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Dynamic analysis of major active ingredients of Cortex Moutan cultivated in Dianjiang county of Chongqing

重庆垫江牡丹皮主要有效成分多维动态分析



全 文 :重庆垫江牡丹皮主要有效成分多维动态分析
范俊安 t o张 艳 u o夏永鹏 v o邱宗荫 t3 o于 超 t o王继生 t o王宾豪 u
ktq重庆医科大学 药学院 o重庆 wsssty~ uq重庆市中药研究院 o重庆 wsssyx~
vq重庆市食品药品监督管理局 o重庆 wssswul
≈摘要   目的 }研究多种因素引起垫江牡丹皮中丹皮酚和芍药苷 u种主要有效成分的动态变化规律 o确定垫
江牡丹皮主要有效成分动态特征 o探索垫江牡丹皮的适宜种植条件和质量控制措施 ∀方法 }‹ °≤测定丹皮酚和芍
药苷含量 o并对其随着不同海拔高度 !不同土壤条件 !不同生长年限 !不同采收季节的变化规律进行多维动态分析 ∀
结果与结论 }不同生长海拔高度 !不同生长年限和不同采收季节采集 o垫江丹皮中丹皮酚 !芍药苷及酚苷比值存在
明显的动态变化规律 ∀海拔 wss ∗ {ss °均适宜种植药用牡丹 o但 yss °种植的牡丹皮中丹皮酚和芍药苷含量最
高 ∀ v种土壤比较表明 o矿子黄泥为最适宜土壤 o丹皮酚和芍药苷含量最高 ∀从三年生至五年生丹皮酚和芍药苷含
量逐年提高 o四年生 !五年生牡丹均适宜采收牡丹皮 o但五年生最佳 ∀采收期从 { ∗ tt月丹皮酚含量呈抛物线型变
化 ots月最高 o芍药苷亦呈积累趋势 o但 ts月以后积累速度显著下降 ott月比 ts月几乎没有增加 o垫江牡丹皮的最
佳采收季节为 ts月上中旬 ∀丹皮酚与芍药苷含量的比值 k简称酚苷比值 l是垫江丹皮的重要质量特征 ∀
≈关键词   牡丹皮 ~重庆垫江 ~丹皮酚 ~芍药苷 ~动态分析
≈中图分类号   ≥ xyz ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszltx2txst2sw
≈收稿日期   ussy2st2us
≈通讯作者   3 邱宗荫 oר¯}ksuvly{w{xzuzo∞2°¤¬¯}½²±ª¼¬±twt
ƒ ¶¬±¤q¦²°
牡丹皮又称丹皮 o为常用中药材 o主产于安徽铜
陵 !重庆垫江及山东河泽等地 o具有清热凉血 !活血
化瘀的功能 o现代药理学研究表明牡丹皮具有抗炎 !
