全 文 ：Εφφεχτσ οφ Εξτραχτσ οφ Γινκγο Βιλοβα (ΕΓΒ) ον Λεϖελσ οφ Νιτριχ
Οξιδε ανδ Αποπτοσισιν τηε Ρετινα Ινδυχεδ βψ Γλυταµ ατειν Αδυλτ Ραββιτσ.
Œ ≠¤±ª2­∏±t o ≠ „‘Š ÷¬±2ª∏¤±ªt oŠ„’  ¬¨2µ∏¬u o
kt q ⁄¨ ³¤µ·° ±¨·²© ’³«·«¤¯ °²¯²ª¼ o פ±ª ⁄∏ ‹²¶³¬·¤¯ o ׫¨ ƒ²∏µ·« ¬¯¬·¤µ¼  §¨¬¦¤¯ ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼·«¨ ©¨©¨ ¦·¶²© ¬¨·µ¤¦·¶²©ª¬±®ª²¥¬¯²¥¤k∞Š…l ²±·«¨ ¯¨ √¨¯¶²©±¬·µ¬¦²¬¬§¨ k‘’l ¤±§¤³²³·²¶¬¶
¬±·«¨ µ¨·¬±¤¬±§∏¦¨§¥¼ ª¯∏·¤°¤·¨ ¥¼¬±·µ¤√¬·µ¨¤¯ ¬±­¨¦·¬²±¬± ¤§∏¯·µ¤¥¥¬·q Μετηοδ : × «¨ °²§¨¯²©¤³²³·²¶¬¶¬± µ¨·¬±¤¬±§∏¦¨§¥¼ ª¯∏2
·¤°¤·¨ ¥¼¬±·µ¤√¬·µ¨¤¯ ¬±­¨¦·¬²± º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §¬± ¤§∏¯·µ¤¥¥¬·¤±§∞Š… º¤¶µ¨·µ²¥∏¯¥¤µ¯¼¬±­¨¦·¨§q׫¨ ¯¨ √¨¯¶²© ‘’ º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§¥¼
¶³¨ ¦·µ²³«²·²° ·¨¨µq • ·¨¬±¤ ⁄‘„ ©µ¤ª° ±¨·¤·¬²± º¤¶§¨·¨µ°¬±¨ §¥¼ ¤ª¤µ²¶¨ ª¨¯ ¨¯ ·¨µ²³«²µ¨¶¬¶q Ρεσυλτ : × «¨ ¯¨ √¨¯¶²© ‘’ ¬± µ¨·¬±¤¬±
¬¨³¨µ¬° ±¨·ªµ²∏³¶º µ¨¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼¬±¦µ¨¤¶¨§¦²°³¤µ¨§ º¬·«¦²±·µ²¯¶o¤©·¨µ·µ¨¤·° ±¨·º¬·« «¬ª«§²¶¤ª¨ ²© ∞Š…o¤±§¯¨ √¨¯¶²© ‘’
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§¨·¨¦·¨§¬± ¬¨³¨µ¬° ±¨·ªµ²∏³¶¤±§¶°¤¯¯§²¶¤ª¨ ∞Š… ªµ²∏³¶q≤²±¦¯∏¶¬²± × «¨ µ¨·¬±¤¤³²³·²¶¬¶º¤¶¬±§∏¦¨§¥¼ ª¯∏·¤°¤·¨ ¥¼¬±·µ¤√¬·µ¨¤¯
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[ Κεψ ωορδσ] ª¯∏·¤°¤·¨ ~ ¬¨·µ¤¦·²©ª¬±®ª² ¥¬¯²¥¤~µ¨·¬±¤~¦¨¯¯ ¤³²³·²¶¬¶~‘’
