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Dtermination of Gossypol in Cotton Root Bark by HPLC

高效液相色谱法测定棉根皮中棉酚含量



全 文 :药材用 o但挥发油主成分不同 o挥发油所含化学成分
亦不尽相同 ∀可为两种乳香其它研究提供参考 ∀
6 q4 通过对索马里乳香与埃塞俄比亚乳香挥发油
主要成分的分析 o为建立有效的鉴别及定量方法 !制
订相应的质量标准提供依据 o对于保证进口乳香的
质量十分必要 ∀
≈参考文献 
≈t  江苏新医学院 q中药大辞典 q第 ts版 q上海 }上海科学技术出
版社 ot||z qtvz| q
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≈v  王 维 o朱永新 o刘林哲 o等 q索马里乳香挥发油化学成分研究 q
药物分析杂志 ot||v okvl }tzs q
≈w  卢兖伟 o王 琦 o李胜群 o等 q气质联用法分析炮制对乳香挥发
油的影响 q中成药 ot||y ot{kttl }us q
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≈责任编辑 袁桂京 
高效液相色谱法测定棉根皮中棉酚含量
崔光红 o陈家春 o蔡大勇
k湖北中医学院 o湖北 武汉 wvssytl
≈摘要  目的 }建立棉根皮中主要有效成分棉酚的含量测定方法 ∀方法 }丙酮超声提取 o≤t{柱 o乙腈2s qu h磷
酸水k{xΒtxl为流动相 o检测波长 uvx ±° ∀结果 }平均回收率 |z qy h o• ≥⁄为 t qx| h k ν € xl ∀结论 }此方法适用于
棉根皮中棉酚的含量测定 o并测定了 v种棉根皮中棉酚含量 ∀
≈收稿日期  usst2tt2tv
≈基金项目  湖北省重点科学技术发展计划资助项目k||u°ttswl
≈通讯作者  电话 }kstslywstwwtt2u|xy ∞2°¤¬¯}ª∏¤±ª«²±ª¦∏¬ƒ uyv q±¨ ·
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第 uz卷第 v期
ussu年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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≈关键词  ‹°≤ ~棉根皮 ~棉酚
≈中图分类号  • u{w qt ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussulsv2stzv2sv
棉根皮为锦葵科棉属植物棉花的干燥根皮 o性
味甘温 o入肺 !脾 !肝三经 o具有益气补虚 !止咳平喘 !
调经的功效 o用于体虚咳喘 !月经不调 !子宫脱垂等
症 ∀棉根皮中所含棉酚具有抗生育 !抗肿瘤等多种
生物活性≈t  ∀由于棉花为重要经济作物 o故棉根皮
的来源受到其种植面积及引种历史的影响 ∀棉花在
我国有 w个栽培种 }草棉 Γοσσψπιυ µ ηερβαχιυ µ q!
树棉 Γ . αρβορευ µ q!海岛棉 Γ . βαρβαδενσε q和
陆地棉 Γ . ηιρσυτυ µ qk按其引种时间的先后l ∀
按历史考证来看 o我国的棉花根应为草棉 o而自陆地
棉成功引种到我国后 o草棉和树棉即被淘汰 o只有极
少量种植 o海岛棉仅分布于新疆 ∀故棉根皮的主要
来源应为陆地棉≈t  ∀虽然棉酚 ‹°≤ 含量测定的
文献较多≈u ∗ z  o但主要为棉籽k油l或制剂中棉酚的
含量测定 o针对棉根皮药材中棉酚含量测定的方法
尚无报道 ∀本文采用常用的 ≤t{柱和紫外检测器 o
建立了棉根皮中棉酚的高效液相测定方法 ∀
1 对照品 !试剂 !仪器与药材
棉酚对照品k美国 ≥¬ª°¤公司 o纯度 |x h l o乙
晴为色谱纯 o其他试剂为分析纯 ∀ • ¤·¨µ¶高效液相
色谱仪 ouw{z型紫外检测器 o• ¤·¨µ¶ ¬¯¯ ±¨±¬∏°vu工
作站 ∀超声波滤清器k上海超声波仪器厂l ∀
棉根皮采于华中农业大学实验田中 ott月采摘
棉花后 o刨根 o剥皮 o洗净 o晒干 ∀药材由华中农业大
学张献农 !聂以春教授鉴定 o分别为陆地棉 Γ . ηιρ2
συτυ µ o海岛棉 Γ . βαρβαδενσε 和树棉 Γ . αρβορευ µ
的根皮 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱条件 色谱柱 }天津特纳 ∞®¤ ‘¤¥¨¯
Žµ²°¤¶¬¯ ≤t{kw qy °° ≅ uxs °° ox Λ°l o流动相乙
腈2s qu h磷酸水k{xΒtxl o流速 t qs °#°¬±p t o柱温
ux ε o检测波长 uvx ±° ∀对照品及样品色谱图见
图 t ∀
2 q2 测定波长的选择 取棉酚对照品溶液 o以流
动相为空白对照液 o进行紫外扫描 ∀在 uss ∗ wss
±°之间有 v个吸收峰 o分别为 uvx ou{| qx ovy{ ±° o