抗肿瘤 !降血糖 !抗血栓和动脉粥样硬化等药理作
用 ≈t  ∀已从牡丹皮中分离出数十种化合物 o其主要
有效成分为丹皮酚 !芍药苷 !苯甲酰芍药苷等 o其中
丹皮酚含量已成为衡量丹皮质量的法定标准之一 o
药典规定牡丹皮含丹皮酚不得小于 t1uh ≈u  ∀牡丹
皮为重庆的主要传统道地药材之一 o重庆市垫江县
种植牡丹历史悠久 o丹皮质量好 o习称 /垫丹 0 ! /川
丹 0 ∀目前尚未见对垫江牡丹皮质量进行现代科学
研究的文献报道 o为此笔者对重庆市垫江丹皮进行
了系统的质量研究 ∀经实地调查 o垫江药用牡丹有
红花牡丹和白花牡丹 u个栽培品种 ≈v  o以红花品种
为主 o红花牡丹为垫江长期传统种植的本地品种 o当
地称 /太平红 0~白花牡丹从安徽引种 o亦称 /凤丹
白 0k但目前习惯上将栽培牡丹统称为牡丹 Παεονια
συφφρυτιχοσα „±§µqo药典对牡丹皮原植物收载牡丹一
种 ≈u  l∀本研究对垫江药用牡丹主要栽培品种红花
牡丹 k太平红 l丹皮主要有效成分丹皮酚和芍药苷
在不海拔高度 !不同土壤类型 !不同生长年限 !不同
采收季节的变化规律进行多维动态分析 ∀
1 材料与试剂
从重庆市垫江县牡丹皮药材种植基地采集当地
主要栽培的红花牡丹 k太平红 l丹皮样品 o采挖牡丹
根 o稍凉软 o抽去木心 o剥取根皮 o晒干即得 k原丹皮 l∀
分别采收海拔 wssoxssoyssozsso{ss °生长牡丹根皮
作为不同海拔高度比较样品 ~同一地点同一季节采集
三 o四年生牡丹根皮作为不同生长年限比较样品 ~{o
|otsott月份采集同为五年生牡丹根皮作为不同采收
季节比较样品 ~ts月份采集不同土壤条件下种植的
五年生牡丹皮 o作为不同土壤类型比较样品 ∀取部分
牡丹根 o刮去表皮 k栓皮层 lo抽去木心 o晒干即得刮丹
皮样品 k未特别注明的样品均为原丹皮 l∀所有样品
及原植物经重庆市中药研究院张艳副研究员鉴定为
毛茛科芍药属植物牡丹 Π. συφφρυτιχοσα∀
• „×∞• ≥ uy|x p u||y ‹°≤仪 k自动进样器 o
°⁄„检测器 lo÷|{ p t旋转薄膜蒸发器 k上海有机
化学研究所 l~‹°≤流动相用甲醇为色谱纯 k默克
公司 l~丹皮酚和芍药苷对照品为中国药品生物制
品检定所提供 ∀
2 方法 ≈uow2y 
2q1 供试样品溶液的制备 取供试药材样品粉碎 o
#tsxt#
第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·o ussz
精密称取细粉 t1s ªo加入甲醇 vs °o超声提取 vs
°¬±o过滤 o残渣用甲醇洗涤 u次 o过滤 o合并滤液 o回
收甲醇浓缩至 t °o用甲醇定容至 ts °o精密量取
溶液 t °o用甲醇稀释至 ux °o过 s1wx Λ°有机
滤膜 o即得供试样品溶液 ∀
2q2 对照品溶液的制备 精密称取丹皮酚对照品
t1xxw °ª!芍药苷对照品 t1syt °ªo分别用甲醇溶解
并定容为 ts °即为对照品储备液 ∀
2q3 色谱条件 ≥¼°° ·¨µ¼× • °t{色谱柱 kw1y
°° ≅ uxs °°ox Λ°l~柱温 u{ ε ~进样量 ts ˏ~丹
皮酚测定流动相甲醇 2水 kwxΒxxlo检测波长 uzw
±°~芍药苷测定流动相甲醇 2水 kwsΒyslo检测波长
uvu ±°∀
