全 文 ：健脑安对血管性痴呆大鼠海马区
Œ2tΒ诱导的 ¦2©²¶蛋白表达的影响
时 晶t o田金洲t 3 o朱爱华t o尹军祥t o高 扬u o林嘉友u o王永炎v
kt q北京中医药大学 东直门医院 老年病科 o北京 tsszss ~
u q中国医学科学院 基础医学研究所 o北京 tssssx ~v q中国中医研究院 o北京 tsszssl
≈摘要  目的 }观察健脑安k≤Š∞l对脑缺血2再灌注大鼠高表达的 Œ2tΒo¦2©²¶蛋白的抑制作用 ∀方法 }采用左侧大
脑中动脉插入丝线结扎方法制造大鼠血管性痴呆模型 o分成健脑安大kt| qvw ≅ tsv ª#pt生药l !中k| qyz ≅ tsv ª#pt生
药l !小kw q{v ≅ tsv ª#pt生药l剂量组 !Œ2tµ¤对照组 !假手术组和模型组 ∀中药用 s qx h羧甲基纤维素k≤  ≤l配成水溶
液 o每 tss ª大鼠灌胃给中药溶液 s qz °∀Œ2tµ¤对照组大鼠在缺血前 vs °¬±和缺血后 ts °¬±左侧脑室内分别注射
µ«Œ2tµ¤ts Λªo假手术组注射同等剂量生理盐水 ts ˏ∀假手术组 !模型组分别于造模 z §前开始给予中药灌胃 o分别
按照缺血再灌后不同时间点ks qx ot ou ov ow oy o{ otu ouw ow{ ozu o|y otww oty{ «l取材 ∀应用免疫组化方法标记实验各组大
鼠应用健脑安和 Œ2tµ¤后脑组织中海马区 Œ2tΒ蛋白和 ¦2©²¶阳性神经元的数量 o进行组间均数比较 ∀结果 }与模型组
相比 o健脑安 v个剂量组在不同再灌时间ku ov ow otu ozu «l均具有显著性的抑制 Œ2tΒo¦2©²¶蛋白表达的作用 o但小 !中
剂量组的抑制水平不及 Œ2tµ¤k Π s qsx和 Π s qstl ∀健脑安抑制海马 Œ2tΒ蛋白表达 ou «起效 o大剂量kxvt ? txt qtl
和中剂量kx{| qv ? z{ qyl都强于模型组ky{z qy ? tty qzlk Π s qst和 s qsxl o直到 zu «∀大剂量组从缺血2再灌注 w «后对
¦2©²¶蛋白表达的抑制作用k{t qv ? ty qtl与 Œ2tµ¤对照组kyz qu ? ux qzl无显著性差异 ∀结论 }具有益气补肾 !活血化痰
作用的健脑安可以抑制血管性痴呆大鼠脑内 Œ2tΒ¦2©²¶蛋白的表达亢进 o但这一作用起效相对 Œ2tµ¤慢了大约 t «o且
与剂量有关 ∀
≈关键词  血管性痴呆 ~海马区 ~Œ2tΒ~¦2©²¶~健脑安
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsy2sxzs2sx
目前研究表明≈t  o脑缺血后诱生的白细胞介素
tΒkŒ±·¨µ¯¨ ∏®¬±2tΒoŒ2tΒl可以作为一种主要病理因素
导致缺血2再灌注脑损伤和从细胞中释放化学介质 ∀
Œ2tΒ表达增加可以激活下丘脑2垂体2肾上腺k‹°„l
轴导致下丘脑分泌促肾上腺皮质激素释放因子
k≤• ƒl o内生的 ≤• ƒ在大鼠脑缺血损伤时可以通过
增加神经兴奋性而造成海马区缺血损伤≈u  ∀在验证
Œ2tΒ作用于 ‹°„轴的机理时 o有研究使用¦2©²¶°•2
‘„或 ƒ’≥蛋白作为细胞激活的标志 o这个基因已经
成为检测解剖学功能通路的工具≈v  ∀原癌基因 ¦2©²¶
属于即早基因是反应神经细胞的功能活动的敏感指
标 ∀本课题组以往研究表明≈w  o益气补肾活血化痰
法对脑缺血后智能障碍具有一定临床疗效 o但该治
法的作用机制是否通过脑缺血后诱导的神经内分
≈收稿日期  ussu2tu2ty
≈基金项目  国家自然科学基金k vsuztyuwl
