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HPLC fingerprint of Rhizoma Polygoni Cuspidati

虎杖药材HPLC指纹图谱研究



全 文 :代叶下珠种子的繁殖能力 !后代的生长发育特性等
有待进一步研究 ∀
≈参考文献 
≈t  赵永华 o郭玉海 q我国叶下珠属药用植物资源的开发利用 q生物
学通报 ousss ovxktul }v| q
≈u  蔡 瑾 o梁敬珏 q叶下珠化学成分及药理作用研究概况 q海峡药
学 oussv otxktl }t q
≈v  王荣国 q叶下珠抗乙肝病毒研究概况 q中医药研究 ousst otz
ktl }x{ q
≈w  沈志强 o陈 蓬 o段 理 o等 q叶下珠有效部位对凝血系统的影
响 1 中草药 oussw ovxkxl }xv|
≈x  李荣英 o李学兰 o管艳红 q苦味叶下珠种子发芽试验 1 中药材 o
ussw ouzktl }w q
≈y  李荣英 o李学兰 o管艳红 o等 q苦味叶下珠栽培技术 1 中药材 o
ussw ouzkzl }wz{ q
≈z  李彩东 o梁 云 o李惠新 o等 q珠子草在北方的栽培技术研究 1
中药研究与信息 oussx ozkul }u| q
Ορτηογοναλ εξπεριµεντσ ον χυλτιϖατιον οφ Πηψλλαντηυσ υριναρια
ƒ„‘∏±2¤±t o‹„‘Š ≠¤±u o ÷Œ„ ≠²±ª2³¨ ±ªv o ±Œ˜ «²±ª2¼¬±t
(t1 Χηονγθινγ Υνιϖερσιτψ οφ Μεδιχαλ Σχιενχε , Χηονγθινγ wsssty , Χηινα ;
u1 Χηονθινγ Αχαδεµψ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα , Χηονγθινγ wsssyx , Χηινα ;
v1 Χηονγθινγ Φοοδ ανδ ∆ρυγ Αδµινιστρατιον , Χηονγθινγ wssswu , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ ªµ²º·«µ∏¯ ¶¨o·«¨ ²∏·³∏·¤±§·«¨ ¬±©¯∏¨ ±¦¨ ©¤¦·²µ¶²©¦∏¯·¬√¤·¨§ Πηψλλαντηυσ υριναριαo¤±§³µ²√¬§¨
¥¤¶¬¶©²µ¶·¤±§¤µ§¬½¨ §¦∏¯·¬√¤·¬²±1 Μετηοδ : ’µ·«²ª²±¤¯ ¼¯ §¨¶¬ª±¨ §©¬¨ §¯ ¬¨³¨µ¬° ±¨·¶º¬·«·«µ¨¨©¤¦·²µ¶¤±§·«µ¨¨¯¨ √¨¯¶o¦²°³¤µ¬±ª·«¨ ¦«¤µ¤¦2
·¨µ¶²©¦∏¯·¬√¤·¨§³¯¤±·¶¤±§·«¨ º¬¯§²±¨ ¶²© Π1 υριναρια1 Ρεσυλτ ανδ Χονχλυσιον : ˜±§¨µ·«¨ °¤±∏¤¯ ³¯¤±·¨µ¦²±§¬·¬²±o·«¨ ¦«¤µ¤¦·¨µ¶o¶∏¦«
¤¶¥µ¤±¦«¬±ª±∏°¥¨µo¶¬±ª¯¨§µ¼ º ¬¨ª«·o¶¬±ª¯¨²∏·³∏· ·¨¦o¨ ±«¤±¦¨§ ±¨²µ°²∏¶¯¼ o¤±§·«¨ ¬±¦µ¨¤¶¨ ²©¶¬±ª¯¨²∏·³∏·µ¨¤¦«¨¶v1uz ·¬° ¶¨1 ׫¨
¶²º¬±ª·¬°¨º¤¶·«¨ °²¶·¶¨±¶¬·¬√¨©¤¦·²µoº«¬¦«¤©©¨¦·¨§·«¨ ¶¬±ª¯¨¦«¤µ¤¦·¨µ¤±§·«¨ ¼¬¨ §¯³¨µ∏±¬·²©¤µ¨¤oº«¨µ¨¤¶·«¨ §¬©©¨µ¨±·¯ √¨¨¯¶²©¶²º2
¬±ª·«¬¦®±¨ ¶¶¤±§©¨µ·¬¯¬½¨ µ¤¯¶²µ¨°¤µ®¤¥¯¼¬±©¯∏¨ ±¦¨§·«¨ ²∏·³∏·1 • «¨ ±·«¨ ¶¨ §¨¶º µ¨¨ ¶²º §¨¤··«¨ °¬§2„³µ¬¯ ¤¨µ¯¬¨µ³¨µ¬²§o§µ¬¯¯¬±ªº¬·«·«¨
us ¦° µ²º ¶³¤¦¬±ªo·«¨ ¼ ¶·¤µ·¨§·² °¨ µ¨ª¨ ¤¥²∏·t º¨¨ ® ¤¯·¨µo·«¨ ªµ²º·«©¯∏¶« ³¨µ¬²§ º¤¶©µ²° ∏±¨ ·² „∏ª∏¶·o·«¨ ªµ²º·«¶¯²º §¨§²º±¬±
