点实验室 o
黑龙江 哈尔滨 txss{yl
≈摘要   目的 }通过观察大明胶囊治疗前后的高脂血症大鼠心肌间隙连接蛋白 wv的表达 o阐述大明胶囊降血
脂作用的分子机制 ∀方法 }• ¬¶·¤µ大鼠 ws只分组 o建立实验性大鼠高脂血症模型 o分别是正常组 !高脂模型组 !大明
胶囊高 !中 !低 kussotssoxs °ª# ®ªpt # §pt l剂量组 o每组 {只 ∀尾静脉取血测血清中的总胆固醇 k×≤ l!甘油三酯
k׊l!低密度脂蛋白 k⁄l!高密度脂蛋白 k‹⁄l!游离脂肪酸 k‘∞ƒ„l等血脂指标 ~×µ¬½²¯法提取心肌总 • ‘„o利
用 • ×2°≤• 技术和免疫组织化学方法结合激光共聚焦技术 o测定间隙连接蛋白 wv在正常 !高脂 !给药 v种情况下的
差异 ∀结果 }高脂血症时血清中的 ×≤o׊o⁄及 ‘∞ƒ„含量升高 kΠ  s1sxlo‹⁄含量降低 kΠ  s1sxlo经大明胶
囊治疗后 ×≤o׊o⁄及 ‘∞ƒ„含量降低 kΠ  s1sxlo‹⁄含量上调 kΠ  s1sxl至接近正常水平 ~与正常组比较高
脂组和给药组心电图无明显改变 o心率无显著性差异 ~高脂组与正常组比较间隙连接蛋白 wv°• ‘„表达显著减弱
#swwt#
第 vu卷第 tw期
ussz年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tw
∏¯¼o ussz
kΠ  s1sxlo给药组与高脂组比较间隙连接蛋白 wv °• ‘„表达显著增强 kΠ  s1sxl~免疫组织化学结果高脂组与
正常组比较间隙连接蛋白 wv表达显著减弱 kΠ  s1sxlo给药组与高脂组比较间隙连接蛋白 wv表达显著增强 kΠ 
s1sxl∀结论 }大明胶囊具有降血脂作用 o其降血脂的药效机制与间隙连接蛋白 wv的表达改变有一定联系 ∀
≈关键词   大明胶囊 ~高脂血症 ~间隙连接蛋白 wv~• ×2°≤• ~免疫组织化学 ~激光共聚焦
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszltw2twws2sy
大明胶囊是已经上市的国家级降血脂新药 o有确
切的降血脂作用 ∀除降血脂作用外 o本室研究还发现
大明胶囊具有治疗心肌缺血 o心肌梗死 o脑梗死 o降血
糖的作用 ∀大明胶囊是治疗心血管疾病的有效药物 o
而许多心血管疾病的发生 !发展与间隙连接蛋白的表
达改变和间隙连接的功能受损有关 o尤其间隙连接蛋
白在心律失常发生中的功能倍受人们关注 ∀大量实验
研究证实 o心肌表达的最主要的是间隙连接蛋白 wv≈t  o
其表达表型改变是引起缺血性心律失常的重要因
素 ≈u  ∀临床和动物实验表明 o高脂血症与缺血性心律
失常有密切关系 o给予降脂药物和低脂饮食能有效降
低室性心律失常发生率和猝死率 ≈v  o高脂血症是引起
心律失常的重要诱发因素 o其发病机制与间隙连接蛋
白表达改变密切相关 o而大明胶囊作为一种新型的降
血脂药物 o它的药物作用分子机制是否与间隙连接蛋
白有关联尚未得到证实 o本研究通过分子生物学方法
和免疫组织化学方法深入探讨了两者的内在联系 ∀
1 材料
1q1 动物