≈通讯作者  3田金洲 oר¯ }kstsl{wstvv{s
泌免疫网络系统多靶点调节机制尚不清楚 ∀为此 o
本实验旨在观察具有益气补肾活血化痰作用的复方
中药健脑安对血管性痴呆大鼠脑内生 Œ2tΒ诱导的
高表达的 ¦2©²¶蛋白的抑制作用 ∀
1 材料
1 q1 实验动物
≥⁄清洁级 y月龄大鼠 o雄性 o体重kwxs ? uxlªo
由北京维通利华实验动物中心供给 o合格证号 }京动
许字kusssl第 ssw号k总 sw|号l ∀
1 q2 实验环境
大鼠饲养和实验均在清洁级动物实验室内进
行 o饮用水为消毒水 ∀自由摄取食物和饮水 o光照与
黑暗为 tu «交替 o室温为 uu ∗ ux ε o相对湿度 ys h ∀
1 q3 药物与试剂
1 q3 q1 药物 健脑安干浸膏粉k人参茎叶 !肉苁蓉
等l o由河南宛西制药责任有限公司协助生产 ∀对照
药 Œ2tµ¤由北京邦定泰克公司提供 o批号 sssuuv ∀
1 q3 q2 主要试剂 正常山羊血清封闭液k中山公
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第 u|卷第 y期
ussw年 y月
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ y∏±¨ oussw
司l !羊抗大鼠第一抗体k羊抗大鼠 Œ2tΒo¦2©²¶lk≥¤±·¤
¦µ∏½l !生物素化兔抗山羊 ªŠk‹ n lk≥¬ª°¤l !辣根
酶标记链亲和素k≥¬ª°¤l !⁄„…显色试剂盒k≥¬ª°¤l !
标记碱性磷酸酶的抗地高辛抗体 k …²¨ «µ¬±ª¨µ
¤±±«¨¬° oŠ¨ µ°¤±¼l ∀
1 q3 q3 仪器与设备 {xy系列恒冷箱冰冻切片机
„’ 公司 ∀真彩色图象分析仪为德国 ¨¬¦¤公司产
品 o配套分析软件为 ⁄≤tss o±º¬±∀
2 方法
2 q1 大鼠脑缺血再灌模型
根据 Ž²¬½∏°¬≈x 和 ‘¤ª¤¶¤º¤≈y 方法制成大脑中动
脉k≤„’l模型 o²µµ¬¶水迷路行为学和病理形态学
检测符合血管性痴呆大鼠模型≈z  ∀大鼠麻醉后 o将
其仰卧固定 o分离右颈总动脉 k≤≤„l !颈内动脉
kŒ≤„l及颈外动脉k∞≤„l并挂线备用 o结扎 ∞≤„ 与
≤≤„ o用动脉夹夹闭 Œ≤„ 远心端后 o迅速于 ∞≤„ 与
Œ≤„分叉处作一切口 o从切口处插入一端加热成光
滑球形尼龙线k直径为 s qux °° o距球端 u ¦°处作标
记 o栓线前端经多聚赖氨酸处理后备用l ∀线插入
Œ≤„后 o于入口处稍稍结扎尼龙线与入口处 Œ≤„段 o
然后松开夹闭 Œ≤„的动脉夹 o继续插入尼龙线至稍
有阻力后略回撤 o至线插入深度为kt{ qx ? s qxl °°
左右 o实现大脑中动脉阻塞导致脑缺血 ∀再次结扎
入口处 o尼龙线外留约 t ¦°o缝合皮肤 ∀u «后轻轻
提拉所留线头至有阻力 o实现大脑中动脉再灌注 o则
造模完成 ∀动物入选的标准 }动物于缺血 u «后出
现对侧前肢倦曲或行走转圈或行走向对侧倒体征则
纳入 o动物无此体征或于 u «后仍不清醒者剔除 ∀
假手术组只切开皮肤 o分离 ≤≤„ o∞≤„ oŒ≤„后缝合 ∀
2 q2 分组及给药方法
将清洁级雄性大鼠正常饲养 y个月 o随机分为 y
组 o即假手术组 !模型对照组 !中药大 !中 !小剂量组
和 Œ2t受体拮抗剂对照组 o每个时间点 z只大鼠 o假
手术组 t{只 ∀假手术组 !模型组喂饲消毒水 os qz
°#tss ªpt体重 o灌胃 o服用时间同治疗组用药时
间 ∀大 !中 !小给药组分别与造模前 z §开始给药 o
一直给药至取材时间 ∀给药剂量分别为大剂量组
kt| qvw ≅ tsv ª#pt生药l !中剂量组k| qyz ≅ tsv ª#pt
