全 文 :图 x 第 u次 ≥≤≤≤色谱峰 ´ χ各管纯度
k¤q纯度 o¥q制备量 l
4 小结
本研究结合大孔吸附树脂预处理 o经过 u次高
速逆流色谱分离从喜树叶粗提物中分离制备出纯度
达到 |z1||h的喜树碱单体 ∀为喜树叶中喜树碱分
离制备提供了一条新的技术路线 ∀
≈参考文献
≈t • ¤¯¯ ∞o• ¤±¬ ≤o ≤²²® ≤ ∞o ·¨¤¯q ° ¤¯±·¤±·¬·∏°²µ¤ª¨ ±·¶q q
׫¨ ¬¶²¯¤·¬²± ¤±§¶·µ∏¦·∏µ¨ ²©¦¤°³²·«¨ ¦¬±o ¤±²√¨¯ ¤¯®¤¯²¬§¤¯ ¯¨ ∏2
®¨ °¬¤¤±§·∏°²µ¬±«¬¥¬·²µ©µ²° Χαµ πτοτηεχα αχυµ ινατα≈ q 2
° µ¨≤«¨ ° ≥²¦o t|yyo{{ktyl}v{{{q
≈u 王瑞芳 o欧来良 o孔德领 o等 q大孔吸附树脂对喜树果中喜树碱
和喜果苷的分离纯化研究 ≈ q中草药 oussxovykyl}{w|q
≈v 王 萍 o王博文 o王 倩 o等 q大孔吸附树脂分离喜树碱的研究
≈ q林业科技 oussxovskyl}xuq
≈w 祝顺琴 o谈 锋 q高速逆流色谱在天然产物分离中的应用 ≈ q
中国医药工业杂志 qussxovyktul}z{{q
≈x 张丽艳 o杨玉琴 o反相高效液相色谱法测定喜树果实中喜树碱
的含量 ≈ q中国中药杂志 ot||zouukwl}uvwq
≈y ²±ª ¨ ¬±o ²¨©©µ¨¼ o ≤²µ⁄¨¯ q¯ ± ∏¬±²¯¬±¨ ¤¯®¤¯²¬§¶©µ²°
Χαµ πτοτηεχα αχυµ ινατα≈ q °«¼·²¦«¨ °¬¶·µ¼o t|{|ou{kwl}tu|xq
≈责任编辑 鲍 雷
千里光化学成分研究
史 辑 t o张 芳 uov o马鸿雁 t o王长虹 uov3 o侴桂新 uov o
张 勉 t o张朝凤 t o王峥涛 touov
ktq中国药科大学 中药学院 o江苏 南京 utsss|~
uq上海中医药大学 中药标准化教育部重点实验室 o上海 ustusv~
vq上海中药标准化研究中心 o上海 ustusvl
≈收稿日期 ussy2tu2tv
≈基金项目 国家自然科学基金重点项目 kvsxvs{wsl~国家自
然科 学 基 金 项 目 k vsxzuuuu l~国 家 科 技 攻 关 计 划 项 目
kussw
zuµtul~上海市重点学科建设项目 k≠svstl
≈通讯作者 3 王长虹 oר¯}ksutlxtvuuxtvoƒ¤¬}ksutlxtvuux
t|o∞2°¤¬¯}º¦«¦¬° tyvq¦²°
千里光 Σενεχιο σχανδενσ
∏¦«q2¤°q为菊科千
里光属植物 ∀我国约有 tss多种 o广泛分布于全国
各地 ∀千里光为常用草药 o其味苦 o性寒 o具有清热
解毒 o杀虫明目之功效 ≈t ∀药理研究表明千里光全
草具有抗菌消炎的作用 ∀目前国内学者对千里光的
化学成分研究较少 ∀作者对千里光全草进行了系统
的化学成分研究 o从乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部
分分离得到了 y个化合物 o鉴定其结构分别为齐墩
果醇 k1lo对羟基苯乙酸 k2lo槲皮素 k3low2k吡咯
烷 2u2酮基 l2x2甲氧基 2苯基乙酸 k4lo消旋丁香脂素
