全 文 :BioactiveconstituentsinhibitingTNFαproductioninfreshrhizome
ofPineliaternata
HANMeihua1,YANGXiuwei1,ZHONGGuoyue2,ZHANGMing2
(1.StateKeyLaboratoryofNaturalandBiomimeticDrugs,DepartmentofNaturalMedicine,
SchoolofPharmaceuticalSciences,PekingUniversity,Beijing100083,China;
2.ChongqingAcademyofChineseMateriaMedica,Chongqing400065,China)
[Abstract] Objective:TostudythebioactiveconstituentsofthefreshrhizomeofPineliaternata,andprovidethescientific
basisforqualitycontrol.Method:Variouschromatographictechniqueswereusedtoseparateandpurifythechemicalconstituents,and
theirchemicalstructuresweredeterminedonthebasisofphysicalchemicalpropertiesandspectroscopicanalysis.Theinhibitoryefects
oftheisolatedcompoundsontumornecrosisfactor(TNF)αproductionintheperitonealmacrophagesofmicestimulatedwithlipopo
lysaccharide(LPS)wereassayedinvitrobymicroplatecolorimetricmethod.Result:Ninecompoundswereisolatedandidentifiedas
(E)pcoumarylalcohol(1),3,4dihydroxycinnamylalcohol(2),ferulicacid(3),lariciresinol(4),erythroguaiacylglycerolβO
4′sinapylether(5),dehydrodiconiferylalcohol(6),isolariciresinol(7),sachaliside1(8)andconiferin(9).Theinhibitoryefect
ofcompounds1,2,3,8,and9were241%,576%,402%,827%,and620%,respectively,againsttheTNFαproductionin
theperitonealmacrophagesofmicestimulatedwithLPSataconcentrationof10-5mol·L-1invitro.Conclusion:Thecompounds1,
2and48fromgeneraPineliaTen.andcompound9fromP.ternatawereisolatedforthefirsttime.Thecompounds1,2,8and9
werephenylpropanoids,and47werelignanoids.TheantiinflammatoryefectsoftherhizomeofP.ternatamightrelateattheleastto
compounds1,2,3,8and9.
[Keywords] Pineliaternata;freshrhizome;chemicalconstituent;phenylpropanoid;lignanoid;TNFα
[责任编辑 牛泽宇]
[收稿日期] 20070312
[通讯作者] 周欣,Tel:(0851)6690018,Email:alice9800@
sina.com
杏叶防风挥发油成分 SPMEGCMS分析
赵 超1,陈华国1,程 力2,周 欣1,杨再波3,张怡莎1
(1.贵州师范大学 天然药物质量控制研究中心,贵州 贵阳 550001;
2.贵阳中医学院 第二附属医院,贵州 贵阳 550002;
3.黔南民族师范学院 化学与化工系,贵州 都匀 558000)
[摘要] 目的:分析杏叶防风挥发油化学成分。方法:利用固相微萃取气相色谱质谱(SPMEGCMS)联用技
术对杏叶防风挥发油成分进行研究。结果:共鉴定出65种化学成分,占挥发油总成分的9217%。结论:杏叶防风
挥发油主要化学成分是α姜烯(2482%),前盖介烯(1627%),β没药烯(482%),2异丙基5甲基9亚甲基二
环[4.4.0]萘烷1烯(403%),β倍半水芹烯(398%),反式β金合欢烯(368%),芳姜黄烯(354%)等。
[关键词] 杏叶防风;挥发油;固相微萃取;气相色谱质谱联用
