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GC-MS analysis of essential oils from Radix Angelicae Pubescentis

独活挥发油成分的GC-MS分析



全 文 :weightarenearly200kDa,werefoundon75%SDSPAGEExtractedtheseproteinstoanalyzewithcapilaryHPLC,theywerefoundtobe
thecomplexproductsofcolagenandserumalbuminofdonkeyConclusion:Donkeyserumalbuminisamainproteincomponentinthehide,
whichisacluetoexposetheefectofEjiaoonblood
[Keywords] TriPuresolationreagent;sodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis;dermisofdonky;constituentproteins
[责任编辑 李 禾]
独活挥发油成分的 GCMS分析
杨秀伟1,2,刘玉峰1,陶海燕1,2,杨 智3,肖诗鹰3
(1北京大学 药学院 天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京 100083;
2北京大学 医药卫生分析中心,北京 100083;
3科技部 中国21世纪议程管理中心,北京 100089)
[摘要] 目的:分析我国中药材GAP基地之一所种植独活挥发油的化学成分,为其质量评价提供科学依据。方
法:采用水蒸气蒸馏法提取独活挥发油,用GC毛细管柱进行分析,归一化法测定其相对含量,并用GCMS法鉴定化学
成分。结果:检出229个色谱峰,鉴定出88个化合物,占挥发油总量的7823%。结论:独活挥发油的单萜类化合物及
其衍生物中,3蒈烯(889%)、间聚伞花素(499%)、β水芹烯(835%)等是主要成分,占总挥发油量的2223%;倍半
萜类化合物及其衍生物中,桉叶烷4(14),11二烯(436%)、α芹子烯(136%)、喇叭醇(114%)、α甜没药萜醇(603%)
和1,8二甲基4异丙基螺环[45]+8烯7酮(437%)等是主要成分,占总挥发油量的1726%。
[关键词] 伞形科;独活;挥发油;毛细管色谱;气相色谱质谱
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2006)08066304
[收稿日期] 20051025
[通讯作者] 杨秀伟,Tel:(010)82801569,Email:xwyang@bj
mueducn
传统中药独活系伞形科植物独活 Angelica
pubescensMaximfbiserataShanetYuan的干燥根,能
祛风除湿,通痹止痛。主要用治风寒湿痹、腰膝疼痛、
少阴伏风头痛等。湖北、四川、陕西均有分布,并有栽
培。在药用上因产地不同而形成不同的商品,著名的
有川独活、资丘独活、恩施独活、巴东独活、浙独活等。
湖北省独活种植示范基地为GAP基地之一。为了科
学评价其质量,作者首先对湖北省五峰县牛庄产三年
生独活的挥发油成分进行了研究,以期制定出评价独
活质量的挥发油气相色谱(GC)指纹图谱。
1 材料
独活药材于 2003年春季出苗刚发芽时采自湖
北省五峰县牛庄独活种植示范基地,三年生,将鲜根
阴干。其品种经湖北省中医药研究院王克勤研究员
鉴定为 Apubescensfbiserata。
2 方法
21 挥发油的制备
称取独活(干品)609201g,加水1L,按2000年
版《中国药典》一部附录 XD方法[1](不加二甲苯)提
取挥发油,用无水硫酸钠干燥后得淡黄色油状物
019mL(01344g),收油率为022%。
22 挥发油的GCMS联用分析
221 GCMS条件 美国 Finnigan公司 TRACEMS
气相色谱质谱联用仪。DB5石英毛细管色谱柱
(025mm×30m,025μm),进样口温度 260℃(3
min);程序升温,3℃·min-1,80℃(停留 10min)~
240℃(停留10min);载气为高纯氮气,流量 1mL·
min-1;进样量 02μL;分流比 50∶1。EI电离源,70
eV;离子源温度 250℃;加速电压 200V;扫描质量
30~500amu。
222 独活挥发油化学成分分析 对总离子流图
中各峰经质谱扫描后得到质谱图,通过 Xcalibur工
作站NIST标准质谱图库进行检索,确认各化合物;
通过 Xcalibur工作站数据处理系统,按峰面积归一
化法计算各化合物在挥发油中的相对含量(表1)。
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第31卷第8期
2006年4月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol31,Issue 8