2q4 标准曲线 精密量取 s1txx w °ª# °pt丹皮
酚对照品储备液 s1tos1uos1wos1yos1{ot1s °o用
甲醇稀释定容至 t °o各进样 ts ˏo记录色谱图 o
以溶液质量浓度为纵坐标 o色谱峰面积为横坐标 o得
回归方程 Ψ € u ≅ tsp{ Ξ p s1sss yoρ€ s1||| {o在
s1stx xw ∗ s1txx w °ª# °pt线性良好 ~取 s1tsy t
°ª# °pt芍药苷对照品储备溶液 o同法操作 o得芍
药苷回归方程 Ψ €w ≅ tsp{ Ξ p s1sss xoρ€ s1||| {o
在 s1sts y ∗ s1s{w | °ª# °pt线性良好 ∀
2q5 方法学考察 经精密度测定试验表明精密度
良好 o经稳定性试验表明样品稳定 ∀经加样回收率
试验 o丹皮酚平均回收率 |{1xh o• ≥⁄ t1|h o芍药
苷平均回收率 |y1wh o• ≥⁄ t1zh o方法稳定可靠 ∀
2q6 样品测定 取供试样品溶液及相应对照品溶
液各 ts ˏo进样 o分别按丹皮酚和芍药苷测定方法
测定 o记录色谱图 o以外标法计算丹皮酚和芍药苷含
量 ∀
3 结果
3q1 不同海拔高度及土壤类型的影响 不同海拔
高度种植牡丹皮中主要有效成分丹皮酚 !芍药苷含
量呈现明显动态变化规律 ∀随着海拔高度的提高 o
牡丹皮的有效成分丹皮酚含量呈现明显的抛物线型
规律性变化 o以海拔 yss °为最高 o高于或低于 yss
°含量均下降 ~各海拔高度样品丹皮酚含量均在
uh以上 ~芍药苷含量亦以海拔 yss °采集样品为最
高 ∀不同土壤类型种植牡丹皮中丹皮酚含量矿子黄
泥 石骨子土 红棕紫泥 o矿子黄泥未施肥的样品
与红棕紫泥接近 ~芍药苷含量以矿子黄泥样品最高 o
其他几个样品十分接近 k表 tl∀
3q2 不同生长年限的动态变化 同一季节采收的
牡丹皮 o从三年生至七年生牡丹皮中丹皮酚含量呈
抛物线型变化 o芍药苷含量约呈渐近线型变化 k表
tl∀从三年生至五年生 ou种有效成分在牡丹生长
发育过程中呈积累趋势 o随着生长年限延长有效成
分含量逐渐增加 o丹皮酚含量尤其是四年生比三年
生显著增加 o芍药苷含量尤以五年生比四年生显著
增加 o丹皮酚和芍药苷均以五年生含量最高 ∀ x年
以后 o丹皮酚含量下降 o七年生牡丹皮明显低于五年
生和四年生牡丹皮 ~而芍药苷含量在 x年以后基本
稳定 o七年生的芍药苷含量与五年生基本相同 ∀
3q3 采收季节的动态变化 同一生长年限牡丹皮
有效成分丹皮酚含量随采收月份呈抛物线型变化 o{
月份立秋后含量逐渐增加 ots月份为最高点 ott月
份开始下降 ~芍药苷含量立秋后呈逐步积累趋势 ots
月和 tt月为最高点 ∀且同一年度不同月份之间的
变化大于同一月份不同年度之间的变化 o表明采收
季节比生长年限对牡丹皮有效成分的影响更大 ∀
3q4 不同加工及取材部位的影响 在同一地点采
集红花牡丹原丹皮和刮丹皮对比分析表明 o原丹皮
中丹皮酚和芍药苷含量均比刮丹皮稍高 ∀从 v个地
点采集的样品 }原丹皮丹皮酚分别为 v1ssh o
u1{xh ou1yuh ~芍药苷分别为 t1svh o s1{uh o
s1{|h ∀刮丹皮丹皮酚分别为 u1zth ou1wxh o
u1suh ~芍药苷分别为 s1zxh os1xth os1yyh ∀同
一株牡丹根加工成的原丹皮 !刮丹皮 !抽出的木心 !
