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Analysis of volatile oil in herb of Pimpinella candolleana by SPME-GC-MS

杏叶防风挥发油成分SPME-GC-MS分析



全 文 :BioactiveconstituentsinhibitingTNFαproductioninfreshrhizome
ofPineliaternata
HANMeihua1,YANGXiuwei1,ZHONGGuoyue2,ZHANGMing2
(1.StateKeyLaboratoryofNaturalandBiomimeticDrugs,DepartmentofNaturalMedicine,
SchoolofPharmaceuticalSciences,PekingUniversity,Beijing100083,China;
2.ChongqingAcademyofChineseMateriaMedica,Chongqing400065,China)
[Abstract] Objective:TostudythebioactiveconstituentsofthefreshrhizomeofPineliaternata,andprovidethescientific
basisforqualitycontrol.Method:Variouschromatographictechniqueswereusedtoseparateandpurifythechemicalconstituents,and
theirchemicalstructuresweredeterminedonthebasisofphysicalchemicalpropertiesandspectroscopicanalysis.Theinhibitoryefects
oftheisolatedcompoundsontumornecrosisfactor(TNF)αproductionintheperitonealmacrophagesofmicestimulatedwithlipopo
lysaccharide(LPS)wereassayedinvitrobymicroplatecolorimetricmethod.Result:Ninecompoundswereisolatedandidentifiedas
(E)pcoumarylalcohol(1),3,4dihydroxycinnamylalcohol(2),ferulicacid(3),lariciresinol(4),erythroguaiacylglycerolβO
4′sinapylether(5),dehydrodiconiferylalcohol(6),isolariciresinol(7),sachaliside1(8)andconiferin(9).Theinhibitoryefect
ofcompounds1,2,3,8,and9were241%,576%,402%,827%,and620%,respectively,againsttheTNFαproductionin
theperitonealmacrophagesofmicestimulatedwithLPSataconcentrationof10-5mol·L-1invitro.Conclusion:Thecompounds1,
2and48fromgeneraPineliaTen.andcompound9fromP.ternatawereisolatedforthefirsttime.Thecompounds1,2,8and9
werephenylpropanoids,and47werelignanoids.TheantiinflammatoryefectsoftherhizomeofP.ternatamightrelateattheleastto
compounds1,2,3,8and9.
[Keywords] Pineliaternata;freshrhizome;chemicalconstituent;phenylpropanoid;lignanoid;TNFα
[责任编辑 牛泽宇]
[收稿日期] 20070312
[通讯作者] 周欣,Tel:(0851)6690018,Email:alice9800@
sina.com
杏叶防风挥发油成分 SPMEGCMS分析
赵 超1,陈华国1,程 力2,周 欣1,杨再波3,张怡莎1
(1.贵州师范大学 天然药物质量控制研究中心,贵州 贵阳 550001;
2.贵阳中医学院 第二附属医院,贵州 贵阳 550002;
3.黔南民族师范学院 化学与化工系,贵州 都匀 558000)
[摘要] 目的:分析杏叶防风挥发油化学成分。方法:利用固相微萃取气相色谱质谱(SPMEGCMS)联用技
术对杏叶防风挥发油成分进行研究。结果:共鉴定出65种化学成分,占挥发油总成分的9217%。结论:杏叶防风
挥发油主要化学成分是α姜烯(2482%),前盖介烯(1627%),β没药烯(482%),2异丙基5甲基9亚甲基二
环[4.4.0]萘烷1烯(403%),β倍半水芹烯(398%),反式β金合欢烯(368%),芳姜黄烯(354%)等。
[关键词] 杏叶防风;挥发油;固相微萃取;气相色谱质谱联用