k5lo大黄素 k6l∀其中化合物 4为新天然产物 o化
合物 3o5为首次从该植物中分离得到 o化合物 6为
首次自该属中分离得到 ∀
1 仪器和材料
µ∏®¨ µ xss型核磁共振仪 o× ≥为内标物 ~
ƒ¬±±¬ª¤± p ≤±⁄∞≤型质谱仪 ~÷w显微熔点测定仪
k未校正 l∀柱色谱用硅胶 ktss ∗ uss目 ouss ∗ vss
目 ovss ∗ wss目 l均为烟台汇友硅胶开发有限公司
出品 ~≥ ³¨«¤§¨ ¬ p us为 °«¤µ°¤¦¬¤公司产品进口
分装 ~其余试剂均为分析纯 ∀
样品于 ussx年 w月采自广西省荣安县 o原植物
经吴立宏博士鉴定为 Σ. σχανδενσ∀凭证标本保存于
上海中药标准化中心标本室 ∀
2 提取分离
千里光全草 y ®ªo{sh乙醇回流提取 v次 o提取
液合并 o减压浓缩得浸膏 o以少量水混悬后 o依次用
石油醚 !醋酸乙酯 !正丁醇萃取 o得到相应萃取物 ∀
醋酸乙酯萃取物 uxs ª经硅胶柱色谱分离 o氯仿 2甲
#ssyt#
第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ tx
∏ª∏¶·o ussz
醇 ktssΒs ∗ xsΒxsl梯度洗脱 o共收集 uus个流分 o
每流分约 xss °∀ ƒµq| ∗ tt经硅胶柱色谱石油醚 2
醋酸乙酯 kusΒtl洗脱纯化得化合物 1 kuzs °ªlo化
合物 6 kx °ªl∀ ƒµqvs ∗ xt经硅胶柱色谱石油醚 2丙
酮 ktsΒtl洗脱 o再经 ≥ ³¨«¤§¨ ¬ p us氯仿 2甲醇
ktΒtl纯化得化合物 2 kts °ªl∀ ƒµqz| ∗ tss经硅
胶柱色谱石油醚 2醋酸乙酯 ktΒtl洗脱 o再经 ≥ ³¨«¤2
§¨ ¬ p us甲醇纯化得化合物 4 kts °ªl∀
ƒµqtuv ∗ txs经硅胶柱色谱氯仿 2丙酮 kxΒtl和 ≥ ³¨«2
¤§¨ ¬ pus甲醇纯化得化合物 3 kvs °ªl和化合
物 5 kuv °ªl∀
3 结构鉴定
化合物 1 白色粉末 k石油醚 2醋酸乙酯 lo∞≥2
≥ µ / ζ}wu|≈ n t n ~tv ≤ 2 k≤⁄≤ v¯ otss ½l
∆}v{1xk≤ 2tlouz1sk≤ 2uloz{1|k≤ 2vlov{1zk≤ 2wlo
xx1tk≤ 2xlot{1v k≤ 2ylovu1y k≤ 2zlov|1z k≤ 2{lo
wz1y|≤ 2|lovz1s k ≤ 2tslouv1w k ≤ 2ttlotut1z k ≤ 2
tulotwx1∀ k≤ 2tvlowt1zk≤ 2twlou{1vk≤ 2txlouy1u
k≤ 2tylovu1x k≤ 2tzlowz1u k≤ 2t{lowy1{ k≤ 2t|lo
vt1tk≤ 2uslovw1{ k≤ 2utlovz1u k≤ 2uulou{1t k≤ 2
uvlotx1xk≤ 2uwlotx1xk≤ 2uxloty1{k≤ 2uylouy1s
k≤ 2uzlouz1vk≤ 2u{lovv1uk≤ 2u|louv1yk≤ 2vsl∀以
上数据与文献 ≈u 报道基本一致 o故确定为齐墩果
醇 ∀
化合物 2 无色针晶 k甲醇 lo°³tw{ ∗ txs ε o
∞2 ≥ µ / ζ}txuo三氯化铁 p铁氰化钾 !溴钾酚绿反
