全 文 :weightarenearly200kDa,werefoundon75%SDSPAGEExtractedtheseproteinstoanalyzewithcapilaryHPLC,theywerefoundtobe
thecomplexproductsofcolagenandserumalbuminofdonkeyConclusion:Donkeyserumalbuminisamainproteincomponentinthehide,
whichisacluetoexposetheefectofEjiaoonblood
[Keywords] TriPuresolationreagent;sodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis;dermisofdonky;constituentproteins
[责任编辑 李 禾]
独活挥发油成分的 GCMS分析
杨秀伟1,2,刘玉峰1,陶海燕1,2,杨 智3,肖诗鹰3
(1北京大学 药学院 天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京 100083;
2北京大学 医药卫生分析中心,北京 100083;
3科技部 中国21世纪议程管理中心,北京 100089)
[摘要] 目的:分析我国中药材GAP基地之一所种植独活挥发油的化学成分,为其质量评价提供科学依据。方
法:采用水蒸气蒸馏法提取独活挥发油,用GC毛细管柱进行分析,归一化法测定其相对含量,并用GCMS法鉴定化学
成分。结果:检出229个色谱峰,鉴定出88个化合物,占挥发油总量的7823%。结论:独活挥发油的单萜类化合物及
其衍生物中,3蒈烯(889%)、间聚伞花素(499%)、β水芹烯(835%)等是主要成分,占总挥发油量的2223%;倍半
萜类化合物及其衍生物中,桉叶烷4(14),11二烯(436%)、α芹子烯(136%)、喇叭醇(114%)、α甜没药萜醇(603%)
和1,8二甲基4异丙基螺环[45]+8烯7酮(437%)等是主要成分,占总挥发油量的1726%。
[关键词] 伞形科;独活;挥发油;毛细管色谱;气相色谱质谱
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2006)08066304
[收稿日期] 20051025
[通讯作者] 杨秀伟,Tel:(010)82801569,Email:xwyang@bj
mueducn
传统中药独活系伞形科植物独活 Angelica
pubescensMaximfbiserataShanetYuan的干燥根,能
祛风除湿,通痹止痛。主要用治风寒湿痹、腰膝疼痛、
少阴伏风头痛等。湖北、四川、陕西均有分布,并有栽
培。在药用上因产地不同而形成不同的商品,著名的
有川独活、资丘独活、恩施独活、巴东独活、浙独活等。
湖北省独活种植示范基地为GAP基地之一。为了科
学评价其质量,作者首先对湖北省五峰县牛庄产三年
生独活的挥发油成分进行了研究,以期制定出评价独
活质量的挥发油气相色谱(GC)指纹图谱。
1 材料
独活药材于 2003年春季出苗刚发芽时采自湖
北省五峰县牛庄独活种植示范基地,三年生,将鲜根
阴干。其品种经湖北省中医药研究院王克勤研究员
鉴定为 Apubescensfbiserata。
2 方法
21 挥发油的制备
称取独活(干品)609201g,加水1L,按2000年
版《中国药典》一部附录 XD方法[1](不加二甲苯)提
取挥发油,用无水硫酸钠干燥后得淡黄色油状物
019mL(01344g),收油率为022%。
22 挥发油的GCMS联用分析
221 GCMS条件 美国 Finnigan公司 TRACEMS
气相色谱质谱联用仪。DB5石英毛细管色谱柱
(025mm×30m,025μm),进样口温度 260℃(3
min);程序升温,3℃·min-1,80℃(停留 10min)~
240℃(停留10min);载气为高纯氮气,流量 1mL·
min-1;进样量 02μL;分流比 50∶1。EI电离源,70
eV;离子源温度 250℃;加速电压 200V;扫描质量
30~500amu。
222 独活挥发油化学成分分析 对总离子流图
中各峰经质谱扫描后得到质谱图,通过 Xcalibur工
作站NIST标准质谱图库进行检索,确认各化合物;
通过 Xcalibur工作站数据处理系统,按峰面积归一
化法计算各化合物在挥发油中的相对含量(表1)。
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中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol31,Issue 8
April,2006
表1 独活挥发油成分
No
tR
/min
化合物名称
分子
质量
分子式
相对含量
/%
1 192 1甲基1,4环己二烯 1methyl1,4cyclohexadiene 94 C7H10 007