最大吸收峰为 uvx ±° o故选用 uvx ±°为测定波长 ∀
图 t 对照品和样品 ‹°≤ 谱图
„ q对照品 …q样品 t q棉酚
2 q3 标准曲线的绘制 精密称取棉酚对照品
u .u| °ª置 ux °量瓶中 o加流动相乙腈2s qu h磷
酸水k{xΒtxl定容 ∀精密吸取t qss ou qss ov qss o
w qss ox qss °分别置 x °量瓶中 o加流动相定
容 ∀进样 us ˏo以对照品进样量kΛªl为横坐标 o峰
面积积分值为纵坐标 o绘制标准曲线 o计算回归方
程 }Ψ € t .xz ≅ ts{ Ξ p t .y{ ≅ tsx , ρ € s q|||| o线性
范围 s qvw{t ∗ t qzwsw Λª∀
2 q4 稳定性试验 取对照品于配制后 s ,t ou ov o
w ox oy « 测定峰面积积分值 o取其平均值为
tszw{ssy o结果表明在 y «以内稳定 o• ≥⁄ t qyv h ∀
2 q5 精密度试验 精密吸取对照品溶液重复进
样 x 次 o测定峰面积积分值 o取其平均值为
tszxwvxz o• ≥⁄ t qxy h ∀
2 q6 重复性试验 取同一批样品 x份 o分别制备
供试品溶液进行测定 o其含量平均值为 t qy h o• ≥⁄
u qss h ∀
2 q7 回收率试验 取已知含量的样品粉末约
s .szx ªo精密称定 x份 o分别精密加入一定量的棉
酚对照品 o按样品测定方法进行分析 o结果见表 t ∀
2 q8 样品测定 精密称取样品粉末约 s .tx ªo加
丙酮 ts °o超声波提取 tx °¬±o离心 kvsss µ#
°¬±p tlts °¬±o吸取上清液 o残渣用丙酮再提取 u
次 o每次加丙酮 ts °o超声 ts °¬±o离心 o吸取上清
液 ov次上清液合并 o减压抽干 o残渣用流动相定容
于 xs °量瓶中 o微孔滤膜ks qwx Λ°l滤过 o取续滤
液为供试品溶液 ous ˏ进样 ∀棉酚含量结果 }陆地
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第 uz卷第 v期
ussu年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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棉 t qy h o海岛棉 t q{ h o中棉 t qv h ∀
表 t 加样回收率测定
样品量
r°ª
加入量
r°ª
测定值
r°ª
回收率
r h
ξ
r h
• ≥⁄
r h
t quy t qtu u qvv |x qx
t quz t qu{ u qxv |{ qw
t qvs t qu{ u qxx |z qz |z qy t qx|
t qu{ t qww u qzu tss qs
t quy t qww u qyx |y qx
3 讨论
3 q1 流动相的选择 据报道≈w 四氢呋喃2水2磷
酸kysΒwsΒs qs{l流动相对棉酚的分离能力强且结果
稳定 o但经试验发现该流动相虽能将棉根皮中棉酚
与其他色素杂质分开 o但棉酚在四氢呋喃组成的溶
剂中并不稳定 o随放置时间的延长 o杂质峰逐次增
大 o主峰逐次减小 ∀同时由于棉酚在甲醇中不稳
定≈u ox  o故以乙腈2s qu h磷酸水以不同比例作为流
动相进行试验 o结果显示棉酚在乙腈组成的溶剂中
十分稳定 o而且乙腈2s qu h磷酸水k{xΒtxl时能达到
最佳分离 ∀关于磷酸用量的选择 o曾比较过水2磷酸
ktssΒs qul和ktssΒs qwl的效果 o结果显示图谱没有
区别 ∀根据酸度最小的原则 o采用了含 s qu h磷酸
的水 ∀
3 q2 提取溶剂及提取方法的选择 由于棉酚为
一多羟基酚化合物 o遇光 !热易氧化变质 o故多采用
冷浸或超声提取的方法 ∀以乙醇和丙酮进行提取溶
剂的选择 o结果乙醇为提取溶剂时产生分解物峰 o与
文献中棉酚在醇溶液中不稳定的结论相一致≈u  o而
以丙酮为提取溶剂时效果好 ∀在进行提取方法的选
择中 o比较了冷浸过夜 ty «≈v 和超声提取的异同 o
结果显示冷浸过夜和超声提取结果一致 ∀还进行了
超声提取 v次ktx ots ots °¬±l和超声提取 x次ktx o
ts ots ots ots °¬±l的比较 o结果显示超声 v次即可
将棉酚提取完全 ∀故最后采用以丙酮为提取溶剂 o
超声 v次的提取方法 ∀
≈参考文献 
≈t  中国医学科学院 中国协和医科大学药用植物研究所 q中药志 q
北京 }人民卫生出版社 ot|{v q
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谱分析 q山东中医药大学学报 ot||| ouvkwl }uuu q
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棉籽蛋白中的游离和总棉酚 q营养学报 ot||x otzkwl }wt| q
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