选用 • ¬¶·¤µ雄性大鼠 ws只 o体重 t{s ∗ uss ªo购自
哈尔滨医科大学动物学部 o合格证号为医动字 |2v2t∀
1q2 药物
大明胶囊 k大黄 o决明子 o陈皮 o人参 o茯苓 l购自哈
尔滨伊达药业有限公司 o批号 usswszsu~丙基硫氧嘧
啶 o购自上海复兴朝晖药业有限公司 o批号 usswtusv~
戊巴比妥钠购自上海化学试剂采购供应站 ∀
1q3 试剂
总胆固醇试剂盒 o批号 vsysuxx!甘油三酯试剂
盒 o批号 ussxtstz!低密度脂蛋白试剂盒 o批号
utssvt!高密度脂蛋白试剂盒 o批号 t|sswto购自浙
江东瓯生物工程有限公司 ~游离脂肪酸试剂盒 o批号
ussxs|sz购自南京建成生物工程研究所 ~间隙连接
蛋白 wv单克隆抗体购自 ≥¤±·¤≤µ∏½公司 ~荧光标记
的二抗 „¯¨ ¬¤©¯∏²µª²¤·¤±·¬°²∏¶¨x|w购自  ²¯ ¦¨∏¯¤µ
°µ²¥¨ ¶公司 ~封闭羊血清 o批号 sxsutxo购自中杉公
司 ~…≥„o批号 svvuo购自上海华舜生物工程有限公
司 ~多聚甲醛购自天津市科密欧化学试剂开发中心 ~
×µ¬·²±÷ 2tssk≥¬ª°¤lo批号 sy|wo柠檬酸和柠檬酸三
钠购自哈尔滨市化工试剂厂 ~总 • ‘„提取试剂盒是
Œ±√¬·µ²ª¨ ±试剂公司产品 o批号 …Œuvsxo• ×2°≤• 试剂
盒 o批号 …Žvvsto…Œuxsx从 Œ±√¬·µ²ª¨ ±试剂公司和
宝生物工程 k大连 l有限公司购买 ∀
1q4 仪器
°≤•仪 k美国 …Œ’2• „⁄公司 l低温高速离心机
k…∞≤Ž „‘公司 o≤≥2tx• lo水平电泳仪 k美国 …Œ’2
• „⁄公司 lo紫外分光光度仪 k美国 …Œ’2• „⁄公司 o
≥°¤µ·≥³¨ ¦× vssslo天能 ŠŒ≥凝胶图像处理系统 k上海
天能科技有限公司 lo激光共聚焦显微镜 k日本 ’ ¼¯°³∏¶
公司 lo水平摇床 k• ⁄ p|wsx…l北京市六一仪器厂 ∀
2 方法
2q1 高脂动物模型的制备 ≈w 
用脂肪乳 k胆固醇 th o脂肪 ush o丙基硫氧嘧
啶 th o丙二醇 vsh o聚山梨酯 {s1ush o其他 ush l
按照 ts °# ®ªpt灌胃 tw §∀
2q2 分组
健康雄性 • ¬¶·¤µ大鼠 ws只随机分成 x组 }正常
组 !高脂模型组 !大明胶囊高 !中 !低 kussotssoxs °ª#
®ªpt # §pt l剂量组 o每组 {只 o高脂组灌胃脂肪乳 o大明
胶囊组灌胃脂肪乳和大明胶囊 o正常组灌胃同等体积
生理盐水 ∀给药剂量参见药理实验方法学制定 ≈x  ∀
2q3 样品采集及测定
灌胃第 tw天给药后禁食 o不禁水 ∀第 tx天尾
静脉取血 ∀ v sss µ# °¬±pt离心 x °¬±分离血清 o测
定 ×≤o׊o⁄o‹⁄o‘∞ƒ„含量 ∀并测量每只鼠二
导联心电图 ∀
2q4 心律失常评分
采用 ≤∏µ·¬¶和 • ¤¯®¨ µkt|{{l心律失常评分方
法 ≈y  o本实验取血测血脂指标 o确定成模之后即建
模第 tx天的同一时间段监测心电 v次 o每次 us
°¬±o作为观察区间 ∀心律失常分为室颤 k∂ ƒlo室速
