全 文 ：半夏块茎高质量总 ＲＮＡ提取的一种有效方法
黄月琴１，２，徐有明２，薛建平１，３
（１．淮北煤炭师范学院 生命科学学院，安徽 淮北 ２３５０００；
２．华中农业大学 园艺林学学院，湖北 武汉 ４３００７０；
３．资源植物生物学安徽省重点实验室，安徽 淮北 ２３５０００）
［摘要］ 目的：探讨一种有效提取半夏块茎总ＲＮＡ方法。方法：以半夏试管苗的叶片、叶柄和块茎为试验材
料，将常规的异硫氰酸胍提取植物总ＲＮＡ的方法做了改进，在 ＲＮＡ提取缓冲液中加入高浓度的 β巯基乙醇以除
去酚类物质，用酸酚／氯仿抽提去除蛋白质污染，以及利用异丙醇和醋酸钠联合沉淀多糖等手段，建立了一种简单
实用的从富含多酚类和多糖等物质的植物材料中提取总 ＲＮＡ的方法。结果：该方法所提 ＲＮＡ的 Ａ２６０／Ａ２３０均大于
２０，Ａ２６０／Ａ２８０的值为１７～２０，电泳条带清晰，ＲＮＡ完整性好。结论：利用本方法提取的半夏试管小块茎总ＲＮＡ具
有很高的质量和纯度，且得率很高，完全满足后续的ＤＤＲＴＰＣＲ和反向Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ等分子生物学研究，而且简
单经济、实验结果稳定，重复性好，适合富含多酚类和多糖等物质的药用植物组织总ＲＮＡ的提取。
［关键词］ 半夏；试管块茎；多酚类物质；多糖；总ＲＮＡ；提取
［中图分类号］Ｒ２８２．５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１５１８１００４
［收稿日期］ ２００７１０１９
［基金 项 目］ 国 家 农 业 成 果 转 化 资 金 重 点 项 目
（０５ＥＦＮ２１３４００１２４）；淮北市重点项目（０６０８５）
［通讯作者］ 薛建平，Ｔｅｌ：（０５６１）３８０２０２５，Ｅｍａｉｌ：ｘｕｅｊｐ２０００
＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
植物组织 ＲＮＡ的提取是进行植物分子生物学
方面研究的必要前提。要进行 ＲＴＰＣＲ，ｃＤＮＡ合
成、ＲＮＡ序列分析、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交、狭线杂交、引
物延伸，以及用ｍＲＮＡ差异显示技术筛选感兴趣的
相关基因等分子生物学研究，均需要有高质量、高纯
度、完整性好的 ＲＮＡ。可以说，分子生物学研究后
续工作的进展及成效在很大程度上取决于 ＲＮＡ的
质量。所以，如何提高ＲＮＡ纯度和经济而快捷地获
得足够量的ＲＮＡ是当前研究人员十分关注的问题。
植物组织 ＲＮＡ的提取最常用的方法是异硫氰酸胍
法，但半夏块茎富含多糖及酚类物质［１］，由于酚类
化合物的存在，ＲＮＡ提取过程中极易产生褐化效
应［２］，氧化的酚类化合物（如醌类）可以与 ＲＮＡ不
可逆地结合，导致 ＲＮＡ的降解及 ＲＮＡ活性的丧
失［３］。多糖能与ＲＮＡ共沉淀形成难溶的胶状物，还
可以抑制许多酶的活性［４］。因此，针对半夏块茎富
含多糖及酚类物质的特性，本实验对文献中植物组
织ＲＮＡ提取技术进行尝试和分析［５８］，在此基础上
改进了常规的异硫氰酸胍法，通过在ＲＮＡ提取缓冲
液中加入高浓度的β巯基乙醇，以及利用异丙醇和
醋酸钠联合沉淀多糖等手段，从半夏试管小块茎中
提取出了高质量、高纯度的总ＲＮＡ，并在ＲＴＰＣＲ反
应中检验了其完整性好，能够满足 ｍＲＮＡ差异显示
实验，为今后利用分子生物学手段研究半夏资源提
供技术参考。
１ 材料
半夏材料由资源植物生物学安徽省重点实验室
提供，经薛建平教授鉴定为天南星科三叶半夏
ＰｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａＢｒｅｉｔ．的试管苗和试管微型块茎。
２ 方法
２．１ 常规提取方法［６］
异硫氰酸胍法：取２ｇ半夏组织，置于预先在冰
中冷冻的匀浆器中，加入４ｍＬ提取缓冲液（４ｍｏｌ·
Ｌ－１异硫氰酸胍，ｐＨ７０的２５ｍｍｏｌ·Ｌ－１柠檬酸钠，
０５％十二烷基肌氨酸钠，０１％ β巯基乙醇）后迅
速匀浆１ｍｉｎ；加入４００μＬ２ｍｏｌ·Ｌ１醋酸钠，再加
入４ｍＬ水饱和酚，８００μＬ氯仿异戊醇（２４∶１），剧
烈混匀，４℃ １万ｒ·ｍｉｎ－１离心２０ｍｉｎ；取出上层水