≥¨ ³·¨°¥¨µo¤±§·«¨ ²∏·³∏·³¨µ«¨¦·¤µ¨ ¦²∏¯§µ¨¤¦«·²x1zxs ®¬¯²ªµ¤°¶¤·«¤µµ¨¶·¬± ¤¯·¨ ’¦·²¥¨µ1
[ Κεψ ωορδσ] Πηψλλαντηυσ υριναρια~¦∏¯·¬√¤·¬²±·¨¦«±²¯²ª¼~©¬¨ §¯ ¬¨³¨µ¬° ±¨·~ªµ²º·«µ∏¯¨
≈责任编辑 张宁宁 
≈收稿日期  ussx2s{2uv
≈基金项目  四川省科技厅重点科技项目ksw‘Šsus2svtsul
≈通讯作者  3马云桐 oר¯ }ksu{l{yzytvzy o∞2°¤¬¯} °¼yx|v ƒ √¬³1tyv1¦²°
虎杖药材 ‹°≤指纹图谱研究
马云桐t 3 o万德光t o宋良科u
kt q成都中医药大学 药学院 o四川 成都 ytsstx ~
u q西南交通大学 药学院 o四川 峨眉 ywustul
≈摘要  目的 }建立虎杖药材 ‹°≤指纹图谱测定方法 ∀方法 }采用 ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{柱 o流动相为乙腈2s1t h磷酸
水溶液线性梯度洗脱 o检测波长为 uvs ±° ∀采用中南大学出版的指纹图谱相似度比较软件进行比较 ∀结果 }运用
梯度洗脱能很好分离虎杖的各类成分 o通过软件的比较 o虎杖药材的指纹图谱相似度均大于 s1{s ∀结论 }本研究所
建立的方法可作为虎杖药材质量标准制定参考依据 ∀
#uz|#
第 vt卷第 tu期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tu
∏±¨ oussy
≈关键词  虎杖 ~‹°≤ ~指纹图谱
≈中图分类号  • u{w1t ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltu2s|zu2sv
虎杖为蓼科植物虎杖 Πολψγονυµ χυσπιδατυµ
≥¬¨¥1 ·¨∏¦¦1的干燥根及根茎 ∀主产于江苏 !浙江 !
安徽 !四川 !云南等省≈t  ∀虎杖主要含蒽醌 !二苯乙
烯类 !鞣质及多糖类成分≈u  ∀ 5中国药典6ussx年版
一部虎杖项下以大黄素 !虎杖苷的含量来控制质
量≈v  o现因白藜芦醇的广泛使用 ~该方法难以真正控
制虎杖药材的质量 ∀参照国家药典委员会5中药指
纹图谱研究的技术要求6和补充规定 o作者以 ‹°≤
梯度洗脱法对虎杖药材指纹图谱进行了研究 o试验
证明 o本实验建立的方法 o可操作性强 o重复性好 o符
合指纹图谱检测要求 ∀
1 仪器与试药
≥«¬°¤§½∏≤高效液相色谱仪k≥°⁄p ts„∂°检
测器l o≤¯ ¤¶¶p √³色谱工作站 ∀乙腈k色谱纯 o美国
ƒ¬¶«¨µ公司产l o自制重蒸水 o其他试剂均为分析纯 ∀
大黄素k批号 ttszxy2ussutsl !大黄素甲醚k批
号 ttszx{2ussvszl !虎杖苷k批号 tttxzx2ussvstl对
照品均为中国药品生物制品检定所制备 ~白藜芦醇
购自美国 ≥¬ª°¤公司 o批号 swwŽxusy ∀
虎杖药材共 uv批 o经成都中医药大学万德光教
授鉴定为蓼科植物虎杖 Π1 χυσπιδατυµ 的干燥根及
根茎 o见表 t ∀
表 t 虎杖药材来源
编号 采集地 编号 采集地
t 四川青城山tl tv 河北安国市场
u 四川洪雅tl tw 四川巴中基地ul
v 贵州tl tx 四川巴中基地ul
w 四川巴中基地ul ty 四川巴中基地ul
x 四川巴中基地ul tz 四川巴中基地ul
y 四川巴中基地ul t{ 四川巴中基地ul
z 四川巴中基地ul t| 贵州tl
{ 四川巴中基地ul us 四川巴中tl
| 四川雅安tl ut 四川邻水tl
ts 四川雅安tl uu 四川屏山tl
tt 四川巴中tl uv 四川宣汉tl
tu 河北安国市场
注 }tl为野生 oul为种植
2 方法与结果
211 色谱条件
流动相为乙腈2s1t h磷酸溶液二元梯度洗脱 o
流速 t1s °#°¬±pt o检测波长 uvs ±° o色谱柱 ⁄¬¤2
°²±¶¬¯ ≤t{kw1y °° ≅ uxs °° ox Λ°l o柱温 ux ε ∀梯
度程序见表 u ∀
表 u 线性梯度洗脱流动相配比变化程序
时间r°¬± 乙腈r h s1t h磷酸水溶液r h
