全 文 ：复方海蛇胶囊抗 ＰＣ１２细胞凋亡研究
沈悦娣１，张力三２，姚航平３，赵光树３，陈　炜２
（１．杭州师范大学 临床医学院 附属医院，浙江 杭州 ３１００３６；
２．浙江大学 医学院 附属邵逸夫医院 浙江省生物治疗重点实验室，浙江 杭州 ３１００１６；
３．浙江大学 医学院 附属第一医院，浙江 杭州 ３１０００３）
［摘要］　目的：研究复方海蛇胶囊对β淀粉样蛋白（Ａβ１～４２）诱导的 ＰＣ１２细胞凋亡的影响，探讨复方海蛇胶
囊应用于痴呆的治疗机制。方法：采用四氮唑蓝比色法（ＭＴＴ法）确定复方海蛇胶囊对神经生长因子（ＮＧＦ）诱导培
养ＰＣ１２细胞的安全剂量后，加或不加Ａβ，分别用ＭＴＴ法、流式细胞术（ＦＣＭ术）检测不同质量浓度的复方海蛇胶
囊（００１，０１，１，５ｍｇ·ｍＬ－１）对 ＰＣ１２细胞凋亡的影响；用蛋白免疫印迹（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）法分别检测凋亡执行酶
ｃａｓｐａｓｅ９与ｃａｓｐａｓｅ３的活性。结果：复方海蛇胶囊对 ＮＧＦ诱导培养的 ＰＣ１２细胞的安全剂量为小于 １０ｍｇ·
ｍＬ－１。复方海蛇胶囊各剂量组对 Ａβ诱导的 ＰＣ１２细胞的凋亡具有明显的抑制作用。各组数据（Ａ）分别为：
１７５±０１２，０７３±０３５，０７９±０１１，０８３±００７，１３１±００７和１８０±０３８，与空白组比较Ｐ＜００１，流式细胞
检测中凋亡细胞的百分率降低（１９３±０４１）％，（４６１７±４０８）％，（３５３５±４６３）％，（２８６２±３８１）％，
（１５１３±３１５）％，（７８４±１７６）％，与空白组比较 Ｐ＜００１。另外，复方海蛇胶囊抑制了 Ａβ诱导 ＰＣ１２细胞的
ｃａｓｐａｓｅ９和ｃａｓｐａｓｅ３活性的增高。结论：复方海蛇胶囊可显著抑制Ａβ诱导ＰＣ１２细胞的凋亡，其机制可能通过抑
制凋亡执行酶ｃａｓｐａｓｅ９，ｃａｓｐａｓｅ３的活性实现。
［关键词］　复方海蛇胶囊；ＰＣ１２细胞；细胞凋亡；ｃａｓｐａｓｅ９；ｃａｓｐａｓｅ３
［中图分类号］Ｒ２８５．５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）１０１１７１０４
［收稿日期］　２００７０５２７
［基金项目］　浙江省中医药管理局（２００５Ｃ１４０）；浙江省自然科
学基金项目（Ｙ２０５３３２）
［通讯作者］　陈炜，Ｔｅｌ：（０５７１）８６００６０７９，Ｅｍａｉｌ：ｓｒｃｗ＠ｚｊｕ．
ｅｄｕ．ｃｎ
　　复方海蛇胶囊（ｒｅｉｎｈａｒｔｄｔａｎｄｓｅａｃｕｃｕｍｂｅｒｃａｐ
ｓｕｌｅ，ＲＳＣ），其主要成分是海蛇、海参、远志、石菖
蒲等，经生物工程手段制成的纯天然海洋药物［１］，
具有补肾宁心、化痰安神的功效，不仅对健忘症、增
龄相关记忆障碍有效，而且对老年痴呆也有很好的
治疗效果，为国家基本药物（２００４年）。临床研究表
明［２］，ＲＳＣ能改善轻、中度老年痴呆（包括 ＡＤ，ＶＤ）
患者的记忆功能和认知功能，显效２３６７％，总有效
率６７３３％，而不良反应轻微，少数患者服药后可出
现皮疹等过敏反应，也可出现轻度腹泻、恶心，经对
症治疗可缓解［２，３］。
药理研究显示［４］，ＲＳＣ能明显增加大脑中的乙
酰胆碱含量及过氧化物歧化酶（ＳＯＤ），降低过氧化
脂质（ＬＰＯ）及谷氨酸（ＧＡ）水平，并有明显的促进
神经细胞生长作用，能多途径延缓脑衰老，改善脑记
忆功能。然而，凋亡作为ＡＤ的主要发病机制之一，
至今尚无ＲＳＣ对凋亡作用的研究。
β淀粉样蛋白在脑内沉积，通过各种途径导致
神经纤维缠结（ＮＦＴ）和神经细胞丢失（主要表现为
凋亡）是 ＡＤ的发病机制之一［５］。本研究以 Ａβ诱
