免费文献传递   相关文献

中药复方安替威血清药物化学和抗SARS病毒试验研究



全 文 :中药复方安替威血清药物化学
和抗 ≥„• ≥病毒试验研究
曹洪欣t 3 o王喜军u o于友华t o张 宁u o张华敏t
kt q中国中医研究院 o北京 tsszss ~ u q黑龙江中医药大学 o黑龙江 哈尔滨 txsswsl
非典型性肺炎是由 ≥„• ≥病毒引起的一种传染性强 o发
病率 !死亡率较高的流行性疾病 ∀据研究 o≥„• ≥病毒是一种
变异的冠状病毒 o在进入人体后进行大量复制 o同时干扰人
体免疫系统 o使免疫应答紊乱 o从而出现以呼吸功能障碍为
主要表现的病症 ∀目前已知的抗生素对 ≥„• ≥病毒无确切
疗效 o而中医药在治疗非典型性肺炎上显示出一定的优势 o
在缓解症状 o缩短发热时间 o减轻病人痛苦等方面有着很好
的疗效 ∀因此 o积极探索中医药防治 ≥„• ≥的规律 o用现代研
究方法阐明中医药治疗 ≥„• ≥的有效性十分必要 ∀
根据中医药理论 o以透表解毒法为原则组成的中药复方
安替威治疗上呼吸道感染曾取得较好的疗效 ∀应用中药血
清药物化学的方法 o对复方安替威的血中移行成分进行分离
纯化 o以此进行抗 ≥„• ≥病毒作用的研究 o取得初步结果 ∀
1 安替威的血清药物化学研究
为了研究安替威在血清中的主要药效物质 o提高其药物
功效 o笔者采用了现代血清药物化学的方法 o分离制备和纯
化该药的体内直接作用物质 ∀
1 q1 实验材料与药品
• ¤·¨µ¶高效液相色谱仪k • ¤·¨µ¶yss ≤²±·µ²¯¯¨µo• ¤·¨µ¶yss
°∏°³o• ¤·¨µ¶||y °«²·²§¬²§¨ „µµ¤¼ ⁄¨ ·¨¦·²µl ~ • ¤·¨µ≥¼°° ·¨µ¼
≥«¬¨ §¯× • °t{色谱柱 kv q| °° ≅ txs °° ox Λ°l ~‘²√¤2°¤®≤t{
Š∏¤µ§p °¤®× 保护柱 ~≤’u培养箱 ‘˜„Œ• ˜≥ „˜×’ ƒ’ • 提
供 ∀
乙腈 o‹°≤ 级 o美国迪马k⁄ŒŽ„l试剂公司 ~甲醇 o‹°≤
级 o美国天地k×∞⁄Œ„l试剂公司 ~其余试剂为分析纯 ∀
1 q2 实验方法及结果
1 q2 q1 色谱条件 • ¤·¨µ≥¼°° ·¨µ¼ ≥«¬¨ §¯× • °t{色谱柱 kv q|
°° ≅ txs °° ox Λ°l ~‘²√¤p °¤®≤t{ Š∏¤µ§p °¤®× 保护柱 ~流
动相 乙腈 p s qtx h磷酸 otss °¬±内梯度洗脱 ~柱温 vs ε ~流
量 t °#°¬±p t ~检测波长 vvs ±° ∀
1 q2 q2 复方安替威口服后大鼠血清样品的制备及其 ‹°≤
分析 取 • ¬¶·¤µ大鼠{只 o禁食tu«k自由饮水l o称重 o按
t qx °#tss ªp t体重 o取 t只灌胃给予蒸馏水 oys °¬±后采
血 ~其他 z只灌胃给予所制药液 ∀在 tus °¬±时用 t h戊巴比
≈收稿日期  ussv2tt2uw
≈通讯作者  3曹洪欣 oר¯ }kstslywstwwtt2uusx
妥钠麻醉 o经肝门静脉取血 x °o血液在 v sss µ#°¬±p t条件
下离心 ts °¬±o取上清液 t °o加入 s qu °zs h 高氯酸 o
快速摇匀 ovsssµ# °¬±p t条件下离心ts °¬± o取上清液过
s qwx Λ°微孔滤膜 o制得空白血清样品及给药组血清样品 o
经 ‹°≤分析 o结果k图 tl表明 o给药后血清样品中 o复方安
替威的血中移行成分最多 o而且浓度最高 ∀经与体外 ‹°≤
色谱图比较分析 o确定了 ts个来源于复方安替威血中移行
成分 o为生药中的原型成分 o而且尚有三四个为代谢产物 ∀
2 中药复方安替威抑制冠状病毒的药效学实验
2 q1 材料与药品
2 q1 q1 药物样品 安替威样品k含金银花 !柴胡等l和中药
对照药品按上述血清药物化学方法制备 ∀对照药物更昔洛
韦 kŠ¤±¦¬¦¯²√¬µo湖北科益药业股份有限公司提供 o批号
sus{sul ∀
2 q1 q2 细胞及病毒 非洲绿猴肾传代细胞k∂ µ¨² ∞y细胞l !
