全 文 ：Στυδιεσ ον χηεµ ιχαλχονστιτυεντσ οφΧψνανχηυµ φορρεστιι
≠ ∏¨ o ¬±ªo ≠ ≥«¬2¶«¤±o ÷¬¤±ª2½«²±ªo ≠ ²∏2¦¤¬
(Ινστιτυτε οφΜατερια Μεδιχα, Χηινεσε Αχαδεµ ψ οφΜεδιχαλΣχιενχεσ ανδ Πεκινγ Υνιον ΜεδιχαλΧολλεγε, Κεψ Λαβορατορψ οφ
Βιοαχτιϖε Συβστανχεσ ανδ ΡεσουρχεσΥτιλιζατιον οφ Χηινεσε ΗερβαλΜεδιχινε, Μινιστρψ οφ Εδυχατιον, Βειϕινγ tsssxs, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶²©Χψνανχηυµ φορρεστιιq Μετηοδ : ≤«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦·¨¦«±¬´∏¨ ¶º µ¨¨
¤³³¯¬¨§·²¬¶²¯¤·¨§¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶q ׫¨ ¶·µ∏¦·∏µ¨¶º µ¨¨ ¬§¨ ±·¬©¬¨§²± ·«¨ ¥¤¶¬¶²©³«¼¶¬¦²2¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¤±·¶¤±§¶³¨ ¦·µ²¶¦²³¬¦
§¤·¤q Ρ εσυλτ: ∞¬ª«·¦²°³²∏±§¶º µ¨¨ ¬¶²¯¤·¨§©µ²° ·«¨ |xh ·¨«¤±²¯ ¬¨·µ¤¦·²©·«¨ µ²²·¶²©Χ. φορρεστιι ¤±§¨¯∏¦¬§¤·¨§¤¶k n l2xχ2° 2¨
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¤¦¬§k5lo Β2¶¬·²¶·¨µ²¯ k6lo §¤∏¦²¶·¨µ²¯ k7lo ±²±¤± §¨¬²¬¦¤¦¬§k8lq Χονχλυσιον: ≤²°³²∏±§¶123 ©µ²° ·«¬¶ª¨ ±∏¶o ¤±§¦²°³²∏±§¶
428 ©µ²° ·«¨ ³¯¤±·º µ¨¨ ²¥·¤¬± §¨©²µ·«¨ ©¬µ¶··¬° q¨
[ Κεψ ωορδσ] Χψνανχηυµ φορρεστιι~ ¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶~ ¬¯ª±¤±~ ¤¯®¤¯²¬§
≈责任编辑 戴 畅
°≤2∞≥⁄测定积雪草提取物中积雪草苷的含量
于泉林 t o高文远 t3 o陈海霞 t o段宏泉 u
ktq天津大学 药物与科学技术学院 o天津 vssszu~
uq天津医科大学 药学院 o天津 vssszsl
≈摘要 目的 }用 °≤ 2∞≥⁄测定积雪草提取中积雪草苷的含量 ∀方法 }色谱柱为 ¬± ¶¬≠ 2≤t{分析柱 o
流动相为乙腈 2水 o梯度洗脱 ~漂移管温度 tsx ε ~载气流速 u1| # °¬±pt ∀结果 }积雪草苷在 s1vx ∗ z1s Λª呈良好
线性关系 ~积雪草提取物中积雪草苷的回收率为 |w1|h k ≥⁄ t1zh l∀结论 }该方法简便 !准确 !分离效果好 o无干
扰 o可用于积雪草提取物中积雪草苷的质量评价 ∀
≈关键词 °≤ 2∞≥⁄~积雪草提取物 ~积雪草苷 ~质量控制
≈中图分类号 u{wqt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusszlsy2sxsv2sv
≈收稿日期 ussy2sz2tu
