全 文 ：人参配伍五灵脂对 Ａ５４９人肺腺癌细胞增殖抑制及
诱导凋亡的实验研究
王 瑾，任艳玲
（辽宁中医药大学，辽宁 沈阳 １１００３２）
［摘要］ 目的：观察人参配伍五灵脂对Ａ５４９人肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响，以阐明其作用机制，探究其最
佳配伍比例，为临床用药提供合理的实验依据。方法：健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠２５只，随机分成５组，每组５只，即正常对照
组，人参、五灵脂１∶１，１∶２，２∶１组，复方斑蝥胶囊组。煎取药液后，计算出大鼠等效剂量，按１ｍＬ·１００ｇ－１给大鼠灌
胃，每天２次，连续灌胃３ｄ。末次灌胃后１ｈ取血清，加入 ＲＰＭＩ１６４０培养液，配制成含量为１０％的药物血清温育
液。运用ＭＴＴ法检测肿瘤细胞生长曲线及肿瘤细胞抑制率，透射电镜观察其凋亡情况。结果：人参、五灵脂配伍能
抑制Ａ５４９人肺腺癌细胞增殖，并对其细胞的凋亡有诱导作用，且当二者比例为２∶１时效果最显著。结论：提示抑制
肿瘤细胞增殖，诱导其调亡可能是人参配伍五灵脂抗癌作用的机制之一。
［关键词］ 人参；五灵脂；配伍；ＭＴＴ；细胞凋亡
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００６）０７０５８５０４
［收稿日期］ ２００５０３２０
［通讯作者］ 任艳玲，（０２４）３１２０７０８６，Ｅｍａｉｌ：ｙａｎｌｉｎｇｒｅｎ＠ｍａｉｌ．
ｔｏｍ．ｃｏｍ
人参与五灵脂历来被认为是中药的配伍禁忌，
《药对》中人参“畏五灵脂”的记载，较早地确定了二
者的对立关系。然而历代医家对此素有争议，在多
本医籍中有二者伍用的记载，并在现代临床实践中，
用于中医辨证属气血亏虚、气滞血瘀的慢性萎缩性
胃炎、胃十二指肠溃疡、原发性痛经、冠心病等疾病
的治疗，取得了较好的疗效。现代实验研究亦表明
二者配伍在提高小鼠机体免疫功能［１］及抗肿瘤［２］等
方面有积极的作用，其研究多见于在体实验，有关体
外的实验研究较少见。本实验通过体外实验观察其
对Ａ５４９人肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响，探讨其在
肿瘤治疗上的作用机制。
１ 材料
１１ 细胞株及培养
人肺腺癌细胞株 Ａ５４９由中国医科大学细胞生
物教研室提供，培养于含１０％灭活小牛血清，１×１０５
Ｕ·Ｌ－１青霉素，１００ｍｇ·Ｌ－１链霉素的 ＲＰＭＩ１６４０培养
基中，３７℃，５％ＣＯ２培养箱中培养。
１２ 试剂与仪器
ＲＰＭＩ１６４０干粉购自美国ＧｉｂｃｏＢｒｌ公司；二甲基
亚砜购自美国 Ｓｉｇｍａ公司；ＭＴＴ及胰蛋白酶均购自
华美生物工程公司；标准新生牛血清购自郑州佰安
生物工程有限公司；Ｂｉｏｔｅｃｈ酶标仪（美国）。
１３ 动物
健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠，２５只，体重（２５０±２０）ｇ，雌雄
各半，由辽宁中医学院动物实验中心提供，动物合格
证号ＳＣＸＫ（辽）２００３０００９。
１４ 药物
人参（红参）ＲａｄｉｘｅｘＲｈｉｚｏｍａＧｉｎｓｅｎｇ和五灵脂
ＦａｆｃｅｓＴｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｉ均购自沈阳天益堂大药房，经辽宁
中医学院中药鉴定教研室鉴定确认。取红参饮片加
适量水浸泡１ｈ，煮沸后文火煮３０ｍｉｎ，煎煮３次，合
并３次滤液，浓缩至含生药量为１ｇ·ｍＬ－１的药液，置
４℃冰箱中保存备用。五灵脂则先用纱布包好，加
适量水浸泡０５ｈ，煎煮方法同红参，亦制成含生药
量为１ｇ·ｍＬ－１的药液，置４℃冰箱中保存备用。
复方斑蝥胶囊，山西黄河中药有限公司生产，批
号２００３０７０１，购于维康大药房，作为本实验阳性对照
药。
２ 方法
２１ 药物血清的制备
将大鼠随机分成 ５组，每组 ５只，即正常对照
组，人参、五灵脂１∶１，１∶２，２∶１组，复方斑蝥胶囊组。
根据２０００年版《中国药典》中规定的人参和五灵脂
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的剂量，结合临床常用量确定各药的剂量为 ９ｇ，通
过“人和动物之间按体表面积折算的等效剂量比值
表”计算出大鼠等效剂量（相当于７０ｋｇ成人用量）：
人参、五灵脂（人五）１∶１组、人五 １∶２组中人参的剂
量为０６５ｇ·ｋｇ－１，人五 ２∶１组中人参的剂量为１３ｇ
·ｋｇ－１；人五 １∶１组、人五 ２∶１组中五灵脂的剂量为