相放入１支新离心管中，加入２ｍＬ水饱和酚和２
ｍＬ氯仿异戊醇（２４∶１），剧烈混匀，４℃ １万 ｒ·
ｍｉｎ－１离心２０ｍｉｎ；取出上层水相放入新离心管中，
加入等体积的异丙醇，置于 －２０℃沉淀１ｈ，４℃ １
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万ｒ·ｍｉｎ－１离心２０ｍｉｎ；弃去上清液，用５ｍＬ７５％
乙醇洗２次，并以４℃ １万 ｒ·ｍｉｎ－１离心５ｍｉｎ；沉
淀于室温下干燥１０ｍｉｎ后溶于１００μＬＤＥＰＣ处理
水中。
２．２ 改进提取方法
２．２．１ 试剂及其配制 抽提液：４ｍｏｌ·Ｌ－１异硫氰
酸胍，２５ｍｍｏｌ·Ｌ－１柠檬酸钠，０５％十二烷基肌氨
酸，５％ β巯基乙醇（βＭＥ）（与常规方法比提高５０
倍）；水饱和苯酚（ｐＨ４３）；氯仿异戊醇（２４∶１）；２
ｍｏｌ·Ｌ－１醋酸钠（ｐＨ４０）；８ｍｏｌ·Ｌ－１ＬｉＣｌ。
２．２．２ 操作方法 取３ｇ新鲜半夏组织，用液氮研
磨；粉末移入一预冷的５０ｍＬ离心管中，加入１０ｍＬ
ＲＮＡ抽提缓冲液；依次加入下列溶液，２ｍｏｌ·Ｌ－１醋
酸钠（ｐＨ４０）１２ｍＬ，水饱和苯酚６ｍＬ，水饱和氯
仿１２ｍＬ，充分混匀，在冰上冷却至少１０ｍｉｎ；以１
万 ｒ·ｍｉｎ－１，４℃ 离心２０ｍｉｎ。将水相移入一新鲜
的５０ｍＬ离心管中，加入等体积异丙醇，－２０℃ 放
置２ｈ以沉淀 ＲＮＡ；１万 ｒ·ｍｉｎ－１，４℃ 离心 ２０
ｍｉｎ；倾去上清液，用７５％乙醇洗涤ＲＮＡ；将ＲＮＡ溶
解于４８０μＬＤＥＰＣ处理水中，再将其转入２ｍＬ离
心管，然后加入３６０μＬ的水饱和苯酚和３００μＬ水
饱和氯仿，振荡混匀，４℃，１２０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１５
ｍｉｎ沉淀蛋白质（本操作重复１～２次，以充分除去
蛋白质）；加入 １／３倍提取液体积的 ８ｍｏｌ·Ｌ－１
ＬｉＣｌ，混匀，放置－２０℃冰箱中５～８ｈ；取出离心管，
于４℃，１２０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ，弃上清，沉淀
溶于１３５ｍＬＤＥＰＣ处理的无菌水中，加入１５０μＬ
３ｍｏｌ·Ｌ－１ｐＨ５２醋酸钠（终浓度为 ０３ｍｏｌ·
Ｌ－１），混匀。再加等体积的异丙醇，－２０℃ 沉淀
ＲＮＡ２ｈ；４℃下以１２０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１５ｍｉｎ，倾
去上清液；以１ｍＬ７５％乙醇浸泡ＲＮＡ３０ｍｉｎ，倒出
乙醇，晾干ＲＮＡ至胶状，最后将 ＲＮＡ溶解于５０μＬ
ＤＥＰＣ处理水中，－７０℃冰箱贮藏备用。
２．３ 总ＲＮＡ纯度及完整性检测
２．３．１ 分光光度法测定 用紫外分光光度计测定
所抽提ＲＮＡ样品Ａ２６０，Ａ２８０值。
２．３．２ 凝胶电泳 进行常规琼脂糖凝胶电泳，凝胶
浓度为０８％，紫外成像系统下观察总 ＲＮＡ的谱
带，检验总ＲＮＡ的完整性。
２．４ ｃＤＮＡ合成检测ＲＮＡ的ＲＴ活性
ｃＤＮＡ第一链的合成参照按 ＴａＫａＲａ公司 ＡＭＶ
反转录酶操作说明书进行。
２．５ ＲＴＰＣＲ
按ＴａＫａＲａＲＮＡＬＡＰＣＲＴＭＫｉｔ（ＭＭＬＶ）Ｖｅｒ．
１１试剂盒的说明书进行ＲＴＰＣＲ，略作修改。设计
转录伸长因子正向引物：５′ＣＣＡＣＣＡＡＴＣＴＴＧＴＡＣＡ
ＣＡＴＣＣ３′；反向引物：５′ＡＧＡＣＣＡＣＣＡＡＧＴＡＣＴＡＣＴ
ＧＣＡＣ３′。ＰＣＲ反应程序为 ９４℃ 预变性３ｍｉｎ，９４
℃ 变性 ３０ｓ，５３℃ 复性３０ｓ，７２℃ 延伸５０ｓ，２５个
循环，７２℃延伸 １０ｍｉｎ。反应完毕后取 ６μＬ于
１０％的琼脂糖凝胶上进行电泳分析。
３ 结果和分析
３．１ ２种提取方法总ＲＮＡ的质量比较
采用常规异硫氰酸胍法提取叶片和叶柄时，由
于酚类物质含量高，而含０．１％ β巯基乙醇提取缓
冲液未能够充分抑半夏叶片和叶柄的多酚类物质的
氧化，所以颜色比较深，被氧化的酚类物质能够结合
大量的ＲＮＡ从而降低了 ＲＮＡ的产率；同时在半夏
成熟的试管块茎中由于淀粉在变性液中形成胶状
物，使后续操作很难进行，电泳结果显示，几乎看不
到三者２８Ｓ和１８ＳｒＲＮＡ的带型（图１）。分光光度