2 251 2甲基辛烷 2methyloctane 128 C9H20 045
31) 287 壬烷 nonane 128 C9H20 303
4 347 3蒈烯 3carene 136 C10H16 889
5 372 莰烯 camphene 136 C10H16 011
6 381 4亚甲基1异丙基双环[310]己2烯 4methylene1(1methylethyl)bicyclo[310]hex2ene 134 C10H14 005
7 396 3甲基壬烷 3methylnonane 142 C10H22 060
8 406 3亚甲基1,5,5三甲基环己烯 3methylene1,5,5trimethylcyclohexene 136 C10H16 064
9 414 香桧烯 4methylene1(1methylethyl)bicyclo[310]hexane 136 C10H16 016
10 425 lβ蒎烯 (1S)6,6dimethyl2methylenebicyclo[311]heptane 136 C10H16 049
11 442 β月桂烯βmyrcene 136 C10H16 047
12 458 癸烷 decane 142 C10H22 014
13 483 α水芹烯αphelandrene 136 C10H16 083
14 500 1,3,3三甲基三环[22102,6]庚烷 1,3,3trimethyltricyclo[22102,6]heptane 136 C10H16 107
151) 540 间聚伞花素 mcymene 134 C10H14 499
161) 559 β水芹烯βphelandrene 136 C10H16 835
17 623 2壬酮 2nonanone 142 C9H18O 009
18 664 2壬醇 2nonanol 144 C9H20O 006
19 688 正辛醇 1octanol 130 C8H18O 007
20 806 6莰烯酮 6camphenone 150 C10H14O 082
21 904 2甲基1亚甲基3(1甲基乙烯基)环戊烷 2methyl1methylene3(1methylethenyl)cyclopentane 136 C10H16 023
22 936 反式1甲基4异丙基2环己烯1醇 trans1methyl4(1methylethyl)2cyclohexen1ol 154 C10H18O 013
23 956 2,2,3三甲基3环戊烯1乙醛 2,2,3trimethyl3cyclopentene1acetaldehyde 152 C10H16O 003
24 1042 顺式1甲基4异丙基2环己烯1醇 cis1methyl4(1methylethyl)2cyclohexen1ol 154 C10H18O 010
25 1077 4,6,6三甲基双环[311]庚3烯2醇 4,6,6trimethylbicyclo[311]hept3en2ol 152 C10H16O 029
26 1138 戊基苯 pentylbenzene 148 C11H16 005
271) 1262 松油醇44methyl1(1methylethyl)3cyclohexen1ol 154 C10H18O 008
28 1289 (E,E)1,3,5十一烷三烯 undecatriene(E,E)1,3,5undecatriene 150 C11H18 004
29 1314 4(异丙基)2环己烯1酮 4(1methylethyl)2cyclohexen1one 138 C9H14O 167
30 1344 α松油醇α,α4trimethyl3cyclohexene1methanol 154 C10H18O 014
31 1373 6,6二甲基双环[311]庚烷2甲醇 6,6dimethylbicyclo[311]heptane2methanol 154 C10H18O 030
32 1407 香桧醇 1α,3α,5α4methylene1(1methylethyl)bicyclo[310]hexan3ol 152 C10H16O 015
33 1423 正癸醛 decanal 156 C10H20O 026
34 1468 (E)6壬烯1醇 (E)6nonen1ol 142 C9H18O 019
35 1596 2甲氧基4甲基1异丙基苯 2methoxy4methyl1(1methylethyl)bezene 164 C11H16O 046
36 1612 10甲基1十一碳烯 10methyl1undecene 168 C12H24 005
37 1761 3,5二甲氧基甲苯 3,5dimethoxytoluene 152 C9H12O2 006
38 1789 4异丙基1环己烯1甲醛 4(1methylethyl)1cyclohexene1carboxaldehyde 152 C10H16O 026