April,2006
表1 独活挥发油成分
No
tR
/min
化合物名称
分子
质量
分子式
相对含量
/%
1 192 1甲基1,4环己二烯 1methyl1,4cyclohexadiene 94 C7H10 007
2 251 2甲基辛烷 2methyloctane 128 C9H20 045
31) 287 壬烷 nonane 128 C9H20 303
4 347 3蒈烯 3carene 136 C10H16 889
5 372 莰烯 camphene 136 C10H16 011
6 381 4亚甲基1异丙基双环[310]己2烯 4methylene1(1methylethyl)bicyclo[310]hex2ene 134 C10H14 005
7 396 3甲基壬烷 3methylnonane 142 C10H22 060
8 406 3亚甲基1,5,5三甲基环己烯 3methylene1,5,5trimethylcyclohexene 136 C10H16 064
9 414 香桧烯 4methylene1(1methylethyl)bicyclo[310]hexane 136 C10H16 016
10 425 lβ蒎烯 (1S)6,6dimethyl2methylenebicyclo[311]heptane 136 C10H16 049
11 442 β月桂烯βmyrcene 136 C10H16 047
12 458 癸烷 decane 142 C10H22 014
13 483 α水芹烯αphelandrene 136 C10H16 083
14 500 1,3,3三甲基三环[22102,6]庚烷 1,3,3trimethyltricyclo[22102,6]heptane 136 C10H16 107
151) 540 间聚伞花素 mcymene 134 C10H14 499
161) 559 β水芹烯βphelandrene 136 C10H16 835
17 623 2壬酮 2nonanone 142 C9H18O 009
18 664 2壬醇 2nonanol 144 C9H20O 006
19 688 正辛醇 1octanol 130 C8H18O 007
20 806 6莰烯酮 6camphenone 150 C10H14O 082
21 904 2甲基1亚甲基3(1甲基乙烯基)环戊烷 2methyl1methylene3(1methylethenyl)cyclopentane 136 C10H16 023
22 936 反式1甲基4异丙基2环己烯1醇 trans1methyl4(1methylethyl)2cyclohexen1ol 154 C10H18O 013
23 956 2,2,3三甲基3环戊烯1乙醛 2,2,3trimethyl3cyclopentene1acetaldehyde 152 C10H16O 003
24 1042 顺式1甲基4异丙基2环己烯1醇 cis1methyl4(1methylethyl)2cyclohexen1ol 154 C10H18O 010
25 1077 4,6,6三甲基双环[311]庚3烯2醇 4,6,6trimethylbicyclo[311]hept3en2ol 152 C10H16O 029
26 1138 戊基苯 pentylbenzene 148 C11H16 005
271) 1262 松油醇44methyl1(1methylethyl)3cyclohexen1ol 154 C10H18O 008
28 1289 (E,E)1,3,5十一烷三烯 undecatriene(E,E)1,3,5undecatriene 150 C11H18 004
29 1314 4(异丙基)2环己烯1酮 4(1methylethyl)2cyclohexen1one 138 C9H14O 167
30 1344 α松油醇α,α4trimethyl3cyclohexene1methanol 154 C10H18O 014
31 1373 6,6二甲基双环[311]庚烷2甲醇 6,6dimethylbicyclo[311]heptane2methanol 154 C10H18O 030
32 1407 香桧醇 1α,3α,5α4methylene1(1methylethyl)bicyclo[310]hexan3ol 152 C10H16O 015
33 1423 正癸醛 decanal 156 C10H20O 026
34 1468 (E)6壬烯1醇 (E)6nonen1ol 142 C9H18O 019
35 1596 2甲氧基4甲基1异丙基苯 2methoxy4methyl1(1methylethyl)bezene 164 C11H16O 046
36 1612 10甲基1十一碳烯 10methyl1undecene 168 C12H24 005
37 1761 3,5二甲氧基甲苯 3,5dimethoxytoluene 152 C9H12O2 006
38 1789 4异丙基1环己烯1甲醛 4(1methylethyl)1cyclohexene1carboxaldehyde 152 C10H16O 026