k∂ ×lo室早二联律 k∂ ∞≥lo记录以上几种心律失常
的累积时间 o按以下标准进行评分 }s €无心律失常 ~
#twwt#
第 vu卷第 tw期
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tw
∏¯¼o ussz
t €  ts ¶∂ ∞≥和 r或 ∂ ×~u € tt ∗ vs ¶∂ ∞≥和 r或
∂ ×~v € vt ∗ |s ¶∂ ∞≥和 r或 ∂ ×~w € |t ∗ t{s ¶∂ ∞≥
和 r或 ∂ ×o ts ¶可逆的 ∂ ƒ~x €  t{s ¶∂ ∞≥和 r或
∂ ×o ts ¶可逆的 ∂ ƒ~y €不可逆的 ∂ ƒ∀
2q5 半定量 • ×2°≤•
2q5q1 • ‘„提取 尾静脉取血测定血清指标确定
模型制备成功之后 oth 戊巴比妥钠腹腔注射麻醉
kw °# ®ªpt lo取下心脏 o左心室剪成 s1x °° ≅ s1x
°°大小的组织块 o液氮冻存 o p {s ε 保存组织块 ~
一步提取法 o提取心室肌总 • ‘„∀各总 • ‘„样本
Αuys rΑu{s的比值为 t1{ ∗ u1s∀
2q5q2 扩增引物设计与合成 根据 Š ±¨ ¥¨¤±®的序
列 o并参考相关文献 ≈z  o用 °µ¬° µ¨x1s软件设计间隙
连接蛋白 wv引物 o由上海申能博彩生物科技有限公
司合成 ∀引物序列如下 }间隙连接蛋白 wv上游引
物 }xχ2„„„ŠŠ≤Š×ׄ„ŠŠ„×≤Š≤Š×Š2vχo下游引物 }
xχ2Š×≤„×≤„ŠŠ≤≤Š„ŠŠ≤××2vχkwv{¥³l~Β2¤¦·¬±上
游引物 }xχ2≤≤Š×„„„Š„≤≤×≤ׄ׊≤≤„„≤„ 2vχo下
游引 物 } xχ2≤ŠŠ„≤×≤„×≤Š×„≤×≤≤׊≤×2vχ k uxs
¥³l∀
2q5q3 • ×2°≤• 反应 以总 • ‘„为模板 o|w ε u
°¬±预热 o|w ε vs ¶oxs ε vs ¶ozu ε t °¬±连续反
应 vw个循环 o分别扩增出间隙连接蛋白 wv和 Β2¤¦2
·¬±o然后以 Β2¤¦·¬±为内参照调节加样量使其达到亮
度 k丰度值 l一致 o再按 Β2¤¦·¬±的加样量加间隙连接
蛋白的 °≤• 产物 ot1xh的琼脂糖凝胶电泳 o以 …Œ’ 2
• Œ⁄多媒体凝胶成像系统照相 o并进行半定量分析 ∀
2q6 免疫组织化学
2q6q1 组织包埋切片 模型制备成功后 o每组取 w
只鼠 th戊巴比妥钠腹腔注射麻醉 kw °# ®ªpt lo
取心脏多聚甲醛固定 tx «otxh的蔗糖溶液脱水 uw
«ovsh的蔗糖溶液脱水 uw «o组织包埋 o冰冻切片机
切片 o将切片置于 p {sε 冰箱冻存 ∀
2q6q2 孵育抗体 首先冰冻切片用修复液 |s ∗ |w
ε 修复 tx °¬±o加 ×µ¬·²±÷ 2tssoth …≥„室温孵育 t
«o封闭羊血清封闭 x «o加间隙连接蛋白 wv一抗 vz
ε 孵育 ty «o加荧光二抗 vz ε 孵育 u «o用激光共聚
焦显微镜观察间隙连接蛋白 wv表达情况 ∀
2q7 统计方法
数据均以 cξ ? σ表示 o用方差分析和秩和检验进
行组间差异显著性比较 ∀
3 结果
3q1 血清指标结果
