全 文 ：复方鱼腥草软胶囊的鉴别和含量测定方法研究
罗 璇 o李小芩 o杨岳隆 o李发美 3
k沈阳药科大学 药学院 o辽宁 沈阳 ttssty l
复方鱼腥草软胶囊是由复方鱼腥草片改进工艺的新制
剂 o方由鱼腥草 !黄芩 !板蓝根 !金银花 !连翘 x味中药组成 o
具清热解毒之功效 o用于外感风热引起的咽喉肿痛 o急性咽
炎 !扁桃体炎等症≈t o疗效确切 ∀复方鱼腥草软胶囊是未见
文献报道的新制剂 o为了全面 !有效的控制其质量 o作者建立
了制剂中鱼腥草 !绿原酸和黄芩苷的薄层色谱法 o以及绿原
酸的 °≤含量测定 ∀鱼腥草为方中君药 o文献报道≈u 其具
有较多的药理活性 o但 usss年版5中国药典6对复方鱼腥草
片中的鱼腥草只进行了醛类的显色鉴别 o故本实验建立了以
鱼腥草药材作对照 o鉴别复方鱼腥草软胶囊中鱼腥草的薄层
色谱法 ∀金银花和黄芩是该方中的主要药味 o其抗病毒 !抗
菌作用的 u种主要有效成分分别为绿原酸与黄芩苷 o故作者
将其作为控制复方鱼腥草软胶囊质量的指标成分 o有文献采
用 ×≤ 法鉴别了复方鱼腥草口服液中的绿原酸≈v o作者尚未
见文献报道对复方鱼腥草制剂中二者进行同时鉴别 o本实验
建立了同时鉴别复方中绿原酸 !黄芩苷的薄层色谱法 o为制
剂质量的控制提供快速 !简便的方法 ∀由于复方鱼腥草制剂
中黄芩苷的含量测定的文献报道较多≈w o故不再赘述 o只重
点介绍绿原酸的 °2°≤含量测定 ∀
1 仪器与试药
日本岛津 ≤ p ts×∂°型高效液相色谱仪 o≥°⁄p ts∂°
紫外可见分光光度检测器 o±¤¶·¤µ色谱工作站 o⁄p t{s型
超声波清洗机k浙江省象山县石浦海天电子仪器厂l o³¶p
ux型 ³计k上海精科雷磁仪器厂l ∀
硅胶 k青岛海浪硅胶干燥剂厂l o羧甲基纤维素钠k中
国医药集团k上海l化学试剂公司l o乙腈 !甲醇均为色谱纯
k山东禹王实业有限公司l o水为自制重蒸水 o其他试剂均为
分析纯k沈阳化学试剂厂l ∀复方鱼腥草软胶囊及阴性复方
制剂由本校药剂教研室提供 ∀鱼腥草药材购于沈阳市天益
堂药店 o经沈阳药科大学陈发奎教授鉴定为 µ¨¥¤ ²∏·∏¼±¬2
¤¨ o绿原酸 !黄芩苷对照品均购于中国药品生物制品检定
所 ∀
2 方法与结果
2 q1 定性鉴别
2 q1 q1 鱼腥草的鉴别 取复方鱼腥草软胶囊内容物约 v ª
≈收稿日期 ussv2ts2us
≈通讯作者 3李发美 oר¯ }ksuwluv{wvztt2vvyt o∞2°¤¬¯}©¤° ¬¨¯¬
tyv q¦²°
于具塞锥形瓶中 o加甲醇 ts °o密塞 o超声处理 vs °¬±o滤
过 o滤液作为供试品溶液 ~另取鱼腥草药材粉末约 u ªo置具
塞锥形瓶中 o加甲醇 ux °o密塞 o超声处理 vs °¬±o滤过 o滤
液浓缩至干 o残渣用 v °甲醇溶解 o作鱼腥草对照药材供试
液 ∀吸取上述 u种溶液各约 ts Λo分别点于同一硅胶 薄
层板上 o以石油醚kys ∗ |s ε l2氯仿2醋酸乙酯2冰醋酸kzΒwΒ
vΒs qvl为展开剂 o预饱和约 vs °¬±后展开 o展距约 tx ¦° o取
出 o晾干 o置紫外灯kvyx ±°l下检视 o供试品色谱中在与对照
药材色谱相应位置显多个相同荧光斑点 o阴性对照品在相应
位置无干扰k图 tl ∀
图 t 复方鱼腥草软胶囊中鱼腥草的 ×≤鉴别
t q鱼腥草阴性对照品 ~u q鱼腥草对照药材 ~
v ∗ x q复方鱼腥草软胶囊
2 q1 q2 绿原酸 !黄芩苷的鉴别 取复方鱼腥草软胶囊内容
物约 t qx ª于具塞锥形瓶中 o加甲醇 ts °o密塞 o超声处理
vs °¬±o滤过 o滤液作为供试品溶液 ~另取绿原酸 !黄芩苷对照