生药l !小剂量组kw q{v ≅ tsv ª#pt生药l o给药体积
均为 s qz °#tss ªpt o药物用 s qx h ≤≤ 配制成水
溶液灌胃 ∀Œ2tµ¤us Λª稀释于 us ˏ生理盐水中 o
采取侧脑室注射给药方法≈{  o分别在大鼠造模前 vs
°¬±和后 ts °¬±左侧脑室内注射 Œ2tµ¤ts Λªo假手
术组按照同样方法分别注射生理盐水 ts ˏ∀
2 q3 脑组织取材及处理方法
模型组大鼠分别于造模后 s qx ot ou ov ow oy o{ o
tu ouw ow{ ozu o|y otww oty{ «后按照上述方法取材 ∀
各组大鼠在预定时间按照常规灌注 o大鼠经腹腔注
射 vxs ª#°pt水合氯醛麻醉≈t °#ktss ªlp t体重  o
常规胸腹联合切口 o经左心室插管 o依次用 •¬±ª¨µ. ¶
液 !ws ª#pt多聚甲醛的 s qt °²¯#pt磷酸缓冲液 wss
°灌注固定大鼠 ∀取含海马结构的脑组织逐级浸
入 txs ovss ª#pt的蔗糖 °…≥中 o置 w ε 冰箱过夜 o
待分别下沉 ∀冰冻切片机冠状连续切片 o切片厚度
us Λ° o隔 x片取 t片 ∀根据模型组大鼠表达的起始
点和高峰点将给药组大鼠分别于造模后 u ov ow otu o
zu «后注毕取出全脑 ∀
2 q4 免疫组化步骤
≠ °…≥2×÷ 洗 v次 o每次 x °¬±∀ 滴加正常山羊
血清封闭液 o室温 t «∀ ≈ 依次加入第一抗体k羊抗
大鼠 Œ2tΒo¦2©²¶tΒtss稀释l o过夜 ∀ …°…≥2×÷ 洗 v
次 o每次 x °¬±∀  加入生物素化兔抗山羊 ªŠk‹ n
lktΒuss稀释l o室温 u «∀ ¡°…≥2×÷ 洗 v次 o每次 x
°¬±∀ ¢加入辣根酶标记链亲合素 o室温 t «∀ £
⁄„…显色 }t °蒸馏水加 ⁄„…显色剂 „ o…o≤ 各 t
滴 o观察显色程度 o显色 x ∗ us °¬±∀ ¤乙醇脱水 o二
甲苯透明后中性树脂封片 ∀所有免疫组化反应均设
阴性对照 o方法为用正常山羊血清代替一抗 o其余步
骤同上 ∀
2 q5 图象半定量分析
连续切片后取大致相同部位切片 o在光镜下观
察阳性信号存在的部位和结构 o采用德国 ¨¬¦¤真彩
色图象分析系统 o对免疫组化切片进行定性 !半定量
分析 }在 ts ≅ us倍镜下 o按照黄色色调的一定阈值
分割免疫组化阳性细胞 o选择各切片海马区阳性相
对明显的视野 o每只动物选取 v个视野 o平均记数阳
性细胞个数 o分别测定各组大鼠脑组织中海马区 Œ2
tΒo¦2©²¶蛋白表达的阳性细胞个数 ∀
2 q6 统计学分析
全部数据采用 ≥°≥≥ts qs 统计软件 o方差齐性检
验和方差分析用 ’±¨ 2 • ¤¼q„‘’‘„程序进行分析 ∀
3 结果
3 q1 脑缺血后不同再灌时间 Œ2tΒ蛋白的表达情况
k见表 tl
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表 t 不同缺血时间 Œ2tΒ蛋白阳性细胞数的变化k ξ ? σl
组别 ν
再灌注时间
s qx « t « u « v « w « y « { «
模型组 z u qu ? v qy |z qw ? v| qvtl yts qz ? t{{ qwtl wxs qs ? twt qztl vst qu ? tuz qttl vsw qw ? tys qvtl u{x q{ ? tsu qwtl
假手术组 t{ u qu ? v qs tt qw ? v q| uw qu ? tu q| t{ qt ? w q| tt qu ? x qz { qz ? w qw t qw ? v qt
