全 文 ：Ｔｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｔｈａｔｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｄｕｃｉｎｇｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｔｕｍｏｒｃｅｌｍａｙｂｅｏｎｅｏｆｔｈｅａｎｔｉｃａｎｃｅｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｈｅ
ｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆＲａｄｉｘｅｘＲｈｉｚｏｍａＧｉｎｓｅｎｇａｎｄＦａｆｃｅｓＴｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｉ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ＲａｄｉｘｅｘＲｈｉｚｏｍａＧｉｎｓｅｎｇ；ＦａｆｃｅｓＴｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｉ；ｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆｍｅｄｉｃｉｎｅ；ＭＴＴ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ
［责任编辑 古云侠］
三七对高脂血清刺激的大鼠血管平滑
肌细胞增殖的抑制作用
王 晶，胡晋红
（第二军医大学 长海医院，上海 ２００４３３）
［摘要］ 目的：考察三七对高脂血清刺激的大鼠血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ，ＶＳＭＣ）增殖的影
响，为评价三七的降血脂作用及其机制研究提供依据。方法：大鼠高脂血症模型给予不同剂量三七处理，２周后分
离血清，分别以未处理组血清、各处理组血清刺激ＶＳＭＣ增殖，并采用 ＭＴＴ的测定 Ａ值，研究三七对高脂血清刺激
的大鼠ＶＳＭＣ增殖的抑制作用。结果：与正常血清相比，高脂血清能显著促进ＶＳＭＣ的增殖（Ｐ＜００５），而含三七的
高脂血清对ＶＳＭＣ增殖的促进作用与高脂血清相比其作用明显减弱（Ｐ＜００５）。结论：三七对高脂血清刺激的大
鼠血管平滑肌细胞增殖有明显的抑制作用，该法可为降脂药物体外研究提供借鉴。
［关键词］ 三七；ＭＴＴ；血管平滑肌细胞；血清药理学
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００６）０７０５８８０３
［收稿日期］ ２００５０３２０
［基金项目］ 国家高技术研究发展计划（８６３计划）资助项目
（２００２ＡＡ２Ｚ３４６Ｃ）
［通讯作者］ 胡晋红，Ｔｅｌ：（０２１）２５０７０６６５，Ｅｍａｉｌ：ｈｕｊｈ＠ｓｍｍｕ．
ｅｄｕ．ｃｎ．
在细胞水平上研究细胞的存活和增殖情况，目
前主要的检测方法有活细胞计数法、同位素掺入法、
ＭＴＴ法［１］。前２种方法易受主观因素影响或使用放
射性同位素易造成环境污染，在应用上有—定的局
限性。ＭＴＴ法具有简便易行、灵敏度高、结果客观可
靠、安全价廉等优点，目前认为在生物学和医学的许
多研究领域中是一种有效的技术手段［２］。现代药理
研究证明，传统中药三七具有广泛的药理活性［３］，本
实验利用ＭＴＴ法来考察含三七的高脂血清对体外
培养的大鼠血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅ
ｃｅｌｓ，ＶＳＭＣ）生长的影响，为评价三七的降血脂作用
及其机制研究提供依据。
１ 材料与方法
１１ 动物 ＳＤ大鼠，雄性，体重（１８０±２０）ｇ，由第
二军医大学实验动物中心提供，许可证号 ＳＹＸＫ
（沪）２００２００２６。
１２ 药材 三七 Ｐａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ（Ｂｕｒｋ）Ｆ．Ｈ．Ｃｈｅｎ
为五加科人参属植物。粉末粒度分别为：超细三七
粉，样品编号 ００５０１，平均粒径（１１８６±０２３７）μｍ；
普通三七粉，符合２０００年版《中国药典》最细粉要求
（均为云南省文山坤七药业有限公司生产，云南省文
山三七研究所惠赠）。
１３ 试剂 ＤＭＥＭ培养基（Ｇｉｂｃｏ公司），ＭＴＴ（Ｓｉｇｍａ
公司），新生牛血清（ＦＣＳ，杭州四季青生物工程材料
有限公司），二甲亚砜（ＤＭＳＯ，分析纯，北京亚太精细
化工公司），αｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ平滑肌肌动蛋白检
测试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司）。
１４ 仪器 ＥＬＸ８００型全自动酶标分析仪（ＢＩＯ
ＴＥＫｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉｎｃ）。
１５ ＶＳＭＣ的培养 实验用大鼠断头弃血，用７５％
乙醇浸泡１０ｍｉｎ，迅速转入无菌超净台，无菌条件下
迅速取出大鼠主动脉胸腹段，ＤＨａｎｋｓ液冲洗，去除
内皮、外膜，剪成 １ｍｍ×１ｍｍ的组织块，贴于培养
瓶内壁。将贴有组织块的瓶壁朝上，置于３７℃，５％
ＣＯ２培养箱中培养，加入适量含 ２０％ＦＣＳ的 ＤＭＥＭ
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中 国 中 药 杂 志
