全 文 ：天麻钩藤方对自由活动大鼠脑缺血海马细胞
外液递质氨基酸的影响
张春颖t o杜贵友t 3 o王 巍u o叶祖光v o王丹巧u o孙晓芳u o赵德忠u
kt1中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszss ~
u1中国中医研究院 西苑医院 o北京 tsss|t ~
v1国家食品药品监督管理局 o北京 tsssv{l
≈摘要  目的 }观察天麻钩藤方k天钩方l对不完全脑缺血清醒自由活动大鼠海马细胞外液递质氨基酸的影
响 ∀方法 }用 ≤  „微透析采样系统收集双侧颈总动脉结扎和放松引起的清醒自由活动大鼠不完全缺血前 !缺血期
间及再灌后大鼠海马细胞外透析液 ~用高效液相色谱2电化学法测定透析液中谷氨酸kŠ¯ ∏l !牛磺酸kפ∏l !精氨酸
k„µªl !Χ2氨基丁酸kŠ„…„l和半胱氨酸k≤¼¶l的浓度 ∀结果 }天钩方中剂量组可升高正常大鼠脑海马细胞外液 Š„…„
和 פ∏的浓度 ∀与模型组比较 o大鼠不完全缺血 tus °¬±时 o天钩方中和大剂量组的 Š¯ ∏水平分别降低了 v{1yw h和
vt1vx h oפ∏升高了 tv1|| h和 tu1{y h oŠ„…„升高了 ux1{| h和 vv1|| h o≤¼¶降低了 ws1|v h和 wu1s{ h o„µª升高了
ty1|x h和 {1|y h ~再灌 tus °¬±时 o天钩方中和大剂量组的 Š¯ ∏的水平分别降低了 tw1xx h 和 tt1w{ h oפ∏升高了
ty1tv h和 tw1sv h oŠ„…„升高了 uw1wt h和 uy1uu h ∀结论 }天钩方能增加正常大鼠海马细胞外液中抑制性氨基酸
的浓度 o抑制缺血再灌引起的兴奋性氨基酸的过度释放 o增加 „µª和抑制性氨基酸的浓度 o从而发挥神经保护作用 ∀
≈关键词  缺血再灌 ~海马 ~微透析 ~氨基酸 ~神经递质
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswltt2tsyt2sx
≈收稿日期  ussw2st2ty
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kvstztt{xl ~北京自
然科学基金资助项目kzstusvvl
≈通讯作者  3杜贵友 oר¯ }kstsl{wsutwxs oƒ¤¬}kstsl{wsutwxs o
∞2°¤¬¯}§∏ª∏¬¼²∏t|wu ƒ √¬³1¶¬±¤1¦²°
老年性痴呆中以脑血管性痴呆为多见 ∀血管性
痴呆的一个主要发病原因是脑反复缺血 o导致海马 !
基底神经节 !皮层等结构不可逆性损伤 o随之出现痴
呆症状 ∀天麻钩藤方k天钩方l具有平肝息风 !清热
活血 !补肾益智之功效 ∀基础研究表明有改善脑缺
血再灌注动物的学习记忆障碍作用 ~临床研究表明
可提高肝阳上亢型脑血管性老年痴呆患者的智力和
痴呆量表分值≈t  ∀微透析是 us世纪 |s年代初开发
出测定脑内神经递质或其他物质的新技术 o可收集
活体动物脑透析液 o用高效液相色谱2电化学k‹°≤2
∞≤l检测器可测出 ±ª∗ ³ª级物质 ∀作者通过结扎双
侧颈总动脉造成清醒自由活动大鼠的不完全脑缺血
模型 o用微透析技术实时采集大鼠海马细胞外液 o通
过观察天钩方对脑缺血活体清醒大鼠海马细胞外液
氨基酸类递质的影响 o进一步研究天钩方治疗血管
性痴呆的作用机理 ∀
1 材料
111 仪器 高效液相色谱系统 }≤ „ruys除气装
置 o…„≥的 ° p {s泵 o≤≤ p x液相色谱装置 o• «¨ ²2
§¼±¨ ztux注入阀k接 us ˏ进样环l o‘∏¦¯¨ ²¶¬¯ ≤t{柱
kv1s °° ≅ tss °° ov Λ°l o玻璃碳工作电极和 „ªr
„ª≤¯ 参考电极 o≤ ) w≤电化学检测器和色谱工作站
k≤‹„⁄ ) „… 电脑化积分器l ∀微透析装置 }