如表 t所示 o正常组与高脂组 o高脂组与大明胶
囊中剂量组和高剂量组 ×2≤‹’o׊o⁄o‹⁄和
‘∞ƒ„均有显著性差异 o而大明胶囊低剂量组与高
脂组无统计学意义 ∀高脂组血脂代谢紊乱表明高脂
模型建立成功 o大明胶囊中剂量 o高剂量组血脂恢复
接近正常 o而低剂量组无变化 o表明大明胶囊具有降
血脂作用并且有剂量依赖性 ∀
表 t 大明胶囊对大鼠 x种血清指标的影响 kcξ ? σ, ν € {l
组别 剂量 r°ª# ®ªpt # §pt ×2≤‹ ’ r°°²¯# pt ׊ r°°²¯# pt ⁄r°°²¯# pt ‹⁄r°°²¯# pt ‘∞ƒ„ r°°²¯# pt
正常 p v1|w ? s1vytl t1u{ ? s1sutl s1|v ? s1svtl t1|z ? s1twtl s1zw ? s1sttl
高脂 p y1uw ? s1xv v1tw ? s1sx v1xw ? s1vu s1xy ? s1tt t1uw ? s1tv
大明胶囊 uss w1uv ? s1tttl t1|| ? s1sztl s1|z ? s1sttl t1{| ? s1vstl s1zs ? s1svtl
tss w1|u ? t1uztl u1st ? s1tutl t1st ? s1xwtl t1yz ? s1uttl s1{w ? s1sutl
xs y1ut ? s1uw u1tx ? s1ut v1uw ? s1{{ s1zy ? s1u| t1ty ? s1yz
注 }与高脂组比较 tl Π  s1sx
3q2 心电图结果
x个组心律失常评分均为零 o各组间无显著性
差异 o无心律失常发生 ∀
3q3 • ×2°≤• 结果
琼脂糖凝胶电泳结果如图 t所示 ∀从结果看出
高脂血症时间隙连接蛋白 wv表达减弱 o给大明胶囊
治疗后 o大明胶囊高 !中 !低剂量组间隙连接蛋白 wv
表达明显增强 o接近正常水平 o并且呈剂量依赖性 ∀
3q4 免疫组织化学结果
如图 u所示 o高脂组与正常组比较间隙连接蛋

图 t 间隙连接蛋白 °• ‘„表达
 1 ¤µ®¨ µ2⁄usss~tq正常组 ~uq高脂组 ~vq大明胶囊 uss °ª# ®ªpt
组 ~wq大明胶囊 tss °ª# ®ªpt组 ~x1大明胶囊 xs °ª# ®ªpt组
#uwwt#
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图 u 各组间隙连接蛋白 wv表达 k ≅ ussl
¤q正常组 ~¥q高脂组 ~¦q大明胶囊 uss °ª# ®ªpt组
白 wv表达显著增强 o给大明胶囊 uss °ª# ®ªpt治
疗后间隙连接蛋白 wv恢复接近正常水平 ∀
4 讨论
血清学结果显示高脂血症时血清中 ×≤o׊o
⁄o‘∞ƒ„含量增多 o‹⁄含量减少表明高脂模型
建立成功 o而在大明胶囊治疗之后血清中 ×≤o׊o
⁄o‘∞ƒ„含量减少 o‹⁄含量增多表明大明胶囊
发挥了降血脂作用 o并具有剂量依赖性 ∀高脂血症
大鼠心电图中未出现 ≥×段抬高或者压低 ! ×波倒
置 !病理性 ±波 !± ×间期延长现象 o表明无心律失
常发生 o只是在 • ×2°≤• 结果和免疫组化结果中出