仪检测显示，该ＲＮＡ样品的Ａ２６０／Ａ２８０小于１７，Ａ２６０／
Ａ２３０小于２０（表１）。
１．块茎，２．叶柄，３．叶片（均未加ＬｉＣｌ）；
４．块茎，５．叶片，６．叶柄（均加ＬｉＣｌ，采用改进法）；
７．块茎，常规法（表１同）
图１ 异硫氰酸胍和改进方法提取总ＲＮＡ的电泳
而采用改进方法提取的 ＲＮＡ电泳检测显示，
２８Ｓ，１８Ｓ，５ＳｒＲＮＡ条带明显，清晰，不拖尾，而且２８
Ｓ条带的亮度约为１８Ｓ的２倍，且无明显 ＤＮＡ等杂
质污染。分光光度仪检测 Ａ值表明（表１），提取的
ＲＮＡＡ２６０／Ａ２３０大于２０，Ａ２６０／Ａ２８０介于１７～２０，证
明ＲＮＡ没有被污染。
３．２ 改进提取法总ＲＮＡ的完整性分析
３．２．１ ｃＤＮＡ合成检测 ＲＮＡ的 ＲＴ活性分析 将
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表１ ２种方法提取总ＲＮＡ的紫外分光光度计检测结果
Ｎｏ． Ａ２６０／Ａ２８０ Ａ２６０／Ａ２３０ ＲＮＡ／μｇ·ｇ－１
１ １７６８８ ２４３２６ ３１３８６７
２ １８０２３ ２４４１５ ３４５０６７
３ １８９５６ ２４５６７ ３９６３２１
４ １７７０１ ２４２８１ ３００８２２
５ １５０６４ １６４２３ ９８５２４
６ １３１２５ １７５０９ １２０６３５
７ １１０２２ １３７８７ ２８１４５
合成双链的试管块茎总 ＲＮＡ控制在２μｇ左右，从
电泳图（图 ２）可以看出双链 ｃＤＮＡ片段呈弥散状
态，大小主要集中分布在０３～５ｋｂ，由于植物 ＲＮＡ
相对较短，因此在这个范围内的 ｃＤＮＡ是比较完整
的，符合分子生物学和后续实验要求。
图２ 半夏块茎ｍＲＮＡ的反转录检测
３．２．２ 表达基因的 ＲＴＰＣＲ扩增检测分析 为了
进一步验证改进方法抽提的ＲＮＡ完整性，实验以改
进方法提取的试管块茎总ＲＮＡ为模板，以转录延伸
长因子（ＥＦ１α）的保守序列为引物，用 ＲＴＰＣＲ方
法对这个基因进行特异扩增，检测总 ＲＮＡ的完整
性。检测结果表明，扩增片段大小与设计引物的预
期片段大小一致（４９６ｂｐ），说明改进方法提取的总
ＲＮＡ保持了表达基因的完整性（图３）。
图３ 转录延长因子基因表达片段ＲＴＰＣＲ扩增结果
４ 讨论
酚类物质氧化会产生褐化效应 （ｂｒｏｗｎｉｎｇ
ｅｆｅｃｔ）［２］，酚类物质氧化后不可逆地结合到核酸上
并与 ＲＮＡ共沉淀，这导致 ＲＮＡ产量和质量均很
差［３，９］。而β巯基乙醇不仅能打开蛋白酶的二硫键
使酶失活，从而抑制酚类氧化酶和 ＲＮａｓｅ的活性，
也能与酚类竞争性氧化，有抗氧化作用。从本试验
结果可以看出，和常规方法相比较，β巯基乙醇在提
取缓冲液的终浓度提高５０倍，效果好。
蛋白质在半夏块茎中占很大比重，是影响总
ＲＮＡ提取的重要因素，因而要获得完整的、高质量
的ＲＮＡ就必须有效地去除蛋白。用酸酚／氯仿抽
提，有效去除了蛋白质。另外，酸酚不但抑制 ＲＮａｓｅ
的活性，而且在酸性条件下，ＤＮＡ和蛋白质进入有
机相，而ＲＮＡ留在水相中，提高了纯度与产率［１０］。
用常规方法提取半夏块茎 ＲＮＡ，在沉淀 ＲＮＡ
时产生多糖的凝胶状沉淀，这种含有多糖的ＲＮＡ沉
淀难溶于水，即使溶解也会产生黏稠状的溶液。由
于多糖可以抑制许多酶的活性［４］，因此含有多糖的
ＲＮＡ样品无法用于后续的分子生物学研究，而 Ｌｉ＋
能将部分多糖留在上清液中，使ＲＮＡ更易沉淀。
同时 ＬｉＣｌ可以选择性地沉淀 ＲＮＡ［１１１２］。小分
子ＲＮＡ（如２８ＳｔＲＮＡ及５ＳｒＲＮＡ）和ＤＮＡ在高离子
强度下是可容的，而大分子 ＲＮＡ（如 ｒＲＮＡ和 ｍＲ
ＮＡ）则不溶。改进方法利用了这个差异在高浓度
ＬｉＣｌ中沉淀大分子 ＲＮＡ。所以在 ＲＮＡ电泳图中显
示出２８ＳｒＲＮＡ和１８ＳｒＲＮＡ两条带型，５Ｓ带型要比
没加ＬｉＣｌ时弱得多。ＬｉＣｌ在乙醇溶液中的溶解度
很高，而且不随核酸共沉淀，可以在后面步骤中除去
残留的 ＬｉＣｌ。另外，ＲＮＡ在０３ｍｏｌ·Ｌ－１的 ＮａＡｃ
溶液中难溶［１１］，而ＤＮＡ则易溶，从而通过离心有效
地将ＤＮＡ去除。这样为进一步的分子生物学实验
提供了优质的ＲＮＡ。
同时在抽取过程中，一定要严格操作。操作均
在低温条件下进行，减少ＲＮＡ降解的可能性，ＲＮａｓｅ
