全 文 ：不同产地金银花种质资源化学成分含量比较
向增旭 t3 o高山林 u o郭巧生 t
ktq南京农业大学 中药材研究所 o江苏 南京 utss|x~
uq中国药科大学 中药学院 o江苏 南京 utssv{l
≈收稿日期 ussz2sv2tw
≈通讯作者 3 向增旭 oר¯}ksuxl{wv|yx|to∞2°¤¬¯}½¬¬¬¤±ª
±¤∏q §¨∏q¦±
金银花是忍冬科植物忍冬 Λονιχερα ϕαπονιχα
׫∏±¥的干燥花蕾 o为常用中药材 o有清热解毒之功
效 ≈t ∀现代药理实验研究证明 o金银花具有抗病
毒 !解热 !增强免疫力 !止血 !利尿和降低胆固醇的作
用 ∀据记载 o忍冬科 ≤¤³µ¬©²¯¬¤¦¨¤¨植物在中国有 |{
种 o几乎全国各地均有分布 o尤以西南地区种类最多
种 o可供药用的种类达 wz种 ≈uov o以山东平邑和河
南封丘为道地产区 ≈wox ∀近年来 o随着应用范围的
扩大和需求量的增加 o金银花野生资源逐渐减少 o人
工栽培已成为金银花药材的主要来源 o现在山东 !河
南及湖南等省均有大面积金银花栽培种植基地 ∀
金银花中所含的化学成分 o除绿原酸等有机酸
外 o还含有挥发油 !黄酮类 !环烯醚萜苷类 !三萜皂苷
类等成分 ≈y ∀ 5中国药典 6ussx年版以绿原酸和木
犀草苷含量作为金银花质量控制指标 ∀绿原酸有异
绿原酸 !新绿原酸及 / ¥¤±§xts0等几种异构体 o它们
都是奎尼酸的咖啡酸酯 ≈zo{ ~金银花中除木犀草苷
外 o还含有芦丁 !槲皮素 !木犀草素 !木犀草素 2z2葡
萄糖苷多种黄酮类化合物 ≈|ots ∀
作者收集全国主要金银花产区山东 !河南 !湖南
隆回 !四川南江等地金银花种质 o采用 °≤测定不
同产地金银花中绿原酸含量 o采用紫外分光光度法
测定总绿原酸和总黄酮含量 o根据化学成分含量分
析结果 o对不同产地的金银花种质资源进行评价 o并
对道地性进行了初步探讨 ∀
1 材料和仪器
样品 t ∗ z作者亲自采集 o经中国药科大学中药
学院高山林教授鉴定为忍冬 ~样品 {由中国药科大
学李萍教授提供并鉴定为红腺忍冬 ~样品 tso|为南
江 t号 !u号是四川南江金银花研究所选育并在当
地栽培的两个品种 o分别是灰毡毛忍冬和细毡毛忍
冬 ~样品 tuott为隆回 t号 !u号是湖南隆回金银花
研究所选育的两个灰毡毛忍冬地方新品种 ∀
表 t 金银花样品来源
²q 学名 采集 r提供地点
t Λονιχερα ϕαπονιχα 河南封丘城郊
u Λ. ϕαπονιχα 河南封丘杨许寨
v Λ. ϕαπονιχα 河南密县
w Λ. ϕαπονιχα 山东平邑羊城
x Λ. ϕαπονιχα 山东平邑郑城
y Λ. ϕαπονιχα 山东平邑流域
z Λ. ϕαπονιχα 江苏南京
{ Λ. ηψπογλαυχα 四川重庆
| Λ. µ αχραντηοιδεσ 四川南江金银花研究所
ts Λ. σιµ ιλεσ 四川南江金银花研究所
tt Λ. µ αχραντηοιδεσ 湖南隆回金银花研究所
tu Λ. µ αχραντηοιδεσ 湖南隆回金银花研究所
高效液相色谱 k美国 ª¬¯¨ ±·公司 o包括泵 !柱温
箱 !二极管阵列检测器 !化学工作站 lo¤°¥§¤vx分
光光度计 k° µ¨®¬± ∞ °¯ µ¨l∀
绿原酸对照品 k中国药品生物制品检定所提供 o
批号 szxv2||tslo芦丁对照品 k中国药品生物制品检
定所提供 o批号 ussws{utlo{s ε 减压干燥至恒重 ∀
2 方法与结果
2q1 °≤测定不同产地金银花中绿原酸含量
2q1q 1 色谱 条件 ¼³¨ µ¶¬¯ ⁄≥u 色谱 柱
kw1y °° ≅ txs °°ox Λ°l~流动相乙腈 2s1wh磷酸
水溶液 ktvΒ{zlo临用前以 s1wx Λ°微孔滤膜过滤
并经过超声脱气处理 ~流速 t °# °¬±pt o柱温为 vs
ε o检测波长 vuz ±°∀
2q1q2 线性关系 精密称取绿原酸对照品 u1|y °ªo
