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河套向日葵茎髓多糖的提取及含量测定



全 文 :3 q3 供试品溶液提取条件的选择 分别选择以乙醇
us ovs °提取 v次 ous °提取 w次 o以及提取时间
为 us ows oys °¬±o分别同法进行测定 ∀结果表明 o以
us °乙醇提取 v 次 o每次 us °¬±时的含量最大 ∀
说明提取溶剂量和提取时间的增加 o可能造成薯蓣皂
苷脱水等副反应的增加 ∀
3 q4 供试品溶液水解条件的选择 分别对水解时酸
的种类 !浓度 !酸量和时间进行了选择 o结果以 t °²¯#
pt硫酸 us °o沸水回流水解 x «为优 ∀
3 q5 萃取条件的选择 分别用氯仿 !石油醚 !醋酸乙
酯进行萃取 o以及氯仿回流萃取 o结果表明以氯仿 us
°直接萃取 v次的效果最优 ∀
3 q6 流动相的优化 比较了以甲醇 !甲醇2乙腈kwΒ
tl !甲醇2乙腈kvΒul o以及甲醇2水k|Βtl为流动相时
供试品溶液的色谱图 o结果以甲醇2乙腈kvΒul时的分
离效果最好 ∀
3 q7 实验结果表明 o影响穿山龙中薯蓣总皂苷的提
取 o以及薯蓣总皂苷水解的因素很多 ∀样品在提取和
水解过程中可产生副反应 o包括薯蓣皂苷元脱水生成
ϖ v ox2去氧替告皂苷元k ϖ v ox2§¨ ²¬¼·¬ª²ª¨ ±¬±l≈{  ∀因
此 o控制供试品溶液的制备条件是测定穿山龙中薯蓣
皂苷元的关键 ∀
3 q8 从图 t可知 o在上述优化的色谱条件下 o样品溶
液中其他组分对薯蓣皂苷元的测定无干扰 o分离效果
佳 ∀本实验所用对照品溶液的浓度为 s qu °ª#
°p t o进样量仅为 ts ˏo理论板数均大于 z sss o常
在 | sss以上 o而且拖尾因子可达 t qs ∀而文献报道
的对照品溶液浓度均较大 o理论板数较小 o上述色谱
条件尚未见报道 ∀
3 q9 本实验同时对影响薯蓣总皂苷提取 !水解 !以及
薯蓣皂苷元萃取等各因素进行了考察 o并对色谱条件
的各方面进行了优化 ∀同时比较了先提取后水解法 !
先水解再提取法 !以及两相溶剂的直接水解提取法 o
亦尚未见报道 ∀
≈参考文献 
≈t  四川医学院 q中草药学 q北京 }人民卫生出版社 ot|z| q
≈u  都述虎 o夏重道 o付铁军 o等 q穿龙薯蓣总皂甙水解条件的优化 q
中成药 ousss ouuk|l }ys{ q
≈v  陈战国 o耿 征 o刘谦光 o等 q薯蓣皂苷元的分光光度法测定 q分
析化学 ot||y ouwkul }uz q
≈w  刘玉珍 o钱本余 o厦莉杰 o等 q蒺藜中薯蓣皂甙元的双波长薄层扫
描定量法 q中成药 ot||u otwktsl }vx q
≈x  陶 莉 o达晖宁 o达世禄 o等 q盾叶薯蓣中薯蓣皂甙元的气相色谱
测定 q中草药 ot||t ouukul }uz q
≈y  都述虎 o王晓华 o夏重道 o等 q• °2‹°≤ 法测定穿龙薯蓣总皂甙
中薯蓣皂甙元的含量 q中国药科大学学报 ousst ovuktl }vz q
≈z  中国药典 q一部 qusss qwwt q
≈{  中国医学科学院药物研究所 q中草药现代研究 q第二卷 q北京 }北
京医科大学中国协和医科大学联合出版社 ot||y quvw q
≈责任编辑 李 禾 
河套向日葵茎髓多糖的提取及含量测定
杨树平t o温爱平 o吴冬梅 o李俊芳u
kt q内蒙古医学院 药学系 o内蒙古 呼和浩特 stssx| ~u q承德中药厂 o河北 承德 syzsssl