≈责任编辑 方文贤 
水翁花对微粒体和神经细胞氧化损伤的保护作用
卢艳花t o杜长斌t o吴子斌u o叶春林t o刘建文t o魏东芝t
kt q华东理工大学 生物工程学院 国家重点实验室 o上海 ussuvz ~
u q香港中文大学 生物化学系l
≈摘要  目的 }研究水翁花对小鼠肝微粒体膜脂氧化及 ‹u ’u诱导的 °≤tu神经细胞氧化损伤的保护作用 ∀方
法 }用小鼠肝微粒体膜脂氧化模型 !细胞培养  × × 法测定细胞的存活率等方法 ∀结果 }水翁花水提物能强烈抑制
小鼠肝微粒体膜脂氧化 oŒ≤xs为 s qstv ª#p t o效果优于阳性对照维他命 ∞kŒ≤xs为 s qsyw ª#p tl ~对 ‹u ’u 引起的
°≤tu神经细胞氧化损伤亦显示出较强的抑制作用 o对神经细胞表现出保护作用 ∀结论 }水翁花对膜脂氧化及神经
细胞的氧化损伤的保护作用 o可能用于治疗与氧化损伤有关的脑疾 ∀
≈关键词  水翁花 ~抗氧化 ~神经细胞
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvlts2s|yw2sv
水翁花为桃金娘科植物水翁 Χλειστοχαλψξ οπερ2
χυλατυσk• ²¬¥ql  µ¨µq ·¨° µ¨µ¼的干燥花蕾 o具有清
热解毒 o治外感 !恶寒 !发热 !头痛 o食滞不化的功
效≈t  o在民间使用非常广泛 o也是/清热凉茶0中成药
的主要原料 ∀但关于水翁花的研究报道甚少 ∀最
≈收稿日期  ussu2tt2t|
≈通讯作者  卢艳花 ר¯ }ksutl ywuxu|{t ƒ¤¬}ksutl
ywuxssy{ ∞2°¤¬¯}§½«º ¬¨ƒ ¦¨∏¶·q¨§∏q¦±
近的研究证实 o在小鼠心脏灌注系统中 o水翁花提取
物通过抑制 ‘¤n rŽn2„×°¤¶¨ 的活性加强了心脏的
收缩功能 o同时降低了心脏的收缩频率 o因而推断水
翁花中可能含有强心成分≈u  ∀有关其化学成分的研
究报道仅见 t篇文献≈v  ∀为了促进我国中药资源的
开发利用 o我们对水翁花抗氧化方面的生物活性作
了研究 ∀
1 材料与方法
#wy|#
第 u{卷第 ts期
ussv年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ ts
’¦·²¥¨µoussv
1 q1 试剂
水翁花水提物为本实验室自制 o药材请南京师
范大学生命科学学院龚祝南博士鉴定 o标本存华东
理工大学生物工程学院 ∀ °≤tu神经细胞购自中国
科学院上海细胞所 ~噻唑蓝 k  × × l购自 …¬²¶¨ ±¨
× ¦¨«±²¯²ª¼ ~胎牛血清 !• ° Œ tyws为 Š¬¥²²公司产
品 ~维生素 ∞为 ≥¬ª°¤公司产品 ~其他试剂均为分析
纯 ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 水翁花水提物的制备 水翁花药材 uss ªo