≤ „rtts液体开关 o≤ „rtuktwrsul探针及探针套
管 o≤„rtus 清醒动物装置 o≤„rtsu 微量泵 o
≤ „rtzs低温样品自动收集器及软件 ∀手术设备 }
ƒ ) xvyw立体定位仪 o≤„rtxs动物温度控制器 o
ƒ ) xvys牙科钻 ∀
112 试剂和药物 标准品 }邻苯二醛k’°„l o亚硫
酸钠 o半胱氨酸k≤¼¶l o牛磺酸kפ∏l o谷氨酸kŠ¯ ∏l oΧ2
氨基丁酸kŠ„…„l o精氨酸k„µªl o均为 ≥¬ª°¤产品 ∀
其他试剂 }乙腈k„≤‘l !甲醇 !高氯酸 !乙二胺四乙酸
k∞⁄ׄl及其他试剂均为国产 „• 级 ∀水为去离子
双蒸馏水 ∀天钩方由河南宛西制药股份有限公司提
供 ∀
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第 u|卷第 tt期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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113 实验动物 雄性 ≥⁄大鼠 ux只 o体重kt{v ? |l
ªo购自维通利华实验动物技术有限公司k许可证号 }
≥’÷Žk京lussu2sssvl ∀
2 实验方法
211 动物分组和药物处理 实验分为 x组 }假手术
组 !模型组和天钩方大 !中 !小剂量组 o随机分配 o每
组 x只 ∀各组动物自由饮水 !进食 ∀天钩方分别按
s1zx ot1x ov ª#®ªpt灌胃给药 ~假手术组和模型组分
别给予相同体积的自来水 ∀连续给药 u周 ∀
212 外科手术 给药第 tv天时 o用 u h戊巴比妥
钠麻醉大鼠kws °ª#®ªpt o¬³l o分离双侧颈总动脉 o于
左 !右侧颈总动脉下穿一根 wf白色丝线 o并分别在
靠近左右颈总动脉的 wf白色丝线处穿一根 sf黑色
丝线 osf黑色丝线分别由皮下通道从颈后部的左右
侧穿出 owf白色丝线从颈中部拉出 ∀此后 o将大鼠
固定在立体定位仪上 o用钻孔器在海马定位点k大鼠
的海马坐标 }„° w1{ °° ow1{ °° o⁄∂ y1s °°l上
钻一小孔 o使 ≤ „rtu探针套管徐徐降至所需的深
度 ∀牙科水泥固定套管 ∀手术过程中 o用 ≤ „rtxs
动物温度控制器将大鼠体温控制在 vz ε ∀
213 脑微透析 第 tw天在动物清醒自由活动状态
下进行脑缺血再灌 ∀透析取样时 o拔出头顶部套管
内芯 o插入 ≤ „rtu探针 o将大鼠放入 ≤ „rtus动
物清醒装置内 o以 u1x ˏ#°¬±p t速度灌流 o出口管连
接 ≤ „rtzs低温收集器 ous °¬±收集 t管 ∀先用林
格液灌流 o收集 {s °¬±o改用含 x °°²¯#pt水杨酸钠
林格液灌流 o灌流 t{s °¬±时 o拉紧 wf白色丝线结扎
双侧颈总动脉导致大脑不完全缺血 o收集 tus °¬±~
灌流 vss °¬±时 o拉紧 sf黑色丝线放松双侧颈总动
脉使大鼠再灌 o收集 tus °¬±o灌流共持续 wus °¬±∀
假手术组不结扎双侧颈总动脉 ∀每管灌流液均取出
us ˏo存于 p zs ε 冰箱内 o测定氨基酸时取出 ∀
214 化学检测方法 用 ‹°≤2∞≤ 检测器测定氨基
酸递质 o采用外标法定量 ∀分析柱为 ‘∏¦¯ ²¨¶¬¯ ≤t{ ∀
流动相 }s1t °²¯#pt ‘¤‹u°’w os1x °°²¯#pt ∞⁄ׄ o
us h甲醇 o³‹ x1t ∀流速 }s1x °#°¬±pt o工作电压 }
{xs °∂ o增益 }xs ±„≈u ov  ∀每 t °衍生液含 }’°„
tt °ª o t °²¯#pt ‘¤u≥’v s1ux °o乙醇 s1ux °o
s1t °²¯#pt硼酸缓冲液k³‹ z1wls1wx °∀每 t °