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2007)17175904
  杏叶防风为伞形科杏叶防风 Pimpinelacan
doleanaWightetArn的全草,多年生草本植物,生于
路旁、林下、沟边、草坡或灌木丛中;分布于西南及广
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第32卷第17期
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    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.32,Issue 17
September,2007
西等地。其辛、微苦、性温,归肺、脾、胃、肝经。具有
温中散寒、行气止痛、驱风活血、解毒消肿等功
效[1,2]。杏叶防风全株有特异的香味,但其挥发油
的化学成分研究较少有报道,仅危英[3]等用水蒸气
蒸馏法对其进行研究。
固相微萃取技术(solidphasemicroextraction,
SPME)[4]是Pawliszyn等人于1990年提出的一项新
技术。此技术利用被测样品对活性固体表面(熔融
石英纤维表面的涂层)有一定的吸附亲和力而达到
分离、富集的目的。SPME具有分析样品使用量少、
对被测样品选择性高、溶质更易洗脱,几乎无空白值
和复现性好等特点。因此,本研究采用固相微萃取
装置提取杏叶防风的挥发油,并用气相色谱质谱联
用仪对其化学成分进行分析,共分离出109个化学
成分,鉴定了其中65个化合物。该方法相对于水蒸
气蒸馏提取法而言,检出化合物和鉴定化合物的数
量都大大增加,这将为进一步开发利用中药杏叶防
风提供科学依据。
1 实验部分
1.1 仪器及材料
HP6890GC/5973MS气相色谱质谱联用仪(美
国惠普公司)。手动固相微萃取(SPME)装置(美国
Supelco公司),萃取纤维头为 65μmPDMS/DVB。
药材采于贵州省龙里县,经贵阳中医学院魏升华教
授鉴定为杏叶防风P.candoleana。
1.2 SPME条件
取少许药材的根部用剪刀剪碎,置于专用采样
瓶中,插入装有65μmPDMSDVB纤维头的手动进
样器,磁力搅拌速度1100r·min-1,90℃下顶空萃
取保持30min取出,立即插入色谱仪进样口(温度
250℃)中,脱附30min。
1.3 GCMS条件
色谱柱为 HP5MS石英弹性毛细管柱(025
mm×30m,025μm);载气为高纯氦(99999%),
流量1mL·min-1;进样口温度250℃;色谱柱初始
温度50℃(保持1min),以5℃·min-1升温速率升
至210℃(保持 10min);不分流进样。电离方式
EI,能量70eV;离子源温度230℃;四极杆温度150
℃;传输线温度280℃;质量范围m/z10~350;电子
倍增器电压1768V。谱图检索:采用Nist98和Wi
ley275L谱库进行检索。
2 结果与讨论
2.1 实验结果
按上述实验条件进行实验,HPMSD化学工作站
给出总离子流图。对总离子流图中的各峰经质谱扫
描后得质谱图,经过质谱计算机数据系统检索及核
对标准质谱图,并查对有关质谱资料[4],从而确定
出杏叶防风挥发油中的65种化学成分,并用峰面积
归一化法测定了各化学成分在挥发油中的相对百分
含量。结果列于表1。
表1 杏叶防风挥发油的化学成分
No.
tR
/min
化合物名称
相对含量
/%
相对分子
质量
分子式
1 433 2甲基丁酸乙酯2methylbutanoicacidethylester 002 130 C7H14O2
2 457 2甲基辛烷 2methyloctane 026 128 C9H20
3 532 壬烷 nonane 007 128 C9H20
4 616 α蒎烯 αpinene 019 136 C10H16
5 707 3甲基壬烷 3methylnonane 002 142 C10H22
6 717 香桧烯 sabinene 014 136 C10H16
7 726 β蒎烯 βpinene 295 136 C10H16
8 761 β月桂烯 βmyrcene 019 136 C10H16
9 831 α松油烯 αterpinen 003 136 C10H16
10 853 对伞花烯 pcymene 113 134 C10H14
11 918 反式β罗勒烯 transβocimene 002 136 C10H16
12 950 γ松油烯 γterpinene 205 136 C10H16
13 960 2甲基癸烷 2methyldecane 030 156 C11H24
14 1063 十一烷 undecane 106 156 C11H24
15 1167 3,4二乙烯基3甲基环己烯3,4diethenyl3methylcyclohexene 275 148 C11H16
16 1197 前盖介烯 pregeijerene 1627 162 C12H18
17 1343 十二烷 dodecane 002 170 C12H26
18 1431 麝香草基甲醚 thymylmethylether 106 164 C11H16O
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续表1
No.