刮下的栓皮及牡丹全根的有效成分比较见表 u∀
3q5 丹皮酚与芍药苷的比值 计算样品丹皮酚含
量与芍药苷含量的比值 o将其定义为酚苷比值 k·«¨
µ¤·¬²²©·«¨ ¦²±·¨±·²©³¤¨ ²±²¯ ¤±§³¤¨ ²±¬©¯²µ¬± ¬± ≤²µ2
·¨¬  ²∏·¤±o °°• l∀垫江牡丹皮不同样品的酚苷比
值亦存在明显的变化规律 k表 toul∀不同海拔样品
中 o以 zss °酚苷比值最高 oxss °和 yss °其次 o
wss °和 {ss °较低 ~不同生长年限样品以四年生
酚苷比值最高 o其次为五年生 o三年生最低 ~不同采
收时间样品显示立秋后酚苷比值逐渐增加 ots月份
达到最高 ott月份又开始下降 o呈抛物线型变化 ~不
同加工及取材部位样品中 o酚苷比值差异很大 o刮丹
皮 原丹皮 栓皮 木心 Υ全根 ∀
4 讨论
4q1 垫江药用牡丹分布在跨 x个相互比邻乡镇绵
延数十千米的明月山内槽地带 o在海拔 wss ∗ {ss °
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∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·o ussz
表 t 各因素不同水平下垫江牡丹皮中有效成分质量分数 kν € vl
样品性质
丹皮酚
质量分数 rh • ≥⁄rh
芍药苷
质量分数 rh • ≥⁄rh
酚苷比值
海拔高度 wss u1s| t1y s1{yw u1x u1wu
k°l xss u1ux u1v s1zw{ t1| v1su
yss v1ss t1{ t1sv u1u u1|t
zss u1wx u1w s1zsx u1v v1wz
{ss u1ss u1u s1{wu u1s u1vz
平均值 u1vy s1{v{ u1{w
土壤类型 石骨子土 u1zx t1y s1{st u1v v1ww
红棕紫泥 t1|| t1z s1{vt t1| u1ws
矿子黄泥 u1{u u1t t1tv t1y u1xs
矿子黄泥 k未施肥 l t1|u t1| s1{{z u1w u1ty
平均值 u1vz s1|tu u1yv
生长年限 三年生 u1ux u1x s1zss u1w v1uu
四年生 u1|t u1t s1zyx u1t v1{t
五年生 v1uv u1u s1|sv u1v v1x{
七年生 u1wx u1s s1{|| t1| u1zv
平均值 u1{s s1z|s v1xx
采收月份 {月 t1wv t1x s1y{{ u1u u1s{
|月 u1wt u1v s1z{z t1z v1sz
ts月 v1uv u1{ s1|sv u1x v1x{
tt月 u1uy u1x s1|sy u1t u1w|
平均值 u1vv s1{ut u1{w
表 u 同株牡丹根不同加工及取材部位对
丹皮酚和芍药苷质量分数的影响
加工及部位 单株取材量 rª 丹皮酚 rh 芍药苷 rh 酚苷比值
原丹皮 xt1zt u1{u s1{{z v1t{
刮丹皮 wx1vt u1zv s1zvw v1zt
木心 t{1t{ s1zu t1s{ s1yyw
栓皮 t1vy v1{v t1yu u1vy
全根 y|1wz t1tt t1zw s1yws
均有种植 ∀各海拔高度及不同土壤条件下种植的牡
丹皮均符合并高于药典对丹皮酚含量的要求 o但有
效成分含量分析表明海拔 yss °左右应为最适宜发
展区域 o矿子黄泥为最适宜土壤 o其药材丹皮酚和芍
药苷含量均为最高 ∀肥水管理不善 o有效成分含量
会显著降低 o影响牡丹皮质量 ∀在牡丹皮生产中 o应