组别 ν
再灌注时间
tu « uw « w{ « zu « |y « tww « ty{ «
模型组 z tvw qw ? vv qytl yz qs ? uz qttl xw qt ? t| qztl xx qw ? uu qytl v| qt ? ts qxtl uw q| ? uv quul y qy ? x q|ul
假手术组 t{ t qw ? v qt t qu ? v qs t qs ? u qs t qv ? u qt t qv ? u q| t qw ? u qu t q{ ? u qv
注 }与假手术组比 o tl Π s qst o ul Π s qsx
Œ2tΒ不同时间段在大鼠脑内表达情况不同k表
tl o表达结果通过图象分析仪检测 o在假手术大鼠脑
内两侧半球少见 Œ2tΒ免疫反应细胞 oŒ2tΒ在 ≤„’
缺血再灌后缺血半球从 t «后开始表达 ou «后免疫
反应继续增加并向未缺血半球侧表达 o此时表达达
到高峰 ow «后表达持续减弱 o至第 ty{ «表达基本消
失 ∀表 t显示 o模型组各时间点kt ∗ tww «l同相对应
的假手术组相比差异极显著k Π s qstl otww oty{ «
两组相比差异显著k Π s qsxl os qx «两组相比无显
著性差异k Ё s qsxl ∀表达细胞以神经元为主 ∀
3 q2 脑缺血后不同再灌时间 ¦2©²¶蛋白的表达情况
k见表 ul
各实验组大鼠不同时间点脑内 ¦2©²¶蛋白表达
情况不同 o组化结果通过图象分析显示 o在假手术组
大鼠脑内两侧半球海马区偶见散在的 ¦2©²¶免疫反
应细胞 o模型组 ¦2©²¶在缺血再灌后缺血半球从 u «
后开始表达 o表达部位以海马区为主 ov «后免疫反
应继续增加并向未缺血半球侧表达 ow «达到高峰 ∀w
«后表达逐渐减弱 o至 zu «表达基本消失 ∀模型组
各时间点ku ∗ w{ «l同相对应的假手术组相比差异极
显著k Π s qstlk表 ul o可见表达细胞以神经元
为主 ∀
3 q3 健脑安对大鼠脑缺血再灌后不同时间 Œ2tΒ蛋
白表达的影响
u «}健脑安大 !中 !小剂量组 !Œ2tµ¤对照组与模
型组相比差异显著k Π s qsx或 °  s qstl ~v «}健脑
安大剂量组 !Œ2tµ¤对照组与模型组比较差异显著
k Π s qsxl ~zu «}健脑安大剂量组和Œ2tµ¤对照组与
模型组相比差异极显著k Π s qstl o见图 t ∀
图 t 各实验组不同再灌时间 Œ2tΒ蛋白的表达
与假手术组比 tl Π s qst o ul Π s qsx ~
与模型组比 vlΠ s qst o wl Π s qsx
3 q4 健脑安对大鼠脑缺血再灌后 ¦2©²¶蛋白表达的
影响k见表 vl
表 u 不同再灌时间 ¦2©²¶蛋白的表达k ξ ? σl
组别 ν
再灌注时间
u « v « w « y « { «
缺血组 z tyu qw ? uw q{tl wws qs ? {w qvtl xut qz ? tsv qxtl uwv qz ? yz q{tl uss qy ? |z qstl
假手术组 | uy q{ ? t| qx uv q{ ? { qs ty qy ? tt qv tz qz ? z qx tt qs ? tt qx
组别 ν
再灌注时间
tu « uw « w{ « zu « |y «
缺血组 z txt qv ? x{ qytl utv qz ? tss q|tl xv q| ? uz qttl vx qw ? t| qwtl ts qw ? | qztl
假手术组 | s ? s s ? s s ? s s ? s s ? s