tR
/min
化合物名称
相对含量
/%
相对分子
质量
分子式
19 1444 1异丙基2甲氧基4甲苯1isopropyl2methoxy4methylbenzene 146 164 C11H16O
20 1462 对二异丙苯 pdisopropylbenzene 003 162 C12H18
21 1469 香芹酚甲醚 carvacrolmethylether 008 164 C11H16O
22 1510 1(1,1二甲基乙基)3乙基苯 1(1,1dimethylethyl)3ethylbenzene 007 162 C12H18
23 1520 2甲基十二烷2methyldodecane 099 184 C13H28
24 1583 三乙基苯 triethylbenzene 016 162 C12H18
25 1617 十三烷 tridecane 053 184 C13H28
26 1653 吉玛烯DgermacreneD 038 204 C15H24
27 1694 α古芸烯 αgurjunene 008 204 C15H24
28 1722 δ榄香烯 δelemene 001 204 C15H24
29 1754 α荜澄茄烯 αcubebene 001 204 C15H24
30 1779 丁香酚 eugenol 005 164 C10H12O2
31 1803 3甲基十三烷3methyltridecane 012 198 C14H30
32 1824 胡椒烯 copaene 082 204 C15H24
33 1847 白菖烯 calarene 160 204 C15H24
34 1860 反式4十四(碳)烯 trans4tetradecene 034 196 C14H28
35 1867 β榄香烯 βelemene 068 204 C15H24
36 1880 十四烷 tetradecane 015 198 C14H30
37 1926 γ依兰油烯 γmuurolene 214 204 C15H24
38 1939 β丁香烯 βcaryophylene 120 204 C15H24
39 1954 吉玛烯BgermacreneB 009 204 C15H24
40 1967 罗汉柏烯 thujopsene 025 204 C15H24
41 1976 α佛手柑油烯 αbergamotene 113 204 C15H24
42 2000 (±)吉诺米烯(±)gymnomitrene 228 204 C15H24
43 2029 反式β金合欢烯 transβfarnesene 368 204 C15H24
44 2043  2异丙基5甲基9亚甲基二环[4.4.0]萘烷1烯 403 204 C15H24
    2isopropyl5methyl9methylenebicyclo[4.4.0]dec1ene      
45 2049 二环倍半水芹烯 bicyclosesquiphelandrene 021 204 C15H24
46 2067 α紫穗槐烯 αamorphene 027 204 C15H24
47 2085 β花柏烯 βchamigrene 089 204 C15H24
48 2095 ar芳姜黄烯 arcurcumene 354 202 C15H22
49 2110 δ杜松油烯 δcadinene 007 204 C15H24
50 2141 α姜烯 αzingiberene 2482 204 C15H24
51 2163 β没药烯 βbisabolene 482 204 C15H24
52 2199 β倍半水芹烯 βsesquiphelandrene 398 204 C15H24
53 2212 α花柏烯 αchamigrene 045 204 C15H24
54 2220 β雪松烯 βhimachalene 077 204 C15H24
55 2232 β荜澄茄烯 βcubebene 007 204 C15H24
56 2255 榄香醇 elemol 018 222 C15H26O
57 2274 反式γ没药烯 transγbisabolene 009 204 C15H24
58 2433 表圆线藻烯 epizonarene 002 204 C15H24
59 2497 喇叭烯 ledene 003 204 C15H24
60 2509 广藿香醇 patchoulialcohol 004 222 C15H26O
61 2521 6(E),8(E)十七烷二烯6(E),8(E)heptadecadiene 004 236 C17H32
62 2791 十四酸乙酯 ethylmyristate 001 256 C16H32O2
63 3008  2(1′,2′环氧丙基)4甲氧基苯基2甲基丁醇酯 092 264 C15H20O4
    2(1′,2′epoxypropyl)4methoxyphenyl2methylbutanoate      