０６５ｇ·ｋｇ－１，人五 １∶２组中五灵脂的剂量为１３ｇ·
ｋｇ－１；复方斑蝥胶囊组大鼠的等效剂量为 ００５４ｇ·
ｋｇ－１。然后称量各组大鼠体重，按等效剂量和体重
计算给药量。取混匀的中药水煎液１ｍＬ·１００ｇ－１给
大鼠灌胃，正常对照组给予等量生理盐水，阳性药对
照组给予等量混悬液（研磨颗粒用生理盐水配成混
悬液），每天２次，连续灌胃３ｄ。
末次灌胃后１ｈ，腹主动脉采血，无菌分离血清，
经５６℃，３０ｍｉｎ灭活处理后，用０４５，０２２μｍ微孔
滤膜过滤除菌，置－２０℃保存备用。
２２ 药物血清温育液的制备
含人参、五灵脂的药物血清组及对照组，在实验
前将各组药物血清加入 ＲＰＭＩ１６４０培养液，血清浓
度为１０％，混匀备用。
２３ 细胞增殖测定
待细胞形成单层后，倒掉细胞悬液，用少量
０２５％胰蛋白酶消化，加培养液吹打，使细胞均匀悬
浮，将细胞含量调整为２×１０５个／ｍＬ接种至９６孔培
养板，每孔 １００μＬ，６孔复孔，培养 ２４ｈ后，弃培养
液，分别加入１００μＬ各组含药血清继续培养。培养
２４，４８ｈ后，吸去上清液，加入５ｍｇ·ｍＬ－１的ＭＴＴ，每
孔１０μＬ，３７℃温育４ｈ，弃去ＭＴＴ，加入二甲基亚砜
（ＤＭＳＯ）１００μＬ，３７℃，１０ｍｉｎ，轻轻摇动培养板，应用
酶标仪检测５７０ｎｍ波长处的 Ａ值。计算公式为：
细胞增殖抑制率（％）＝（对照孔平均 Ａ－用药组平均
Ａ）／对照孔平均 Ａ×１００％
２４ 凋亡细胞的透射电镜观察
传代细胞在含１０％小牛血清的ＲＰＭＩ１６４０培养
液中贴壁生长 ２４ｈ后，用含药物血清人五 ２∶１组
（通过ＭＴＴ法选出的最佳配伍比例）、复方斑蝥胶囊
组和空白对照组的１６４０培养液继续培养４８ｈ，戊二
醛固定，收集细胞于琼脂离心管中，取出细胞团，按
常规电镜样品制作程序处理样品，制作超薄切片，透
射电子显微镜观察。
２５ 统计方法
实验数值以珋ｘ±ｓ表示，并采用两样本均数比
较的 ｔ检验进行统计学处理。
３ 结果与分析
３１ ＭＴＴ法检测结果
表１显示，与空白对照组比较，人参、五灵脂不
同比例的药物血清作用 ２４，４８ｈ后，各组均表现出
明显的抑制作用（Ｐ＜００１），且当人参、五灵脂为２∶
１的比例时最佳，抑制率分别为 ３９８６％，５２１１％，
取得较好效果。与阳性对照组（复方斑蝥胶囊组）比
较，人五２∶１组（Ｐ＜００１）有显著性差异。对 Ａ５４９
细胞的抑制效应呈时间依赖性。
表１ 人参、五灵脂不同配伍比例药物血清对Ａ５４９细胞
增殖的抑制作用（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
组别
２４ｈ ４８ｈ
Ａ
抑制率
／％
Ａ
抑制率
／％
空白对照组 １．３３±０．０４ １．１９±０．０６
人五 １∶１组 １．０２±０．０８１） ２３．０４ ０．８０±０．０４１） ３２．７２
人五 １∶２组 ０．９１±０．０５１，２） ３１．５８ ０．７２±０．０３１） ３９．９８
人五 ２∶１组 ０．８０±０．０５１，３） ３９．８６ ０．５７±０．０５１，３）５２．１１
复方斑蝥胶囊组 ０．９６±０．０２１） ２７．８９ ０．７１±０．０３１） ４０．９４
注：与空白对照组比较１）Ｐ＜００１；与复方斑蝥胶囊组比较２）Ｐ＜
００５，３）Ｐ＜００１
３２ 透射电镜观察结果
３２１ 空白对照组 镜下可见正常的肺癌细胞，细
胞边缘有数量较多的微绒毛，细胞膜完整，胞质内线
粒体、粗面内质网正常，细胞核染色均匀（见图１Ａ）。
３２２ 人五 ２∶１组 ①镜下可见细胞增大，核增
大，核质比例严重失调，边缘出现早期出芽现象，胞
质变化不明显。核异染色增多积聚成团块状分布于
核的内侧（见图 １Ｂ）。②镜下可见凋亡细胞胞膜完
整，形成椭圆形的细胞凋亡小体，逐渐向细胞外分
离，外膜较完整，凋亡小体内可见残存的细胞器（见
图１Ｃ）。
３２３ 复方斑蝥胶囊组 镜下可见细胞体积明显
增大，细胞膜部分破裂，边缘有微绒毛，细胞核增大，
染色质均匀（见图１Ｄ）。
４ 讨论
人参与五灵脂配伍的现代研究，已通过诸多实
验与临床的研究，论证其二者配伍的可行性。研究
发现，人参与五灵脂配伍，不会产生毒性作用［３］，并
且能提高小鼠耐缺氧、抗寒冷、抗疲劳的能力［２］，增
强环磷酰胺造成的免疫功能低下小鼠的免疫功
能［１］，还在抗肿瘤方面，具有延长荷瘤小鼠生存时
间，抑制癌细胞增殖的作用［２］。临床研究中，二者配
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图１ 各组对人肺腺癌细胞的作用
Ａ空白对照组（×７０００）；Ｂ人五１∶２组（×１００００）；Ｃ人五２∶１组（×１００００）；Ｄ复方斑蝥胶囊组（×１００００）
