全 文 ：3 讨论
3 q1 流动相的选择 比较甲醇2水kysΒws oyzΒvv oy{Βvu ozsΒ
vsl不同比例 o结果甲醇2水kzsΒvsl比例较佳 ∀同时 o加入磷
酸缓冲液 o使峰形 !分离度 !出峰时间较为理想 ∀
3 q2 柱温的选择 在柱温 ux ovx ows owx oxs ε 下分别比较了
供试品与对照品 o结果表明 o在甲醇2水kzsΒvsl为流动相中 o
柱温 xs ε 时柱效最高 o分离度理想 o无干扰 o且保留时间适
中 o与文献≈w 报道一致 ∀
≈参考文献
≈t 梁 斌 o李孟林 q薄层扫描法测定胃药胶囊中延胡索乙素的含
量 q中国药房 ousss ottkyl }uzz q
≈u 岑 彬 o刘 毅 o何忠东 q速效枣仁安神胶囊中延胡索乙素的含
量测定 q中国中药杂志 ot||s otxkvl }vy q
≈v 李表翠 o李勇军 q高效液相色谱法测定复方胃宁片中延胡索乙
素的含量 q药物分析杂志 oussu ouukwl }u{{ q
≈w 李发美 q医药高效液相色谱技术 q北京 }人民卫生出版社 ot||| q
xvs q
≈责任编辑 袁桂京
广西地不容总生物碱的含量测定方法
董常青t o周 莹u o易 红u o杨 桦u 3
kt q浙江省开化县人民医院 o浙江 开化 vuwvssl
u q中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszssl
广西地不容 Στεπηανια κωανγσιενσισ q≥ q²为防己科植
物 o是广西壮族等少数民族民间常用草药 o功能清热解毒 !散
瘀消肿 !健胃止痛 o用于胃 !十二指肠溃疡疼痛 o上呼吸道感
染 o急性胃肠炎 o菌痢 o牙痛 !神经痛 o痈疮肿毒 o跌打肿痛 ∀
在5广西中药材标准6≈t 中收载为金不换的植物来源品种之
一 ∀广西地不容块根中总生物碱含量较高 o其中有 2¯四氢巴
马汀 t qzw h ∗ w qwv h k 2¯·¨·µ¤«¼§µ²³¤¯°¤·¬±¨ l !二氢巴马汀k§¬2
«¼§¨²³¤¯°¤·¬±¨ l o巴马汀k³¯¤°¤·¬±¨ l !¯2卡马任碱k 2¯¦¤³¤∏µ¬±¨ l !
§2异紫堇定k§2¬¶²¦²µ¼§¬±¨ l !¯2罗默碱kt2µ²¨ ° µ¨¬±¨ l !去氢罗默
碱k§¨«¼§µ²¨ ° µ¨¬±¨ l !去氢千金藤碱 k§¨«¼§¨²¶·¨³«¤±¬±¨ l≈u2w ∀
本研究以延胡索乙素k四氢巴马汀l为对照品 o应用酸性染料
比色法≈x 测定其总生物碱的含量 o并对测定方法的各影响因
素分别进行多水平的考察 o结果证明方法可行 ∀
1 仪器与试药
∂ p vsss可见紫外分光光度计k岛津l ~° p |s
酸
度计k北京海淀航天计算机公司l ~≤÷ p uxs超声波清洗器
k北京医疗设备二厂l ∀
广西地不容饮片购于河北安国 o经中国中医研究院中药
研究所谢宗万研究员鉴定为防己科植物 Στεπηανια κωανγσιεν2
σισ的干燥块根 ∀延胡索乙素对照品k含量测定用l购自中国
药品生物制品检定所 ~试剂 }溴甲酚绿 !磷酸氢二钠 !枸橼酸 !