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2007)17175904
杏叶防风为伞形科杏叶防风 Pimpinelacan
doleanaWightetArn的全草,多年生草本植物,生于
路旁、林下、沟边、草坡或灌木丛中;分布于西南及广
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西等地。其辛、微苦、性温,归肺、脾、胃、肝经。具有
温中散寒、行气止痛、驱风活血、解毒消肿等功
效[1,2]。杏叶防风全株有特异的香味,但其挥发油
的化学成分研究较少有报道,仅危英[3]等用水蒸气
蒸馏法对其进行研究。
固相微萃取技术(solidphasemicroextraction,
SPME)[4]是Pawliszyn等人于1990年提出的一项新
技术。此技术利用被测样品对活性固体表面(熔融
石英纤维表面的涂层)有一定的吸附亲和力而达到
分离、富集的目的。SPME具有分析样品使用量少、
对被测样品选择性高、溶质更易洗脱,几乎无空白值
和复现性好等特点。因此,本研究采用固相微萃取
装置提取杏叶防风的挥发油,并用气相色谱质谱联
用仪对其化学成分进行分析,共分离出109个化学
成分,鉴定了其中65个化合物。该方法相对于水蒸
气蒸馏提取法而言,检出化合物和鉴定化合物的数
量都大大增加,这将为进一步开发利用中药杏叶防
风提供科学依据。
1 实验部分
1.1 仪器及材料
HP6890GC/5973MS气相色谱质谱联用仪(美
国惠普公司)。手动固相微萃取(SPME)装置(美国
Supelco公司),萃取纤维头为 65μmPDMS/DVB。
药材采于贵州省龙里县,经贵阳中医学院魏升华教
授鉴定为杏叶防风P.candoleana。
1.2 SPME条件
取少许药材的根部用剪刀剪碎,置于专用采样
瓶中,插入装有65μmPDMSDVB纤维头的手动进
样器,磁力搅拌速度1100r·min-1,90℃下顶空萃
取保持30min取出,立即插入色谱仪进样口(温度
250℃)中,脱附30min。
1.3 GCMS条件
色谱柱为 HP5MS石英弹性毛细管柱(025
mm×30m,025μm);载气为高纯氦(99999%),
流量1mL·min-1;进样口温度250℃;色谱柱初始
温度50℃(保持1min),以5℃·min-1升温速率升
至210℃(保持 10min);不分流进样。电离方式
EI,能量70eV;离子源温度230℃;四极杆温度150
℃;传输线温度280℃;质量范围m/z10~350;电子
倍增器电压1768V。谱图检索:采用Nist98和Wi
ley275L谱库进行检索。
2 结果与讨论
2.1 实验结果
按上述实验条件进行实验,HPMSD化学工作站
给出总离子流图。对总离子流图中的各峰经质谱扫
描后得质谱图,经过质谱计算机数据系统检索及核
对标准质谱图,并查对有关质谱资料[4],从而确定
出杏叶防风挥发油中的65种化学成分,并用峰面积
归一化法测定了各化学成分在挥发油中的相对百分
含量。结果列于表1。
表1 杏叶防风挥发油的化学成分
No.
tR
/min
化合物名称
相对含量
/%
相对分子
质量
分子式
1 433 2甲基丁酸乙酯2methylbutanoicacidethylester 002 130 C7H14O2
2 457 2甲基辛烷 2methyloctane 026 128 C9H20
3 532 壬烷 nonane 007 128 C9H20
4 616 α蒎烯 αpinene 019 136 C10H16
5 707 3甲基壬烷 3methylnonane 002 142 C10H22
6 717 香桧烯 sabinene 014 136 C10H16
7 726 β蒎烯 βpinene 295 136 C10H16
8 761 β月桂烯 βmyrcene 019 136 C10H16
9 831 α松油烯 αterpinen 003 136 C10H16
10 853 对伞花烯 pcymene 113 134 C10H14
11 918 反式β罗勒烯 transβocimene 002 136 C10H16
12 950 γ松油烯 γterpinene 205 136 C10H16
13 960 2甲基癸烷 2methyldecane 030 156 C11H24
14 1063 十一烷 undecane 106 156 C11H24
15 1167 3,4二乙烯基3甲基环己烯3,4diethenyl3methylcyclohexene 275 148 C11H16
16 1197 前盖介烯 pregeijerene 1627 162 C12H18
17 1343 十二烷 dodecane 002 170 C12H26
18 1431 麝香草基甲醚 thymylmethylether 106 164 C11H16O
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续表1
No.