氨基酸标准 o加入 us ˏ衍生液 ~每 us ˏ透析液 o加
入 s1w ˏ衍生液 ∀
215 统计方法 数值用 cξ ? σ来表示 o各组数据用
≥°≥≥tt1s ©²µ•¬±§²º¶软件进行统计 ∀
3 结果
311 天钩方对脑缺血再灌大鼠海马细胞外液中兴
奋性氨基酸k∞„„l的影响 用林格液灌流 {s °¬±
后 o正常大鼠的海马细胞外液中 Š¯ ∏和 ≤¼¶水平为 }
ks1|t ? s1sxlΛ°²¯ #pt和ks1ww ? s1tvlΛ°²¯ #pt ∀
与假手术组比较 o不完全脑缺血 tus °¬±时 o大鼠海
马细胞外液中 Š¯ ∏和 ≤¼¶分别为基础水平的 u|w h
和 w|{ h ~再灌 tus °¬±时 o模型组的 Š¯ ∏已下降为基
础水平的 twy h o≤¼¶已恢复至基础水平 ∀
缺血期间 o天钩方各组 ∞„„水平的升高幅度显
著降低 o缺血 tus °¬±时 o小 !中 !大剂量组 Š¯ ∏分别
降低了 wt1| h oxy1| h ovw1{ h o≤¼¶分别降低了
tx1y h ov{1| h ows1u h ~再灌期间 o天钩方各组的水
平逐渐降低 o再灌 tus °¬±时 o小 !中 !大剂量组的
Š¯ ∏分别降低了 tw1y h otz1| h otv1{ h o≤¼¶已恢复
至基础水平k图 t !表 tl ∀
图 t 天钩方对脑缺血再灌自由活动大鼠海马
细胞外液 Š¯ ∏浓度的影响
林格液和水杨酸林格液灌流的第一支管的透析液未测定kus °¬±
和 tss °¬±l ot{s °¬±时缺血 ovss °¬±时再灌k图 u同l
312 天钩方对脑缺血再灌大鼠海马细胞外液中抑
制性氨基酸的影响 正常大鼠海马细胞外液中 Š„2
…„和 ˜¤∏的浓度分别为 }ks1xy ? s1svl Λ°²¯#pt和
kt1yt ? s1tvl Λ°²¯#pt ∀不完全脑缺血时 o大鼠海
马细胞外液中 Š„…„ 和 פ∏均显著升高 o缺血 tus
°¬±时 o分别为基础水平的 vtt h 和 t{t h ~再灌期
间 oŠ„…„和 פ∏的水平逐渐降低 otus °¬±时 o分别
为基础水平的 uux h 和 tts h ∀
缺血前天钩方各组的 Š„…„和 פ∏水平均显著
高于假手术组 ∀与模型组比较 o缺血期间 o天钩方各
组的 Š„…„和 פ∏升高的幅度显著增加 o缺血 tus
°¬±时 o天钩方小 !中 !大剂量组的 Š„…„ 分别升高
了 tw1y h ouy1v h ovw1x h oפ∏分别升高了 {1s h o
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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‘²√¨ °¥¨µoussw
tw1s h otu1| h ~再灌期间 oŠ„…„和 פ∏的水平逐渐
下降 o再灌 tus °¬±时 o天钩方中 !大剂量组的 Š„…„
分别升高了 uw1y h ouz1s h oפ∏分别升高了 ty1t h
和 tw1v h k图 u !表 ul ∀
表 t 天钩方对脑缺血再灌自由活动大鼠海马细胞外液 ≤¼¶浓度的影响kcξ ? σ, ν € xl
组别
剂量
rª#®ªpt
不同灌流时间 ≤¼¶浓度rΛ°²¯#pt
t{s °¬± uss °¬± vss °¬± vus °¬± wus °¬±
模型组 s1wv ? s1tv t1ss ? s1t| t1|| ? s1vs t1y{ ? s1uu s1wx ? s1tx
假手术组 s1wx ? s1tu s1ww ? s1ttvl s1ws ? s1tuvl s1vz ? s1tvvl s1wv ? s1tv
天钩方 s1zx s1wv ? s1tu s1{u ? s1t{ul t1y{ ? s1usul t1v| ? s1tzvl s1xs ? s1tutl