置于 ts °量瓶中 o甲醇定容 o进样体积为 voxozo|o
tt Λo依照 2q1q1的方法测定 ∀以绿原酸进样量为
横坐标 o峰面积为纵坐标绘制标准曲线方程 o得到绿
原酸线性回归方程及线性范围 Ψ u1zy ≅ tsv Ξ n
{z1yyoρs1||| vo线性范围 s1{| Λª∗ v1ux Λª∀
2q1q3 样品溶液制备 取金银花药材适量 oxs ∗ ys
ε 烘干 o过 ws目筛 o精密称取药材样品粉末 s1x ªo
#wxxu#
第 vu卷第 uv期
ussz年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ uv
⁄ ¦¨¨°¥¨ µo ussz
置入 tss °量瓶中 o加入 tss °甲醇 o超声 vs
°¬±o放置至室温 o加甲醇至 tss °摇匀 o上清液用
s1wx Λ°微孔滤膜过滤 o作为供试溶液 ∀
2q1q4 精密度试验 将 t号样品制成的供试品溶
液按 2q1q1中色谱条件进行 °≤分析 o连续进样 y
次 o每次进样 x Λo结果 ≥⁄ t1uh kν ylo说明精
密度良好 ∀
2q1q5 稳定性试验 t号样供试品溶液在 souowo
{otuouw «各进样 t次 o进样体积 x Λo结果 ≥⁄
s1uzh kν ylo说明样品 uw «内稳定 ∀
2q1q6 重复性实验 精密称取 y份 t号样品 o各约
s1x ªo按 2q1q3中进行制备 o2q1q1中色谱条件进行
°≤分析 o进样体积 x Λo结果 ≥⁄ s1tzh kν
ylo说明重复性良好 ∀
2q1q7 回收率试验 取金银花生药粉末适量 k过
ws目筛 lo精确称取同一样品 y份 o精密加入绿原酸
对照品适量 o按 2q1q3进行制备 o按 2q1q1中方法进
行 °≤分析 o进样体积 x Λ∀结果绿原酸的加样
平均回收率为 |z1th o ≥⁄ t1zh kν ylo说明加样
回收率较高 ∀
2q1q8 样品含量测定 按 2q1q1中色谱条件进行
°≤分析 o进样体积 x Λ∀以峰面积值 o从回归方
程求得绿原酸的质量 o再计算出金银花中绿原酸的
含量 o结果见表 u∀
表 u 不同产地金银花中绿原酸的含量
²q
质量分数
r°ª# ªpt
≥⁄
rh ²q
质量分数
r°ª# ªpt
≥⁄
rh
t u1z| s1{v z u1wy s1zz
u v1s{ s1yy { x1su s1xt
v u1yz s1xu | x1zw s1{u
w v1xs t1tz ts |1uv t1uv
x u1v| s1{v tt y1wx s1|s
y u1xs s1{x tu x1xv s1w{
2q2 分光光度法测定不同产地金银花中绿原酸类
总含量
2q2q1 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照
品 s1ssx t{ ªo置于 xs °量瓶中 o甲醇定容至刻
度 o摇匀配制成质量浓度为 tsv1y °ª# pt绿原酸
标准溶液 ∀
2q2q2 测定波长的选择 将对照品溶液和供试品
溶液在 uss ∗ wss ±°进行扫描 o两者均在 vuz ±°波
长处有最大吸收峰 o选择检测波长为 vuz ±°∀
2q2q3 标准曲线的绘制及线性范围 精密吸取绿
原酸标准溶液 touowo{otu °分别置于 xs °量瓶
中 o甲醇定容 o摇匀 o配制成质量浓度为 u1szuo
w1twwo{1u{{oty1xzyouw1{yw °ª# pt的绿原酸溶
液 o以甲醇作为空白对照 o在 vuz ±°处测定吸光度 o
以吸光度 kΨl对进样浓度 kΞl绘制标准曲线方程 o
绿原酸线性回归方程为 Ψ s1sxxtΞ p s1svw {oρ
s1||| wo线性范围 u1sz ∗ us1z Λª# °pt ∀
2q2q4 供试品溶液的制备 称取药材细粉约 t1s
ªo甲醇定容于 xs °量瓶中 o超声 vs °¬±o放置至室
温 o滴加甲醇至 xs °o摇匀 ∀吸取 t °甲醇定容