注 }同假手术组比较 tl Π s qst o ul Π s qsx
根据图 u中图象分析仪定量和半定量分析结
果 o各实验组在不同时间点呈现不同表达峰值 ∀表 v
可见 u ov ow otu «o大 !中 !小剂量组 !Œ2tµ¤对照组均
比模型组表达有极显著性差异k Π s qstl ~健脑安大
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表 v 各实验组不同再灌时间 ¦2©²¶蛋白的表达k ξ ? σ, ν € zl
组别
剂量
rª#pt
再灌注时间
u « v « w « tu « zu «
大剂量组 t| qvw ≅ tsv |y qs ? tu qyt ovl tsx qt ? wv q{u ovl {t qv ? ty qtvl yu qz ? ux qtvl u| qv ? tv qswl
中剂量组 | qyz ≅ tsv ttz q{ ? {z qut ovl uz| q| ? uz qzt ovl vvz q{ ? wy qzt ovl tsw q| ? ut qxt ovl ww qz ? ty qwul
小剂量组 w q{v ≅ tsv u|y qv ? xv qzt ovl uvt q{ ? {{ qzt ovl vzt qu ? wy qut ovl tvt qz ? vs qzt ovl wx q{ ? ut q|ul
Œ2tµ¤组 s qssssu xx q{ ? uw quvl zs qv ? t| qxvl yz qu ? ux qzvl t| q{ ? tw qyvl tw qt ? | qywl
模型组 txz qz ? ux qstl w|v qz ? w{ qxtl w{u q| ? tt| qxtl ust q| ? tsw q|tl wx q| ? us qvul
注 }同 Œ2tµ¤对照组比较tl Π s qst o ul Π s qsx o vl Π s qst o同模型组比较 o wl Π s qsx
剂量组与 Œ2tµ¤对照组相比无显著差异k Ё s qsxl o
中 ! 小
剂量组与模型组 o与Œ2tµ¤对照组相比差异显著
k Π s qsxl ∀
图 u 模型组与中药组缺血再灌 u «¦2©²¶蛋白的表达图
¤q模型组 u «海马区 ¦2©²¶蛋白的表达k ≅ vvl ~
¥q健脑安大剂量组 u «海马区 ¦2©²¶蛋白表达k ≅ yyl
4 讨论
צ«¨ ¬¯±ª¨µ¬¤±等≈| 认为 ƒ’≥表达主要在脑损伤
侧海马神经元内 o给予 Œ2tΒ会通过原位杂交方法检
测出在特殊脑区诱导出 ¦2©²¶°• ‘„ 的表达 o表达部
位包括脑膜 !脑内血管系统 !脉络丛和室周循环器
官 ∀Œ2tΒ是脑缺血损伤的主要病理产物 oŒ2tΒ的
神经元变性过程与给予它的受体拮抗剂有关≈ts  ∀
• ·¯²±等≈tt 报告指出 o脑室内或外周注射白介素 t受
体拮抗剂kµ«Œ2tµ¤l可以减少永久 ≤„’大鼠缺血模
型的脑梗死 !脑水肿和神经缺损症状 ∀也可以减少
≤„’大鼠脑区的坏死神经元数目 o从而抑制 Œ2tΒ
的活性 ∀所以 Œ2tµ¤可以作为一种神经元保护剂 o
因此本实验选择 Œ2tµ¤作为对照组 o探讨中药健脑
安对脑缺血损伤的保护作用 o同时也为研究脑缺血
后 Œ2tΒ同 ¦2©²¶的诱导神经元变性损伤的关系提供
一定的理论基础 ∀
本研究结果表明 o大鼠脑缺血2再灌注后诱导 Œ2
tΒ和 ¦2©²¶蛋白表达具有一定的时间规律 oŒ2tΒ在
≤„’缺血再灌注后 t «开始表达 ou «表达达到高
峰 ∀¦2©²¶在 ≤„’缺血再灌后缺血半球从 u «后开
始表达 ow «表达达到高峰 ∀至第 w §表达基本消失 ∀