现间隙连接蛋白 wv的表达改变 ∀心肌间隙连接蛋
白 wv是构成心肌间隙连接的最主要的蛋白 ≈{  o间隙
连接蛋白 wv的正常表达与分布是间隙连接通道电
偶联功能正常 !心脏正常电活动和协调舒缩的重要
保证 ∀而间隙连接蛋白 wv含量和分布的异常是多
种心律失常的解剖学基础 o对间隙连接蛋白 wv的深
入研究是阐明心律失常机制的关键 ∀高脂血症时间
隙连接蛋白 wv的含量改变说明高脂血症与心律失
常有一定的联系 ∀ ‹ ±¨µ¼等认为 ≈|  o高脂血症时产
生过多的脂质过氧化物 o大量的过氧化物攻击细胞
膜的离子通道 o导致以钙超载为中心的电紊乱 ∀ ¬∏
等报道 ≈ts  o长期高脂饮食可使家兔心肌细胞 Œ≤¤密
度明显增加 o使心脏离子通道平衡失调 o激活钙通
道 o促发后除极和触发活动而易于诱发恶性心律失
常 ∀而大明胶囊治疗后心肌间隙连接蛋白 wv含量
增多 o接近正常 k可以认为大明胶囊的降血脂作用
与间隙连接蛋白 wv的含量改变有关 l∀作者以往
的研究表明 ≈tt  o高脂血症时  v受体表达增强 o使血
清中  ⁄„含量减少 o≥’⁄活力增强 o清除体内过多
的脂质过氧化物 o对损伤心肌具有保护作用 o可以认
为高脂血症时 o心肌间隙连接蛋白发生病理性的改
变 o是与  v受体的病理性改变同时存在的 ∀
近年来对心脏 受体各种亚型认识逐渐加深 o
受体在心脏功能调节方面作用的研究已经成为
寻找治疗心脏缺血性疾病和缺血性心律失常的最佳
靶点之一 o本室提出的抗心律失常最佳靶点学
说 ≈tuotv 更强调  v受体在心肌缺血过程中的保护性
调节机制及意义 ∀作者对其生理特性及功能进行研
究 o首次证明具有抗缺血性心律失常作用 ≈tw  ~应用
免疫沉淀和免疫印迹技术进一步研究证实大鼠心肌
细胞单位膜上  v受体与间隙连接蛋白 wv的结构性
与功能性共定位关系 ≈tx  ∀激光共聚焦显微镜的结
果更直观地证实了间隙连接蛋白 wv主要分布于闰
盘 o而心肌  v受体在细胞膜上呈非均一性分布 o但
是二者在某些单位膜结构上是相互整合的 o在进一
步的研究中发现 ≈ty  o心肌缺血时 o间隙连接蛋白 wv
蛋白表达水平下降 o而给与  v受体激动剂预刺激后
心肌缺血 o间隙连接蛋白 wv蛋白表达水平不变 o该
结果提示激动  v受体可以改善细胞间的电信号传
导 o并且该作用可能是通过  v受体与间隙连接蛋白
wv存在结构和功能性整合实现的 ∀本实验在这些
研究结果基础上进一步对心律失常高危险因素高脂
血症研究发现 o高脂血症时间隙连接蛋白 wv表达减
弱 ∀应用 • ×2°≤• 技术得出高脂血症时间隙连接蛋
白 wv°• ‘„表达减弱 o并进一步利用免疫组织化学
结合激光共聚焦显微镜更直观证实了高脂血症时间
隙连接蛋白 wv表达减弱 ∀
本次研究表明 o大明胶囊治疗后心肌  v受体表
达持续升高 o而间隙连接蛋白 wv表达恢复接近正常
水平 o提示在高脂血症发生和大明胶囊治疗过程中 o
 v受体和间隙连接蛋白 wv相互联系 o相互制约 o有
#vwwt#
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∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tw