39 1817 4羟基3甲基苯乙酮 4hydroxy3methylacetophenone 150 C9H10O2 241
40 1859 (1S桥环)1,7,7三甲基双环[221]庚烷2醇乙酸酯 196 C12H20O2 050
(1Sendo)1,7,7trimethylbicyclo[221]heptan2olacetate
41 1898 1,3二异丙基1,3环戊二烯 1,3bis(1methylethyl)1,3cyclopentadiene 150 C11H18 060
42 1929 十三烷 tridecane 184 C13H28 015
431) 1970 香荆芥酚 2methyl5(1methylethyl)phenol 150 C10H14O 010
44 2168 8甲基1癸烯 8methyl1decene 154 C11H22 283
451) 2235 α衣兰油烯 1α,4aα,8aα1,2,4a,5,6,8ahexahydro4,7dimethyl1(1methylethyl)naphthalene 204 C15H24 019
46 2247 (+)环异酒剔烯 (+)cycloisosativene 204 C15H24 015
47 2303 乙酸癸酯 ndecylacetate 200 C12H24O2 013
48 2310 β古芸烯βgurjunene 204 C15H24 014
49 2372 [1S(1α,2β,4β)]1乙烯基1甲基2,4二(1甲基乙烯基)环己烷 204 C15H24 164
[1S(1α,2β,4β)]1ethenyl1methyl2,4bis(1methylethenyl)cyclohexane
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续表1
No tR/min 化合物名称
分子
质量
分子式
相对含量
/%
50 2486 [s(R,s)]3(1,5二甲基4己烯基)6亚甲基环己烯 204 C15H24 063
[s(R,s)]3(1,5dimethyl4hexenyl)6methylenecyclohexene
51 2609 2异丙烯基4a,8二甲基1,2,3,4,4a,5,6,7八氢化萘 204 C15H24 043
2isopropenyl4a,8dimethyl1,2,3,4,4a,5,6,7octahydronaphthalene
521)2636 α石竹烯αcaryophylene 204 C15H24 069
531)2660 β倍半水芹烯βsesquiphelandrene 204 C15H24 082
54 2667 (E)7,11二甲基3亚甲基1,6,10十二烷三烯 (E)7,11dimethyl3methylene1,6,10dodecatriene204 C15H24 079
55 2774 α姜黄烯 1(1,5dimethyl4hexenyl)4methylbenzene 202 C15H22 002
56 2784 桉叶烷4(14),11二烯 eudesma4(14),11diene 204 C15H24 436
57 2820 α芹子烯αselinene 204 C15H24 136
58 2831 8异丙烯基1,5二甲基环十碳1,5二烯 8isopropenyl1,5dimethylcyclodeca1,5diene 204 C15H24 036
591)2881 β甜没药烯 (S)1methyl4(5methyl1methylene4hexenyl)cyclohexene 204 C15H24 040
60 3067 喇叭醇 ledol 222 C15H26O 114
61 3109 (E)3,7,11三甲基1,6,10十二烷三烯3醇 (E)3,7,11trimethyl1,6,10dodecatrien3ol 222 C15H26O 045
62 3179 (-)蓝桉醇 (-)globulol 222 C15H26O 023
631)3211 橙花叔醇 3,7,11trimethyl1,6,10dodecatrien3ol 222 C15H26O 060
64 3240 α,α,3,8四甲基1,2,3,4,5,6,7,8八氢5奥甲醇 222 C15H26O 080
α,α,3,8tetramethyl1,2,3,4,5,6,7,8octahydro5azulenemethanol
65 3273 [1R(1R,3E,7E,11R)]1,5,5,8四甲基12环氧双环[910]十二烷3,7二烯 220 C15H24O 022
[1R(1R,3E,7E,11R)]1,5,5,8tetramethyl12oxabicyclo[910]dodeca3,7diene
66 3291 雪松醇 cedrol 222 C15H26O 021
67 3300 顺式澳白檀醇 cislanceol 220 C15H24O 023
68 3320 Zα反式佛手柑油烯醇 Zαtransbergamotol 220 C15H24O 025