tR
/min
化合物名称
相对含量
/%
相对分子
质量
分子式
19 1444 1异丙基2甲氧基4甲苯1isopropyl2methoxy4methylbenzene 146 164 C11H16O
20 1462 对二异丙苯 pdisopropylbenzene 003 162 C12H18
21 1469 香芹酚甲醚 carvacrolmethylether 008 164 C11H16O
22 1510 1(1,1二甲基乙基)3乙基苯 1(1,1dimethylethyl)3ethylbenzene 007 162 C12H18
23 1520 2甲基十二烷2methyldodecane 099 184 C13H28
24 1583 三乙基苯 triethylbenzene 016 162 C12H18
25 1617 十三烷 tridecane 053 184 C13H28
26 1653 吉玛烯DgermacreneD 038 204 C15H24
27 1694 α古芸烯 αgurjunene 008 204 C15H24
28 1722 δ榄香烯 δelemene 001 204 C15H24
29 1754 α荜澄茄烯 αcubebene 001 204 C15H24
30 1779 丁香酚 eugenol 005 164 C10H12O2
31 1803 3甲基十三烷3methyltridecane 012 198 C14H30
32 1824 胡椒烯 copaene 082 204 C15H24
33 1847 白菖烯 calarene 160 204 C15H24
34 1860 反式4十四(碳)烯 trans4tetradecene 034 196 C14H28
35 1867 β榄香烯 βelemene 068 204 C15H24
36 1880 十四烷 tetradecane 015 198 C14H30
37 1926 γ依兰油烯 γmuurolene 214 204 C15H24
38 1939 β丁香烯 βcaryophylene 120 204 C15H24
39 1954 吉玛烯BgermacreneB 009 204 C15H24
40 1967 罗汉柏烯 thujopsene 025 204 C15H24
41 1976 α佛手柑油烯 αbergamotene 113 204 C15H24
42 2000 (±)吉诺米烯(±)gymnomitrene 228 204 C15H24
43 2029 反式β金合欢烯 transβfarnesene 368 204 C15H24
44 2043 2异丙基5甲基9亚甲基二环[4.4.0]萘烷1烯 403 204 C15H24
2isopropyl5methyl9methylenebicyclo[4.4.0]dec1ene
45 2049 二环倍半水芹烯 bicyclosesquiphelandrene 021 204 C15H24
46 2067 α紫穗槐烯 αamorphene 027 204 C15H24
47 2085 β花柏烯 βchamigrene 089 204 C15H24
48 2095 ar芳姜黄烯 arcurcumene 354 202 C15H22
49 2110 δ杜松油烯 δcadinene 007 204 C15H24
50 2141 α姜烯 αzingiberene 2482 204 C15H24
51 2163 β没药烯 βbisabolene 482 204 C15H24
52 2199 β倍半水芹烯 βsesquiphelandrene 398 204 C15H24
53 2212 α花柏烯 αchamigrene 045 204 C15H24
54 2220 β雪松烯 βhimachalene 077 204 C15H24
55 2232 β荜澄茄烯 βcubebene 007 204 C15H24
56 2255 榄香醇 elemol 018 222 C15H26O
57 2274 反式γ没药烯 transγbisabolene 009 204 C15H24
58 2433 表圆线藻烯 epizonarene 002 204 C15H24
59 2497 喇叭烯 ledene 003 204 C15H24
60 2509 广藿香醇 patchoulialcohol 004 222 C15H26O
61 2521 6(E),8(E)十七烷二烯6(E),8(E)heptadecadiene 004 236 C17H32
62 2791 十四酸乙酯 ethylmyristate 001 256 C16H32O2
63 3008 2(1′,2′环氧丙基)4甲氧基苯基2甲基丁醇酯 092 264 C15H20O4
2(1′,2′epoxypropyl)4methoxyphenyl2methylbutanoate