加 ts倍量的水 o回流提取 u «o反复 v次 o合并滤液 o
减压回收溶剂后 o冷冻干燥 o得冻干粉 vv q{ux ªk得
率为 ty q|t h l o备用 ∀
1 q2 q2 小鼠肝微粒体膜脂氧化测定 取 us ∗ uu ª
的昆明雄性小鼠肝脏 o匀浆 o冷冻离心得微粒体 ∀具
体操作参照文献≈w  ∀
1 q2 q3 细胞培养 将新购的 °≤tu神经细胞用含
ts h胎牛血清及青霉素 !链霉素的 • ° Œ tyws培养
基作为培养液 o于 vz ε 恒温下的 ≤ ’u 培养箱中培
养 o≤ ’u浓度为 x h及饱和湿度 ∀
1 q2 q4 水翁花细胞毒性测定 在 |y孔微量培养板
中加入 °≤tu神经细胞 o水翁花以 • ° Œ tyws培养
液稀释成不同浓度 o每个浓度 v孔 o每孔接种 u ≅ tsv
细胞 ovz ε 培养 w{ «o × × 法测定 ∀
1 q2 q5 存活率测定 °≤tu神经细胞预先在 |y孔
板中培养 uw «o每孔接种 u ≅ tsv 细胞 ∀第 u天 o细
胞用 uss Λ°²¯#pt的 ‹u’u 处理 ovz ε 下培养 v «
后加入不同浓度的水翁花水提物 o作用 tu «后 o用
°…≥k³‹ z qwl洗两遍 o加入 s qx ª#pt  × × 及新鲜
的 ⁄ ∞ 培养基 o在 vz ε 下培养 w «后加入二甲
基亚砜k⁄ ≥’l溶解结晶复合物 o用酶联免疫检测
仪在 xxs ±° 处测定其吸收度 ∀
2 结果
2 q1 对小鼠肝微粒体膜脂氧化的抑制
水翁花提取物在小鼠肝微粒体膜脂氧化模型中
表现出很强的抑制作用 oŒ≤xs为 s qstv ª#pt o效果
优于阳性对照维生素 ∞k∂ l¨kŒ≤xs为 s qsyw ª#ptl o
结果见图 t ∀
2 q2 水翁花提取物对 °≤tu神经细胞的毒性
水翁花提取物在浓度低于 s qsxx ª#p t时 o对神
经细胞有保护作用 o在 s qsxx ∗ t qss ª#p t浓度时 o
与空白对照组比较无显著差异 o对细胞生长几乎无
任何影响 o结果见图 u ∀
图 t 水翁花对小鼠肝微粒
体膜脂氧化的保护作用
k υ }水翁花 ~τ }∂¨l
图 u 水翁花对 °≤tu神经细胞的毒性
2 q3 水翁花提取物对氧化导致 °≤tu神经细胞损
伤的保护作用
在低于 s qts ª#pt的浓度下 o水翁花提取物对
‹u’u诱导的 °≤tu神经细胞的氧化损伤没表现出明
显的保护作用 ∀但当浓度为 t qss ª#pt时 o细胞存
活率达到 ‹u’u对照组k只加 ‹u ’u o不加水翁花提取
物l的 vss h以上 o是对照组k正常细胞 o不加 ‹u ’u
和水翁花提取物l的 xz q| h o对 ‹u’u 诱导的 °≤tu
神经细胞的氧化损伤表现出明显的氧化修复能力 o
结果见图 v ∀
图 v 水翁花对 °≤tu神经细胞的保护作用
3 讨论
现代医学研究表明 o自由基和过氧化脂质与许
多疾病 o尤其是疑难病症 !慢性病 o如心脑血管疾病 !