t1x s1wv ? s1tv s1zy ? s1twvl t1uu ? s1twvl t1s{ ? s1twvl s1wt ? s1tu
v1s s1wv ? s1tv s1{w ? s1utul t1t| ? s1u|vl t1us ? s1usvl s1wt ? s1tw
注 }灌流 t{s °¬±时 o结扎模型组和各给药组动物的双侧颈总动脉 o假手术组不结扎 o灌流 vss °¬±时进行再灌注 ~与模型组比较tl Π s1sx o
ul Π s1st ovl Π s1sstk表 u ov同l
图 u 天钩方对脑缺血再灌自由活动大鼠海马
细胞外液 Š„…„浓度的影响
313 天钩方对脑缺血再灌大鼠海马细胞外液中 „µª
的影响 正常大鼠海马细胞外液中 „µª的水平为
ks1xss ? s1suyl Λ°²¯#pt ∀不完全脑缺血期间 o与
假手术组比较 o模型组的水平迅速降低 o缺血 tus
°¬±时 o降至正常水平的 v|1{ h ~再灌后逐渐升高 o
tus °¬±时 o„µª已恢复至基础水平 ∀与模型组比较 o
缺血期间 o天钩方各组的水平迅速降低 o缺血 tus
°¬±时 o天钩方中 !大剂量组的 „µª分别升高了
wy1s h和 uw1v h ~再灌期间 o天钩方各组均逐渐升
高 o再灌 tus °¬±时 o已恢复至基础水平k表 vl ∀
表 u 天钩方对脑缺血再灌自由活动大鼠海马细胞外液 פ∏浓度的影响kcξ ? σ, ν € xl
组别
剂量
rª#®ªpt
不同灌流时间 פ∏浓度rΛ°²¯#pt
t{s °¬± uss °¬± vss °¬± vus °¬± wus °¬±
模型组 t1wx ? s1tt u1vu ? s1sy u1yw ? s1ts u1yx ? s1ts t1yt ? s1tt
假手术组 t1wx ? s1tu t1wu ? s1tvvl t1wy ? s1twvl t1wu ? s1tvvl t1wy ? s1twul
天钩方 s1zx t1wy ? s1tt u1ww ? s1s{tl u1{x ? s1syul u1z{ ? s1s{ul t1zw ? s1tsul
t1x t1yw ? s1ts u1yu ? s1tsvl v1st ? s1tuvl u1|y ? s1tuvl t1{z ? s1s|vl
v1s t1yz ? s1tv u1yu ? s1s|vl u1|{ ? s1tuvl u1{s ? s1s|ul t1{w ? s1sxvl
表 v 天钩方对脑缺血再灌自由活动大鼠海马细胞外液 „µª浓度的影响kcξ ? σ , ν € xl
组别
剂量
rª#®ªpt
不同灌流时间 „µª浓度rΛ°²¯#pt
t{s °¬± uss °¬± vss °¬± vus °¬± wus °¬±
模型组 s1w{w ? s1ssu s1wx| ? s1stw s1t{w ? s1ssy s1u|t ? s1ssw s1wzx ? s1ss{
假手术组 s1xss ? s1suy s1wzu ? s1stx s1wyw ? s1ssvvl s1w{y ? s1ssuvl s1w{u ? s1ssv
天钩方 s1zx s1wyw ? s1sut s1wsx ? s1stw s1t{s ? s1st{ s1uzs ? s1ssx s1wz| ? s1stu
t1x s1w{w ? s1ssz s1wxv ? s1ss| s1uzu ? s1svsvl s1vt| ? s1ssx s1wxu ? s1svz
v1s s1w|w ? s1ssw s1wvx ? s1ss| s1uvs ? s1ssxtl s1vux ? s1ssu s1wzy ? s1sys
4 讨论
天钩方主要由天麻 !钩藤 !石决明 !杜仲和桑寄
生等组成 o有关天钩方治疗血管性痴呆的报道较少 ∀
脑缺血再灌注试验促进了对血管性痴呆的深入研
究 o缺血再灌注对脑不同递质性氨基酸含量有不同
影响 ∀本室以前的研究表明 o天钩方可调节小鼠脑
