全 文 ：双参宁心胶囊对小型猪介入性心肌
缺血的保护作用
于 震１，２，刘建勋１，李欣志１，尚晓泓１，闫爱国１，冯新庆１
（１．中国中医科学院 西苑医院，北京 １０００９１；２．北京大学 药学院，北京 １０００８３）
［摘要］ 目的：研究双参宁心胶囊对小型猪介入性心肌缺血的治疗作用。方法：小型猪ＬＡＤ经心导管介入自
体血栓制备心肌缺血模型，喂饲双参宁心胶囊６ｄ后，观察冠状动脉造影、血流动力学、生化和病理组织学的改变。
结果：造模６ｄ后，心肌缺血小型猪冠状动脉ＬＡＤ基本栓塞，心输出量（ＣＯ）、心脏指数（ＣＩ）、左心做功（ＬＣＷ）和左
心做功指数（ＬＣＷＩ）明显降低，病理组织学可见心肌变性、坏死，缺失区被纤维组织替代填充、嗜中性粒细胞浸润。
各组给药６ｄ后，双参宁心胶囊可明显减轻小型猪冠状动脉ＬＡＤ自体血栓栓塞的程度，改善血流动力学，增加ＣＯ，
ＣＩ，ＬＣＷ，ＬＣＷＩ，降低外周血管阻力（ＳＶＲ）和外周血管阻力指数（ＳＶＲＩ），抗脂质过氧化，增加血浆超氧化物歧化酶
（ＳＯＤ）活性，降低血浆丙二醛（ＭＤＡ）含量，同时减轻心肌病理组织学变性和坏死改变。结论：双参宁心胶囊可能通
过改善心肌收缩功能，增加左心做功，抑制心肌细胞膜的脂质过氧化，发挥抗心肌缺血的作用。
［关键词］ 双参宁心胶囊；心肌缺血；小型猪；介入
［中图分类号］Ｒ２８５．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）１６１６９５０５
［收稿日期］ ２００７０２０８
［基金项目］ 国家自然科学基金项目（３０６７２６３８）
［通讯作者］ 刘建勋，Ｔｅｌ：（０１０）６２８７４０４９，Ｅｍａｉｌ：ｊｉａｎｘｕｎ＠
ｈｔ．ｒｏｌ．ｃｎ．ｎｅ
心血管疾病是人类病死率最高的疾病之一，而
缺血性心脏病在其中起主导作用［１］。心肌缺血动
物模型多应用开胸结扎冠状动脉法［２］、冠状动脉放
置收缩环法［３］，或是化学药物法［４］，但存在对动物
损伤大，血管栓塞后不能再通，与心肌缺血临床发病
机制尚有很大差异等缺点。应用现代先进的放射影
像学介入技术，在不开胸的状态下经心导管制备心
肌缺血动物模型，具有更多优点，也是今后研究的一
个趋势。双参宁心胶囊由人参、丹参等中药组成，通
过对其提取工艺、剂型、质量控制等进一步深入研
究，分别选用其中的总皂苷，总酚酸等成分按一定比
例配方而成，具有益气活血、祛瘀止痛功能，用于治
疗冠心病心绞痛。本实验观察双参宁心胶囊对应用
介入技术制备的小型猪血栓性心肌缺血模型的治疗
作用。
１ 材料
１．１ 动物
健康小型猪１６头，雌雄兼用，体重（３８±５）ｋｇ，
由中国农业大学畜牧学院小型猪繁育场提供。
１．２ 药物与试剂
双参宁心胶囊（以下简称双参），黄褐色粉末，
由人参、丹参等有效部位按比例配伍而成，以多种有
效成分（如人参皂苷Ｒｇ１，丹酚酸Ｂ）控制其质量，每
克含生药量为９２８ｇ，由中国中医科学院西苑医院
实验研究中心药学室提供；凝血酶（Ｓｉｇｍａ公司）；戊
巴比妥钠（北京化学试剂公司，批号０２０４０２）；肝素
钠注射液（常州千红生化制药有限公司，批号
０５０５０９；注射用青霉素钠（华北制药股份有限公司，
批号Ｓ０５０１２０８）；复方泛影葡胺注射液（上海旭东海
普药业有限公司，批号０５０５０３；血清超氧化物歧化