结合产量指标 !丹皮酚和芍药苷含量等质量指标进
行综合评价 o制订科学的发展规划 o进行合理布局 ∀
4q2 随着生长年限延长牡丹皮产量会不断增加 o但
田间观察发现七年生和九年生牡丹明显有根腐现象 o
部分根生病死亡 ∀而且牡丹皮主要有效成分丹皮酚
和芍药苷含量则只在一定年限区间内呈积累趋势 o以
四年和五年生牡丹皮最高 o五年生以后呈下降趋势 o
因此认为垫江药用牡丹最佳生长年限为 x年 ∀
4q3 药典规定秋季采收牡丹皮 ≈u  o垫江种植药用牡
丹一般在立秋后开始采收牡丹皮 o至霜降之前采收完
毕 ∀有文献报道春夏季牡丹开花期有一个丹皮酚含
量高峰 ≈z  o但春夏两季正是牡丹生长发育高峰 o光合
作用旺盛 o对牡丹皮产量的形成十分重要 o不宜采收 ∀
垫江药用牡丹红花品种只开花不结果 o一般在采收牡
丹皮的同时进行分株繁殖 o在 ts月下旬霜降以后气
温过低栽培难以成活 o影响牡丹繁殖和牡丹皮再生产
的发展 ∀结合垫江牡丹皮在立秋后有效成分积累的
时间规律 o垫江牡丹皮的最佳采收季节应为 ts月上
中旬 o{月至 |月上旬处于牡丹根快速生长和有效成
分快速积累时期 o不宜采收牡丹皮 ∀
4q4 垫江刮丹皮主要在国内市场销售 o原丹皮主要
供外贸出口 o常年出口日本 !新加坡等国 ≈v  ∀本研究
表明原丹皮中有效成分丹皮酚和芍药苷含量均比刮
丹皮高 o表明国外客商使用原丹皮有一定科学依据 ~
建议国内也改变传统用法 o使用原丹皮 o有效成分含
量更高 o生产加工成本亦有所降低 ∀全根的丹皮酚含
量显著低于原丹皮和刮丹皮 o且不符合药典的要求 o
因此加工牡丹皮时木心抽出是否及时和完全 o对牡丹
皮质量影响很大 ∀加工牡丹皮时抽出抛弃的木心仍
含有一定的丹皮酚和芍药苷 o值得开展综合利用 ∀
4q5 首次将丹皮酚与芍药苷含量的比值定义为酚苷
比值 k°°• l并进行分析 o酚苷比值变化规律显示出垫
江药用牡丹生长发育过程中丹皮酚和芍药苷的积累速
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度及变化有不同的规律 o在牡丹根的不同部位其化学
成分有不同的积累和代谢特性 o酚苷比值可能是垫江
牡丹皮的重要质量特征 ∀原丹皮 !刮丹皮 !栓皮 !木心 !
全根的酚苷比值差异很大 o用酚苷比值可以很容易的
鉴别木心是否抽除完全 o直接鉴别牡丹皮的纯度 ∀建
议增加芍药苷含量测定和酚苷比值作为牡丹皮质量控
制的定量指标 ∀对酚苷比值的稳定性及其与药理作
用 !临床疗效的相关性等值得进一步深入探讨 ∀
≈参考文献  
≈t  姜 潇 q牡丹皮药理作用的研究进展 ≈ q中国新医药 ousswov
k{l}ttsq
≈u  中国药典 ≈≥ q一部 qussx}tt|q
≈v  范俊安 o张 艳 o夏永鹏 o等 q重庆垫江牡丹皮生产历史与生产
现状分析 ≈ q中药材 oussyou|kwl}wstq
≈w  房杏春 o安登魁 o董善事 o等 q‹ °≤法测定丹皮中丹皮酚含量
≈ q中国药科大学学报 ot|{|ouskul}ts|q
≈x  姜 潇 o张广宏 o刘学起 q‹ °≤法测定牡丹皮中丹皮酚的含量
≈ q齐鲁药事 ousswouvkyl}vtq
≈y  中国药典 ≈≥ q一部 qusss}ttyq
≈z  李海燕 o陈小坚 q牡丹皮中丹皮酚含量动态变化研究 ≈ q时珍
国医国药 ousssottkvl}t|zq
∆ ψναµ ιχ αναλψσισ οφ µ αϕορ αχτιϖε ινγρεδιεντσ οφ Χορτεξ Μουταν χυλτιϖατεδ
ιν ∆ ιανϕιανγ χουντψ οφ Χηονγθινγ