导ＰＣ１２细胞凋亡为 ＡＤ的细胞模型，研究 ＲＳＣ的
抗凋亡作用，试图阐述其抗痴呆作用的可能机制。
１　材料和方法
１．１　药物　复方海蛇胶囊（ＲＳＣ），批号２００７０１０５，
由浙江杭康海洋生物药业有限公司提供，批准文号
为国药准字Ｚ２００００１３。
１．２　试剂　βＡｍｙｌｏｉｄ１～４２，美国 ＡＬＥＸＩＳ公司产
品；标准胎牛血清，美国 Ｈｙｃｌｏｎｅ公司；ＭＴＴ，美国
Ｓｉｇｍａ公司；ＤＭＥＭ高糖培养基，Ｈｙｃｌｏｎｅ；重组鼠神
经生长因子（ＮＧＦ），美国 Ｒ＆Ｄ公司；二甲基亚砜
（ＤＭＳＯ），上海生物工程有限公司；ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ
ＡｐｏｐｔｏｓｉｓＤｅｔｅｃｔｉｏｎＫｉｔ，美国 ＢＤ公司；ＲＩＰＡＬｙｓｉｓ
ＢｕｆｅｒＫｉｔ，ＥＣＬ化学发光显色试剂、ｃａｓｐａｓｅ３Ｐ１１
（Ｋ１９）ｇｏａｔｐｏｌｙｃｌｏｎａｌＩｇＧ，ｃａｓｐａｓｅ９Ｐ１０（Ｈ８３）
ｒａｂｂｉｔｐｏｌｙｃｌｏｎａｌＩｇＧ和 Ｒａｂｂｉｔａｎｔｉβａｃｔｉｎｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ
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ＩｇＧ，美国 ＳａｎｔａｎＣｒｕｚ公司；ＰＶＤＦ膜，美国 Ｍｉｌｉｐｏｒｅ
公司。
１．３　ＰＣ１２细胞系的培养和诱导　ＰＣ１２细胞置于
１５％胎牛血清（ＦＣＳ）的高糖ＤＭＥＭ培养液中（含５０
ｎｇ·ｍＬ－１的神经生长因子，ＮＧＦ），青霉素钠１００Ｕ
·ｍＬ－１，链霉素 １００Ｕ·ｍＬ－１，２ｍｍｏｌ·Ｌ－１，ｐＨ
７４），２ｄ更换１次培养液，在３７℃，５％ＣＯ２培养箱
中培养。待细胞长至８０％生长面积时，用０１２５％
胰酶消化细胞，加含血清培养液终止反应，１∶３分瓶
传代，每周换液２次，传代１次。取对数生长期细胞
用于实验。
１．４　培养细胞分组及药物处理　培养的 ＰＣ１２细
胞分为３组：单纯 Ａβ处理组、Ａβ与不同剂量药物
处理组（Ａβ１～４２＋药物）、对照组（正常对照）。正常
对照组：加等量无血清 ＤＭＥＭ培养基；单纯 Ａβ１～４２
组：换以新鲜无血清培养基后加入终浓度为５μｍｏｌ
·Ｌ－１的 Ａβ１～４２；Ａβ与药物保护组：用含不同剂量
（０～５ｍｇ·ｍＬ－１）的药物预处理细胞２４ｈ，弃原培
养基，用无血清 ＤＭＥＭ培养基洗３次，再加入终浓
度为５μｍｏｌ·Ｌ－１的 Ａβ１～４２的 ＤＭＥＭ培养基，继续
培养２４ｈ后，细胞用预冷的００１ｍｍｏｌ·Ｌ－１磷酸盐
缓冲液（ＰＢＳ，ｐＨ７２）冲洗２次后，用０１２５％的胰
酶消化１ｍｉｎ，加入适量含血清的培养基终止消化，
用吸管轻轻吹打制成细胞悬液，用于各项实验，各实
验组设３个平行对照。
１．５　确定药物毒性剂量（四氮唑蓝比色试验，ＭＴＴ
法）　以细胞１×１０４个／孔密度接种于９６孔板，设
正常细胞生长对照组及不同质量浓度的ＲＳＣ（０１，
０５，１２５，２５，５，１０，２０，４０ｍｇ·ｍＬ－１）实验组。每
孔加入含药培养基１００μＬ，每个药物浓度设６个平
行孔。正常对照孔加入培养液１００μＬ。培养７２ｈ
后，每孔加入 ＭＴＴ（２ｍｇ·ｍＬ－１）５０μＬ，继续在３７
℃，５％ＣＯ２条件下孵育４ｈ，吸去培养液，每孔加入
ＤＭＳＯ１５０μＬ振摇１５ｍｉｎ，静置０５ｈ，待蓝紫色结
晶完全溶解后，用酶标仪检测各组细胞的５７０ｎｍ吸
光度（Ａ），以间接反映细胞活性。
１．６　不同浓度药物对 Ａβ１～４２诱导的 ＰＣ１２细胞存