酶检测试剂盒（ＳＯＤ，南京建成生物工程研究所，批
号２００５１２０８）；血清丙二醛检测试剂盒（ＭＤＡ，南京
建成生物工程研究所，批号２００５１２０２０。
１．３ 仪器
ＢＶＰｕｌｓｅｒａ型 Ｃ型臂 Ｘ光机（荷兰飞利浦）；
ＭＰ－１００型多道生理记录仪（美国 Ｂｉｏｐａｃ）；Ｂｉｏ．
ｃｏｍ无创血流动力学监测系统（美国 ＣａｒｄｉｏＤｙｎａｍ
ｉｃｓ）；ＴＥＣ－７６２１Ｃ型心电监护仪（日本光电）；ＵＶ－
３６５型紫外分光光度仪（日本岛津）；ＢＨ－２型显微
镜（日本奥林巴斯）。
２ 方法
２．１ 造模
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选用小型猪，耳静脉注射戊巴比妥钠麻醉（３０
ｍｇ·ｋｇ－１）后，分离右侧颈总动脉，结扎远心端，置
入６Ｆ动脉鞘管，从动脉鞘的侧管注入肝素２００Ｕ·
ｋｇ－１。在Ｃ型臂 Ｘ光机透视下，以６Ｆ右冠导引导
管置于左冠状动脉开口行左冠状动脉造影，观察猪
冠状动脉的分布情况，造影后置入交换导丝，将导丝
置入冠状动脉ＬＡＤ中部，交换５Ｆ小弯导引导管，经
导丝进入冠状动脉ＬＡＤ中部，取出导丝后经导管注
入０５ｍＬ血栓（０５ｍＬ全血＋０１５ｍＬ凝血酶１００
Ｕ形成的血栓），再次造影观察 ＬＡＤ堵塞情况，ＬＡＤ
栓塞后撤除导管，结扎颈总动脉，伤口清创，局部给
予１５０万Ｕ青霉素，无菌缝合，单笼喂养观察，术中
连续心电监护。
２．２ 分组 造模后实验共分３组：①模型组，ｎ＝５；
②双参１６ｍｇ·ｋｇ－１剂量组，ｎ＝６；③双参 ８ｍｇ·
ｋｇ－１剂量组，ｎ＝５。实验药物均在实验开始时混入
饲料中服用，专人观察动物进食情况确保药物吸收
剂量，给药６ｄ后结束实验。
２．３ 检测指标
２．３．１ 冠状动脉造影 实验前后分别行小型猪选
择性冠状动脉造影，观察冠状动脉ＬＡＤ栓塞情况。
２．３．２ 血流动力学 实验前后经动脉鞘管联接多
导生理记录仪记录小型猪收缩压和舒张压，并计算
平均动脉压（ＭＡＰ），然后将改装的针式电极分别固
定于小型猪的双侧颈部和肋下缘中点等８个部位，
应用Ｂｉｏｚ．Ｃｏｍ无创血液动力学监测系统记录血流
动力学指标，包括心输出量（ＣＯ）、心脏指数（ＣＩ）、
外周血管阻力（ＳＶＲ）、外周血管阻力指数（ＳＶＲＩ）、
左心做功（ＬＣＷ）、左心做功指数（ＬＣＷＩ）和心率
（ＨＲ）。
２．３．３ 生化 动脉鞘的侧管取血，分离血浆，按照
试剂盒说明书操作，硫代巴比土酸法测定血浆 ＳＯＤ
活性，黄嘌呤氧化酶法测定血浆ＭＤＡ含量。
２．３．４ 病理组织学 选取第３片心肌，分别剪取
ＬＡＤ周围部位心肌小块，１０％甲醛固定，常规石蜡
包埋，切片，ＨＥ染色，显微镜观察。
２．４ 统计学方法
应用ＳＰＳＳ１２０统计分析软件整理、分析数据，
计量资料以 珋ｘ±ｓ表示，正态性检验采用 ＯｎｅＳａｍｐｌｅ
ＫＳ检验，方差齐性检验采用 Ｌｅｖｅｎｅ检验，若数据
符合正态分布，方差齐，则应用 ＯｎｅＷａｙＡＮＯＶＡ判
断其显著性，反之则采用 ＴｗｏＩｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔＳａｍｐｌｅｓ
Ｔｅｓｔｓ判断其显著性。
３ 结果
３．１ 对心肌缺血小型猪冠状动脉ＬＡＤ栓塞的影响
造模６ｄ后，模型动物冠状动脉 ＬＡＤ基本栓