无处不在，非常稳定，而 ＲＮＡ极易降解。所以所需
器皿
场地、药品应为提取 ＲＮＡ专用，并且用
ＤＥＰＣ处理之后高温灭菌，操作人员自身也要严格
要求，操作过程中使用一次性手套，并需要经常更
换，尽量减少交流和人员流动，从而防止外源 ＲＮａｓｅ
污染［１３］。
综上所述，用改进方法提取半夏组织尤其是半
夏块茎ＲＮＡ，所用的都是常规试剂，而且操作非常
简单。提取的ＲＮＡＡ２６０／Ａ２８０在１８～２０，电泳条带
为完整的２８ＳｒＲＮＡ，１８ＳｒＲＮＡ，前者的亮度约是后
者的２倍，表明经改进方法所提取的ＲＮＡ完全能满
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足后续的 ＲＴＰＣＲ、差异显示和 Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ等
分子操作的要求。
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ｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ，１９８９：３４３．
ＥｆｉｃｉｅｎｔｍｅｔｈｏｄｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｈｉｇｈｑｕａｌｉｔｙＲＮＡｆｒｏｍｍｉｃｒｏｔｕｂｅｒｓｏｆ
Ｐｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａｉｎｖｉｔｒｏ
ＨＵＡＮＧＹｕｅｑｉｎ１，２，ＸＵＹｏｕｍｉｎｇ２，ＸＵＥＪｉａｎｐｉｎｇ１，３
（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｌｏｇｙ，ＨｕａｉｂｅｉＣｏａｌＩｎｄｕｓｔｒｙＴｅａｃｈｅｒｓ＇Ｃｏｌｅｇｅ，Ｈｕａｉｂｅｉ２３５０００，Ｃｈｉｎａ；
２．ＣｏｌｅｇｅｏｆＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ＆ＦｏｒｅｓｔｒｙＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＨｕａｚｈｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈａｎ４３００７０，Ｃｈｉｎａ；
３．ＡｎｈｕｉＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＰｌａｎｔＲｅｓｏｕｒｃｅｓａｎｄＢｉｏｌｏｇｙ，Ｈｕａｉｂｅｉ２３５０００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｘｔｒａｃｔＲＮＡｆｒｏｍＰｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａａｎｄｌａｙａｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｆｏｒｓｔｕｄｙｉｎｇｔｈｅｆｏｒｍａｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＰ．
ｔｅｒｎａｔａ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＢｙｍｏｄｉｆｙｉｎｇｔｈｅｍｅｔｈｏｄｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄｂｙＧｕａｎｉｄｉｎｉｕｍｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｔｏｔａｌＲＮＡｆｒｏｍｐｌａｎｔｔｉｓｓｕｅｓｒｉｃｈｉｎｐｈｅｎｏｌｉｃ
ａｎｄｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，ａｓｉｍｐｌｅａｎｄｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔｍｅｔｈｏｄｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌＲＮＡｆｒｏｍｔｈｅｔｕｂｅｒｓ，ｓｔｅｍｓａｎｄｌｅａｖｅｓｏｆＰ．