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(t. Χηονγθινγ Υνιϖερσιτψ οφΜεδιχαλΣχιενχε, Χηονγθινγ wsssty, Χηινα;
u. Χηονγθινγ Αχαδεµ ψ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα, Χηονγθινγ wsssyx, Χηινα;
v. Χηονγθινγ Φοοδ ανδ ∆ρυγ Αδµ ινιστρατιον, Χηονγθινγ wssswu, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ¦«¤±ª¨ ²©³¤¨ ²±²¯ ¤±§³¤¨ ²±¬©¯²µ¬±o ·«¨ ·º² °¤­²µ¤¦·¬√¨¬±ªµ¨§¬¨±·¶¦²±·¤¬± §¨¬± ≤²µ·¨¬
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¤±§ ∏´¤¯¬·¼ ¦²·µ²¯ ° ·¨«²§¶²©≤²µ·¨¬ ²∏·¤±q Μετηοδ : °¤¨ ²±²¯ ¤±§³¤¨ ²±¬©¯²µ¬± º µ¨¨ §¨ ·¨µ°¬± §¨¥¼ ‹ °≤ ¬± ¶¤°³¯ ¶¨©µ²° ⁄¬¤±­¬¤±ªq
Ρ εσυλτ ανδ χονχλυσιον: ׫¨ µ¤·¬² ²©³¤¨ ²±²¯ ¤±§³¤¨ ²±¬©¯²µ¬± ¬± ≤²µ·¨¬ ²∏·¤± º¤¶µ¨ª∏¯¤µ¯¼ ¬±©¯∏¨ ±¦¨§¥¼ ¤¯·¬·∏§¨ o ·«¨ ªµ²º·« ¼¨ ¤µ¶
¤±§«¤µ√ ¶¨··¬° 1¨≤²µ·¨¬¦²∏¯§¥¨ ¦∏¯·¬√¤·¨§¤·¤¯·¬·∏§¨ ²©wss ° ·²{ss ° ¥∏·yss ° ¬¶·«¨ ¥¨ ¶·¤µ¬¤¥¨ ¦¤∏¶¨ ²©·«¨ ³¨ ¤® ²©·«¨ ³¨ µ¦¨±·2
¤ª¨ ¦²°³²¶¬·¬²± ²©³¤¨ ²±²¯ ¤±§³¤¨ ²±¬©¯²µ¬± ¤·yss °q ׫¨ ©¬µ¶·¤±§°¬§§¯¨·«¬µ§²©’¦·²¥¨ µ¬± ·«¨ ©¬©·« ¼¨ ¤µ¬¶·«¨ ¥¨ ¶·³¬¦®¬±ª·¬°¨²©
≤²µ·¨¬  ²∏·¤± ¥¨ ¦¤∏¶¨ ²©·«¨ °¤¬¬°∏° ²©·«¨ ³¨ µ¦¨±·¤ª¨ ¦²°³²¶¬·¬²± ²©³¤¨ ²±²¯ ¤±§³¤¨ ²±¬©¯²µ¬±q
[ Κεψ ωορδσ] ≤²µ·¨¬  ²∏·¤±~ ⁄¬¤±­¬¤±ª~ ³¤¨ ²±²¯~ ³¤¨ ²±¬©¯²µ¬±~ §¼±¤°¬¦¤±¤¯¼¶¬¶
≈责任编辑 张宁宁  
≈收稿日期   ussy2sz2ts
≈通讯作者   3 郭玉海 oר¯}kstslyuzvuxxy
知母有效成分及氮 !磷 !钾累积规律研究
陈 娟 o杨重军 o郭玉海 3
k中国农业大学 农学与生物技术学院 中药材研究中心 o北京 tsss|wl
≈摘要   目的 }研究知母有效成分累积 !营养吸收特性及其转运规律 o为确定知母的最佳采收期和合理施肥提
供依据 ∀方法 }不同时期采样并测定植株不同器官的干物质质量 !氮 !磷 !钾含量和有效成分含量 ∀结果 }根茎对
氮 !磷 !钾的吸收主要在 z月之后 o{月下旬以后地上部分的氮 !钾元素大量向根茎转运 ∀春季根茎中菝葜皂苷元含
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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