塞，各组给药６ｄ后，双参１６ｍｇ·ｋｇ－１剂量可明显
减轻小型猪冠状动脉ＬＡＤ自体血栓栓塞的程度，双
参８ｍｇ·ｋｇ－１剂量亦有减轻小型猪冠状动脉 ＬＡＤ
栓塞程度的作用，但作用稍弱（图１）。
图１ 各组心肌缺血小型猪冠状动脉造影
Ａ．正常ＬＡＤ；Ｂ．ＬＡＤ栓塞后即刻，箭头所指为栓塞部位；Ｃ．模型猪６ｄ后ＬＡＤ仍栓塞，箭头所指为栓塞部位；Ｄ．双参１６ｍｇ·ｋｇ－１用药
６ｄ血管栓塞减轻；Ｅ．双参８ｍｇ·ｋｇ－１用药６ｄ血管栓塞减轻
３．２ 对心肌缺血小型猪血流动力学的影响 各给药组术前、药后６ｄ分别进行血流动力学
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检测，各组术前后对比结果显示，模型组药后 ６ｄ
ＣＯ，ＣＩ，ＬＣＷ和ＬＣＷＩ明显降低，与模型组术前比较
均有显著的统计学差异（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１）；双参
８ｍｇ·ｋｇ－１剂量组药后 ６ｄＭＡＰ，ＣＯ，ＣＩ，ＬＣＷ和
ＬＣＷＩ明显降低，与术前比较均有显著的统计学差
异（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１）。各给药组药后６ｄ与模型
组药后６ｄ血流动力学指标对比结果显示，双参１６
ｍｇ·ｋｇ－１剂量可增加模型动物 ＣＯ，ＣＩ，ＬＣＷ和 ＬＣ
ＷＩ，降低ＳＶＲ和ＳＶＲＩ，双参８ｍｇ·ｋｇ－１剂量可增加
模型动物ＣＯ，ＣＩ和ＬＣＷＩ。说明模型动物心功能下
降，血流动力学异常，各组给予治疗药物后具有改善
血流动力学各参数的作用（表１）。
表１ 各给药组术前、药后６ｄ后对心肌缺血小型猪血流动力学的影响（珋ｘ±ｓ）
组别 剂量／ｍｇ·ｋｇ－１ ＭＡＰ／ｍｍＨｇ ＣＯ／Ｌ·ｍｉｎ－１ ＣＩ／Ｌ·ｍｉｎ·ｍ－２ ＳＶＲ／ｄｙｎ·ｓ·ｃｍ５
术前 模型 － １１０２０±１４３７ ２１４±０７１ １８７±０５７ ４３０８±１８５４
双参 １６ １１３５０±１０３３ １７８±０３０ １６９±０２３ ４９６５±９０６
８ １１５１１±８４９ １８１±０１４ １７５±００５ ４６９５±５９６
药后６ｄ 模型 － １０２８７±１４６７ １４３±０１２１） １２５±００６１） ５８０４±４８１
双参 １６ １０６１１±１５４３ １８６±０３１４） １７６±０２１４） ４４８４±６８５４）
８ ９６５０±６８９２） １５７±０１６１，３） １５２±０２０１，３） ５４３２±８００
组别 剂量／ｍｇ·ｋｇ－１ ＳＶＲＩ／ｄｙｎ·ｓ·ｍ２·ｃｍ５ ＬＣＷ／ｋｇ·ｍ ＬＣＷＩ／ｋｇ·ｍ·ｍ－２ ＨＲ／ｂｅａｔ·ｍｉｎ－１
术前 模型 － ４８６９±２０３１ ３０１±１０１ ２６３±０８１ １１３４０±１３１７
双参 １６ ５１９４±７５２ ２５１±０４２ ２３８±０３２ １１３５６±３００５
８ ４８３４±４２１ ２５５±０１９ ２４７±００８ １２２８５±２２０９
药后６ｄ 模型 － ６５９０±３５４ ２０１±０１６１） １７７±００９１） １０５２７±３２１９
双参 １６ ４６９６±５６８４） ２６２±０４３３） ２４８±０３０４） １０８６２±２９９３