39 1817 4羟基3甲基苯乙酮 4hydroxy3methylacetophenone 150 C9H10O2 241
40 1859 (1S桥环)1,7,7三甲基双环[221]庚烷2醇乙酸酯 196 C12H20O2 050
(1Sendo)1,7,7trimethylbicyclo[221]heptan2olacetate
41 1898 1,3二异丙基1,3环戊二烯 1,3bis(1methylethyl)1,3cyclopentadiene 150 C11H18 060
42 1929 十三烷 tridecane 184 C13H28 015
431) 1970 香荆芥酚 2methyl5(1methylethyl)phenol 150 C10H14O 010
44 2168 8甲基1癸烯 8methyl1decene 154 C11H22 283
451) 2235 α衣兰油烯 1α,4aα,8aα1,2,4a,5,6,8ahexahydro4,7dimethyl1(1methylethyl)naphthalene 204 C15H24 019
46 2247 (+)环异酒剔烯 (+)cycloisosativene 204 C15H24 015
47 2303 乙酸癸酯 ndecylacetate 200 C12H24O2 013
48 2310 β古芸烯βgurjunene 204 C15H24 014
49 2372 [1S(1α,2β,4β)]1乙烯基1甲基2,4二(1甲基乙烯基)环己烷 204 C15H24 164
[1S(1α,2β,4β)]1ethenyl1methyl2,4bis(1methylethenyl)cyclohexane
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2006年4月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol31,Issue 8
April,2006
续表1
No tR/min 化合物名称
分子
质量
分子式
相对含量
/%
50 2486 [s(R,s)]3(1,5二甲基4己烯基)6亚甲基环己烯 204 C15H24 063
[s(R,s)]3(1,5dimethyl4hexenyl)6methylenecyclohexene
51 2609 2异丙烯基4a,8二甲基1,2,3,4,4a,5,6,7八氢化萘 204 C15H24 043
2isopropenyl4a,8dimethyl1,2,3,4,4a,5,6,7octahydronaphthalene
521)2636 α石竹烯αcaryophylene 204 C15H24 069
531)2660 β倍半水芹烯βsesquiphelandrene 204 C15H24 082
54 2667 (E)7,11二甲基3亚甲基1,6,10十二烷三烯 (E)7,11dimethyl3methylene1,6,10dodecatriene204 C15H24 079
55 2774 α姜黄烯 1(1,5dimethyl4hexenyl)4methylbenzene 202 C15H22 002
56 2784 桉叶烷4(14),11二烯 eudesma4(14),11diene 204 C15H24 436
57 2820 α芹子烯αselinene 204 C15H24 136
58 2831 8异丙烯基1,5二甲基环十碳1,5二烯 8isopropenyl1,5dimethylcyclodeca1,5diene 204 C15H24 036
591)2881 β甜没药烯 (S)1methyl4(5methyl1methylene4hexenyl)cyclohexene 204 C15H24 040
60 3067 喇叭醇 ledol 222 C15H26O 114
61 3109 (E)3,7,11三甲基1,6,10十二烷三烯3醇 (E)3,7,11trimethyl1,6,10dodecatrien3ol 222 C15H26O 045
62 3179 (-)蓝桉醇 (-)globulol 222 C15H26O 023
631)3211 橙花叔醇 3,7,11trimethyl1,6,10dodecatrien3ol 222 C15H26O 060
64 3240 α,α,3,8四甲基1,2,3,4,5,6,7,8八氢5奥甲醇 222 C15H26O 080
α,α,3,8tetramethyl1,2,3,4,5,6,7,8octahydro5azulenemethanol
65 3273 [1R(1R,3E,7E,11R)]1,5,5,8四甲基12环氧双环[910]十二烷3,7二烯 220 C15H24O 022
[1R(1R,3E,7E,11R)]1,5,5,8tetramethyl12oxabicyclo[910]dodeca3,7diene
66 3291 雪松醇 cedrol 222 C15H26O 021