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Ａｐｒｉｌ，２００６
培养液，待组织块边缘液体干后，翻转培养瓶，使组
织块完全浸没于培养液中，放回孵育箱，静置１周。
１～２周后形成单层细胞，用 ０．２５％胰蛋白酶消化，
按１∶２或１∶３传代。参照武汉博士德公司提供的试
剂盒检测方法，采用αｓｍａｃｔｉｎ单克隆抗体检测细
胞。实验用第５～９代。
１６ 高脂模型的建立及给药方案 ＳＤ大鼠，６６
只。饲养条件：每笼 ６只，饲养温度（２３±１）℃，湿
度４０％～７０％。适应性饲养 １周后，大鼠根据体重
随机分成８组：正常对照组、模型组、普通三七粉高
（５００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）、中（２５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）、低（１２５
ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）和超细三七粉高（５００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）、
中（２５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）、低（１２５ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）剂量
组。除正常对照组给予基础饲料喂养外，其余各组
按１０ｍＬ·ｋｇ－１·ｄ－１剂量灌胃喂食高脂饲料［４］（含
５％胆固醇，２０％猪油，２％胆酸钠，０．１％甲巯咪唑，
７２．９％基础饲料）。当形成高脂血症后，按上述剂量
给予不同实验药物灌胃。２周后大鼠眼眶静脉丛取
血，离心分离血清。
１７ 含药血清的制备 将上述动物模型实验中所
取血液５０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１５ｍｉｎ后，分离血清（切忌
取到血细胞），血清呈透明、清亮、淡黄色，无沉淀，未
溶血，５６℃，３０ｍｉｎ灭活，０２２μｍ微孔滤膜滤过，
－２０℃冻存，１月内使用。
１８ 方法 参照文献［２］方法：将 ＶＳＭＣ按 ７５×
１０５个／ｍＬ，种入９６孔细胞培养板。然后按实验分组
加入不同含三七的高脂血清，使血清含量为５％，并
设立空白组，以不含药的大鼠高脂血清的 ＤＭＥＭ培
养基（血清终含量为 ５％）为模型组，每个处理组设
立３个复孔。作用 １６ｈ后，加入 ＭＴＴ溶液（５ｍｇ·
ｍＬ－１）２０μＬ，置３７℃，ＣＯ２培养箱中培养 ４ｈ，终止
培养，弃去原培养液，每孔加入１５０μＬＤＭＳＯ溶解，
振荡至结晶物充分溶解。在全自动酶标仪上以６３０
ｎｍ为参比波长，测定５７０ｎｍ处的吸光度（Ａ）。
１９ 统计方法 数据以珋ｘ±ｓ表示，２组均数比较
采用 ｔ检验。
２ 结果
图１显示，从 Ａ值可见模型组与正常组相比可
显著刺激ＶＳＭＣ的增殖（Ｐ＜００５），含三七的高脂血
清组较模型组相比，其 Ａ值均有不同程度降低，统
计结果显示，两组数据较模型组相比均有显著性差
异（Ｐ＜００５），即含三七的高脂血清与高脂血清相
比其对ＶＳＭＣ增殖的促进作用显著减弱，呈现一定
的剂量依赖性，且超细三七组抑制作用强于普通三
七组，但只在高剂量组有统计学意义。
图１ 不同粉碎度三七对高脂血清
刺激的ＶＳＭＣ增殖的抑制作用
与模型组比Ｐ＜００５
图２ 不同剂量三七对高脂血清刺激的
ＶＳＭＣ增殖的抑制作用
与细粉组比Ｐ＜００５
图２显示，同等剂量不同粉碎度的三七其对高脂
血清刺激的ＶＳＭＣ增殖的抑制作用不同，超细组作用
强于普通组，但只在高剂量组呈现显著性差异（Ｐ＜
００５）。
３ 讨论
血管平滑肌细胞的异常增殖是高血脂症及由此
引起的动脉粥样硬化的关键病变过程［５］，因此抑制
这种病理变化对预防和治疗高脂血症有着重要意
义。药理学研究的关键是能模拟出与人体尽可能相
似的病理变化。高脂血清对ＶＳＭＣ的刺激是导致其
异常增殖的重要原因，可以考察药物对高脂血清刺
激下的ＶＳＭＣ增殖的影响评价药物的降脂作用并进
一步研究其机制。
中药因其多成分、在水中难溶等特点一直制约
着中药的体外研究，而中药“血清药理学”为此提供
了一种有效的解决方法。通过给动物灌服中药，在
一定的时间里，取其血清进行实验。该方法主要针
对中药及其复方复杂多样的化学成分特点，用含药
血清代替煎剂或粗提物进行体外实验，具有更强的
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可信性和科学性，并可结合现代微生物学、分子生物
学、临床等学科进行研究［６］。
本实验采用血清药理学的方法，考察了三七及
其超细粉对 ＶＳＭＣ在高脂血清刺激下增殖的影响。
结果表明，含三七的高脂血清对 ＶＳＭＣ增殖的抑制
作用较模型组相比具有显著差异，且呈现一定的剂
量依赖性。因此可能从一个侧面反映了三七的降血
脂作用。同等剂量的不同粉碎度的三七相比，超细
粉的抑制作用强于普通三七粉，但只在高剂量组有
显著性差异。总之含三七的高脂血清对 ＶＳＭＣ的增
殖有抑制作用，说明三七具有降血脂、预防动脉粥样
硬化的作用，为后期进一步开展药效学及药物作用
机制研究提供了依据。
［参考文献］
［１］ ＭｏｓｍａｎｎＴ．Ｒａｐｉｄｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃａｓｓａｙｆｏｒｃｅｌｕｌａｒｇｒｏｗｔｈａｎｄｓｕｒｖｉｖａｌ：
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［４］ 高 焱，于文功，韩 峰，等．甘糖酯对高脂血症大鼠血脂及