浓氨水 ~氯仿等均为分析纯 ∀
2 实验方法与结果
2 q1 测定条件的选择
≈收稿日期 ussw2sz2sx
≈通讯作者 3杨桦 oר¯ }kstsl{wstzvts
2 q1 q1 延胡索乙素对照品溶液的制备 精密称取延胡索乙
素对照品 s qsvws ª置 tss °容量瓶中 o加入 t °x h硫酸溶
解 o用 ³w qs枸橼酸2磷酸氢二钠缓冲液定容 o制成每 t °
含 s qvw °ª的溶液 o即得 ∀
2 q1 q2 最大吸收波长的确定 分别量取延胡索乙素对照品
溶液 !广西地不容样品溶液各 t qs °o置分液漏斗中 o加入
u qs °溴甲酚绿溶液 oz qs °³ w qs枸橼酸2磷酸氢二钠
缓冲液及 ts qs °氯仿 o振摇充分后 o静置 t «∀氯仿层用脱
脂棉滤过 o弃去初滤液 o取续滤液在可见光范围扫描 ∀另取
蒸馏水 t qs °同上操作制备空白液 ∀结果延胡索乙素对照
品溶液和广西地不容样品溶液的共同最大波长为 wts ±° o故
选择 wts ±°作为测定波长 ∀
2 q1 q3 最佳 ³考察 精密量取 x份对照品溶液各 s qu °o
置于分液漏斗中 o加水 s q{ °o加入 u qs °溴甲酚绿溶液 o
分别加入 ³值为 v qs ov qw ow qs ow qw ox qs的枸橼酸2磷酸氢二
钠缓冲液各 z qs °o其余同上操作 o结果在 ³ w qs时 o吸光
度最大 o故选用 ³为 w qs枸橼酸2磷酸氢二钠缓冲液 ∀
2 q1 q4 溴甲酚绿用量考察 精密量取x份标准品溶液各
s qu °o置于分液漏斗中 o加水 s q{ °o分别加入不同用量
的溴甲酚绿溶液 t qs ou qs ov qs ow qs ox qs oy qs °o其余同上操
作 ∀结果随溴甲酚绿用量的增加 o吸光度有所降低 o选择用
s qsz h的溴甲酚绿溶液 u qs °比较适宜 ∀
2 q1 q5 离子对稳定性考察 取上项测定液 o在室温和室内
光照条件下密闭放置 o每隔 vs °¬±测定吸收值 o结果表明在
u «内 o样品溶液基本稳定 o故样品溶液宜在 u «内测定 o见
表 t ∀
#xt|#
第 u|卷第 |期
ussw年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ |
≥¨ ³·¨°¥¨µoussw
表 t 离子对稳定性考察结果
编号 τr°¬± Α
t s s qu{y
u vs s quz{
v ys s qu{t
w |s s qu{z
x tus s qu{|
2 q1 q6 标准曲线的绘制 分别精密量取延胡索乙素标准溶
液ks qvw °ª#°ptls qt os qu os qv os qw os qx °置分液漏斗中 o
分别加水 s q| os q{ os qz os qy os qx °o按 2 q1 q2 项下条件显
色 !萃取 !测定吸光度 ∀以延胡索乙素量为横坐标 o吸光度为
纵坐标 o绘制标准曲线 ∀计算得回归方程为 }Ψ s .szu | n
s .ssu |zv Ξ , ρ s q||| x ∀延胡索乙素在 vw ∗ tzs Λª具有良
好的线性关系 ∀
2 q2 广西地不容提取条件的影响
2 q2 q1 不同提取方式的考察 取广西地不容药材粉末k过
{s目l约 t ªo精密称定 o共 v份 o按以下 v种方法提取 ∀
索氏回流法 }药材粉末置索氏提取器中 o浓氨水润湿 o加
入 ws °氯仿 o加热回流提取 u qx «o提取液滤过 o至 xs °量
瓶中 o用氯仿定容 ∀精密吸取滤液 u qs °于蒸发皿中蒸干 o
残渣按样品测定项下操作 ∀
超声法 }药材粉末置三角瓶中 o浓氨水润湿 o精密加入
us °氯仿 o精密称重 o放置过夜 o第 u天超声提取 us °¬±o用
氯仿补重 o滤纸过滤 o精密吸取续滤液 t qs °于蒸发皿中蒸
干 o残渣按样品测定项下操作 ∀
浸泡法 }药材粉末置三角瓶中 o浓氨水润湿 o精密加入