伍应用于中医辨证属气血亏虚、气滞血瘀的慢性萎
缩性胃炎、胃十二指肠溃疡、原发性痛经、冠心病、肠
黏连等均有较好的疗效［４］。本实验结果表明，人参
与五灵脂按不同比例配伍，其含药血清对体外培养
的Ａ５４９人肺腺癌细胞增殖有抑制作用，且以人参、
五灵脂２∶１的比例最为显著，此亦与祖国医学中“气
为血之帅”、“气行则血行”的论述相应。
细胞凋亡或称程序化细胞死亡，是一种生理性
细胞消亡方式，普遍存在于生物界。肿瘤的形成则
是一个多阶段、多因素长期相互作用的过程，它的一
个重要特征就是细胞的无限制生长，而细胞凋亡作
为患癌机体对抗恶性细胞增殖的主动努力，在各类
肿瘤中普遍存在，这就为人类提供了新的治疗手段，
即通过干扰肿瘤细胞生长、代谢、增殖等过程，最终
触发肿瘤细胞发生凋亡来达到治疗目的。因而，中
药诱导肿瘤细胞凋亡已成为一条很有希望治疗肿瘤
的新途径。本实验结果表明，电镜下可见细胞增大，
边缘出现早期出芽现象，有明显凋亡细胞，形成椭圆
形的细胞凋亡小体，证明人参与五灵脂配伍通过诱
导肿瘤细胞自身调节的主动性死亡，抑制肿瘤细胞
的生长，故人参配伍五灵脂具有诱导肿瘤细胞凋亡
的作用，这也是二者配伍抗肿瘤的机制之一。
［参考文献］
［１］ 郭国华，鲁耀邦，蒋茂恒，等．人参五灵脂水煎液配伍对免疫
低下小鼠免疫功能的影响．中草药，１９９４，２５（５）：２５３．
［２］ 常敏毅．人参、五灵脂并用抗应激、抗肿瘤的实验研究．中国
中药杂志，１９９７，２２（１１）：６９４．
［３］ 郭国华．人参与五灵脂配伍对实验动物毒性的影响．中国中
药杂志，１９９４，１９（４）：２４７．
［４］ 林纬芬，张文兵．人参不怕五灵脂刍议．中医药信息，１９９６，
（１）：１９．
Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓ
ｏｆＡ５４９ｃｅｌｌｉｎｅｏｆａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｏｆｔｈｅｌｕｎｇｗｉｔｈ
ｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆＲａｄｉｘｅｘＲｈｉｚｏｍａＧｉｎｓｅｎｇａｎｄＦａｆｃｅｓＴｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｉ
ＷＡＮＧＪｉｎ，ＲＥＮＹａｎｌｉｎｇ
（ＬｉａｏｎｉｎｇＣｏｌｅｇｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００３２，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆＲａｄｉｘｅｘＲｈｉｚｏｍａＧｉｎｓｅｎｇａｎｄＦａｆｃｅｓＴｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｉｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＡ５４９ｃｅｌｌｉｎｅｏｆａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｏｆｔｈｅｌｕｎｇ，ｔｏｃｌａｒｉｆｙｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍ，ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｂｅｓｔｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ，ａｎｄｔｏｏｆ
ｆｅｒｔｈｅｒｅａｓｏｎａｂｌｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｅｖｉｄｅｎｃｅｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｍｅｄｉｃｉｎｅｔｈｅｒａｐｙ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｗｅｎｔｙｆｉｖｅｈｅａｌｔｈｙＷｉｓｔａｒｒａｔｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｉｖｅｇｒｏｕｐｓ
ｒａｎｄｏｍｌｙ，５ｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｎｏｒｍａｌｇｒｏｕｐ，ＲａｄｉｘｅｘＲｈｉｚｏｍａＧｉｎｓｅｎｇａｎｄＦａｆｃｅｓＴｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｉｉｎｔｈｅｒａｔｉｏｏｆ１∶１ｇｒｏｕｐ，１∶２