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着紧密的内在联系 ∀  v受体作为 Š蛋白偶联受体
有一系列的信号转导通路 o可以通过第二信使改变
间隙连接蛋白 wv的表达 ≈tz  o在高脂血症发病过程
中其具体的信号转导过程有待进一步深入研究 ∀
≈参考文献  
≈t  ²±ª°¶‹ o • ¬¯§¨ µ¶∞q Š¤³ ­∏±¦·¬²± ¬± ¦¤µ§¬² √¤¶¦∏¯¤µ§¬¶¨¤¶¨
≈ q ≤¬µ¦• ¶¨o ussso{yktul}tt|vq
≈u  Ž¤³µ¬¨ ¬¯¤± • • o Š∏±±¬±ª o ⁄∏³²±·∞o ·¨¤¯q ⁄²º±µ¨ª∏¯¤·¬²± ²©
·¬°°∏±²§¨ ·¨¦·¤¥¯¨¦²±± ¬¨¬±wv ¤±§§¨ ¦µ¨¤¶¨§ª¤³­∏±¦·¬²± ¶¬½¨ ¬±
·«¨ ³¤·«²ª¨ ± ¶¨¬¶²©¦«µ²±¬¦«¬¥¨ µ±¤ ·¨²±¬± ·«¨ «∏°¤± ¯¨ ©·√ ±¨·µ¬2
¦¯ ≈¨ q ≤¬µ¦∏¯¤·¬²±o t||{o|zkzl}yxtq
≈v  ¤µ²¶¤≤o‹¨o ∂ ∏³³∏·∏µ¬≥o ·¨¤¯q ∞©©¨¦·²©¶·¤·¬±¶²± µ¬¶® ²©
¦²µ²±¤µ¼ §¬¶¨¤¶¨} ¤ ° ·¨¤2¤±¤¯¼¶¬¶²©µ¤±§²°¬½¨ §¦²±·µ²¯¯¨ §·µ¬¤¯¶
≈ q „ o t|||ou{ukuwl}uvwsq
≈w  霍 蓉 o李宝鑫 o杨宝峰 o等 q实验性高脂血症大鼠心肌瞬时
外向钾通道 Ž√wquoŽ√wqv基因 °• ‘„表达的研究 ≈ q哈尔
滨医科大学学报 oussxov|ktl}u|q
≈x  徐叔云 o卞如濂 o陈 修 o等 q药理实验方法学 ≈   qv版 q北
京 }人民卫生出版社 oussw}usuq
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≈责任编辑 古云侠  
地龙汤对实验性哮喘豚鼠气道炎症的影响
李祥华 t3 o张德新 t o许甲凤 u o王文英 t o杜亚明 t o张 渊 t o
雷元卫 t o张燕翔 t
ktq长江大学 医学院 o湖北 荆州 wvwsss~ uq长江大学 附属医院 o湖北 荆州 wvwsssl
≈摘要   目的 }观察地龙汤对实验性支气管哮喘豚鼠气道炎症的作用 o并探讨其作用机制 ∀方法 }豚鼠 w{只
随机分为正常组 o模型组 o地塞米松组 o小青龙汤组 o地龙汤高 ktu ª# ®ªpt l!低 ky ª# ®ªpt l剂量组 ∀除正常组外 o
其他各组动物经 tsh卵白蛋白 k²√¤¯¥∏°¬±o’∂ „l腹腔注射致敏和 th气道吸入激发建立哮喘模型 ∀正常组给予等
量生理盐水致敏和治疗 ∀各组分别给予药物治疗后 o观察动物肺泡灌洗液 k¥µ²±¦«²¤√ ²¨¯¤µ ¤¯√¤ª¨ ©¯∏¬§o…„ƒl和外
周血中总细胞数 !嗜酸性粒细胞 k ²¨¶¬±²³«¬¯o∞²¶l!淋巴细胞 k ¼¯°³«²¦¼·¨o¼l!嗜中性粒细胞 k± ∏¨·µ²³«¬¯o‘¨ ∏l比率 ∀