67 3300 顺式澳白檀醇 cislanceol 220 C15H24O 023
68 3320 Zα反式佛手柑油烯醇 Zαtransbergamotol 220 C15H24O 025
69 3339 库比烯醇 cubenol 222 C15H26O 025
70 3357 α菖蒲二烯 [1S(1α,4β,5α)]1,8dimethyl4(1methylethenyl)spiro[45]dec7ene 204 C15H24 060
71 3423 荜澄茄醇 cadinol或 222 C15H26O 024
[1R(1α,4β,4aβ,8aβ)]1,2,3,4,4a,7,8,8aoctahydro1,6dimethyl4(1methylethyl)1naphthalenol
72 3433 14甲基环氧十四烷2酮 14methyloxacyclotetradecan2one 226 C14H26O2 079
73 3502 [3S(3α,3aβ,5α)]1,2,3,3a,4,5,6,7八氢α,α,3,8四甲基5奥甲醇 222 C15H26O 038
[3S(3α,3aβ,5α)]1,2,3,3a,4,5,6,7octahydroα,α,3,8tetramethyl5azulenemethanol
74 3521 6异丙烯基4,8a二甲基4a,5,6,7,8,8a六氢1H萘2酮 218 C15H22O 043
6isopropenyl4,8adimethyl4a,5,6,7,8,8ahexahydro1Hnaphthalen2one
751)3547 正十四碳烯 1tetradecene 196 C14H28 161
761)3582 α甜没药萜醇αbisabolol 222 C15H26O 603
77 3592 1,8二甲基4异丙基螺环[45]十碳8烯7酮 220 C15H24O 437
1,8dimethyl4(1methylethyl)spiro[45]dec8en7one
78 3647 去氢香橙烯 dehydroaromadendrene 202 C15H22 007
79 3718 Z9十四碳烯酸 Z9tetradecenoicacid 226 C14H26O2 203
80 4004 十二烷酸乙酯 ethyllaurate 228 C14H28O 017
81 4061 (Z)9十八碳烯酸甲酯 methyl(Z)9octadecenoate 296 C19H36O2 009
82 4131 Z11十六烯酸 Z11hexadecenoicacid 254 C16H30O2 027
83 4168 环氧十六8烯2酮 oxacycloheptadec8en2one 252 C16H28O2 013
84 4240 正十六醇 1hexadecanol 242 C16H34O 024
85 4388 十六酸甲酯 methylhexadecanoate 270 C17H34O2 028
86 4435 (Z,Z,Z)9,12,15十八碳三烯酸甲酯 methyl(Z,Z,Z)9,12,15octadecatrienoate 292 C19H32O2 014
87 4904 9,12十八碳二烯酸甲酯 methyl9,12octadecadienoate 294 C19H34O2 011
881)5042 甲氧基欧芹酚 osthole 244 C15H16O3 130
注:1)为首次从独活挥发油中鉴定出
3 结果和讨论
31 从独活挥发油中检出229个色谱峰,鉴定了88
个化合物的结构,占挥发油总量的 7823%;其中有
13个成分是首次从独活中鉴定出。在鉴定的成分
中,归类于单萜类及其衍生物的 3蒈烯(3carene,
889%)、β水芹烯(βphelandrene,835%)、间聚伞
花素 [mcymene,499%]等 占 挥 发 油 总 量 的
2223%,倍半萜类及其衍生物的桉叶烷4(14),11
二烯[eudesma4(14),11diene,436%]、α芹子烯
(136%)、喇叭醇(114%)、α甜没药萜醇(αbis
abolol,603%)、1,8二甲基4异丙基螺环[45]十
碳8烯7酮 [1,8dimethyl4(1methylethyl)spiro
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第31卷第8期
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中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol31,Issue 8
April,2006
[45]dec8en7one,437%]等占挥发油总量的
1726%。它们是湖北省五峰县牛庄产独活的主要
成分。在挥发油中也检出了香豆素类化合物甲氧基
欧芹酚(osthole),占总挥发油量的130%。
32 应用GCMS,陈玄玄等[2]从湖北省恩施地区产
独活中鉴定出 21个化合物,主要成分为枞油烯
(sylvestrene),相对含量为 256%;周成明等[3]从北