根据 Œ2tΒ和 ¦2©²¶表达的时序性可见他们可能存在
相互诱导关系 o即大鼠脑缺血后 Œ2tΒ可以诱导 ¦2©²¶
的表达 ∀试验选择了 Œ2tΒ和 ¦2©²¶蛋白表达的起始
点 !高峰段等主要时间点进行药物干预 o结果可见健
脑安可以抑制脑缺血后 Œ2tΒo¦2©²¶蛋白的表达 ∀虽
然脑缺血后 ¦2©²¶的表达是一过性表达≈tu  o有逐渐减
弱的趋势 o但是在使用药物干预后 o其升高的表达出
现大幅度下降 o可见 v种不同剂量的中药健脑安抑
制了脑缺血后 Œ2tΒo¦2©²¶的表达 o且呈现一定量效
关系 ∀遗憾的是 o健脑安的抑制作用没有高于 Œ2tµ¤
k Ё s qsxl o最主要的原因可能是 Œ2tµ¤组脑室内直
接给药 o药物起效较快 o但是随着治疗时间的延长 o
其大剂量组的效果接近 Œ2tµ¤o说明有效剂量的健脑
安抑制 Œ2tΒo¦2©²¶表达的作用可以与 Œ2tµ¤类似 ∀
从实验方法上可见 o健脑安同 Œ2tµ¤的给药途径存
在差异 o可能会给实验结果造成一定的影响 ∀
健脑安具有益气补肾 !活血化痰的作用 o驱邪以
扶正 o从而防止痰瘀互结化热生毒 o损伤形体脑络 o
导致神明失用 ∀健脑安对血管性痴呆大鼠脑缺血后
诱导的 Œ2tΒo¦2©²¶异常表达部分抑制作用可能与其
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益气补肾 !活血化痰有关 ∀但对 Œ2tΒo¦2©²¶异常表
达的单一抑制作用还不足以解释健脑安对脑缺血后
神经细胞保护作用的机理 o也不能肯定是否有其他
因子如 Œ2tΒ也参与了脑缺血诱导的 ¦2©²¶异常表达
的抑制过程 ∀这些将是笔者下一步要报道的结果 ∀
本实验旨在观察健脑安对血管性痴呆大鼠脑内生的
Œ2tΒ诱导的 ¦2©²¶的影响 o以寻找益气补肾 !活血化
痰复方临床上治疗脑卒中后认知损害作用≈w 的分子
机制 ∀
≈参考文献 
≈t  ≠¤¶∏±§² ≠¤°¤¶¤®¬o ‘¤²¶∏®¨ ¤·¶∏∏µ¤o ‹¬§¨·¤®¤ ≥«²½∏«¤µ¤o ετ αλq
Œ±·¨µ¯¨ ∏®¬±2t ¤¶¤ ³¤·«²ª¨ ±¨ ·¬¦° §¨¬¤·²µ²©¬¶¦«¨ °¬¦¥µ¤¬± §¤°¤ª¨ ¬±
µ¤·¶q Στροκε ot||x owkuyl }yzy q
≈u  ≥¤µ¤« „ o ¤o°¨ ·¨µ… …o ετ αλq∞±§²ª¨ ±²∏¶¬±·¨µ¯¨ ∏®¬±2t µ¨¦¨³2
·²µ¤±·¤ª²±¬¶·¬¶ ±¨ ∏µ²³µ²·¨¦·¬√¨q Βιοχηεµ Βιοπηψσ Ρεσ Χοµ µυν ,
t||z ouvw }utt q
≈v  ²µª¤± o ≤∏µµ¤± × q ≥·¬°∏¯∏¶2·µ¬±¶¦µ¬³·¬²± ¦²∏³¯¬±ª¬± ·«¨ ±¨ µ√²∏¶
¶¼¶·¨°}Œ±√²¯√ °¨ ±¨·²©·«¨ ¬±§∏¦¬¥¯¨ ³µ²·²2²±¦²ª¨ ±¨ ¶©²¶¤±§­∏±q
Αννυ Ρεϖ Νευροσχι ot||t otw }wut q
≈w  ׬¤± o≠¬± ÷ o≠¤±ª ≤  o ετ αλq„ µ¤±§²°¬½¨ §³¬¯²·¶·∏§¼ ²©¦²°2
³²∏±§²© ≤«¬±¨ ¶¨ Š¬±¶¨±ª·µ¨¤·° ±¨·²© ° °¨²µ¼ ¬°³¤¬µ°¨ ±·¬± ³¤·¬¨±·¶
º¬·« °¬¯§ ¤±§ °²§¨µ¤·¨ √¤¶¦∏¯¤µ§¨ ° ±¨·¬¤q Στροκε o ussvk≥˜°°l o
vuz q
≈x  Ž²¬½∏°¬o≠²¶«¬§¤ ≠ o‘¤®¤½¤º¤× o ετ αλq∞¬³¨µ¬°¨ ±·¤¯ ¶·∏§¬¨¶²©¬¶2