冠状病毒 |号分离株由解放军 vsu医院提供 ∀
2 q2 实验方法及结果
∂ µ¨² ∞y 细胞以 w ≅ ts{#pt浓度接种 |y 孔培养板 ovz
ε ox h ≤’u孵箱培养 uw «o细胞培养至单层 o弃掉培养液 ∀
加入 tss ×≤Œ⁄xs的冠状病毒液 o同时设正常细胞对照和病毒
对照 o置 vz ε ox h ≤’u 吸附 u «后 o弃掉病毒液 o加入不同浓
度的验证药物 o药物选用对细胞的最大无毒浓度k×⁄slu倍
稀释ts个浓度 o即安替威zxs ∗ t qwx°ª#pt o中药提取物
t xss ∗ u q| °ª#pt o阳性对照药物更昔洛韦选用对细胞的
最大无毒浓度k×⁄slu倍稀释 ts个浓度即 y sss ∗ tt qz °ª#
pt o将稀释的药物分别加入细胞孔内 o每浓度 v孔 o同时设
正常细胞对照和病毒对照 o置 vz ε ox h ≤’u 孵箱培养 x ∗ z
§o逐日在倒置显微镜下观察病毒 ≤°∞o以病毒对照出现 7 ∗
8 时结束试验 o用 • ¨¨ §2∏¨ ±¦«法 o计算药物半数有效浓度
kŒ≤xsl和最小有效浓度kŒ≤l及治疗指数k׌l判断药效k见表
tl ∀
表 t 中药复方安替威抗冠状病毒试验结果
药物 Œ≤xsr°ª#pt Œ≤r°ª#pt ׌
安替威 wy q{ ? s |v qzx ? s {
中药对照 zxs qs ? s txss qss ? s t
更昔洛韦 tt qz ? s uv qww ? s uxy
#t{u#
第 u|卷第 v期
ussw年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ v
¤µ¦«oussw
图 t 中药复方安替威含药血清样品与体外样品的 ‹°≤对照色谱图
¤q复方安替威的体外样品 ¥q复方安替威含药血清样品 ¦q空白血清样品
以上结果表明 o安替威对冠状病毒有明确的抑制效果 o
中药的提取物无抑制冠状病毒的作用 ∀
3 分析与讨论
3 q1 中药复方安替威抗 ≥„• ≥病毒的理论及临床基础
≥„• ≥属中医/温疫0之范畴 o病因是疫疠之毒 o病位在肺 o
其基本病机是热毒 !湿毒 !瘀毒壅阻肺络 o耗伤气阴 o甚则气
脱阴竭 ∀病机特点是毒邪贯穿始终 o因此治疗时解毒至关重
要 o但必须根据疾病的不同阶段采取不同的解毒方法 ∀如早
期宜透表解毒 !中期宜清热凉血解毒 !后期宜益气养阴解毒 ∀
≥„• ≥之毒传染性强 !传变迅速 o故必须早期治疗 o截断病势传
变 ∀透表解毒法是截断传变的主要方法 o用之得当 o邪气得
祛 o则病情缓解 ∀反之病邪骤进 o病势危机 ∀在临床上 o运用
透表解毒法治疗各种流感 !感冒 !上呼吸道感染均有较好的
疗效 o尤其是对上述疾病引起的发热效果颇佳 ∀中药复方安
替威是在临床治疗呼吸道感染性发热有效方剂的基础上 o优
化选择了金银花 !柴胡等中药组成 o处方符合透表解毒的治
疗原则 ∀
本研究表明 o安替威抑制 ≥„• ≥病毒有效 o正是基于其理
论和临床实践基础 ∀其处方抓住了 ≥„• ≥属中医/温疫0之范
畴 o病因是疫疠之毒 o病位在肺 o透表解毒是早期中医治疗
≥„• ≥的基本原则 ∀在透表解毒治疗原则指导下处方遣药是