京药材公司沙河仓库购买的独活中分离出约 50个
色谱峰,鉴定出32个化合物,主要成分有荒漠木烯
(670%)、百里香酚(574%)、β雪松烯(574%)、
草烯(550%)、对甲基苯酚(431%)和β雪松烯
(431%);邱琴等[4]从山东省药品采购供应站提供
的独活中分离出约 50个色谱峰,鉴定出 40个化合
物,主要成分为α蒎烯(1039%)和 1甲基2(1甲
乙基)苯。黄蕾蕾等[5]比较了浙独活、资丘独活和川
独活等3个不同产地和 3种商品独活的挥发油成
分,浙独活与资丘独活的共有成分有 12个,资丘独
活与川独活的共有成分有13个;3种商品独活的共
有成分仅有4个;从浙独活、资丘独活、川独活挥发
油中分离鉴定的化学成分数和相对百分含量分别为
29,82%;44,95%;25,55%。并认为由于产地气候、
土壤等自然条件及加工等不同,造成了独活挥发油
成分有一定的差异。
33 生物活性试验结果表明:蒈烯、水芹烯和桉叶
烷类化合物有较好的抗炎活性,可能与临床上应用
独活治疗风寒湿痹、腰膝疼痛、少阴伏风头痛等症有
关。黄蕾蕾等[6]的研究表明,独活的总挥发油对乙
酰胆碱致肠肌痉挛有较强的抑制作用;不同产地独
活醇提取物皆能抑制实验性血栓形成,其抑制顺序
为资丘独活>浙独活>川独活;不同产地独活挥发
油皆能抑制乙酰胆碱和组胺所至肠肌痉挛性收缩,
其作用强度的顺序为浙独活 >资丘独活 >川独
活[5]。
[致谢] 湖北省中医药研究院王克勤研究员、湖北中医
学院詹亚华教授提供独活样品。
[参考文献]
[1] 中国药典 一部 2000附录64
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湖北中医杂志,2001,23(3):49
GCMSanalysisofessentialoilsfromRadixAngelicaePubescentis
YANGXiuwei1,2,LIUYufeng1,TAOHaiyan1,2,YANGZhi3,XIAOShiying3
(1StateKeyLaboratoryofNaturalandBiomimeticDrugs,SchoolofPharmaceuticalSciencesofPekingUniversity,Beijing100083,
China;
2MedicalandHealthyAnalysisCenter,PekingUniversity,Beijing100083,China;
3AdministrativeCentreforChina’sAgenda21,MinistryofScienceandTechnologyofChina,Beijing100089,China)
[Abstract] Objective:ToanalyzetheconstituentsoftheessentialoilsfromRadixAngelicaePubescentisplantedinaGAPbaseofthe
Chinesemedicamaterials,andprovidethescientificbasisforqualitycontrolMethod:Theessentialoilswereextractedbywatersteamdistil
lationandseparatedbyGCcapilarycolumnchromatographyThecomponentswerecalculatedwithnormalizationmethod,andwereidentified
byMSdetectorResult:229peaksweredetected,amongwhich88compoundshavebeenidentified,whichmadeup7823%ofthetotales
sentialoilConclusion:InthetotalessentialoilsofRadixAngelicaePubescentis,3carene(889%),mcymene(499%)andβphelan
drene(835%)asthemonoterpenesanditsderivatives,andeudesma4(14),11diene(436%),αselinene(136%),ledol(114%),
αbisabolol(603%),and1,8dimethyl4(1methylethyl)spiro[45]dec8en7one(437%)asthesesquiterpenesanditsderivatives,
aremaincomponents
[Keywords] Umbeliferae;RadixAngelicaePubescentis;essentialoil;capilarychromatography;GCMS
[责任编辑 李 禾]
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第31卷第8期
2006年4月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol31,Issue 8
April,2006