向日葵茎髓 Ηελιαντηυσ αννυυσ q为菊科植物
向日葵的茎髓 o又名向日葵茎芯 ∀其味甘 !淡 !性平 o
有利水消肿 !通淋泻浊之功效 ∀药理实验显示 o向日
葵茎心多糖对小鼠免疫功能有增强作用≈t ou  o向日
葵茎髓水煎液能破坏与消化系统肿瘤有密切关系的
亚硝胺 o而起到防癌作用≈v  ∀为此 o我们对内蒙古
河套地区的向日葵茎髓多糖进行研究 o以便对其进
一步开发和利用 ∀本实验采用石油醚 !乙醚除去脂
≈收稿日期  ussu2s{2sx
≈通讯作者  杨树平 ר¯Βkswztlyyvyu{y
溶性杂质 o用 {s h乙醇除去单糖 !双糖及苷类等干
扰性杂质 o再用水提醇沉法制得向日葵茎髓多糖 o并
采用苯酚2硫酸比色法测定多糖含量≈w  o对其理化性
质进行了检测 ∀
1 仪器 !试剂与样品
• ƒzuss型分光光度仪 ~岛津 Œ•2|vs型红外
光谱仪 oŽ…µ压片 ~≤¬±·µ¤ts¨紫外2可见分光光度仪 ~
÷w„型显微熔点仪 o温度计未经校正 ~试剂均为国产
分析纯 ~向日葵茎髓k采自内蒙古河套地区 o秋季采
摘 o取其茎髓 o自然晾干l ∀
#z{{#
第 u{卷第 |期
ussv年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ |≥ ³¨·¨°¥¨µoussv
葡萄糖标准溶液配制 }精密称取 tsx ε 干燥至
恒重的无水葡萄糖 ux quv °ª置 uxs°容量瓶中 o
加水溶解并稀释至刻度 o摇匀备用 ∀
x h苯酚溶液配制 }取苯酚 tss ªo铝片 s qu ªo
‘¤‹≤ ’v s qu ªo蒸馏 o收集 tzy ε 馏分 o称取 tx ªo
加水溶解并至稀释 vss °o置棕色瓶放冰箱备用 ∀
2 实验部分
2 q1 多糖的提取与精制 称取干燥的向日葵茎髓
粉末 xs ªo置索氏提取器中 o依次用石油醚kys ∗ |s
ε l !乙醚 !{s h乙醇回流提取 y «o残渣挥去溶剂后 o
再用蒸馏水回流提取 y «o减压浓缩至原体积 tru o
过滤 o滤液加入 |x h乙醇使含醇量达 {s h o静置过
夜 ∀抽滤 o沉淀用乙醚 !无水乙醇反复洗涤 o得粗多
糖 o将多糖用蒸馏水溶解 o乙醇重沉淀得精制多糖 o
ys ε 烘干备用 ∀
2 q2 多糖的含量测定
2 q2 q1 标准曲线绘制 精密量取葡萄糖标准溶液
s qs os qt os qu os qv os qw os qx os qy os qz °置 ts °
具塞试管中 o分别加入 t qy °x h苯酚溶液 o再将 z
°浓硫酸直接滴到溶液表面 o摇匀 o沸水浴加热
tx°¬±o冷却 us°¬±后再用蒸馏水定容 o于选定的
w|s±°波长处测定吸收度 ∀结果浓度在 t qss| u ∗
z qsyw w °ª#pt与吸收度呈良好线性关系 o将实验
数据处理得回归方程 }Α € s qszv Χn s qssy | o ρ€
s q||| y oν € x ∀
2 q2 q2 换算因素测定 精密称取 ys ε 干燥至恒重
的向日葵茎髓多糖 us °ªo置 tss °容量瓶中 o加
水溶解并稀释至刻度 o摇匀 o作多糖液备用 ∀精密量
取备用液 s qu °于 ts °具塞试管中 o按标准曲
线绘制项下方法自/加入 t qy °x h苯酚 , ,0起
测定吸收度 ∀按下式计算换算因素 }Φ€ Ω/ Χ∆≈式
中 }Ω为多糖称重量k°ªl oΧ为多糖液中葡萄糖浓
度k Λª# pt l o ∆为多糖稀释因素   ∀测得 Φ €