活率的影响（ＭＴＴ法）　以细胞密度１×１０４个／孔接
种于９６孔板，每孔５０μＬ，药物组每孔加入５０μＬ
含不同质量浓度的 ＲＳＣ（０，００１，０１，１，５ｍｇ·
ｍＬ－１）培养基，每种药物浓度重复３孔，与 ＰＣ１２细
胞预孵育２４ｈ后，除正常对照组外，其他组每孔加
入１００μＬ含 Ａβ１～４２的培养基（Ａβ１～４２的终浓度为５
μｍｏｌ·Ｌ－１），继续培养７２ｈ后，作ＭＴＴ比色分析。
１．７　流式细胞仪检测细胞凋亡率　ＰＣ１２以细胞
密度１×１０５个／ｍＬ接种于２４孔板，每孔１ｍＬ，按分
组培养处理后，收集细胞于离心管中。细胞用 ＰＢＳ
洗２次；将细胞重悬于１９５μＬ的１×ＢｉｎｄｉｎｇＢｕｆｅｒ
中，加入５μＬＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ，混匀，室温下避光孵
育１５ｍｉｎ；用１×ＢｉｎｄｉｎｇＢｕｆｅ洗细胞１次，并重悬
细胞；加５μＬ的２０μｇ·ｍＬ－１的碘化丙啶（ＰＩ），避
光孵育５ｍｉｎ。１ｈ内流式细胞仪上机检测凋亡细胞
百分比。
１．８　Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析药物对细胞ｃａｓｐａｓｅ３，９蛋白
表达的影响　收集各组药物处理的细胞及对照组细
胞，用细胞裂解液（ＲＩＰＡＬｙｓｉｓＢｕｆｅｒ）１００μＬ裂解
细胞，冰浴３０ｍｉｎ，１２０００ｒ·ｍｉｎ－１离心５ｍｉｎ，收集
上清液，蛋白定量后加入等体积的加样缓冲液，混
匀，煮沸５ｍｉｎ。按蛋白含量测定结果每孔上样４０
μｇ蛋白，以１０％ ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，
电泳结束后将蛋白转移至ＰＶＤＦ膜上，用封闭液（含
５％脱脂奶粉的ＴＢＳＴ液）室温封闭２ｈ后，与相应
的一抗（分别为ｃａｓｐａｓｅ３，９多克隆抗体１∶２００）４℃
孵育过夜，ＴＢＳＴ液洗１５ｍｉｎ×４次，与辣根过氧化
物酶偶联的二抗（１∶２０００）室温孵育２ｈ，ＴＢＳＴ洗
１５ｍｉｎ×５次，加入 ＥＣＬ显色试剂，暗室曝光，显
影，定影。实验以βａｃｔｉｎ作为内参照。
１．９　统计学方法　计量资料数据均用 珋ｘ±ｓ表示，
组间比较采用方差分析，以 Ｐ＜００５为显著性差
异，Ｐ＜００１为非常显著性差异。
２　结果
２．１　ＮＧＦ诱导培养的 ＰＣ１２细胞　ＰＣ１２细胞可
以在ＮＧＦ作用下分化为神经元样细胞，形成神经突
起和突触样连接。未经处理的 ＰＣ１２细胞呈圆形、
短梭形或三角形，直径６～８μｍ，有的细胞两极有短
突起，但长度不超过 ２μｍ。随着 ＮＧＦ（５０ｎｇ·
ｍＬ－１）诱导培养的时间延长，细胞体积、细胞突起长
度和突起数目均增大或增多，至ＮＧＦ诱导培养第１４
天，细胞突起长度超过胞体直径的２倍，并相互形成
连接。选定ＮＧＦ诱导培养１４ｄ的 ＰＣ１２细胞作为
实验对象。
２．２　ＲＳＣ对 ＰＣ１２细胞的毒性作用　ＲＳＣ仅在高
浓度时对正常ＰＣ１２细胞增殖产生影响。正常培养
的ＰＣ１２细胞经ＲＳＣ处理４ｈ后，剂量为４０，２０ｍｇ
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·ｍＬ－１（Ｐ＜００１）及 １０ｍｇ·ｍＬ－１（Ｐ＜００５）的
ＲＳＣ使ＰＣ１２细胞的Ａ５７０ｎｍ明显降低（Ｐ＜００５，Ｐ＜
００１）；５ｍｇ·ｍＬ－１及以下浓度的 ＲＳＣ处理过的
ＰＣ１２细胞Ａ５７０ｎｍ与未经处理的ＰＣ１２细胞Ａ５７０ｎｍ相
似甚至有增高，但无统计学意义。因此选定 ５，１，
０１，００１ｍｇ·ｍＬ－１作为以下实验 ＲＳＣ的使用浓
度。见表１。