品适量 o以甲醇为溶剂 o分别配制成 t ª#pt的溶液 o作为对
照品溶液 ∀
吸取上述 u种溶液各约 x Λo分别点于同一硅胶 薄层
板上 o以醋酸丁酯2甲酸2水kuvΒ{Βzl上层溶剂为展开剂 o展距
约 tx ¦° o取出 o晾干 o置紫外灯kvyx ±°l下检视 ∀供试品色
谱中在与绿原酸对照品色谱相应位置上 o显相同颜色荧光斑
点 o阴性对照品在相应位置无干扰k图 ul ∀然后喷 t h ƒ ≤¨¯ v
乙醇溶液 ∀供试品色谱中在与黄芩苷色谱相应位置上 o显相
同暗绿色斑点 o阴性对照品在相应位置无干扰k图 vl ∀
2 q2 含量测定
2 q2 q1 色谱条件 色谱柱 µ²°¤¶¬¯ ⁄≥ p t kw qy °° ≅ uss
°° ox Λ°l o≤t{保护柱 o流动相乙腈2 s qsu h磷酸ktsΒ|sl o流
速 t qs °#°¬±pt o检测波长 vuz ±° o灵敏度 s qsu ƒ≥ o柱温
为室温 o进样量为 us Λ∀
#usz#
第 u|卷第 z期
ussw年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ z
∏¯¼ oussw
图 u 复方鱼腥草软胶囊中绿原酸的 ×≤鉴别
t q金银花 !鱼腥草双阴性对照品 ~u q黄芩阴性对照品 ~
v ∗ x q复方鱼腥草软胶囊 ~y q绿原酸 ~z q黄芩苷
2 q2 q2 供试溶液的制备 对照品溶液的制备 }精密称取绿
原酸对照品约 ts °ª于 ts °量瓶中 o甲醇定容 o摇匀 o备用 ∀
供试品溶液的制备 }精密称取复方鱼腥草软胶囊内容物约
s qy ª于 xs °量瓶中 o加 ys h甲醇 ux °o密塞 o超声处理 vs
°¬±o放冷 o用 ys h甲醇定容 o滤过 o取续滤液过 s qwx Λ°滤
图 v 复方鱼腥草软胶囊中黄芩苷的 ×≤鉴别
t q金银花 !鱼腥草双阴性对照品 ~u q黄芩阴性对照品 ~
v ∗ x q复方鱼腥草软胶囊 ~y q绿原酸 ~z q黄芩苷
膜 o得供试品溶液 ∀金银花 !鱼腥草双阴性对照品的制备 }取
金银花 !鱼腥草双阴性制剂 o方法同/供试品溶液的制备0 ∀
2 q2 q3 专属性试验 分别取金银花 !鱼腥草双阴性对照品
溶液 o供试品溶液 o绿原酸对照品溶液按上述色谱条件进样 o
结果供试品溶液色谱在绿原酸保留时间处有一色谱峰 o阴性
对照品溶液在该处无干扰k图 wl ∀
图 w 复方鱼腥草软胶囊阴性样品 !绿原酸对照品及样品的 °≤ 色谱图
q阴性样品 ~
q对照品 ~≤ q样品 ~t q绿原酸
2 q2 q4 线性关系考察 依次精密吸取绿原酸对照品溶液
0 qt os qu os qw os qy os q{ ot qs °o置于 ts °量瓶中 oys h甲醇
定容 o配成系列浓度溶液 o按上述色谱条件进样 o以峰面积均
值k Αl对浓度k Χl进行线性回归 o得回归方程 }Α t .ss ≅
tsz Χn v .us ≅ tsw , ρ s q||| v o线性范围 s qsts s ∗ s qtss s ª#
pt ∀
2 q2 q5 精密度试验 以浓度为 s .sws s ª#pt的绿原酸对照
品溶液分别连续进样 x次 o测定峰面积 o绿原酸的 ≥⁄分别
为 t qt h ∀
2 q2 q6 重复性试验 按/供试品溶液的制备0项下平行制备
x份供试品溶液 o于上述色谱条件进样 o测得复方鱼腥草软
胶囊中绿原酸平均含量为每粒 s qxs °ªo ≥⁄ t qu h ∀
2 q2 q7 回收率试验 精密称取已知含量的复方鱼腥草软胶
囊k批号 sutsttl内容物约 s qv ªo取 y份分别精密加入高 !