64 3055 棕榈酸甲酯 methylhexadecanoateester 002 270 C17H34O2
65 3187 棕榈酸乙酯 ethylhexadecanoateester 004 284 C18H36O2
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2.2 讨论
2.2.1 从杏叶防风根挥发油中分离出109个色谱峰,
鉴定了其中的65个成分,已鉴定成分占挥发油总量的
9217%,主要成分为萜类化合物。含量较高的是α姜
烯(2482%)、前 盖 介 烯 (1627%)、β没 药 烯
(482%)、2异丙基5甲基9亚甲基二环[4.4.0]萘
烷1烯(403%)、β倍半水芹烯(398%)、反式β金
合欢烯(368%)和芳姜黄烯(354%)。
2.2.2 本研究样品前处理方法采用固相微萃取技
术,该方法比水蒸气蒸馏法的条件温和、加热时间
短、其萃取纤维头对物质吸附和解吸附的能力都非
常好,主要分析实验药材的根部,药材产地不同,所
以鉴定的化合物数量优于文献[3]报道,部分相同
的化合物含量也有差别。
3 结论
采用固相微萃取气相色谱质谱联用技术分析
了杏叶防风根部挥发性化学成分,共分离出109个
色谱峰,确定了65种化学成分,主要为萜类化合物,
挥发油中的萜类化合物是存在于植物界的一大类化
合物,具有多种生物学活性,值得进一步研究。
[参考文献]
[1] 国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草[M].第5册.
上海:上海科学技术出版社,1999:1015.
[2] 贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量标准
[M].贵阳:贵州科技出版社,2003:385.
[3] 危 英,张 旭,危 莉,等.杏叶防风挥发油化学成分分析
[J]贵阳中医学院学报,2005,27(4):56.
[4] 丛浦珠.质谱在天然有机化合物中的应用[M].北京:科学出
版社,1987.
AnalysisofvolatileoilinherbofPimpinelacandoleanabySPMEGCMS
ZHAOChao1,CHENHuaguo1,CHENGLi2,ZHOUXin1,YANGZaibo3,ZHANGYisha1
(1.ResearchCenteroftheQualityControlofNaturalMedicines,GuizhouNormalUniversity,Guiyang550001,China;
2.TheSecondAfiliatedHospital,GuiyangTraditionalMedicalColege,Guiyang550002,China;
3.ChemistryandChemicalEngineeringDepartment,QiannanNormalUnivesityforNationalities,Duyun558000,China)
[Abstract] Objective:ToanalyzecomponentsofvolatileoilfromtheherbofPimpinelacandoleana.Method:Thecompo
nentsofvolatileoilwereinvestigatedbySPMEGCMS.Result:Sixtyfivecompoundswereidentifiedwhichaccountedfor9217% of
totalvolatileoil.Conclusion:Themainconstituentsintheessentialoilwereαzingiberene(2482%),pregeijerene(1627%),β
bisabolene(482%),2isopropyl5methyl9methylenebicyclo[4.4.0]dec1ene(403%),βsesquiphelandrene(398%),
transβfarnesene(368%),arcurcumene(354%).
[Keywords] Pimpinelacandoleana;volatileoil;SPME;GCMS
[责任编辑 牛泽宇]
[收稿日期] 20070314
[通讯作者] 屠鹏飞,Tel:(010)82802750,Email:pengfeitu@vip.163.com
鹿蹄草化学成分研究
刘 蕾1,陈玉平1,万 ?2,李安良1,李若瑜2,屠鹏飞1
(1.北京大学 药学院,北京 100083;
2.北京大学 第一医院皮肤性病科,北京大学 真菌和真菌病研究中心,北京 100034)
[摘要] 目的:研究鹿蹄草Pyrolacaliatha全草的化学成分。方法:采用硅胶及SephadexLH-20凝胶柱色谱
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