合理的 ∀
3 q2 血清药物化学能够使主要药效物质最大限度地有机富
集 o并能基本模拟药物体内过程
中药传统的口服给药形式决定了那些被吸收入血的物
质才能产生活性 o且由于中药的成分复杂 o有些成分只有经
体内代谢转化后方能产生活性≈t  ∀因此 o有些药物的体外试
验结果与药物在体内的效应本质上存在着一定差异 o也就是
说 o缺乏体内过程的药物直接用于体外试验 o不能完全反应
其药物活性 ∀采用血清药物化学的方法分离 !制备和纯化药
物在体内直接作用物质为体外试验药物样品 o基本能够解决
体外实验样品与体内药效物质相对一致的问题 ∀从复方安
替威含药血清样品与体外样品的 ‹°≤ 对照色谱图k图 tl中
可以看到 o复方安替威的血中移行成分中 o有 ts个成分是来
源于为生药中的原型成分 o有三 四个为代谢产物 ∀从实验结
果k表 tl看 o这种从血清中提取制备药物入血成分的方法获
得的体内直接作用物质确有抑制 ≥„• ≥病毒的效果 o而体外
的中药提取物无此作用 ∀使用这种方法的目的在于它能够
使尚属未知有效成分通过生物筛选达到最大限度的有机富
集 ~同时还能够通过体内过程 o使某些体外无效的前体药物
代谢激活 o使体外试验达到体内试验的效果 ~其意义是能够
较大限度地提高药效研究的效价和准确度 o较大限度地体现
中药复方的整体作用方式 ∀
3 q3 从中药复方安替威看中药复方对 ≥„• ≥治疗的优势和
前景
从中医药参与治疗 ≥„• ≥的临床研究报告分析看≈u  o中
医药对 ≥„• ≥的防治作用主要包括 }早期干预 o可阻断病情的
进一步发展 ~可明显减轻 ≥„• ≥的临床症状 o特别是能够缩短
发热时间 o促进炎症吸收 ~能减少激素用量及西药毒副作用 o
减少后遗症与并发症 ∀能够缩短病程 o提高疗效 ~对促进患
者康复有良好效果等方面 ∀中药治疗的优势就是方剂的/整
体综合调节0作用方式 o通过配伍将中药整合为一整体后 o干
预作为整体的疾病状态下的人体 ∀它通过不同途径干预疾
病的不同环节 o其干预的主要方式不是单纯补充或对抗 o而
是强调祛邪不伤正 o扶正不留邪的调节方式≈v  ∀安替威抑制
≥„• ≥病毒的机理仍需进一步研究才能够阐述清楚 o但从本
试验分析看 o它反映的是复方的整体作用 o这一整体作用通
过体内过程实现药物间的相互作用及人体对药物作用以后
才能够显现出来得 ∀此外 o安替威能够抑制病毒是临床取得
疗效的一个方面 o从理论上推测 o它还应具备调节机体免疫
功能 !改善发热和呼吸道症状等作用 o需要进一步深入研究 ∀
≈参考文献 
≈t  王喜军 q中药及中药复方的血清药物化学研究 q世界科学技术
#中药现代化 oussu owkul }t q
≈u  曹洪欣 o于友华 o王喜军 o等 q中医药在防治 ≥„• ≥中的作用 q
中国中医基础医学杂志 oussv o|k|l }v q
≈v  于友华 o王永炎 o等 q论方剂/整体综合调节0的作用方式 q中国
中药杂志 oussv ou{ kwl }u{| q
≈责任编辑 古云侠 
#u{u#
第 u|卷第 v期
ussw年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ v
¤µ¦«oussw