69 3339 库比烯醇 cubenol 222 C15H26O 025
70 3357 α菖蒲二烯 [1S(1α,4β,5α)]1,8dimethyl4(1methylethenyl)spiro[45]dec7ene 204 C15H24 060
71 3423 荜澄茄醇 cadinol或 222 C15H26O 024
[1R(1α,4β,4aβ,8aβ)]1,2,3,4,4a,7,8,8aoctahydro1,6dimethyl4(1methylethyl)1naphthalenol
72 3433 14甲基环氧十四烷2酮 14methyloxacyclotetradecan2one 226 C14H26O2 079
73 3502 [3S(3α,3aβ,5α)]1,2,3,3a,4,5,6,7八氢α,α,3,8四甲基5奥甲醇 222 C15H26O 038
[3S(3α,3aβ,5α)]1,2,3,3a,4,5,6,7octahydroα,α,3,8tetramethyl5azulenemethanol
74 3521 6异丙烯基4,8a二甲基4a,5,6,7,8,8a六氢1H萘2酮 218 C15H22O 043
6isopropenyl4,8adimethyl4a,5,6,7,8,8ahexahydro1Hnaphthalen2one
751)3547 正十四碳烯 1tetradecene 196 C14H28 161
761)3582 α甜没药萜醇αbisabolol 222 C15H26O 603
77 3592 1,8二甲基4异丙基螺环[45]十碳8烯7酮 220 C15H24O 437
1,8dimethyl4(1methylethyl)spiro[45]dec8en7one
78 3647 去氢香橙烯 dehydroaromadendrene 202 C15H22 007
79 3718 Z9十四碳烯酸 Z9tetradecenoicacid 226 C14H26O2 203
80 4004 十二烷酸乙酯 ethyllaurate 228 C14H28O 017
81 4061 (Z)9十八碳烯酸甲酯 methyl(Z)9octadecenoate 296 C19H36O2 009
82 4131 Z11十六烯酸 Z11hexadecenoicacid 254 C16H30O2 027
83 4168 环氧十六8烯2酮 oxacycloheptadec8en2one 252 C16H28O2 013
84 4240 正十六醇 1hexadecanol 242 C16H34O 024
85 4388 十六酸甲酯 methylhexadecanoate 270 C17H34O2 028
86 4435 (Z,Z,Z)9,12,15十八碳三烯酸甲酯 methyl(Z,Z,Z)9,12,15octadecatrienoate 292 C19H32O2 014
87 4904 9,12十八碳二烯酸甲酯 methyl9,12octadecadienoate 294 C19H34O2 011
881)5042 甲氧基欧芹酚 osthole 244 C15H16O3 130
注:1)为首次从独活挥发油中鉴定出
3 结果和讨论
31 从独活挥发油中检出229个色谱峰,鉴定了88
个化合物的结构,占挥发油总量的 7823%;其中有
13个成分是首次从独活中鉴定出。在鉴定的成分
中,归类于单萜类及其衍生物的 3蒈烯(3carene,
889%)、β水芹烯(βphelandrene,835%)、间聚伞
花素 [mcymene,499%]等 占 挥 发 油 总 量 的
2223%,倍半萜类及其衍生物的桉叶烷4(14),11
二烯[eudesma4(14),11diene,436%]、α芹子烯
(136%)、喇叭醇(114%)、α甜没药萜醇(αbis
abolol,603%)、1,8二甲基4异丙基螺环[45]十
碳8烯7酮 [1,8dimethyl4(1methylethyl)spiro
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[45]dec8en7one,437%]等占挥发油总量的
1726%。它们是湖北省五峰县牛庄产独活的主要
成分。在挥发油中也检出了香豆素类化合物甲氧基
欧芹酚(osthole),占总挥发油量的130%。
32 应用GCMS,陈玄玄等[2]从湖北省恩施地区产
独活中鉴定出 21个化合物,主要成分为枞油烯
(sylvestrene),相对含量为 256%;周成明等[3]从北
京药材公司沙河仓库购买的独活中分离出约 50个
色谱峰,鉴定出32个化合物,主要成分有荒漠木烯
(670%)、百里香酚(574%)、β雪松烯(574%)、
草烯(550%)、对甲基苯酚(431%)和β雪松烯
(431%);邱琴等[4]从山东省药品采购供应站提供
的独活中分离出约 50个色谱峰,鉴定出 40个化合
物,主要成分为α蒎烯(1039%)和 1甲基2(1甲