us °氯仿 o精密称重 o过夜 o第 u天用氯仿补重 o滤纸过滤 o
精密吸取续滤液 t qs °于蒸发皿中蒸干 ov份 o残渣按样品
测定项下操作 ∀
结果说明选用超声提取 o操作简单 o提取率较高 ∀见表
u ∀
表 u 提取方式的考察结果
编号
提取方式
广西地不容总生物碱含量
r°ª#ªptk药材l
t 索氏回流 u qx « ww qss
u 超声 us °¬± yu qvx
v 室温冷浸过夜 xw qts
2 q2 q2 提取因素的影响 称取一定量的药材粉末置三角瓶
中 o加入碱性氯仿浸泡过夜 o按超声波提取的方法 o采用 w
kuvl正交实验对不同提取时间和溶剂用量进行考察 oΑ因素
为提取时间 o分为 tx ovs °¬± u个水平 oΒ因素为溶剂用量 o
分为 us ows °u个水平 o共做 w份试验 o结果见表 v ∀
从方差结果分析 oΑ因素k提取时间l和 Β因素k溶剂用
量l对总生物碱含量的影响均无统计学意义 ∀优选出的提取
条件为 }加入氯仿 ws °o超声提取 vs °¬±∀
表 v 正交试验结果
试验号
广西地不容总生物碱含量
r°ª#ªpt
t ys qww
u zv quy
v zu qvy
w zz qy{
2 q3 加样回收试验
取广西地不容药材粉末k{s目ls qx ªo精密称定 o再精密
加入延胡索乙素对照品适量 o按样品的含量测定项下操作 ∀
结果平均回收率为 |y qy h o ≥⁄ u qs h ∀
2 q4 重复性试验
取广西地不容药材粉末k过 {s目l约 t ªoy份 o按样品测
定项下方法操作 o结果分别为zu q{u ozx quz ozw q{{ ozy qxy o
zw qwz ozx q{z °ª#ªp t o ≥⁄ t qzu h o说明重复性较好 ∀
2 q5 样品的测定
取广西地不容药材粉末k过 {s目l约 t ªo精密称定 o浓
氨水润湿 tx °¬±o精加 ws °氯仿 o过夜 o第 u天超声提取 vs
°¬±o用氯仿补重 o滤纸过滤 o精取续滤液 u °蒸干 o残渣用
x h硫酸溶解 o转溶于 ux °量瓶中 o用 ³ w qs缓冲液稀释
至刻度 o摇匀 o微孔过滤 ∀精取 t qs °续滤液于分液漏斗
中 o加入 u qs °溴甲酚绿溶液 oz qs °³ w qs枸橼酸2磷酸
氢二钠缓冲液及氯仿 ts qs °o振摇充分后静置 t «∀另取蒸
馏水 t °同上操作制备空白液 ∀取氯仿液在 wts ±°处测定
吸收值 ∀并以延胡索乙素计算广西地不容药材总生物碱含
量k ν vl o结果分别为 z qu{ h oz qxv h oz qw| h ∀
3 讨论
广西地不容作为广西地方用药金不换的植物来源品种
之一 o在5广西中药材标准6中没有规定含量测定指标 o其主
要有效成分为生物碱类 o故本研究建立了酸性染料比色法测
定广西地不容中生物碱含量 o经方法学考察本方法准确可
靠 o操作简便 o稳定可行 o为进一步控制药材质量提供了方
法 o可用于广西地不容药材的质量控制及其制剂的工艺研
究 ∀
≈参考文献
≈t 广西壮组自治区卫生厅 q广西中药材标准 q第二册 qt||y qtxv q
≈u 闽知大 o钟守明 q广西地不容生物碱的研究 q药学学报 ot|{s otx
k|l }xvv q
≈v 成桂仁 o王桂青 o文永新 q广西地不容生物碱的研究 q中草药 o
t|{t otukwl }y q
≈w 朱兆仪 o冯毓秀 o何丽一 o等 q中国防己科千斤藤属药用植物资
源利用研究 q药学学报 ot|{v ot{kyl }wys q
≈x 黄诺嘉 o郑剑江 o张幼扬 q治胃宝片中延胡索生物碱的含量测
定 q中成药 ot||w otykwl }ty
≈责任编辑 袁桂京
#yt|#
第 u|卷第 |期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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