#xy|#
第 u{卷第 ts期
ussv年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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癌症 !爱滋病 !克山病 !肿瘤 !糖尿病等的生成和恶化
有密切关系 ~与衰老有关的神经退行性疾病 o如老年
性痴呆 o帕金森氏症等也皆与活性氧自由基对细胞
的氧化损伤有关≈x  ∀我们的研究表明 o水翁花水提
物不仅对小鼠肝微粒体膜脂氧化有很强的抑制作
用 o而且对 ‹u’u诱导的 °≤tu神经细胞的氧化损伤
亦有很强的保护作用 o显示出较强的抗氧化特性 ∀
在我们做的另一项更能直接反映抗氧化性的 °≤tu
神经细胞氧化应激检测中 o说明水翁花不仅能够作
用于细胞外 o而且能够较好地进入细胞 o在细胞内发
挥抗氧化作用 ∀这些结果提示水翁花水提物有可能
用于治疗与氧化损伤有关的脑疾 ∀
≈参考文献 
≈t  江苏新医学院 q中药大辞典k上册l q上海 }上海人民出版社 o
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≈u  • ²² „±·«²±¼ ≠ ‹ o • ¤¼¨ ¤µ¼  ≠ oŽº¤± ‹ ≥ q ·¨¤¯ qŒ±«¬¥¬2
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≈v  张风仙 o刘梅芳 o陆仁荣 q水翁花蕾化学成分的研究 q植物学
报 ot||s ovukyl }wy| q
≈w  ¬∏ƒ o ’²¬∂ ∞ ≤ o ≤«¤±ª≥ × qƒµ¨¨ • ¤§¬¦¤¯ ≥¦¤√ ±¨ª¬±ª „¦·¬√¬2
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Προτεχτιϖε Εφφεχτσ οφ Χλειστοχαλψξ οπερχυλατυσ
ον Λιπιδ Περοξιδατιον ανδ Τραυµ α οφ Νευροναλ Χελλσ
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kt q≥·¤·¨ Ž¨¼ ¤¥²µ¤·²µ¼ ²© …¬²µ¨¤¦·²µ∞±ª¬±¨ µ¨¬±ªoŒ±¶·¬·∏·¨ ²© …¬²¦«¨ °¬¶·µ¼ o
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¤±§²±·«¨ ·µ¤∏°¤²© °≤tu ¦¨¯¯¶¬±§∏¦¨§¥¼ ‹u ’u q Μετηοδ : × «¨ °²∏¶¨ ¬¯√ µ¨«²°²ª¨ ±¤·¨ ¬¯³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²± ¤¶¶¤¼ ¤±§°≤tu ≤¨¯¯¦∏¯2
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‹u ’ukuss Λ°²¯#p tl º«¨ ± ·«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± µ¨¤¦«¨ §t qss ª#p t q Χονχλυσιον : Χλειστοχαλψξ οπερχυλατυσ °¤¼ ¥¨ ∏¶¨§¤¶¤±·¬²¬¬2
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[ Κεψ ωορδσ] Χλειστοχαλψξ οπερχυλατυσ; °≤tu ¦¨¯¯¶~ ¬¯³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²± ~ ‹¼§µ²ª¨ ± ° µ¨²¬¬§¨
≈责任编辑 方文贤 
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≈vv  任 义 q马兜铃引起呕吐一例报告 q中药通报 ot|{v o{kxl }v| q
≈vw  兰茂璞 q服用中药引起过敏反应二例报告 q江苏中医杂志 o
t|{w okyl }yu q
≈vx  肖 平 q马兜铃引起中毒反应一例 q湖南中医杂志 ot|{| ox
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≈vy  王德会 q马兜铃过敏一例报告 q中原医刊 ot||t ot{kyl }wu q
≈vz  段尚勤 q马兜铃致吐一例报告 q四川中医 ot||z otxkzl }tz q
≈v{  杨宁辉 q过量运用马兜铃副作用分析 q河南中医 ousst outkxl }
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≈v|  郑法雷 o苏 震 q慢性马兜铃酸肾病的研究进展 q中国中西医
结合肾病杂志 oussu ovkyl }vtv q
≈ws  严美琴 o潘汉生 q服马兜铃不良反应谈中药炮制重要性 q浙江
中医学院学报 ousst ouxkyl }yu q
≈wt  吕文海 q四种蜜制饮片蜜用量检测研究 q中药通报 ot|{{ otv
ktul }uu q
≈wu  唐慎微 q 晟校定 q经史证类大观本草 q卷 ttk影印本l q台南 }
正言出版社 ot|zz qvts q
≈wv  唐慎微 q曹孝忠校 q寇宗 衍义 q证类本草 q上海 }上海古籍出
版社 ot||w qzws q
≈ww  王继先 q绍兴校定经史证类备急本草图卷k影印l qv册 q日本
昭和 {年和文排印 q
≈责任编辑 袁桂京 
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第 u{卷第 ts期
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中 国 中 药 杂 志
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