肺组织病理学主要观察 ∞²¶数目及其凋亡情况 ∀结果 }模型组动物血中及 …„ƒ中 ∞²¶o¼o‘¨ ∏和总细胞数显著增
高 o与正常组比较 o差异十分显著 kΠ  s1stl∀地龙汤高剂量组对外周血及 …„ƒ中 ∞²¶o¼o‘¨ ∏及总细胞数均较
模型组有非常显著的差异 kΠ  s1stlo显示出与地塞米松组相似的结果 ~地龙汤低剂量组亦显示出一定的差异性
kΠ  s1sxl∀模型组支气管黏膜水肿明显 o部分支气管内皱褶减少伴部分上皮脱落 o支气管壁 !管周及肺泡区见炎
性细胞浸润 o其中较多 ∞²¶浸润 o支气管壁增厚 ∀电镜下可见模型组细支气管破坏 o肺泡 µ型细胞变性 o肺泡内 ∞²¶
浸润 ∀地龙汤高剂量组以上改变显著较轻 o并见 …„ƒ中 ∞²¶凋亡 ~地龙汤低剂量组改变程度低于高剂量组 o并见
部分 ∞²¶凋亡 ∀结论 }地龙汤可减轻哮喘豚鼠气道炎症 o其作用与抑制 ∞²¶浸润 o并促进 ∞²¶凋亡有关 ∀作用强弱
与剂量呈正比例关系 ∀
≈关键词   地龙汤 ~哮喘 ~炎症细胞 ~气道炎症
≈中图分类号   • u{xqx ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszltw2twwx2sw
≈收稿日期   ussy2sz2us
≈基金项目   湖北省教育厅科学研究项目 k…ussxtussyl
≈通讯作者   3 李祥华 oר¯}ksztyl{syzztxo∞2°¤¬¯}¼¤±ª·½¨ ∏¢
¬¯«ƒ tyvq¦²°
支气管哮喘是一种由多种细胞特别是肥大细胞 !
∞²¶及 ¼参与的慢性气道炎症性疾病 o而 ∞²¶浸润是
支气管哮喘的主要炎症因子 ∀哮喘的本质是一种特
应性气道细胞 o∞²¶在此种炎症反应中起着关键的作
用 ≈t  ∀临床证明地龙汤对哮喘患者有明显的治疗作
用 o其有效率达 tssh ≈u  ∀作者已对地龙汤的抗气道
变态反应作用及机制进行了研究 ≈v  o本研究主要探讨
地龙汤对哮喘模型豚鼠总细胞数 !∞²¶o¼o‘¨ ∏计数
和病理学改变 o从而进一步阐明其机制 ∀
1 材料
1q1 药品和试剂
地龙汤是临床治疗哮喘的一个经验方 o由地龙 !
鱼腥草 !柴胡 !射干 !葶苈子 !制麻黄 !蜂房 !五味子 !
甘草等组成 ~小青龙汤由麻黄 !白芍 !细辛 !干姜 !制
甘草 !桂枝 !半夏 !五味子组成 ∀以上各药均购自湖
北省荆州市中药材公司 o经湖北省荆州市药品检定
所刘以民副主任药师鉴定地龙为巨蚓科动物参环毛
蚓 Πηερελιµ α ασπεργιλλυµ k° µ¨µ¬¨µl的全虫体 ~鱼腥草
为三百草科多年生草本植物蕺菜 Ηουττυψνια χορδατα
׫∏±¥q的全草 ~柴胡为伞形科多年生草本植物 Βυπ2
λευρυµ χηινενσισ⁄≤q的根 ~射干为鸢尾科多年生草本
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第 vu卷第 tw期
ussz年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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