¦«¨ °¬¦¥µ¤¬± §¨¨ °¤o´ }„ ±¨ º ¬¨³¨µ¬°¨ ±·¤¯ °²§¨¯ ²© ¦¨µ¨¥µ¤¯ °¨2
¥²¯¬¶°¬±µ¤·¶¬± º«¬¦«µ¨¦¬µ¦∏¯¤·¬²± ¦¤± ¥¨ ¬±·µ²§∏¦¨§¬±·«¨ ¬¶¦«¨ °¬¦
¤µ¨¤q ϑπν ϑ Στροκε ot|{y o{ }t q
≈y  ‘¤ª¤¶¤º¤ ‹ oŽ²ª∏µ¨ Žq ≤²µµ¨ ¤¯·¬²± ¥¨·º¨¨ ± ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¥¯²²§©¯²º ¤±§
«¬¶·²¯²ª¬¦¦«¤±ª¨¶¬± ¤ ±¨ º µ¤·°²§¨¯ ²© °¬§§¯¨¦¨µ¨¥µ¤¯ ¤µ·¨µ¼ ²¦¦¯∏2
¶¬²±q Στροκε , t|{| ousk{l }tsvz q
≈z  尹军祥 o田金州 o黄启福 o等 q≤„’ 拟血管性痴呆大鼠模型的
建立 q中国病理生理杂志 oussv ot|ktl }ttws q
≈{  张 凤 o李向红 o谷志远 q大鼠脑缺血2再灌注损伤诱导 Œ2tΒ的
表达 q中国病理生理杂志 ot||| otxkul }tsz q
≈|  ¬∏‹  o≤«¨ ± o  q‘q≤2©²¶³µ²·¨¬± ¬¨³µ¨¶¶¬²± ¤±§¬¶¦«¨ °¬¦¦«¤±ª¨¶
¬± ±¨ ∏µ²±¨ ¶√∏¯±¨ µ¤¥¯¨·²¬¶¦«¨ °¬¤r«¼³²¬¬¤o¦²µµ¨ ¤¯·¨§ º¬·« ¥¤¶¬¦©¬2
¥µ²¥¯¤¶·ªµ²º·«©¤¦·²µo¦²µµ¨ ¤¯·¨§º¬·«¥¤¶¬¦©¬¥µ²¥¯¤¶·ªµ²º·«©¤¦·²µ¬°2
°∏±²µ¨¤¦·¬√¬·¼q ϑ Νευροπατηολ Εξπ Νευρολot||w oxvkyl }x|{ q
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kt . ∆επαρτµεντ οφ Χαρε οφ Ελδερλψ, ∆ονγζηιµεν Ηοσπιταλ, Βειϕινγ Υνιϖερσιτψ οφ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsszss , Χηινα ;
u . ∆επαρτµεντ οφ Ιµ µυνολογψ, Ινστιτυτε οφ Βασιχ Μεδιχαλ Σχιενχε , ΧΑΜΣ ανδ ΠΥΜΧ, Βειϕινγ tssssx , Χηινα ;
v . Χηινα Αχαδεµψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsszss , Χηιναl
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²¥¶¨µ√¨¬±«¤¥¬·¬±ª ©¨©¨¦·²© ≤Š∞ k¦²°³²∏±§ª¬±¶¨±ª ¬¨·µ¤¦·l ²± ¬±¦µ¨¤¶¨§ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©Œ2tΒ ¤±§¦2©²¶
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第 u|卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
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≈责任编辑 古云侠 
黄连解毒汤对 „⁄大鼠的
治疗作用及对细胞因子含量的影响
方 青t 3 o詹小萍u o莫剑翎t o孙 梅u