应均为阳性 o提示为含有酚羟基的羧酸类化合物 ∀
t 2 谱显示苯环对位取代的特征偶合系统 }z1sz
ku o§oϑ {1x ½l∀t 2 k≤⁄v ⁄oxss ½l∆}
z1szku o§oϑ {1x ½o 2uoyloy1ztku o§oϑ {1y
½o 2voxlov1wzku o¶o 2zl∀tv ≤ 2 k≤⁄v ⁄o
tux ½l∆}tzy1tk≤ 2{lotxz1wk≤ 2wlotvt1vk≤ 2uo
ylotuy1{k≤ 2tlotty1uk≤ 2voxlowt1tk≤ 2zl∀以上
数据与文献 ≈v 报道基本一致 o确定为对羟基苯乙
酸 ∀
化合物 3 淡黄色粉末 k甲醇 lo°³ vts ∗ vtu
ε o∞≥2 ≥ µ / ζ}vst≈ p p o∂ k∞· l±°}uxyo
vzy∀t 2 k⁄ ≥ 2δy oxss ½l∆}z1{ukt o§o
ϑ t1x ½o 2uχloz1zskt o§§oϑ {1xot1x ½o 2
yχloy1||kt o§oϑ {1x ½o 2xχloy1xukt o¶o 2
{lo y1uy kt o ¶o 2yl~tv ≤ 2 k ⁄ ≥ 2§yo tux
½l∆}tw{1y k≤ 2ulotvy1| k≤ 2vlotzy1{ k≤ 2wlo
tyu1yk≤ 2xlo||1wk≤ 2ylotyx1vk≤ 2zlo|w1yk≤ 2{lo
tx{1sk≤ 2|lotsw1vk≤ 2tslotuv1|k≤ 2tχlotty1wk≤ 2
uχlotwy1t k ≤ 2vχlo twz1u k ≤ 2wχlo ttx1| k ≤ 2xχlo
tut1zk≤ 2yχl∀以上数据与文献 ≈w 报道基本一致 o
故确定为槲皮素 ∀
化合物 4 白色片晶 k甲醇 l∀溴甲酚绿 !茚三
酮反应均呈阳性 ∀ ∞≥2 ≥ µ / ζ}uxs≈ n n o含有
奇数个氮 ∀t 2 k× ≥r≤⁄v ⁄oxss ½l∆}u1wz
ku o·oϑ z1| ½o 2uχlou1swku o³oϑ z1| ½o
2wχlov1{sku o·oϑ z1| ½o 2xχlov1xuku o¶o
2zlov1zskv o¶o 2|loz1wwkt o§oϑ u1v ½o 2
uloz1vskt o§§oϑ u1vo{1w ½o 2vloy1|skt o
§oϑ {1w ½o 2yl~tv ≤ 2 k × ≥r≤⁄v ⁄otux
½l∆}tvu1w k≤ 2tlott|1t k≤ 2vlotzw1u k≤ 2uχlo
tzw1sk≤ 2{lotxu1wk≤ 2xlotuv1{k≤ 2ulotut1xk≤ 2
wlotut1tk≤ 2yloxu1zk≤ 2|low|1wk≤ 2xχlovz1xk≤ 2
zlovu1wk≤ 2vχlot{1sk≤ 2wχl∀参照文献 ≈x o确定
为 w2k吡咯烷 2u2酮基 l2x2甲氧基 2苯基乙酸 o为一新
的天然产物 ∀
化合物 5 黄色油状液体 ∀ ∞≥2 ≥ µ / ζ}
wt|k n n l~t 2 k× ≥r≤⁄v ⁄oxss ½l∆}
y1yskt o¶o 2uouχloy1ys kt o¶o 2yoyχlow1ys
kt o§ow1u ½o 2zozχlov1sw kt o°o 2{o{χlo