内氨基酸递质的含量 o维持 Š¯ ∏!天门冬氨酸和 Š„2
…„的动态平衡 o对抗反复缺血再灌引起的兴奋性氨
基酸毒性作用≈w ox  ∀本实验建立了用 ‹°≤2∞≤ 法测
定脑透析液内氨基酸类递质 Š¯ ∏o≤¼¶oפ∏oŠ„…„ 和
„µª的方法 o该法的稳定性和灵敏度高 ~用微透析采
样技术和 ‹°≤2∞≤法 o动态观察天钩方对双侧颈总
动脉结扎造成的不完全脑缺血清醒自由活动大鼠海
马细胞外液中上述 x种氨基酸的影响 ∀
Š¯ ∏是脑内一种最主要的兴奋性递质 o它的释
放与脑缺血时兴奋性毒性作用有密切关系 ∀ ≤¼¶作
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为 ∞„„ o也是一种神经介质 o逐渐为人们所重视 o其
作用方式与 Š¯ ∏等 ∞„„ 类似 o但具有更强的作
用≈y  ∀缺血再灌注使 ∞„„ 从神经细胞大量释放到
细胞外间隙 o同时细胞的摄取灭活功能障碍 o间隙中
超常量的 ∞„„ 递质持续强烈地作用于神经细胞上
相应受体 o打开 ≤¤u n通道的活化状态来发挥其延迟
性细胞毒性作用 ∀脑缺血时的 ∞„„明显升高 o且缺
血越重和时间越长 ∞„„ 释放就越多≈z  ∀本实验表
明 o天钩方能降低不完全脑缺血时大鼠海马细胞外
液 Š¯ ∏和 ≤¼¶的升高幅度 o再灌后 ∞„„水平逐渐下
降 ou «时 ≤¼¶已恢复至基础水平 ∀
Š„…„和 פ∏是脑内主要的抑制性氨基酸递
质 o它们的释放和受体激活有利于对抗脑缺血时兴
奋性毒性的作用 o保护神经元不受损害 ∀持续半球
缺血过程中 Š„…„和 פ∏释放的增加则可能是机体
一种重要的自身脑保护机制≈{  ∀天钩方能增加正常
大鼠脑海马细胞外液中 Š„…„ 和 פ∏的浓度 o增加
不完全脑缺血和再灌后海马细胞外液 Š„…„ 和 פ∏
的升高幅度 ∀
„µª作为体内合成 ‘’的前体 o发挥着重要的生
物学作用 ∀有研究表明 oΛ2„µª能明显减少脑缺血
体积 o改善脑损伤 o可明显增加脑组织中 ‘’ 含量 o
减少丙二醛含量 o增加超氧化物歧化酶活性 o对脑缺
血早期有治疗作用≈|  ∀天钩方不影响正常大鼠脑海
马细胞外液 „µª的水平 o但能抑制不完全脑缺血期
间海马细胞外液 „µª的降低 o使 „µª的水平于再灌
后 tus °¬±恢复至基础水平 ∀
总之 o本实验的结果表明 o天钩方能增加正常大
鼠海马细胞外液中 Š¯ ∏oŠ„…„ oפ∏的浓度 o抑制缺
血再灌引起的 ∞„„的过度释放 o增加缺血再灌期间
脑海马细胞外液 „µª和抑制性氨基酸的浓度 o通过
多途径多靶点对机体的作用 o减轻缺血再灌造成的
脑损伤 o发挥神经保护作用 ∀
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伤的影响 1 中华麻醉学杂志 oussu ouukvl }tyt1
Εφφεχτσ οφ Τιανµα Γουτενγ Φανγ ον τρανσµιττερ αµινο αχιδσιν τηε ηιπποχαµ πυσ
εξτραχελλυλαρ λιθυιδσιν φρεελψ µοϖινγ ρατσσυβϕεχτεδ το βραιν ισχηεµια
‹„‘Š ≤«∏±2¼¬±ªt o⁄˜ Š∏¬2¼²∏t o • „‘Š • ¬¨u o ≠∞ ∏2ª∏¤±ªv o • „‘Š ⁄¤±2 ¬´¤²u o≥˜‘÷¬¤²2©¤±ªu o‹„’ ⁄¨ 2½«²±ªu
(t1 Ινστιτυτε οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα , Χηινα Αχαδεµψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsszss , Χηινα ;