于 ts °量瓶中 o再吸取 t °定容于 ts °量瓶
中 o作为药材供试品溶液 ∀
2q2q5 精密度实验 将 t号样品制成的供试品溶
液 o重复进样 y次 o计算吸光度的相对标准偏差 o结
果表明 o ≥⁄ s1zth o说明精密度良好 ∀
2q2q6 重复性实验 精密称取 y份样品 t各 s1x
ªo按 21214项下进行制备 o以绿原酸含量计算相对
标准偏差 ∀结果表明 o ≥⁄ u1th o说明重复性好 ∀
2q2q7 稳定性实验 对 t号供试样品溶液在 soto
uovowox «按标准曲线项下操作各测定 t次 ∀结果
表明 ≥⁄ s1zyh kν ylo说明样品在 x «内稳定 ∀
2q2q8 回收率实验 精密称金银花药材细粉 s1x
ªo分别加入绿原酸对照品 o按 21214项下进行制备 ∀
结果表明 o样品中绿原酸加标回收率为 |y1uh o ≥⁄
u1vh kν ylo说明加标回收率较高 ∀
2q2q9 样品测定 按 21214中方法进行制备 o按标
准曲线项下操作测定 o计算出金银花中总绿原酸的
含量 o结果见表 v∀
表 v 金银花中总绿原酸含量
²q
质量分数
r°ª# ªpt
≥⁄
rh ²q
质量分数
r°ª# ªpt
≥⁄
rh
t x1s{ s1xx z x1zs s1zu
u y1|z s1uz { ts1zs s1w|
v x1tz s1zz | z1{z t1vs
w y1wv s1x| ts tu1|s s1v{
x y1v{ s1vv tt tu1|s s1{t
y y1xs s1tx tu tt1|s s1x{
从表 v可见 o这 tu批样品中 o总绿原酸含量最
高的是四川南江的样品 tso达到了 tu1|wh o绿原酸
含量最低的是山东平邑的样品 t号和 v号 o总绿原
酸含量为 x1s{h ox1tzh ∀四川南江 !湖南隆回产
区的金银花绿原酸含量远高于山东 !河南道地产区 ∀
2q3 分光光度法测定金银花中总黄酮含量 ≈tt
#xxxu#
第 vu卷第 uv期
ussz年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ uv
⁄ ¦¨¨°¥¨ µo ussz
2q3q1 对照品溶液的制备 精密称取芦丁 s1ssw
ut ªo用甲醇溶解 o最后定容至 xs °刻度 o摇匀 o即
得浓度为 {w °ª# pt的对照品贮备液 ∀
2q3q2 标准曲线的确定 精密吸取对照品贮备液
touovowoxoyozo{ °o分别置于 ux °的量瓶中 o加
蒸馏水至 { °o加入 t °s1xh亚硝酸钠溶液 o放
置 y °¬±o再加入 t °tsh硝酸铝 o放置 y °¬±o加入
t °tsh氢氧化钠 o用蒸馏水定容至刻度 o摇匀 o放
置 tx °¬±∀用空白液作对照 o在 xts ±°处测定吸光
度 ∀以浓度 Ξ为横坐标 o吸收度 Ψ为纵坐标 o求得
其回归方程为 Ψ s1sst xΞ n s1ssx voρ s1||w zo
线性范围 w ∗ ws Λª# °pt ∀
2q3q3 方法学考察 精密度实验 o ≥⁄ t1{h ~重
现性实验 o ≥⁄ u1th ~稳定性实验 o ≥⁄ t1uh kν
ylo样品在 y «内稳定 ~回收率实验 o芦丁平均加标
回收率为 ||1vxh o ≥⁄ s1|uh kν yl∀
2q3q4 样品测定 精密称取金银花药材粉末 u ªkv
份 lo按 21214方法制备样品 o显色 o以空白液作对
照 o在 xts ±°处测定 o平行测定 v次 o从回归方程计
算出金银花中总黄酮的含量 o见表 w∀
表 w 金银花中总黄酮含量
²q
质量分数
r°ª# ªpt
≥⁄
rh ²q
质量分数
r°ª# ªpt
≥⁄
rh
t u1tu v1uy z s1yx s1|{
u u1xw t1vx { w1{| t1us
v u1s{ t1sx | x1xz u1xy
w t1z{ u1yv ts x1{| s1{x
x t1{y u1{w tt x1xv u1tv
y t1{v v1sz tu x1tx v1wu