８ ５６４４±１１１４ ２２１±０２３１） ２１４±０２８１，３） １３０３０±３７１４
注：与术前自身比较１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１；与模型药后６ｄ比较３）Ｐ＜００５，４）Ｐ＜００１
３．３ 对心肌缺血小型猪血浆 ＳＯＤ活性、ＭＤＡ含量
的影响
各组造模给药６ｄ后，１６ｍｇ·ｋｇ－１剂量可增加
血浆ＳＯＤ活性，降低血浆ＭＤＡ含量，与模型组比较
有显著的统计学差异（Ｐ＜００５），显示出较好的抗
氧化作用（表２）。
表２ 各给药组对心肌缺血小型猪血浆ＳＯＤ活性，
ＭＤＡ含量的影响（珋ｘ±ｓ）
组别 剂量／ｍｇ·ｋｇ－１ ＳＯＤ／Ｕ·ｍＬ－１ ＭＤＡ／ｎｍｏｌ·ｍＬ－１
模型 － ３４３６±１２６４ ２２１±１００
双参 １６ ４８７６±１０１８１） １１６±０６９１）
８ ４６８４±１１８３ １６２±０６９
注：与模型组比较，１）Ｐ＜００５
３．４ 对心肌缺血小型猪心肌病理组织学的影响
模型组小型猪经ＬＡＤ内注入自体血栓６ｄ后，
可见心肌变性、坏死，缺失区被纤维组织替代填充，
在坏死的心肌纤维之间及心肌纤维与肉芽组织交界
区见大量嗜中性粒细胞浸润。给予双参６ｄ后，心
肌病理组织学观察，变性和坏死有所减轻，但仍可见
心肌组织缺失，被肉芽组织替代，部分心肌组织间见
嗜中性粒细胞浸润（图２）。
４ 讨论
自体血栓注射造模的方法在药理学研究中广泛
图２ 各组心肌缺血小型猪心肌病理组织学观察（ＨＥ，×４０）
Ａ．模型对照组小型猪心肌纤维间见大片纤维组织增生及大
量炎性细胞浸润，并见灶性心肌组织缺失，被肉芽组织替代和添
充；Ｂ．双参１６ｍｇ·ｋｇ－１剂量组小型猪心肌纤维间部分纤维组
织增生及炎性细胞浸润；Ｃ．双参８ｍｇ·ｋｇ－１剂量组小型猪心肌
纤维间见部分纤维组织增生及炎性细胞浸润
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应用，如肺栓塞模型［５］、脑梗塞模型［６］等，具有同源
性，减少排异等特点。应用心导管介入技术，在小型
猪ＬＡＤ内注入了自体血栓的方法成功制备了心肌
缺血模型，此种方法造成的血管栓塞可靠、稳定，６ｄ
后，模型组心肌缺血小型猪ＬＡＤ仍栓塞［７］。
中药有药源广和不良反应轻的特点。多年来从
中医学的活血化瘀、消食化痰、软坚散结、通腐化浊
等理论出发，结合现代药理研究方法，研制了不少抗
动脉粥样硬化、抗血栓作用的药物，它们在临床应用
后能发挥调节血脂、防治血栓等疗效。本次实验结
果显示给予双参６ｄ后，双参有明显减轻心肌缺血
小型猪冠状动脉ＬＡＤ自体血栓栓塞的程度，具有较
好的活血化瘀，抗血栓栓塞的作用。
近２０年来，临床上评价心功能主要采用肺动脉
导管（ＰＡＣ）和超声法。热稀释法连续侧定心排量
是公认的“金标准”［８］。然而，此方法也有其本身的
不足之处，如此方法属有创检查，易致心律失常，一
般以室性早搏最多见，还可见肺梗死，肺小动脉破裂
和出血，另外检测费用昂贵［９，１０］。因此，寻找一种安
全、方便、准确、价廉的方法一直是努力研究的方向。
在动物实验中，若需多次监测血液动力学参数，也要
求检测方法无创、准确、对动物影响小。Ｂｉｏｚ．Ｃｏｍ
无创血流动力学监测系统是建立在胸电生物阻抗测
量理论基础上，运用先进的 ＤＩＳＱＴＭ技术及专利的