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［５］ ＧｌａｓｓＣＫ，ＷｉｔｚｔｕｍＪＬ．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ：ｔｈｅｒｏａｄａｈｅａｄ．Ｃｅｌ，２００１，
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ｍｅｔｈｏｄ．ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９８７，２１（１）：４５．
ＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｅｃｔｏｆＰａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｏｎｔｈｅＶＳＭＣｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｉｎｄｕｃｅｄｂｙｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｓｅｒｕｍ
ＷＡＮＧＪｉｎｇ，ＨＵＪｉｎｈｏｎｇ
（ＣｈａｎｇｈａｉＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００４３３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆＰ．ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｏｎｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌ（ＶＳＭＣ）ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｂｙｈｙ
ｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｓｅｒｕｍ．Ｍｅｔｎｏｄ：ＭＴＴｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｓｅｒｕｍａｎｄｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｐｌｕｓＰ．ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ
ｏｎＶＳＭＣｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＨｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｓｅｒｕｍｃｏｕｌｄｐｒｏｍｏｔｅＶＳＭＣｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙａｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜
００５），ｗｈｉｌｅｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｐｌｕｓＰ．ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｃｏｕｌｄｗｅａｋｅｎｔｈｉｓｅｆｅｃｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜００５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｐ．ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｃａｎｓｉｇｎｉｆｉ
ｃａｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅＶＳＭＣｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｅｄｂｙｈｙｐｅｒｌｉｐｉｄｅｍｉａｓｅｒｕｍ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｐａｎａｘｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ；ＭＴＴ；ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｓ；ｓｅｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ［责任编辑 古云侠］
［收稿日期］ ２００５１０１５
［基金项目］ 国家中医药管理局面上项目（０４０５ＺＰ７０）
［通讯作者］ 赵艳玲，Ｔｅｌ：（０１０）６６９３３３２４
生物热力学法观察板蓝根不同提取部位
对小鼠淋巴细胞的影响
赵艳玲１，２，肖小河１，廖庆文１，王伽伯１，马永刚１，鄢 丹１，金 城１
（１解放军３０２医院 中药研究所，北京 １０００３９；
２军事医学科学院，北京 １００８５０）
［摘要］ 目的：观察板蓝根不同提取部位对小鼠淋巴细胞增殖作用的影响。方法：分离培养小鼠淋巴细胞，以
生物热动力学方法观察板蓝根不同提取部位的免疫活性，并以常规离体细胞培养法进行药效学验证。结果：板蓝
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