w1txkt o§§o{1woy1y ½o 2|o|χlov1zykt o§§o
{1wov1u ½o 2|o|χlov1|w kv o¶ovovχ2≤v lo
v1|wkv o¶oxoxχ2≤v l~tv ≤ 2 k× ≥r≤⁄v ⁄o
tux ½l∆}tvt1vk≤ 2totχlotsv1xk≤ 2yoyχlo{y1v
k≤ 2zozχloxw1uk≤ 2{o{χlozt1sk≤ 2|o|χloxy1wkvovχ2
≤v loxy1wkxoxχ2≤v l∀以上数据与文献 ≈y 数
据基本一致 o故确定为消旋丁香脂素 ∀
化合物 6 橙红色晶体 k丙酮 lo°³ uyy ∗ uy{
ε o∞≥2 ≥ µ / ζ}uzsot 2 k⁄ ≥ 2δy owss ½l
∆tt1v|ott1|{otu1syk ¬vloz1wykt o§oϑs1{
½loz1twkt o§oϑ s1{ ½loz1s|kt o§§oϑ
u1wot1u ½loy1xzkt o§§oϑ u1wot1u ½lou1v|
kv o¶o≤v ~tv ≤ 2 k⁄ ≥ 2δy otss ½l∆}tyw1u
k≤ 2tlotsz1{ k ≤ 2ulotyx1v k ≤ 2vlots{1y k ≤ 2wlo
tvw1|k≤ 2w¤lotus1vk≤ 2xlotw{1tk≤ 2ylotuw1sk≤ 2
zlotyt1uk≤ 2{lottv1uk≤ 2{¤lot{|1wk≤ 2|lots{1{
k≤ 2|¤lot{t1tk≤ 2tslotvu1yk≤ 2ts¤lout1yk≤v l∀
以上数据与文献 ≈z 所报道基本一致 o故确定为大
黄素 ∀
#tsyt#
第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ tx
∏ª∏¶·o ussz
≈参考文献
≈t 江苏新医学院 q中药大辞典 ≈ q上海 }上海人民出版社 o
t|zz}utvq
≈u 于德泉 o杨峻山 q分析化学手册 ≈ qu版 q第 z分册 q北京 }化
学工业出版社 ot|||}z|yq
≈v 廖志新 o王明奎 o彭树林 o等 q菱叶紫菊的化学成分 ≈ q药学学
报 oussuovzktl}vzq
≈w ¤µ¥²µ±¨
o ¤¥µ¼ × q ׫¨ ƒ ¤¯√²±²¬§¶} ¤§√¤±¦¨¶¬± µ¨¶¨¤µ¦«
≈ q ¨ º ≠ ²µ®} ≤«¤³°¤± ¤±§ ¤¯ o¯ t|{uq
≈x ¬≥¤·²∏o ≥∏½∏®¬²¥∏«¬µ²o ¶²¤½∏¼²¶«¬o ·¨¤¯q °µ¨³¤µ¤·¬²± ²©
¤µ²°¤·¬¦¤°¬±¨ §¨ µ¬√¤·¬√ ¶¨¤±§ ¤ª¨ ±·¶¦²±·¤¬±¬±ª ·«¨ ¶¤° ≈¨ ° q
°≤× ±·o ussso ³³¯o vs|q
≈y ²¯¤§≥ ⁄o ²©©°¤±± o ≤ ²¯¨ 1 ≤¼·²·²¬¬¦¤ª¨ ±·©µ²° Πενστε2
µ ον δευστυσk≥¦µ²³«∏¯¤µ¬¤¦¨¤¨ l} ¬¶²¯¤·¬²± ¤±§ ¶·¨µ¨²¦«¨ °¬¶·µ¼ ²©
¬¯µ¬²§¨ ±§µ¬±o ¤¶¼°° ·¨µ¬¦¤¯ ¼¯ ¶∏¥¶·¬·∏·¨§©∏µ²©∏µ¤±²¬§ ¬¯ª±¤± §¬ª¯∏2
¦²¶¬§¨ ≈ q µª≤«¨ °o t|{sowxkzl}tvuzq