≈通讯作者 3 高文远 o ר¯ rƒ¤¬} ksuul {zwst{|xo ∞2°¤¬¯}
³«¤µ°ª¤² ·∏q §¨∏q¦±
积雪草为伞形科积雪草属植物积雪草 Χεντελλα
ασιατιχα kqlµ¥¤±的干燥全草 ≈t ∀ t|世纪 o积雪草
及其提取物作为消炎与皮肤损伤而记入印度药
典 ≈u ∀在欧洲也利用积雪草治疗跌打损伤与溃疡
等 ∀以上这些均由于积雪草中含有多种三萜皂苷类
活性化学成分 ≈v o如积雪草苷等 ∀积雪草中皂苷类
的含量测定有滴定 !反相 °≤ 2∂等方法 ≈wox ∀但
上述方法存在许多问题 o如滴定法要把皂苷水解然
后再测定其总三萜酸的含量 o方法较繁 ~而反相
°≤ 2∂一般把紫外波长设定在 usx ∗ uvs ±°o从
图 t中也可以看到其结构中只含有 t个双键 o它的
紫外吸收非常弱 o这时用梯度洗脱很易造成基线不
稳导致检测结果不准确 ≈y ∀蒸发光散射检测器
k∞≥⁄l是一种通用型检测器 o国内外已有报道成功
用于有参皂苷 !萜类内酯等成分的分析检测 ≈zo{ ∀
本研究采用反相 °≤ 2∞≥⁄梯度洗脱的方法测定
积雪草提取中积雪草苷的含量 o以建立更加合理的
积雪草提取物制备的质量控制方法 ∀
1 仪器与试药
ª¬¯¨ ±·ttss型高效液相色谱仪 otvtt系列
四元梯度泵 otvuu脱气机 ~zzux¬手动进样器 ~美
#vsx#
第 vu卷第 y期
ussz年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ y
¤µ¦«o ussz
国 ¯¯·¨¦«usss型蒸发光散射检测器 ~° √¨q q
sxst化学工作站 kª¬¯¨ ±·公司 l~空气发生器 k天津
市达因仪器厂 l∀
积雪草提取物 }分别购于陕西 o广西和本实验室
制备 ∀本实验室制备 }积雪草药材购于天津市药店 o
经天津大学高文远教授鉴定为 Χ. ασιατιχαo标本保
存于天津大学药学院中药系标本室 ∀积雪草药材粉
碎 o过 us目筛 o|{h乙醇提取 u «重复 v次 o浓缩提
取液得浸膏 o经硅胶柱色谱 o收集氯仿 2甲醇 kzΒvl洗
脱液并浓缩至干 o然后用丙酮重结晶即得积雪草提
取物见图 t∀积雪草苷对照品为本实验室分离得
到 o其波谱数据与报道相一致 o纯度为 |{h ∀乙腈 !
甲醇为色谱纯 o水为超纯水 ∀
图 t 积雪草苷结构图
2 方法与结果
2q1 色谱分析条件 ¬± ¶¬≠2≤t{分析柱
kw1y°° ≅ uxs °°ox Λ°l~流动相乙腈 2水 o梯度洗
脱 ks °¬±oush乙腈 ~vs °¬±oxxh乙腈 ~vx °¬±oxxh
乙腈 ~xs °¬±oush 乙腈 l~流速 t1s °# °¬±pt ~
∞≥⁄检测器漂移管温度 tsx ε ~载气流速 u1| #
°¬±pt ~理论板数按积雪草苷峰值计算应不低于
x sss∀
2q2 供试品溶液与对照品溶液的制备 提取物供
试品溶液的制备 }精确称取购于广西的积雪草提取
物 x1w °ªo购于陕西的积雪草提取物 uu1x °ªo本实
验室制备的积雪草提取物 uv1w °ªo分别用甲醇 2水
k|Βtl溶解并定溶至 ts °量瓶中 o作为 v种提取
物的供试品溶液 ∀
对照品储备液及工作液制备 }精密称定积雪草
苷标准品配成 us °ª# °pt作为储备液 o然后依次
稀释为每 t °分别含 s1szos1vos1zot1sot1w °ª
的工作液 ∀
按以上色谱条件得到对照品及 v个提取物的色
谱分离图 o如图 u所示 ∀
2q3 线性关系考察 分别精密吸取积雪草苷对照
品工作液 o依次进样 o按上述色谱条件测定峰面积 o
以峰面积的常用对数为纵坐标 o以进样量的常用对
图 u 积雪草提取物 °≤图
q积雪草苷 ~
q购于广西的积雪草提取物 ~≤q购于陕西的