s tx {x
vs vx yx
xs yx vx
zs {s us
212 供试品溶液的制备
取样品粉末约 t ªo精密称定 o置具塞锥形瓶中 o
加 zs h乙醇 us °o称重 o超声提取 ws °¬±o放冷 o称
重 o补足减失的质量 o滤过 o取续滤液适量 o以 s1wx
Λ°微孔滤膜滤过 o即得 ∀
213 对照品溶液的制备
取大黄素 !大黄素甲醚 !虎杖苷 !白藜芦醇适量 o
分别加甲醇制成每 t °含 s1u °ª的对照品溶液 o
摇匀 o即得 ∀
214 指纹图谱的方法学验证
21411 精密度试验 取同一份供试品溶液 o重复
进样 y次 o以白藜芦醇峰为参照峰 o对主要色谱峰的
相对保留时间及相对峰面积进行统计 o• ≥⁄ 
v1s h o表明精密度良好 ∀
21412 稳定性试验 取同一份样品 o分别在 s ou o
w oy otu ouw «等 y个时间点进行检测 o以白藜芦醇峰
为参照峰 o对主要色谱峰的相对保留时间及相对峰
面积进行统计 o • ≥⁄ v1s h o表明在此时间内供试
品溶液的成分是稳定的 ∀
21413 重复性试验 取同一批号的供试品 x份 o按
上述方法进行测定 o以白藜芦醇峰为参照峰 o对主要
色谱峰的相对保留时间及相对峰面积进行统计 o
• ≥⁄ v1s h o表明该方法的重复性较好 ∀
215 结果
21511 虎杖指纹图谱 uv批虎杖药材按照同样方
法制备供试品溶液 o在同样色谱条件下测定 ‹°≤
色谱图 o通过对照品试验 o考察对照品的保留时间 o
鉴别了虎杖药材 ‹°≤ 指纹图谱中的大黄素 !虎杖
苷 !白藜芦醇 !大黄素甲醚 ∀见图 t ∀
21512 相似度 采用中南大学中药现代化研究所
的相似度评价软件对上述 uv批药材的指纹图谱进
行相似度的分析 ∀以相关系数k中位数l代表其相似
度 ouv 批药材的相似度分别为 s1{wu y os1{v| v o
#vz|#
第 vt卷第 tu期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tu
∏±¨ oussy

图 t 虎杖 ‹°≤指纹图谱
t1虎杖苷 ~u1 白藜芦醇 ~v1大黄素 ~w1 大黄素甲醚
s1{vs z os1|ys s os1|u| u os1|yy w os1|xv s os1|vz x o
s1{yv | os1{yx { os1|vt s os1{y| t os1{zt v os1|xw t o
s1|{v | os1|z{ s os1|{v z os1|{t u os1{vt | os1|wy w o
s1|yz { os1{|t v os1|vs { ∀其中 o有 tw批药材的相
似度在 s1|s以上 o|批药材的相似度在 s1{s ∗ s1|s o
见图 u ∀
图 u uv批虎杖药材的指纹图谱比较
3 讨论
311 考察了不同波长下的指纹图谱 o在 uvs ±°处 o
虎杖含有的主要成分蒽醌及其苷类 !虎杖苷 !白藜芦

醇均有较强的吸收 o出峰数量多 o故选择 uvs ±°作
为指纹图谱的检测波长 ∀不同厂家色谱柱的考察结
果表明 o⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{kw1y °° ≅ uxs °° ox Λ°l相对
于另外 v种色谱柱 „¯ ·¯¬°¤ ≤t{kw1y °° ≅ uxs °° ox
Λ°l o׌„‘‹∞ ≤t{kw1y °° ≅ uxs °° ox Λ°l o‹¼³¨µ¶¬¯
≤t{kw1y °° ≅ uxs °° ox Λ°l而言 o出峰数量较多 o分
离度高 o峰形对称性好 o故选用 ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{
kw1y °° ≅ uxs °° ox Λ°l 色谱柱 ∀柱温的选择方
面 o比较了 us oux ovs ovx ε 对色谱分离的影响 o柱温
为 ux ε 时出峰数量较多 o分离度高 o故确定柱温为
ux ε ∀
312 在选择流动相时 o用乙腈2s1t h磷酸溶液系统
要比甲醇2s1t h磷酸溶液的系统分离度高 o峰形对
称性好 ∀u «的图谱显示 zs °¬±后再没有其他特征
峰出现 ∀
313 在供试品的制备上 o分别采用水 !xs h甲醇 !