ＺＭＡＲＣＴＭ算法，提供血液动力学参数的创新型无
创心功能监护产品，极大地提高了该系统的准确性。
此方法与传统的热稀释法所测得的心排量的相关
性，国外已有很多报道，通过对影响ＣＯ相关性的各
个因素的全面分析，其心功能参数相关性系数 ｒ＝
０９３，心功能参数变化的相关性系数 ｒ＝０９５，证明
了胸电生物阻抗法与漂浮导管热稀释法所测得的心
排量参数有很好的相关性［１１］。
心梗后心功能的下降，常常是因为具有完整舒
缩功能的心肌细胞代谢异常、数量的丧失及梗死心
肌纤维结缔组织瘢痕的形成和扩大［１２］。血流动力
学参数后负荷指标 ＳＶＲ的改变，可影响每搏量，每
搏量和ＨＲ共同影响心脏的 ＣＯ，而 ＣＯ是评价左心
功能的重要指标。小型猪 ＬＡＤ注入自体血栓后，
ＣＯ和ＣＩ、左心做功指标ＬＣＷ和ＬＣＷＩ降低，提示心
肌缺血小型猪心肌细胞数量丧失，代谢异常，结缔组
织瘢痕形成和扩大，舒缩功能障碍，左心做功能力下
降；双参可降低心肌缺血小型猪心脏后负荷指标
ＳＶＲ和ＳＶＲＩ，增加ＣＯ，因此双参具有降低血流动力
学前后负荷的作用，在改善心肌收缩功能的同时还
可以增加左心做功能力，改善心肌细胞代谢，抑制心
肌结缔组织瘢痕形成，恢复正常的舒缩功能，从而改
善左心功能。
心肌缺血时自由基的产生与心肌细胞的损伤之
间的关系，及自由基清除剂与心肌细胞的保护作用
之间的关系的研究倍受关注。氧自由基的产生与心
肌缺血损伤的病理过程有关。心肌缺血时氧自由基
的生成增加，而氧自由基清除酶（ＳＯＤ、过氧化氢酶、
谷胱甘肽过氧化物酶等）的活性降低，导致氧自由
基堆积，氧自由基可转变为羟基自由基，后者活性更
强，使膜脂质过氧化，引起细胞膜的结构和功能损
害，从而加剧缺血心肌组织损伤［１３］。各组造模给药
６ｄ后，双参显示出较好的抗氧化作用，可增加血浆
ＳＯＤ活性，降低血浆 ＭＤＡ含量，与模型对照组比较
有显著的统计学差异。提示双参通过减少心肌缺血
缺氧时自由基的生成，抑制心肌细胞膜的脂质过氧
化，减轻心肌细胞膜结构的损害，从而改善心肌细胞
功能。
病理组织学显示模型对照组小型猪经 ＬＡＤ内
注入自体血栓６ｄ后，可见心肌变性、坏死，缺失区被
纤维组织替代填充，在坏死的心肌纤维之间及心肌
纤维与肉芽组织交界区见大量嗜中性粒细胞浸润，
血管腔充满血栓。心肌缺血小型猪给予双参 ６ｄ
后，心肌病理组织学观察，变性和坏死有所减轻，但
仍可见心肌组织缺失，被肉芽组织替代，部分心肌组
织间见嗜中性粒细胞浸润。双参具有一定改善心肌
缺血小型猪心肌病理组织学的作用。
综上所述，双参可通过抗血栓栓塞，降低前后负
荷，改善心肌收缩功能，增加左心做功，减少心肌缺
血缺氧时自由基的生成，抑制心肌细胞膜的脂质过
氧化，抑制心肌病理改变，恢复正常心功能，发挥抗
心肌缺血的作用。
［参考文献］
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ｖａｓｃｕｌａｒｂｅｄｒｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｒａｔｓｗｉｔｈａｎｄｗｉｔｈｏｕｔｈｅａｒｔｆａｉｌｕｒｅｆｏｌ
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