u1 Γεριατριχσ Ινστιτυτε , Ξιψυαν Ηοσπιταλ, Χηινα Αχαδεµψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsss|t , Χηινα ;
v1 Στατε Φοοδ ανδ ∆ρυγ Αδµινιστρατιον , Βειϕινγ tsssv{ , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨¦·¶²©×¬¤±°¤Š²∏·¨±ªƒ¤±ªk׊ƒl ²±·«¨ ·µ¤±¶°¬·¨µ¤°¬±²¤¦¬§¶¬±·«¨ «¬³³²¦¤°³∏¶ ¬¨·µ¤2
¦¨¯¯∏¯¤µ¯ ¬´∏¬§¶¬±©µ¨¨¯¼ °²√¬±ªµ¤·¶¶∏¥­¨¦·¨§·²¬±¦²°³¯ ·¨¨ ¥µ¤¬±¬¶¦«¨ °¬¤1 Μετηοδ : ‹¬³³²¦¤°³∏¶ ¬¨·µ¤¦¨¯¯∏¯¤µ¯¬´∏¬§¶º¤¶¦²¯¯¨ ¦·¨§¦²±·¬±∏2
²∏¶¯¼ ¥¼·«¨ °¬¦µ²§¬¤¯¼¶¬¶¶¤°³¯¬±ª·¨¦«±²¯²ª¼¬±©µ¨¨¯¼ °²√¬±ªµ¤·¶§∏µ¬±ª³µ¨2¬¶¦«¨ °¬¤o¬±¦²°³¯ ·¨¨¬¶¦«¨ °¬¤¤±§µ¨³¨µ©∏¶¬²± ³¨µ¬²§¶¬±§∏¦¨§
¥¼·«¨ ²¦¦¯∏¶¬²± ¤±§ ²¯²¶¨ ²©¥²·«¦²°°²±¦¤µ²·¬§¤µ·¨µ¬¨¶1 ∞¤¦«§¬¤¯¼¶¤·¨¶¤°³¯¨º¤¶¤¶¶¤¼¨ §©²µŠ„…„ oפ∏oŠ¯∏o≤¼¶¤±§„µªº¬·«‹°≤2
¨¯ ¦¨·µ²¦«¨ °¬¦¤¯ §¨·¨¦·²µ1 Ρεσυλτ : ׊ƒ ¬±¦µ¨¤¶¨§·«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¶²© Š„…„ ¤±§×¤∏¬±·«¨ ¬¨·µ¤¦¨¯¯∏¯¤µ ¬¯´∏¬§¶²©µ¤·«¬³³²¦¤°³∏¶1 ≤²°2
³¤µ¨§º¬·«·«¨ °²§¨¯ªµ²∏³o·«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²© Š¯ ∏¬±·«¨ °¬§§¯¨¤±§ ¤¯µª¨ §²¶¤ª¨ ªµ²∏³¶²©×Šƒ o§∏µ¬±ª·«¨ tus °¬± ²©¬¶¦«¨ °¬¤oµ¨§∏¦¨§
¥¼ v{1yw h ¤±§vt1vx h oפ∏¬±¦µ¨¤¶¨§¥¼ tv1|| h ¤±§tu1{y h oŠ„…„ ¤§√¤±¦¨§ux1{| h ¤±§vv1|| h o≤¼¶§¨¦µ¨¤¶¨§¥¼ ws1|v h ¤±§
#wyst#
第 u|卷第 tt期
ussw年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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wu1s{ h o„µªµ¤¬¶¨§·²tty1|x h ¤±§ts{1|y h oµ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼1 „©·¨µtus °¬± ²©µ¨³¨µ©∏¶¬²±o·«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²© Š¯∏§¨¦µ¨¤¶¨§¥¼ tw1xx h
¤±§tt1w{ h oפ∏¬±¦µ¨¤¶¨§¥¼ ty1tv h ¤±§tw1sv h oŠ„…„ ¬±¦µ¨¤¶¨§¥¼ uw1wt h ¤±§uy1uu h oµ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼1 Χονχλυσιον : ׊ƒ ¦¤±¬±2
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≈责任编辑 方文贤 