xs h乙醇 !zs h甲醇 !zs h乙醇 !甲醇和乙醇对虎杖
药材进行提取 o结果 zs h乙醇提取效率较高 o色谱
峰数量最多 o色谱峰的强度较大 o虎杖苷 !白藜芦醇
等特征性成分的出峰好 o图谱稳定 ∀
≈参考文献 
≈t  肖培根 1 新编中药志 1 第 t卷 1 北京 }化学工业出版社 oussu1
xz|1
≈u  肖 凯 o宣利江 o徐亚明 o等 1 虎杖的化学成分研究 1 中国药学
杂志 oussv ov{ktl }tu1
≈v  中国药典 1 一部 1 ussx1 twx1
ΗΠΛΧ φινγερπριντ οφ Ρηιζοµα Πολψγονι Χυσπιδατι
„ ≠∏±2·²±ªt o • „‘⁄¨ 2ª∏¤±ªt o≥’‘Š ¬¤±ª2®¨ u
(t1 Πηαρµαχψ Σχηοολ οφ Χηενγδυ Υνιϖερσιτψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Χηενγδυ ytsszx , Χηινα ;
u1 Πηαρµαχψ Σχηοολ οφ Σουτηωεστ ϑιαοτονγ Υνιϖερσιτψ, Εµει ywussu , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«·«¨ ‹°≤ ©¬±ª¨µ³µ¬±·²© • «¬½²°¤ °²¯¼ª²±¬≤∏¶³¬§¤·¬k Πολψγονυµ χυσπιδατυµ l1 Μετηοδ : ׫¨
‹°≤ ¶¨³¤µ¤·¬²± º¤¶¦¤µµ¬¨§ º¬·« ⁄¬¤°²±¶¬¯ ≤t{ ¦²¯∏°± ¤±§¨¯∏·¨§ º¬·«¤ ªµ¤§¬¨±·©µ²° ° ·¨«¤±²¯ ¤±§s1t h ³«²¶³«²µ¬¦¤¦¬§o·«¨ §¨·¨¦·¬²±
º¤√¨¯ ±¨ª·« º¤¶¤·uvs ±° ¤±§µ¨¦²µ§¬±ªzs °¬±1 ׫¨ ¶¬°¬¯¤µ¬·¼ ²©¦«µ²°¤·²ªµ¤°¶º¤¶¦²°³¤µ¨§¥¼ ° ¤¨± ²©·«¨ ¶²©·º¤µ¨ ©µ²° «²±ª±¤± ˜±¬2
√ µ¨¶¬·¼1 Ρεσυλτ : ׫¨ ¦²±¶·¬·∏¨±·¶²© Π1 χυσπιδατυµ º µ¨¨ º¨¯¯¶¨³¤µ¤·¨§¥¼ ‹°≤ o¤±§·«¨ ¶¬°¬¯¤µ¬·¼ º¤¶¤¥²√¨s1{s1 Χονχλυσιον : ׫¨ ° ·¨«²§
¦¤± ¥¨ ∏¶¨§©²µ·«¨ ¶·∏§¼ ²©©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²© •«¬½²°¤°²¯¼ª²±¬≤∏¶³¬§¤·¬1
[ Κεψ ωορδσ] Πολψγονυµ χυσπιδατυµ ~ ‹°≤ ~©¬±ª¨µ³µ¬±·
≈责任编辑 张宁宁 
#wz|#
第 vt卷第 tu期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tu
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