v qw|z z o• ≥⁄€ t qu| h oν € x ∀
2 q2 q3 样品液制备和多糖含量测定 精密称取向
日葵茎髓粉末 uss °ªo用 {s h乙醇浸泡过夜 o于索
氏提取器中用 {s h乙醇回流 u «o残渣挥去溶剂 o用
蒸馏水回流 u «o反复洗置 uxs °容量瓶中 o定容 o
摇匀 o成为样品液备用 ∀精密量取样品液 t °于
ts °具塞试管中 o按标准曲线绘制项下方法自/加
入 t qy °x h苯酚0起测定吸收度 o按下式计算多
糖含量 }多糖含量 h € Χ∆Φ/ Ω ≅ tss%[式中 : Χ
为样品液中葡萄糖浓度kΛª#ptl o∆为样品液稀释
因素 , Φ为换算因素 , Ω 为样品称重量k°ªl  ∀结
果 o向日葵茎髓中多糖含量为x quxz t h o• ≥⁄ €
s q|t h oν € x ∀
2 q3 回收率试验 精密称取向日葵茎髓粉末 txs
°ªo向日葵茎髓多糖 z °ªo按样品含量测定项下方
法自/于索氏提取器中用 {s h乙醇0起测定吸收度 !
计算多糖含量 ∀求得平均回收率为 |x q|s h o
• ≥⁄€ t qvy h oν € x ∀
2 q4 稳定性试验 取显色后的样品和标准溶液 o在
w|s±°波长处 o每隔 x°¬±测定 t次吸收度 o测定 u
«o结果表明在此时间内吸收度基本不变 ∀
2 q5 向日葵多糖的理化性质 向日葵多糖为棕色
粉末 o溶于水 o不溶于甲醇 !乙醇 !丙酮 !氯仿 !乙醚
等 ~ ²¯¬¶«试剂反应呈阳性 o说明是糖类 ~碘液反应
呈阴性 o说明不含淀粉 ~茚三酮反应呈阴性 o说明无
游离蛋白 ~ƒ «¨¯¬±ª反应 !糖脎反应呈阴性 o说明无还
原糖 ~多糖酸水解液纸层析显示单一斑点 ~紫外光谱
显示 }在 uys ±°和 u{s ±°处无吸收峰 o说明无核
酸和蛋白质结构 ~红外光谱显示 }在 v vss ¦°p t附近
有多糖羟基的伸缩振动吸收峰 ∀
3 讨论 多糖广泛存在于自然界 o它能激活免疫细
胞 !提高机体的免疫功能 o而对正常细胞没有毒性 o
临床多用于抗肿瘤 !治疗爱滋病和抗衰老≈x  ∀我们
从河套向日葵茎髓中提取多糖 o并测定其含量 o研究
表明 o河套向日葵茎髓多糖含量较高 ∀内蒙古河套
地区是向日葵的主产地 o一直以来 o大量的向日葵秸
杆被弃置或作为取暖燃料 o造成资源的极大浪费 ∀
鉴于多糖在临床应用的广阔前景 o对河套向日葵茎
髓多糖的进一步研究 !开发和利用 o将会产生一定社
会效益和经济效益 ∀
参考文献
≈t  张尚明 o卢万秘 o付定一 o等 o向日葵茎芯多糖对小鼠免疫功能
的增强作用 q中国免疫学杂志 ot||v o|kylΒv{v q
≈u  张尚明 o陈春林 o罗 玲等 o向日葵茎芯多糖的免疫药理作用 q
中国药理学通报 ot||w otskvlΒuv{ q
≈v  杨世林 o刘玉珍 q临床抗癌中草药彩色图典 q北京 }人民卫生出
版社 ousst qtsz q
≈w  倪 慧 o何爱华 q新疆枸杞多糖的提取及含量测定 q中成药 o
t||v otxktlΒv| q
≈x  田庚元 o冯宇澄 o林 颖 q植物多糖的研究进展 q中国中药杂
志 ot||x ouskzlΒwwt q
≈责任编辑 李 禾 
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第 u{卷第 |期
ussv年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ |≥ ³¨·¨°¥¨µoussv