栀子苷阻抑脑缺血损伤级联反应的作用环节探讨
朱晓磊 3 o张 娜 o李澎涛 o蒋玉凤 o徐 雅
k北京中医药大学 基础医学院 o北京 tsssu|l
≈摘要  目的 }观察持久性局灶性脑缺血损伤大鼠脑组织 בƒ2ΑoŒ2tΒ及血浆 √• ƒ !血清 ‘≥∞含量的变化 o探
讨栀子苷阻抑脑缺血损伤级联反应的作用环节 ∀方法 }成年雄性 ≥⁄大鼠 o随机分成假手术对照组 !模型组 !栀子苷
组 !三七总皂苷组 ∀使用血管腔内尼龙线栓塞术造成大鼠持久性大脑中动脉栓塞k°≤„’l o制作缺血 tu ouw «的局
灶性脑缺血模型 o应用放射免疫法k•Œ„l检测脑组织匀浆 בƒ2Α和 Œ2tΒ含量与血清 ‘≥∞含量 o应用酶联吸附免疫
法k∞Œ≥„l检测血浆 √ • ƒ含量 ∀结果 }缺血 tu «与缺血 uw «o伴随脑组织 בƒ2ΑoŒ2tΒ含量升高 o血浆 √• ƒ !血清 ‘≥∞
含量呈现同步的升高 ∀栀子苷可以明显阻抑缺血 tu «和 uw «脑组织 בƒ2Α和 Œ2tΒ含量升高 o还可阻抑缺血 tu «
和 uw «血浆 √ • ƒ含量的升高 o但对缺血 tu «和 uw «血清 ‘≥∞含量无明显影响 ∀结论 }栀子苷可阻抑脑缺血损伤后
致炎因子 בƒ2Α和 Œ2tΒ及血浆 √ • ƒ的表达 o显示出其抗缺血后血管内皮细胞损伤 !在炎症病理环节阻抑脑缺血损
伤级联反应的作用 ∀
≈关键词  בƒ2Α~Œ2tΒ~√• ƒ ~‘≥∞~栀子苷 ~脑缺血
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswltt2tsyx2sw
≈收稿日期  ussw2st2sz
≈基金项目  国家重点基础研究发展规划项目 k|zvl课题
kŠt|||sxxwswl
≈通讯作者  3 朱晓磊 o ר¯ }kstslywu{yt|s o ∞2°¤¬¯}½¨ ³«¼µ|xuz
ƒ tyv q¦²°
近年来 o在对脑缺血损伤病理生理机制的研究
中 o/脑缺血损伤级联反应0≈t 这一概念倍受重视 ∀
级联反应中大量细胞毒性成分诱导的氧自由基和其
他介质导致了致炎性细胞因子的产生 o由此导致了
炎症反应 o炎症是级联反应导致细胞损伤的重要病
理环节 ∀其中肿瘤坏死因子2Αkבƒ2Αl !白细胞介素
2tΒkŒ2tΒl等致炎性细胞因子参与了这一过程并起
到重要作用 o拮抗 בƒ2ΑoŒ2tΒ的作用有可能减轻脑
损伤的程度 o缓解神经系统症状≈u  ∀清开灵在临床
治疗缺血性中风的实践中取得了良好的疗效 o而栀
子苷是清开灵复方中栀子的有效成分 o本实验以线
栓法复制大鼠 ≤„’模型 o检测给予栀子苷治疗后 o
脑缺血 tu ouw «大鼠脑组织中 בƒ2ΑoŒ2tΒ的含量
以及血浆中内皮细胞凝血因子 ¬相关抗原k血管性
假血友病因子 o√• ƒl及血清中神经元特异性烯醇化
酶k‘≥∞l的含量 o探讨栀子苷阻抑脑缺血损伤级联
反应的作用环节 o为中药复方制剂的优化提供实验
研究依据 ∀
1 材料与方法
111 动物与分组 健康雄性清洁级 ≥⁄大鼠 o体重
kvvs ? usl ªo购自北京维通利华实验动物公司 ∀将
缺血造模成功的 yw只大鼠分为缺血 tu «和缺血 uw
«两大组 ∀每大组又随机分为模型组 !栀子苷组和
三七总皂苷组 o后者为阳性对照药 o另设假手术对照
组 ∀其中 o模型组为 tu只动物 o余组每组均为 ts只
动物 ∀
112 动物模型制作 参照 ²±ª¤≈v 法 o用 ts h的水
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第 u|卷第 tt期
ussw年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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