表１　复方海蛇胶囊对正常ＰＣ１２细胞增殖的影响（珋ｘ±ｓ）
组别 剂量／ｍｇ·ｍＬ－１ ｎ Ａ５７０ｎｍ
正常　　　　 － １１ ２４９３５±０３５１９
复方海蛇胶囊 ４０ ４ ０７８８５±０３００４２）
　 ２０ ４ １３４４８±０６７６０２）
　 １０ ４ １９８４３±０２３２６１）
　 ５ ４ ２２８４３±０２３２６
　 ２５ ４ ２３７５０±０５２２５
　 １２５ ４ ２４２９３±０３４７０
　 ０５ ４ ２４１２０±０５３９３
　 ０１ ４ ２５９３３±０６００９
　　注：与正常对照组比较１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１
２．３　ＲＳＣ对 Ａβ诱导的 ＰＣ１２细胞凋亡的影响　
如表２所示，Ａβ（５μｍｏｌ·Ｌ－１）处理７２ｈ使 ＰＣ１２
细胞的Ａ５７０ｎｍ明显降低（Ｐ ＜００１）。用 ＲＳＣ预处
理２ｈ，ＰＣ１２细胞的Ａ５７０ｎｍ又重新回升，在１，５ｍｇ·
ｍＬ－１时具有统计学意义（Ｐ＜００１）。ＲＳＣ的作用呈
浓度依赖关系。
表２　复方海蛇胶囊对Ａβ诱导的ＰＣ１２细胞凋亡的影响
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝３）
组别 剂量／ｍｇ·ｍＬ－１ Ａ５７０ｎｍ
正常 － １７５３３±０１２２７
单纯Ａβ１～４２ ５３） ０７３１０±０３４７７１）
复方海蛇胶囊 ５ １７９５７±０３８０９２）
　 １ １３１２０±００７４０１，２）
　 ０１ ０８３０３±００６７６１）
　 ００１ ０７９１７±０１０５８１）
　　注：与正常对照组比较１）Ｐ＜００１；与单纯 Ａβ１～４２组比较２）Ｐ＜
００１；３）剂量单位为μｍｏｌ·Ｌ－１（表３同）
２．４　ＲＳＣ对 Ａβ诱导的 ＰＣ１２细胞凋亡百分比的
影响　表３统计了各组凋亡细胞的百分比。可见，
Ａβ（５μｍｏｌ·Ｌ－１）处理１ｈ使 ＰＣ１２细胞的凋亡百
分比与对照组相比显著增加（Ｐ＜００１）。用 ＲＳＣ
预处理２ｈ，ＰＣ１２细胞的凋亡百分比又重新降低，４
个浓度均有统计学意义（Ｐ＜００１）。但各ＲＳＣ预处
理组均不能使凋亡细胞百分比降至对照组，与对照
组相比均有显著性差异。
２．５　ＲＳＣ对 Ａβ诱导的 ＰＣ１２细胞 ｃａｓｐａｓｅ表达
　　表３　复方海蛇胶囊对Ａβ诱导ＰＣ１２细胞凋亡率的影响
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝３）
组别 剂量／ｍｇ·ｍＬ－１ 凋亡率／％
正常 － １９３０±０４０７
单纯Ａβ１～４２ ５３） ４６１７３±４０８１１）
复方海蛇胶囊 ５ ７８４３±１７５９１，２）
　 １ １５１２７±３１４６１，２）
　 ０１ ２８６２３±３８１４１，２）
　 ００１ ３５３４７±４６２７１，２）
的影响　如图１所示，Ａβ（５μｍｏｌ·Ｌ－１）处理２ｈ使
ＰＣ１２细胞 ｃａｓｐａｓｅ３和 ｃａｓｐａｓｅ９表达明显升高
（Ｐ＜００１），用 ＲＳＣ预 处 理 ２ｈ，ｃａｓｐａｓｅ３和
ｃａｓｐａｓｅ９表达又趋于降低，作用呈浓度依赖性，在
１，５ｍｇ·ｍＬ－１时Ｐ＜００１。
图１　复方海蛇胶囊对Ａβ诱导的ＰＣ１２细胞
ｃａｓｐａｓｅ表达的影响
　　１．Ａβ５μｍｏｌ·Ｌ－１组；２．ＰＣ１２正常对照；３．Ａβ５μｍｏｌ·Ｌ－１＋
复方海蛇胶囊０１ｍｇ·ｍＬ－１；４．Ａβ５μｍｏｌ·Ｌ－１＋复方海蛇胶囊１
ｍｇ·ｍＬ－１；５．Ａβ５μｍｏｌ·Ｌ－１＋复方海蛇胶囊５ｍｇ·ｍＬ－１
３　讨论
作者首先建立了 Ａβ对 ＰＣ１２细胞的损伤作为