64 3055 棕榈酸甲酯 methylhexadecanoateester 002 270 C17H34O2
65 3187 棕榈酸乙酯 ethylhexadecanoateester 004 284 C18H36O2
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2.2 讨论
2.2.1 从杏叶防风根挥发油中分离出109个色谱峰,
鉴定了其中的65个成分,已鉴定成分占挥发油总量的
9217%,主要成分为萜类化合物。含量较高的是α姜
烯(2482%)、前 盖 介 烯 (1627%)、β没 药 烯
(482%)、2异丙基5甲基9亚甲基二环[4.4.0]萘
烷1烯(403%)、β倍半水芹烯(398%)、反式β金
合欢烯(368%)和芳姜黄烯(354%)。
2.2.2 本研究样品前处理方法采用固相微萃取技
术,该方法比水蒸气蒸馏法的条件温和、加热时间
短、其萃取纤维头对物质吸附和解吸附的能力都非
常好,主要分析实验药材的根部,药材产地不同,所
以鉴定的化合物数量优于文献[3]报道,部分相同
的化合物含量也有差别。
3 结论
采用固相微萃取气相色谱质谱联用技术分析
了杏叶防风根部挥发性化学成分,共分离出109个
色谱峰,确定了65种化学成分,主要为萜类化合物,
挥发油中的萜类化合物是存在于植物界的一大类化
合物,具有多种生物学活性,值得进一步研究。
[参考文献]
[1] 国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草[M].第5册.
上海:上海科学技术出版社,1999:1015.
[2] 贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量标准
[M].贵阳:贵州科技出版社,2003:385.
[3] 危 英,张 旭,危 莉,等.杏叶防风挥发油化学成分分析
[J]贵阳中医学院学报,2005,27(4):56.
[4] 丛浦珠.质谱在天然有机化合物中的应用[M].北京:科学出
版社,1987.
AnalysisofvolatileoilinherbofPimpinelacandoleanabySPMEGCMS
ZHAOChao1,CHENHuaguo1,CHENGLi2,ZHOUXin1,YANGZaibo3,ZHANGYisha1
(1.ResearchCenteroftheQualityControlofNaturalMedicines,GuizhouNormalUniversity,Guiyang550001,China;
2.TheSecondAfiliatedHospital,GuiyangTraditionalMedicalColege,Guiyang550002,China;
3.ChemistryandChemicalEngineeringDepartment,QiannanNormalUnivesityforNationalities,Duyun558000,China)
[Abstract] Objective:ToanalyzecomponentsofvolatileoilfromtheherbofPimpinelacandoleana.Method:Thecompo
nentsofvolatileoilwereinvestigatedbySPMEGCMS.Result:Sixtyfivecompoundswereidentifiedwhichaccountedfor9217% of
totalvolatileoil.Conclusion:Themainconstituentsintheessentialoilwereαzingiberene(2482%),pregeijerene(1627%),β
bisabolene(482%),2isopropyl5methyl9methylenebicyclo[4.4.0]dec1ene(403%),βsesquiphelandrene(398%),
transβfarnesene(368%),arcurcumene(354%).
[Keywords] Pimpinelacandoleana;volatileoil;SPME;GCMS
[责任编辑 牛泽宇]
[收稿日期] 20070314
[通讯作者] 屠鹏飞,Tel:(010)82802750,Email:pengfeitu@vip.163.com
鹿蹄草化学成分研究
刘 蕾1,陈玉平1,万 ?2,李安良1,李若瑜2,屠鹏飞1
(1.北京大学 药学院,北京 100083;
2.北京大学 第一医院皮肤性病科,北京大学 真菌和真菌病研究中心,北京 100034)
[摘要] 目的:研究鹿蹄草Pyrolacaliatha全草的化学成分。方法:采用硅胶及SephadexLH-20凝胶柱色谱
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