3 讨论与结论
从表 u中可以看出 o产于山东 !河南和江苏南京
的金银花均为忍冬花蕾 o绿原酸含量为 u1wsh ∗
v1xsh ~灰毡毛忍冬花绿原酸含量 x1xvh ∗
y1wxh o细毡毛忍冬绿原酸含量最高为 |1uvh ∀忍
冬 !灰毡毛忍冬和细毡毛忍冬绿原酸含量存在较大
的差异 o说明种间遗传差异是影响化学成分含量的
主要因素 ∀南京金银花基原植物是忍冬 o其绿原酸
含量与山东 !河南金银花中绿原酸含量接近 o说明不
同产地环境条件差异却对绿原酸含量影响不甚明
显 ∀分析表 v可以看出 o总绿原酸含量在种内 !种
间 !不同产地表现出与绿原酸相同的变化规律 ∀从
表 w中可以看出 o红腺忍冬 !灰毡毛忍冬和细毡毛忍
冬中中黄酮质量分数 w1{|h ∗ x1{|h o远高与忍冬
s1yxh ∗ u1xwh ∀红腺忍冬 !灰毡毛忍冬和细毡毛
忍冬中绿原酸 !总绿原酸及总黄酮的含量高于忍冬 o
这一结果与周日宝 ≈tt !苟占平 ≈tu !武煊 ≈tv 等人的研
究结果相一致 ∀
综合分析表 uo表 v和表 w可以看出 o来自道地
产区山东 !河南的金银花中绿原酸 !总绿原酸及总黄
酮的含量明显低于非道地产区 ∀道地和非道地产地
样品指标成分含量差异很大 o非道地产区指标成分
含量高于道地产地 ∀这说明单纯的以个别化学成分
含量作为指标来衡量药材的道地性存在一定的片面
性和局限性 ∀
虽然 ussx年版 5中国药典 6收载忍冬科植物忍
冬 Λ. λονιχερα作为金银花药材的唯一植物来源 o但
是金银花在我国广泛分布 o且化学成分含量差异极
大 o因此 o一方面 o必须积极开展近原植物的化学及
药理活性研究 o以扩大药源 o合理用药 ~另一方面 o在
大面积栽培中对当地适应性强的种质资源进行评
价 o筛选出药效成分含量高的地方优良品种 o对金银
花的 °生产具有十分重要的意义 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 ≈≥ q一部 qussx}txuq
≈u 徐炳声 q中国植物志 ≈ q第 u卷 q北京 }科学出版社 ot|{{q
≈v 石 钺 o石任兵 o陆蕴如 q我国药用金银花资源 !化学成分及
药理研究进展 ≈ q中国药学杂志 ot|||ovw|kttl}zuwq
≈w 张重义 o李 萍 q金银花药材的综合研究 ≈ q现代中药研究
与实践 oussvotzkvl}x{q
≈x 吕患成 o吕 召 q药用忍冬属植物的地理分布及其开发建议
≈ q松辽学刊 k自然科学版 lot||zokvl}usq
≈y 邢俊波 o李 萍 q忍冬属化学成分研究概况及展望 ≈ q中药
材 ot|||ouukzl}vyyq
≈z 苟占平 o万德光 q°≤测定 y种忍冬藤中绿原酸的含量 ≈ q
中成药 oussyou{kvl}ws{q
≈{ 邢俊波 o李 萍 o温德良 q不同物候期金银花中总绿原酸的积
累动态研究 ≈ q中国中药杂志 ousstouykzl}wxzq
≈| 黄 雄 o李松林 o李 萍 o等 q°≤法同时测定金银花中 {种
黄酮的含量 ≈ q药学学报 oussxowskvl}u{xq
≈ts 邢俊波 o李会军 o李 萍 q中药金银花质量标准研究 2总黄酮的
含量测定 ≈ q中国现代应用药学杂志 oussuot|kvl}ty|q
≈tt 周日宝 o童巧珍 q灰毡毛忍冬与正品金银花的绿原酸含量比
较 ≈ q中药材 oussvouykyl}v||q
≈tu 苟占平 o万德光 q°≤法测定 x种 t变种金银花中绿原酸含
量 ≈ q中国中医药信息杂志 ousswottkxl}wutq
≈tv 武 煊 o黎晓敏 o熊仲良 o等 q山东和河南及重庆产金银花中绿原
酸含量的研究 ≈ q西南农业大学学报 oussyou{kvl}wvyq
≈责任编辑 牛泽宇
#yxxu#
第 vu卷第 uv期
ussz年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ uv
⁄ ¦¨¨°¥¨ µo ussz