ＡＤ的细胞模型，研究了 ＲＳＣ对细胞的保护作用及
其作用机制。结果发现，ＲＳＣ对 Ａβ造成 ＰＣ１２细
胞的损伤具有保护作用，表现为 Ａ５７０ｎｍ升高及 ＦＣＭ
检测中细胞凋亡率的下降。ＲＳＣ的保护作用是在单
独应用时不影响ＰＣ１２细胞增殖的浓度范围内实现
的，呈现浓度依赖性。这表明，ＲＳＣ可能是一种安全
有效的抗ＡＤ药物。
有研究显示，Ａβ主要通过二条途径而造成细胞
损伤的［６］。首先，Ａβ可以激活胶质细胞释放ＩＬ１β，
ＴＮＦα等炎症因子，造成炎症损伤；第二，Ａβ寡聚体
激活神经元细胞膜上的所谓“死亡受体”（ｄｅａｔｈｒｅ
ｃｅｐｔｏｒｓ），启动凋亡相关蛋白酶即 ｃａｓｐａｓｅ级联反应，
从而使神经元发生凋亡。ＲＳＣ抗炎作用已经被证
实［７］。因此，笔者认为ＲＳＣ的保护作用可能与其抗
炎作用有关。但是另有研究提示，凋亡是 Ａβ导致
神经元丢失的主要机制［２］，所以进一步研究了 ＲＳＣ
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抗凋亡的作用。ＲＳＣ在其有效浓度时明显抑制了凋
亡相关蛋白酶 ｃａｓｐａｓｅ９和 ｃａｓｐａｓｅ３的激活。这些
结果说明 ＲＳＣ的保护作用与其抗凋亡作用有关。
目前的结果无法阐明 ＲＳＣ通过何种途径抑制
ｃａｓｐａｓｅ９和 ｃａｓｐａｓｅ３的激活而发挥抗凋亡作用。
根据文献资料，其机制可能不是单一的。如有研究
表明炎症本身可能导致细胞凋亡，ＴＮＦα等炎症因
子能通过死亡受体触发ｃａｓｐａｓｅ级联［８］。
总之，本实验说明 ＲＳＣ对 Ａβ诱导的 ＰＣ１２细
胞损伤具有保护作用，该保护作用与 ＲＳＣ的抗凋亡
作用有关。这些结果为ＲＳＣ临床应用于治疗ＡＤ提
供了理论依据。
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ＳｔｕｄｙｏｆＦｕｆａｎｇＨａｉｓｈｅｃａｐｓｕｌｅａｇａｉｎｓｔｃｅｌａｐｏｐｔｏｓｉｓ
ＳＨＥＮＹｕｅｄｉ１，ＺＨＡＮＧＬｉｓａｎ２，３，ＹＡＯＨａｎｇｐｉｎｇ３，ＺＨＡＯＧｕａｎｇｓｈｕ３，ＣＨＥＮＷｅｉ２
（１．ＡｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ，ＨａｎｇｚｈｏｕＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００３６，Ｃｈｉｎａ；
２．ＳｉｒＲｕｎＲｕｎＳｈａｗＨｏｓｐｉｔａｌ，ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＢｉｏｔｈｅｒａｐｙｏｆＺｈｅｊｉａｎｇｐｒｏｖｉｎｃｅ，
Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００１６，Ｃｈｉｎａ；
３．ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ，ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１０００３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｍｅｃｈａｎｉｓｍｔｏｆＦｕｆａｎｇＨａｉｓｈｅｃａｐｓｕｌｅｆｏｒｄｅｍｅｎｔｉａｂｙｏｂｓｅｒｖｉｎｇｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｉｔｏｎＰＣ１２ｃｅｌ
ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ｗｈｉｃｈｗａｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙβａｍｙｌｏｉｄｐｒｏｔｅｉｎ（Ａｂ１４２）Ｍｅｔｈｏｄ：Ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ（ＮＧＦ）ｗａｓｕｓｅｄｔｏｃｕｌｔｉｖａｔｅｔｈｅＰＣ１２
ｃｅｌｓＦｕｆａｎｇＨａｉｓｈｅｃａｐｓｕｌｅａｔｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｗａｓａｄｄｅｄｉｎｔｏｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍｓｏａｓｔｏｉｄｅｎｔｉｆｙｔｈｅｎｏｎｔｏｘｉｃｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ
ｗｉｔｈＭＴＴＴｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅＰＣ１２ｃｅｌａｐｏｐｔｏｓｉｓｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｂｙＭＴＴａｓｓａｙ，Ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ（ＦＣＭｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）ｗｉｔｈｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａ
ｔｉｏｎｓｏｆＦｕｆａｎｇＨａｉｓｈｅｃａｐｓｕｌｅ（００１，０１，１，５ｍｇ·ｍＬ－１），ａｄｄｉｎｇＡｂｏｒｎｏｔＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔａｐｏｐｔｏｓｉｓｗｈｉｃｈｗａｓ
ｍｅａｓｕｒｅｄｏｎｔｈｅｉｍｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｃａｓｐａｓｅ９ａｎｄｃａｓｐａｓｅ３ａｃｔｉｖｉｔｙＲｅｓｕｌｔ：ＦｕｆａｎｇＨａｉｓｈｅｃａｐｓｕｌｅｃｏｕｌｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅａｐ
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００１，０１，１ａｎｄ５ｍｇ·ｍＬ－１ｇｒｏｕｐ，ｗｈｉｃｈｉｓｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ：１７５±０１２，０７３±０３５，０７９±０１１，０８３±００７，１３１±００７，
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［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ＦｕｆａｎｇＨａｉｓｈｅｃａｐｓｕｌｅ；ＰＣ１２ｃｅｌｓ；ｃｅｌａｐｏｐｔｏｓｉｓ；ｃａｓｐａｓｅ９；ｃａｓｐａｓｅ３
［责任编辑　古云侠］
·４７１１·
第３３卷第１０期
２００８年５月
　　　　　　　　　
　　　 中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
　　　　　　　
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　１０
Ｍａｙ，２００８