积雪草提取物 ~⁄q本实验室制备的积雪草提取物 ~tq积雪草苷
数为横坐标 o绘制标准曲线 o得回归方程 Ψ {ysΞ p
tww1voρ s1||| {∀结果表明 o积雪草苷进样量在
s1vx ∗ z1s Λªo其对数值与峰面积的对数值呈良好
的线性关系 ∀
2q4 精密度试验 精密吸取对照品溶液 s1z °ª#
°pt溶液 ts Λo重复进样 y次 o ≥⁄ t1|h kν
yl∀
2q5 稳定性试验 取本实验室制备的积雪草提取
物样品溶液 o定时 ksouowoyo{ «l进行测定 o ≥⁄
t1yh kν xl∀
2q6 重复性试验 取同一批次积雪草提取物本实
验室制备的积雪草提取物 x份 o按供试品溶液制备
项操作 o按前述测定方法测定 o其平均含量为 s1t
°ª# °pt o ≥⁄ u1th kν xl∀
2q7 加样回收率试验 精密称取购于陕西的积雪
草提取物 x份 o分别加入一定量的积雪草苷对照品 o
按上述色谱条件测定积雪草苷含量 o平均回收率为
|w1|h o ≥⁄ t1zh kν xlo见表 t∀
2q8 样品测定结果 分别精密吸取对照品溶液 xo
ts Λ与各提取物溶液各 ts Λo按照上述色谱条件
#wsx#
第 vu卷第 y期
ussz年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ y
¤µ¦«o ussz
表 t 积雪草提取物加样回收率
样品中含量
r°ª
加入量
r°ª
测得值
r°ª
回收率
rh
平均值
rh
≥⁄
rh
s1zt s1zs t1v| |z1t
s1y| s1zs t1vx |w1v
s1zs s1zs t1vz |x1z |w1| t1z
s1y| s1zs t1vw |u1|
s1zs s1zs t1vy |w1v
依次进样 o以外标两点法计算各提取物中积雪草苷
含量 o测定结果如表 u∀
表 u 积雪草提取物中积雪草苷含量
样品来源 积雪草苷含量 r°ª# ªpt
购于广西的积雪草提取物 s1sz
购于陕西的积雪草提取物 s1zs
本实验室制备的积雪草提物 s1ts
由表 u可以看出 o不同积雪草提取物中积雪草
苷的含量相差很大 o其中以购于陕西的积雪草提取
物含量最高 o其次为本实验室制备的积雪草提取物 o
而购于广西的积雪草提取物的含量最低 ∀
3 讨论
本实验建立了 °≤ 2∞≥⁄检测积雪草提取中
积雪草苷含量的分析方法 o在上述的色谱条件下减
少了利用紫外检测器由于使用低波长灵敏度低 !基
线易漂移等缺点 o为积雪草提取物质量控制提供一
个可靠方法 ∀将来可利用此方法检测提取物中多种
成分 o进一步完善积雪草提取物的质量控制 ∀
积雪草提取中成分比较复杂 o本实验采用梯度
洗脱能较好的使积雪草苷与周围的其他物质得到较
好的分离 o色谱图显示基线平稳分离度好 o达到满意
检测积雪草苷的效果 ∀
≈参考文献
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¦¨¶¶¬²±¶²©Χεντελλα ασιατιχα kql µ¥¤±≈ q ƒ²²§≤«¨ °o ussvo
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¦²¶¬§¨ ¶©µ²° Χεντελλα ασιατιχα≈ q ¤· §¨o usstoxxkvl}tvwq
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≈y 沙东旭 o张满来 q°≤ 2∞≥⁄测定三七药材及其制剂中三七皂
苷 t o人参皂苷 ªt及 ¥t的含量 ≈ q中国中药杂志 oussxo
vskul}ttuq
≈z °¤µ® o °¤µ® o ¤± ≥
o ·¨¤¯q ¬ª«2³¨ µ©²µ°¤±¦¨ ¬¯´∏¬§
¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦ ¤±¤¯¼¶¬¶ ²© ª¬±¶¨±ª ¶¤³²±¬±¶ ∏¶¬±ª √¨¤³²µ¤·¬√¨
¬¯ª«·¶¦¤·¨µ¬±ª§¨ ·¨¦·¬²±≈ q ≤«µ²°¤·²ªµo t||yozvy}zzq
≈{ 秦少容 o余佳文 o岳廷哲 o等 q高效液相色谱法 2蒸发光散射检测
器法测定红参及育精胶囊中人参皂苷 ªt和 的¨含量 ≈ q
中国中药杂志 ousstouyk{l}xwwq
∆ ετερµ ινατιον οφ αισατιχοσιδε ιν Χεντελλα ασιατιχα εξτραχτ βψ ΗΠΛΧ2ΕΛΣ∆
≠ ±∏¤±2¯¬±t o • ±¨2¼∏¤±t o ≤∞¤¬2¬¬¤t o ⁄²±ª2´ ∏¤±u
(t. Χολλεγε οφ Πηαρµ αχευτιχαλΣχιενχεσ ανδ Βιοτεχηνολογψ, Τιανϕιν Υνιϖερσιτψ, Τιανϕιν vssszu, Χηινα;
u. Σχηοολοφ Πηαρµ αχευτιχαλΣχιενχεσ, Τιανϕιν ΜεδιχαλΥνιϖερσιτψ, Τιανϕιν vssszs, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: °≤ 2∞≥⁄ ° ·¨«²§º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §©²µ·«¨ ¶¬°∏¯·¤± ²¨∏¶ ∏´¤±·¬·¤·¬√¨§¨ ·¨µ°¬±¤·¬²± ²©¤¶¬¤·¬¦²¶¬§¨ ¬±
Χεντελλα ασιατιχα ¬¨·µ¤¦·q Μετηοδ : ׫¨ ¦²¯∏°± º¤¶³¤¦®¨ §º¬·«x ° ± ≤t{ ¶·¤·¬²±¤µ¼ ³«¤¶¨q ׫¨ °²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ ¦²±¶¬¶·¨§²©¤¦¨·²±¬2
·µ¬¯¨ 2º¤·¨µo ¨¯∏·¨§¬± ªµ¤§¬¨±·°²§¨ q ׫¨ ·¨°³¨ µ¤·∏µ¨ ²©§µ¬©··∏¥¨ º¤¶tsx ε ¤±§·«¨ ± ¥¨∏¯¬½¨ µ±¬·µ²ª¨ ± ©¯²º µ¤·¨ º¤¶u1| # °¬±pt q
Ρ εσυλτ: ׫¨ ¬¯± ¤¨µµ¤±ª¨ ¶²©·«¨ ¤¶¬¤·¬¦²¶¬§¨ º µ¨¨ s1vx2z1s Λªq ׫¨ µ¨¦²√ µ¨¼ ²©·«¨ ¤¶¬¤·¬¦²¶¬§¨ ¬± Χ. ασιατιχα ¬¨·µ¤¦·º¤¶|w1|h
k ≥⁄ t1zh lq Χονχλυσιον: ׫¨ ° ·¨«²§¬¶µ¨ ¬¯¤¥¯ o¨ ¶¬°³¯ o¨ ³µ¨¦¬¶¨ ¤±§¦²∏¯§¥¨ ∏¶¨§©²µ·«¨ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²©Χ. ασιατιχα ¬¨·µ¤¦·q
[ Κεψ ωορδσ] °≤ 2∞≥⁄~ Χεντελλα ασιατιχα ¬¨·µ¤¦·~ ¤¶¬¤·¬¦²¶¬§¨ ~ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯
≈责任编辑 戴 畅
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第 vu卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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