中 !低浓度的绿原酸对照品溶液 o按0供试品溶液的制备0项
下操作 o测定 o结果见表 t ∀
表 t 复方鱼腥草软胶囊中
绿原酸加样回收率试验结果k ν yl
原有量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
ξ
r h
≥⁄
r h
s qvuu s quxs s qxy| |{ qz
s qvt| s quxs s qxzv tst qs
s qvtz s qxss s q{tu || qs || qy t qts qvut s qxss s q{u{ tsu qs
s qvty t qss t qu| |z qx
s qvtz t qss t qvt || qt
2 q2 q8 样品测定 取 v 批复方鱼腥草软胶囊 k批号为
sutstt osutstu osutstvl样品 o按/供试品溶液的制备0项下平
行制备供试品溶液各 v份 o测定含量 o结果 v批样品绿原酸
每粒含量分别为 s qxt os qxt os qxs °ª∀
3 讨论
3 q1 本实验以鱼腥草药材作对照 o采用薄层色谱法鉴别了
复方鱼腥草软胶囊中的君药鱼腥草 o经多次实验验证 o该法
#vsz#
第 u|卷第 z期
ussw年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ z
∏¯¼ oussw
重现性好 o可鉴别到多个相关斑点 o为复方鱼腥草软胶囊中
鱼腥草的定性鉴别提供了一个专属性较强的方法 ∀
3 q2 同时鉴别绿原酸 !黄芩苷的薄层色谱法在银黄口服液
及银黄片的定性鉴别中已有应用≈x o但复方鱼腥草软胶囊所
含药味较多 o干扰较大 o在紫外灯下检视时 o黄芩苷的斑点难
于辨认 o因此 o为确定黄芩苷成分 o作者采用了喷 t h ƒ ≤¨¯ v乙
醇显色剂的方法 o结果黄芩苷斑点显色清晰 o方法提高了检
测灵敏度 ∀
3 q3 绿原酸是金银花的主要有效成分 o另据文献≈y 报道 o
鱼腥草药材中亦含有绿原酸 o因此 o作者以绿原酸为复方鱼
腥草软胶囊的定性 !定量指标之一 o对其进行质量控制 ∀实
验中对金银花 !鱼腥草双阴性制剂及金银花阴性制剂均进行
了考察 o结果证明 o单阴性制剂在 °≤ 色谱图上于绿原酸
峰位处仍有一小峰 o由此可见 o复方鱼腥草软胶囊中绿原酸
成分主要来源于金银花药材 o但也有一小部分来源于鱼腥草
药材 o绿原酸在鱼腥草药材中的具体含量待进一步测定 ∀
3 q4 在制备含量测定的供试品溶液时 o分别比较甲醇 !ys h
甲醇 !zs h乙醇作提取溶剂 o实验发现 ys h甲醇作溶剂时样
品色谱峰干扰小 o且对绿原酸提取回收率高 o反映了制剂中
该成分的真实含量 o故方法中采用 ys h甲醇作溶剂 ∀
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 qusss qxuv ouw{ otzz q
≈u 宋立人 o洪 恂 o丁绪亮 q现代中药学大辞典 q北京 }人民卫生
出版社 ousst qtvw{ q
≈v 杨伟峰 o腾 彦 q复方鱼腥草口服液质控项目的研究 q中国现
代应用药学杂志 ousss otzkxl }v{x q
≈w 宋宁宁 q高效液相色谱法测定复方鱼腥草颗粒中黄芩苷的含
量 q药物分析杂志 ot||| ot|kxl }vxt q
≈x 康廷国 q中成药薄层色谱鉴别 q北京 }人民卫生出版社 ot||x q
vuz q
≈y 阴 健 o郭力弓 q中药现代研究与临床应用 ´ q北京 }学苑出版
社 ot||w qwxz q
≈责任编辑 袁桂京
薄层扫描法测定活血通络颗粒剂中黄芪甲苷的含量