≈z 赵 明 o段金廒 o黄文哲 o等 1≥·¨µ²¬§¶¤±§ ¤±·«µ¤´ ∏¬±²± ¶¨©µ²°
Αστραγαλυσηοαντχηψ≈ 1中国药科大学学报 oussvovwkvl}utyq
≈责任编辑 戴 畅
扶正消癥汤治疗胃癌的机制研究
叶 人 o蔡慎初 3 o尹丽慧 o王海波 o徐晓峰 o项祖闯 o郎 玮
k温州医学院 附属第一医院 o浙江 温州 vuxsssl
≈收稿日期 ussy2tt2ts
≈通讯作者 3 蔡慎初 oר¯}ksxzzl{{sy|uw|
胃癌是临床常见的肿瘤之一 o其发生 !发展和转
归与细胞凋亡有密切关系 o其实质是细胞增殖与凋
亡的失衡 o即增殖过度或凋亡不足 ∀
扶正消癥汤 k≤≥2tl是蔡慎初教授临证 ws年的
经验总结 o是根据扶正祛邪原则组方 o在临床上治疗
胃癌疗效显著 ∀为探讨其作用机制 o本实验观察其
对 ≥≤ 2z|st细胞增殖 !细胞周期凋亡的影响 o研究
该中药方剂抗癌的可能作用机制 o旨在为其更广泛
的应用于临床提供有力的实验依据 ∀
1 材料
1q1 细胞株和细胞培养
胃癌细胞 ≥≤ 2z|st购自中国科学院上海生化
和细胞生物研究所 ∀将 ≥≤ 2z|st细胞接种于含
tsh胎牛血清 !tss # °pt青霉素和 tss # °pt
链霉素的 ° tyws培养液中 ovz ε oxh ≤u !饱和
湿度的培养箱中培养 o每 u ∗ v §换液 t次 o长满单
层后常规胰蛋白酶消化法传代培养 ∀
1q2 ≤≥2t水煎剂的制备
≤≥2t由黄芪 !人参 !温莪术 !藤梨根 !露蜂房 !苏
铁叶 !八月扎 !白毛藤 !徐长卿 !当归 !草豆蔻等药物
组成 ∀经三蒸水漂洗 v次 o于烧杯中煎煮 vs °¬±o去
渣 o{层纱布过滤 o浓缩成含生药 t1s ª# °pt o调
³ z1s ∗ z1uow ε 保存备用 ∀
1q3 主要试剂
° tyws购自美国
≤公司 ~胎牛血清为
天津市正江高科技有限公司产品 ~青霉素为石家庄
制药集团有限公司产品 ~链霉素为华北制药股份有
限公司产品 ~v2kwox2二甲基噻唑 l2uox2二苯基氮唑
溴盐 k ××l购自华美生物工程公司 ~二甲亚砜为江
苏鸿声化工厂生产的分析纯试剂 ~胰蛋白酶使用
≥¬ª°¤公司产品 ~≤¼¦¯ ר∞≥×× °≥ ⁄ ¤¨ª¨ ±·¬·
购自
¦¨·²± ⁄¬¦®¬±¶²±公司 ∀
1q4 主要仪器
倒置相差显微镜 o德国 ¨¬¦¤~酶标仪 ∞¬{sso
美国 ~流式细胞仪 ƒ≤≥ ≤¤¯¬¥∏µo
¦¨·²± ⁄¬¦®¬±¶²±公
司 ~透射电镜日立 zxss∀
2 方法
2q1 ≤≥2t对胃癌细胞增殖的抑制作用
取培养第 w代的 ≥≤ 2z|st细胞共接种 u块 |y
孔板 o每孔接种 y ≅ tsv个 r°细胞 ouw «后分别加
入 sotsousows °ª# °pt的 ≤≥2to每组 z复孔 o分别
继续培养 w{ozu «后 o各取出一块 |y孔板 o ××法
检测存活细胞吸光度 kΑlo并按下列公式计算细胞
存活率 o由细胞存活率与药物浓度作图 o求出半数抑
制浓度 k≤xs l∀
细胞存活率 kh l k实验组 Αr对照组 Αl ≅ tssh
#usyt#
第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ tx
∏ª∏¶·o ussz