ｇｒｏｕｐ，２∶１ｇｒｏｕｐ，ａｎｄｃｏｍｐｌｅｘｒｅｃｉｐｅｏｆｂｅｅｔｌｅｃａｐｓｕｌｅｇｒｏｕｐ．Ａｆｔｅｒｔｈｅｐｈａｒｍａｃｙｌｉｑｕｏｒｗａｓｄｅｃｏｃｔｅｄ，ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔｄｏｓｅｆｏｒｒａｔｗａｓｃａｌｃｕｌａｔ
ｅｄ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｗｅｉｇｈｔｓ，ａｌｒａｔｓｗｅｒｅｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄａｔｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｏｆ１ｍＬ·１００ｇ－１，ｔｗｉｃｅａｄａｙ，ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｌｙｆｏｒ３ｄａｙｓ．
Ｏｎｅｈｏｕｒａｆｔｅｒｔｈｅｌａｓｔａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｓｅｒｕｍｗａｓｃｏｌｅｃｆｅｄａｎｄｍｉｘｅｄｗｉｔｈｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉａＲＰＭＩ１６４０ｔｏｐｒｅｐａｒｅｔｈｅｄｒｕｇｓｅｒｕｍｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ
ｌｉｑｕｉｄａｔｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ１０％．ＭＴＴｗａｓｕｓｅｄｔｏｍｅａｓｕｒｅｔｈｅｇｒｏｗｔｈｃｕｒｖｅａｎｄｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｔｕｍｏｒｃｅｌ，ａｎｄｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｗａｓｏｂ
ｓｅｒｖｅｄｂｙｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆＲａｄｉｘｅｘＲｈｉｚｏｍａＧｉｎｓｅｎｇａｎｄＦａｆｃｅｓＴｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｉｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｃｅｌｐｒｏｌｉｆｅｒａ
ｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｉｎｅＡ５４９ｏｆｌｕｎｇａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａａｎｄｈａｖｅａｎｉｎｄｕｃｅｍｅｎｔｏｎａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ｔｈｅｅｆｅｃｔｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｉｎｔｈｅｒａｔｉｏｏｆ２∶１．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：
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Ｔｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｔｈａｔｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｄｕｃｉｎｇｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｔｕｍｏｒｃｅｌｍａｙｂｅｏｎｅｏｆｔｈｅａｎｔｉｃａｎｃｅｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｈｅ
ｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆＲａｄｉｘｅｘＲｈｉｚｏｍａＧｉｎｓｅｎｇａｎｄＦａｆｃｅｓＴｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｉ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ＲａｄｉｘｅｘＲｈｉｚｏｍａＧｉｎｓｅｎｇ；ＦａｆｃｅｓＴｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｉ；ｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆｍｅｄｉｃｉｎｅ；ＭＴＴ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ
［责任编辑 古云侠］
三七对高脂血清刺激的大鼠血管平滑
肌细胞增殖的抑制作用
王 晶，胡晋红
（第二军医大学 长海医院，上海 ２００４３３）
［摘要］ 目的：考察三七对高脂血清刺激的大鼠血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ，ＶＳＭＣ）增殖的影
响，为评价三七的降血脂作用及其机制研究提供依据。方法：大鼠高脂血症模型给予不同剂量三七处理，２周后分
离血清，分别以未处理组血清、各处理组血清刺激ＶＳＭＣ增殖，并采用 ＭＴＴ的测定 Ａ值，研究三七对高脂血清刺激
的大鼠ＶＳＭＣ增殖的抑制作用。结果：与正常血清相比，高脂血清能显著促进ＶＳＭＣ的增殖（Ｐ＜００５），而含三七的
高脂血清对ＶＳＭＣ增殖的促进作用与高脂血清相比其作用明显减弱（Ｐ＜００５）。结论：三七对高脂血清刺激的大
鼠血管平滑肌细胞增殖有明显的抑制作用，该法可为降脂药物体外研究提供借鉴。
［关键词］ 三七；ＭＴＴ；血管平滑肌细胞；血清药理学
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００６）０７０５８８０３
［收稿日期］ ２００５０３２０
［基金项目］ 国家高技术研究发展计划（８６３计划）资助项目
（２００２ＡＡ２Ｚ３４６Ｃ）
［通讯作者］ 胡晋红，Ｔｅｌ：（０２１）２５０７０６６５，Ｅｍａｉｌ：ｈｕｊｈ＠ｓｍｍｕ．
ｅｄｕ．ｃｎ．
在细胞水平上研究细胞的存活和增殖情况，目
前主要的检测方法有活细胞计数法、同位素掺入法、
ＭＴＴ法［１］。前２种方法易受主观因素影响或使用放
射性同位素易造成环境污染，在应用上有—定的局
限性。ＭＴＴ法具有简便易行、灵敏度高、结果客观可
靠、安全价廉等优点，目前认为在生物学和医学的许
多研究领域中是一种有效的技术手段［２］。现代药理
研究证明，传统中药三七具有广泛的药理活性［３］，本
实验利用ＭＴＴ法来考察含三七的高脂血清对体外
培养的大鼠血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅ
ｃｅｌｓ，ＶＳＭＣ）生长的影响，为评价三七的降血脂作用
及其机制研究提供依据。
１ 材料与方法
１１ 动物 ＳＤ大鼠，雄性，体重（１８０±２０）ｇ，由第
二军医大学实验动物中心提供，许可证号 ＳＹＸＫ
（沪）２００２００２６。
１２ 药材 三七 Ｐａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ（Ｂｕｒｋ）Ｆ．Ｈ．Ｃｈｅｎ
为五加科人参属植物。粉末粒度分别为：超细三七
粉，样品编号 ００５０１，平均粒径（１１８６±０２３７）μｍ；
普通三七粉，符合２０００年版《中国药典》最细粉要求
（均为云南省文山坤七药业有限公司生产，云南省文
山三七研究所惠赠）。
１３ 试剂 ＤＭＥＭ培养基（Ｇｉｂｃｏ公司），ＭＴＴ（Ｓｉｇｍａ
公司），新生牛血清（ＦＣＳ，杭州四季青生物工程材料
有限公司），二甲亚砜（ＤＭＳＯ，分析纯，北京亚太精细
化工公司），αｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ平滑肌肌动蛋白检
测试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司）。
１４ 仪器 ＥＬＸ８００型全自动酶标分析仪（ＢＩＯ
ＴＥＫｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉｎｃ）。
１５ ＶＳＭＣ的培养 实验用大鼠断头弃血，用７５％
乙醇浸泡１０ｍｉｎ，迅速转入无菌超净台，无菌条件下
迅速取出大鼠主动脉胸腹段，ＤＨａｎｋｓ液冲洗，去除
内皮、外膜，剪成 １ｍｍ×１ｍｍ的组织块，贴于培养
瓶内壁。将贴有组织块的瓶壁朝上，置于３７℃，５％
ＣＯ２培养箱中培养，加入适量含 ２０％ＦＣＳ的 ＤＭＥＭ
·８８５·
第３１卷第７期
２００６年４月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ３１，Ｉｓｓｕｅ ７
Ａｐｒｉｌ，２００６