kt q浙江大学 医学院 附属邵逸夫医院 o浙江 杭州 vtssty ~
u q浙江大学 医学院 附属第二医院 o浙江 杭州 vtsss|l
≈摘要  目的 }探讨黄连解毒汤对老年性痴呆k„⁄l的治疗作用及对细胞因子含量的影响 ∀方法 }以 Β2淀粉蛋白
k„Βl注射形成 „⁄大鼠模型 o以水迷宫实验进行学习记忆能力测试 ~以 ∞Œ≥„法测定细胞因子 }肿瘤坏死因子kבƒ2Αl o
干扰素2ΧkŒ‘ƒ2Χl o白介素2ukŒ2ul变化 ∀结果 }模型组学习记忆能力下降 o逃避的平均潜伏期延长 o进入盲端的错误次
数增多 ~黄连解毒汤治疗后 o学习记忆能力改善 oΠ s qst ~模型组 בƒ2ΑoŒ‘ƒ2ΧoŒ2u含量水平较正常组增高 oΠ s qst o
黄连解毒汤治疗 ´ oµ组则明显降低 oΠ s qst ∀结论 }黄连解毒汤可能通过调整 „⁄大鼠的免疫功能和增加抗炎而提
高其学习记忆能力 ∀
≈关键词  黄连解毒汤 ~老年性痴呆 ~细胞因子
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsy2sxzx2sw
老年痴呆 o主要分为血管性痴呆k√¤¶¦∏¯¤µ§¬¶2
¤¨¶¨ o∂⁄l和老年性痴呆k¤¯½«¨¬°¨ µ. ¶§¬¶¨¤¶¨ o„⁄l两
大类 ∀已经有研究提示 o黄连解毒汤可能对 ∂⁄具
有一定疗效 o但是否对 „⁄也有治疗作用尚未见研
究报道 ∀本实验以 „Β进行 „⁄造模 o对提高学习记
忆作用可能与调整免疫功能和增加抗炎有关的机制
进行研究 o现报告如下 ∀
1 材料和方法
1 q1 动物 雄性 ≥⁄大鼠 o体重kuxs ? usl ªo由中科
院上海实验动物中心提供 ∀动物质量合格证 }中科
动第 ssv号 ∀试验条件 }≥ƒ°屏障实验饲养室 o实验
条件合格证 }医动字第 uusstsssw号 ∀
1 q2 药物制备 黄连解毒汤提取物由浙江大学医
学院附属邵逸夫医院提供 ∀黄连解毒汤药材购自华
≈收稿日期  ussv2tt2tw
≈通讯作者  3方青 oר¯ }ksxztl{ys|sszv2wwus
东医药材股份有限公司中药材分公司 ∀黄连为毛茛
科植物黄连 Χοπτισχηινενσισ ƒµ¤±¦«q的干燥根茎 ~黄柏
为芸香科植物黄檗 Πηελλοδενδρον αµυρενσε • ∏³µq的干
燥树皮 ~黄芩为唇形科植物黄芩 Σχυτελλαρια βαιχαλενσισ
Š¨ ²µª¬的干燥根 ~栀子为茜草科植物栀子 Γαρδενια
ϕασµινοιδεσ ∞¯ ¬¯¶q的干燥成熟果实k均由该公司主任
中药师李承伟鉴定l ∀黄连解毒汤采用超声浸出法
进行提取 ∀黄连 o黄柏与黄芩 o栀子分别以饮片超声
浸出 o其中黄连 !黄柏加 x倍量水 o在室温下浸出 u
次 o每次 vs °¬±o合并浸出液 !滤过 ~黄芩 !栀子加 {
倍量水 o在 zx ∗ {s ε 水温下浸出 v次 o每次 vs °¬±o
合并浸出液 !滤过 ∀再将两者滤液合并 o制成本实验
所需的制剂 ∀t qs ª提取物相当于 w qy{ ª生药材 ∀
脑复康由古汉集团股份有限公司 !衡阳制药厂提供 o
批号 ussvswus ∀
1 q3 主要试剂 „Β t ∗ ws由 ≥¬ª°¤公司提供 o批号
txt2ssv2³¦sx ∀ בƒ2ΑoŒ‘ƒ2ΧoŒ2u酶联试剂盒由晶美
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第 u|卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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