王秀萍 3 o曾 平 o孙 燕 o刘志华 o邓武娥 o高小霞
k兰州军区 乌鲁木齐总医院 药剂科 o新疆 乌鲁木齐 {vssssl
活血通络颗粒是由黄芪 !丹参 !当归 !赤芍 !地龙 !川芎等
多味中药组成的复方制剂 o具有益气活血 !抗凝 !降脂等功
效 ∀主要用于中风后遗症 !脑血栓 !脑动脉硬化及高血压 !高
血脂 !心绞痛等心脑血管疾病 ∀黄芪为方中君药 o黄芪甲苷
为其指标成分 o中药复方中黄芪甲苷含量测定已有文献报
道≈t ou ∀本研究参考文献方法 o建立测定活血通络颗粒中黄
芪甲苷含量的方法 o为控制本品质量打下基础 ∀
1 仪器与试药
薄层扫描仪k日本岛津 ≤≥ p |sssl o硅胶 薄层板k青岛
海洋化工厂 ots ¦° ≅ ts ¦°l o定样毛细管k美国 ⁄µ∏°²±§公
司l o电子分析天平k梅特勒2托利多仪器上海有限公司l o黄
芪 !丹参 !当归等原料药k医药公司l o黄芪甲苷对照品k中国
药品生物制品检定所l o活血通络颗粒剂k本院自制 o批号
ussusvuy oussuswts oussuswt|l ∀所用试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
2 q1 供试品溶液的制备≈t 精密称取本品 ux ªo置 tss °
容量瓶中 o用蒸馏水定容 o使其充分溶解 o抽滤 ∀滤液浓缩到
xs °o精密吸取 us °o用石油醚kux oux oux oux °l萃取 w
次 o弃去醚液 o水层再用水饱和正丁醇萃取 w次kvs ovs ous ous
≈收稿日期 ussu2s{2us
≈通讯作者 3王秀萍 oר¯ }ks||tlw||utst2uyx
°l o合并 w次萃取液用氨水振摇萃取 u次 o每次 x °o弃去
氨液 o水浴挥去正丁醇 o残渣加水 ts °溶解 o放冷 o通过
⁄tst型大孔树脂k内径 t qx ¦° o长 tu ¦°l o以水 zs °洗脱 o
弃去水液 o再用 vs h 乙醇 vs °洗脱 o弃去乙醇洗脱液 o用
zs h的乙醇 xs °洗脱 o收集洗脱液水浴蒸干 o残渣加甲醇
溶解 o并转移到 u °量瓶中定容至刻度 o摇匀 o作为供试品
溶液 ∀
2 q2 对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲苷对照品 o加甲
醇制成 t ª#pt的溶液 o作为对照品溶液 ∀
2 q3 薄层条件和扫描条件 硅胶 薄层板 otts ε 活化 t «~
以氯仿2甲醇2水ktvΒyΒul的混合溶剂k在 ts ε 以下放置过
夜l下层为展开剂 ~显色剂为 ts h的硫酸乙醇 ~显色后在 tsx
ε 烘 y °¬±o立即用同样大小的玻璃覆盖 o周围用胶布密封固
定备用 ∀双波长反射锯齿形扫描 ~扫描波长 Κ≥ xvs ±° oΚ
zss ±° o狭缝 s qw °° ≅ s qw °° o≥÷ v ∀灵敏度中 ∀
2 q4 线性关系考察 精密吸取黄芪甲苷对照品溶液 t ou o
v ow ox Λ点于同一硅胶 薄层板上 o晾干 o显色 o按上述条件
扫描测定 ∀以点样量k Ξl为横坐标 o斑点峰面积积分值k Ψl
为纵坐标 o结果表明黄芪甲苷在 t qss ∗ x qss Λª线性关系良
好 o计算得回归方程 Ψ v {zy .x| Ξ n zz| .w| , ρ s .||u y ∀
2 q5 精密度实验 精密吸取黄芪甲苷对照品 u Λo点样 o
展开 o对黄芪甲苷同一斑点重复扫描 x次 o测定其峰面积积
#wsz#
第 u|卷第 z期
ussw年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ z
∏¯¼ oussw