乙基)苯。黄蕾蕾等[5]比较了浙独活、资丘独活和川
独活等3个不同产地和 3种商品独活的挥发油成
分,浙独活与资丘独活的共有成分有 12个,资丘独
活与川独活的共有成分有13个;3种商品独活的共
有成分仅有4个;从浙独活、资丘独活、川独活挥发
油中分离鉴定的化学成分数和相对百分含量分别为
29,82%;44,95%;25,55%。并认为由于产地气候、
土壤等自然条件及加工等不同,造成了独活挥发油
成分有一定的差异。
33 生物活性试验结果表明:蒈烯、水芹烯和桉叶
烷类化合物有较好的抗炎活性,可能与临床上应用
独活治疗风寒湿痹、腰膝疼痛、少阴伏风头痛等症有
关。黄蕾蕾等[6]的研究表明,独活的总挥发油对乙
酰胆碱致肠肌痉挛有较强的抑制作用;不同产地独
活醇提取物皆能抑制实验性血栓形成,其抑制顺序
为资丘独活>浙独活>川独活;不同产地独活挥发
油皆能抑制乙酰胆碱和组胺所至肠肌痉挛性收缩,
其作用强度的顺序为浙独活 >资丘独活 >川独
活[5]。
[致谢] 湖北省中医药研究院王克勤研究员、湖北中医
学院詹亚华教授提供独活样品。
[参考文献]
[1] 中国药典 一部 2000附录64
[2] 陈玄玄,韩昌志,杨红武 独活挥发油的 GCMS分析 南京药
学院学报,1986,17(4):252
[3] 周成明,姚 川,孙海林 独活挥发油化学成分的研究 中药
材,1990,13(8):29
[4] 邱 琴,刘廷礼,崔兆杰,等 独活挥发油化学成分的气相色谱
质谱法测定 分析测试学报,2000,19(2):58
[5] 黄蕾蕾,熊世平,周 治,等 不同产地独活挥发油化学成分的
比较研究 武汉植物学研究,2002,20(1):78
[6] 黄蕾蕾,黄明星,熊世平,等 独活类药材挥发油的比较研究
湖北中医杂志,2001,23(3):49
GCMSanalysisofessentialoilsfromRadixAngelicaePubescentis
YANGXiuwei1,2,LIUYufeng1,TAOHaiyan1,2,YANGZhi3,XIAOShiying3
(1StateKeyLaboratoryofNaturalandBiomimeticDrugs,SchoolofPharmaceuticalSciencesofPekingUniversity,Beijing100083,
China;
2MedicalandHealthyAnalysisCenter,PekingUniversity,Beijing100083,China;
3AdministrativeCentreforChina’sAgenda21,MinistryofScienceandTechnologyofChina,Beijing100089,China)
[Abstract] Objective:ToanalyzetheconstituentsoftheessentialoilsfromRadixAngelicaePubescentisplantedinaGAPbaseofthe
Chinesemedicamaterials,andprovidethescientificbasisforqualitycontrolMethod:Theessentialoilswereextractedbywatersteamdistil
lationandseparatedbyGCcapilarycolumnchromatographyThecomponentswerecalculatedwithnormalizationmethod,andwereidentified
byMSdetectorResult:229peaksweredetected,amongwhich88compoundshavebeenidentified,whichmadeup7823%ofthetotales
sentialoilConclusion:InthetotalessentialoilsofRadixAngelicaePubescentis,3carene(889%),mcymene(499%)andβphelan
drene(835%)asthemonoterpenesanditsderivatives,andeudesma4(14),11diene(436%),αselinene(136%),ledol(114%),
αbisabolol(603%),and1,8dimethyl4(1methylethyl)spiro[45]dec8en7one(437%)asthesesquiterpenesanditsderivatives,
aremaincomponents
[Keywords] Umbeliferae;RadixAngelicaePubescentis;essentialoil;capilarychromatography;GCMS
[责任编辑 李 禾]
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