ｔｅｒｎａｔｅｃｏｎｔａｉｎｉｎｇａｂｕｎｄａｎｔｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓａｎｄｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄβｍｅｒｃａｐｔｏｅｔｈａｎｏｌｗａｓａｄｄｅｄｉｎｔｈｅ
ＲＮＡｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｕｆｅｒｔｏｒｅｍｏｖｅｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ，ｐｈｅｎｏｌａｎｄｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｅｌｉｍｉｎａｔｅｐｒｏｔｅｉｎｓ，ａｎｄｉｓｏｐｒｏｐａｎｏｌａｎｄｓｏｄｉｕｍａｃｅ
ｔａｔｅｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅＡ２６０／Ａ２３０ｖａｌｕｅｏｆＲＮＡｅｘｔｒａｃｔｅｄｗｉｔｈｉｍｐｒｏｖｅｄｍｅｔｈｏｄｗｅｒｅａｌｏｖｅｒ２．０
ａｎｄｔｈｅｖａｌｕｅｓｏｆＡ２６０／Ａ２８０ｗｅｒｅｂｅｔｗｅｅｎ１．７ａｎｄ２．０．ＴｈｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓｂａｎｄｓｗｅｒｅｃｌｅａｒｅｄｏｎａｇａｒｏｓｅｇｅｌａｎｄｉｎｔｅｇｒｉｔｙｏｆＲＮＡｗａｓ
ｇｏｏｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＲＮＡｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｔｈｅｔｕｂｅｒｓ，ｓｔｅｍｓａｎｄｌｅａｖｅｓｏｆＰ．ｔｅｒｎａｔｅｗｉｔｈｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｈａｄｈｉｇｈ
ｐｕｒｉｔｙａｎｄｑｕａｌｉｔｙａｎｄｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄｉｎｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｒｅｓｅａｒｃｈ，ａｓＤＤＲＴＰＣＲａｎｄｒｅｖｅｒｓｅＮｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇａｎａｌｙｓｉｓｄｉｒｅｃｔｌｙ．
Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅ，ｅｃｏｎｏｍｉｃ，ｓｔａｂｌｅｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，ａｎｄｈａｓａｇｏｏｄｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙａｓｗｅｌａｓｉｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｔｏｔａｌＲＮＡｏｆ
ｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔｓｗｉｔｈｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｐｈｅｎｏｌｉｃｓａｎｄｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｐｉｎｅｌｉａｔｅｒｎａｔａ；ｍｉｃｒｏｔｕｂｅｒｓ；ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ｔｏｔａｌＲＮＡ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
［责任编辑 吕冬梅］
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