全 文 ： 表４ 样品含量测定结果 ％
样品
白藜芦醇 白藜芦醇苷 大黄素 大黄素苷
含量 ＲＳＤ 含量 ＲＳＤ 含量 ＲＳＤ 含量 ＲＳＤ
１ ０．５１ ６０６５ ２．００ ２６７６ ０．８９ ６５３１ １．８５ １４４４
２ ０．１９ ２．５８ ０．１５ ２．００
３ ０．２８ １．５１ ０．４９ ２．０２
４ ０．３４ ２．２４ ０．３５ １．９３
５ ０．０７ １．２９ ０．１９ １．３２
６ ０．１１ １．００ ０．１８ １．４２
７ ０．２９ １．８２ ０．３６ １．６２
８ ０．２１ １．８３ ０．３３ １．５０
９ ０．１２ ２．３９ ０．２２ １．８３
１０ ０．１１ ２．２７ ０．２２ １．６７
由于白藜芦醇与白藜芦醇苷溶液的光不稳定
性，实验需避光操作［６］。
从以往文献来看，多数提出以蒽醌类成分与
%
类成分共同作为虎杖药材质量评价的指标成分，但
多单以白藜芦醇苷或大黄素为标准对其质量进行评
价［２７］。作者以２类４种成分为标准来综合评价虎杖
药材的质量，尚属首次，虽取材有限，但结果准确可
靠，表明该法可作为虎杖药材质量评价的方法之一。
１０个不同收集地的虎杖商品药材中４种成分
的含量测定结果表明，虎杖商品药材中白藜芦醇与
白藜芦醇苷质量分数之和平均为２１１％，大黄素与
大黄素苷的和平均为２０６％，２类成分的含量相当。
其中５，６，７，８号样品即广西、广州、青海、北京收集
的虎杖样品中２类成分的和均低于平均含量，说明
质量较差。
总体而言，４种成分在不同来源的商品药材中
的含量虽有差异，但不是十分悬殊。从含量测定结
果总的趋势来看，中部地区的收集品４种成分的含
量均高于其他地区的收集品，表明药材品质的优劣
与药材的产区关系密切。
［参考文献］
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［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００５０１１２
［通讯作者］ 王亮，Ｔｅｌ：（０５９６）２９３３８９１，Ｅｍａｉｌ：ｗａｎｇｌ２３＠
１６３．ｃｏｍ
人参皂苷 Ｒｇ１脂质体制备工艺的优化
王 亮１，顾 宜２，费 燕１
（１中国人民解放军第１７５医院 药剂科，福建 漳州 ３６３０００；
２第四军医大学 西京医院 药学部，陕西 西安 ７１００３２）
人参具有大补元气，补脾益肺，生津，安神的功
效，能调节中枢神经系统兴奋和抑制过程的平衡，并
能提高学习能力。其主要成分人参皂苷基本上能代
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表人参的药效指标。药代动力学研究表明，人参皂
苷难以通过血脑屏障（ＢＢＢ）［１］。为提高脑血药浓
度，增强人参的疗效，增加人参皂苷对血脑屏障的通
透性，使人参皂苷更有效的通过 ＢＢＢ具有重要的临
床意义。
国内外研究表明［２，３］，脂质体具有优良的靶向
性，对提高血脑屏障的通透性有一定的作用，故作者
采用膜膜分散超声法制备人参皂苷 Ｒｇ１脂质体，并
用正交设计法优化处方和制备工艺条件。
１ 仪器与试药
ＲＥ－５２旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；
ＷＨ－９０Ａ微型混合器（上海亚荣生化仪器厂）；ＢＰ
－１９０Ｓ电子分析天平（德国赛多利斯天平有限公
司）；ＫＱ－２５０Ｂ超声清洗仪（昆山市超声仪器有限
公司）；ＧＬ－２０Ａ全自动高速冷冻离心机（湖南仪器
仪表总厂离心机厂）；ＪＥＭ－２０００ＥＸ透射电子显微
镜（日本电子公司）；ＳＣＬ－１０Ａ高效液相色谱仪（日
本岛津公司）；大连伯瑞集团有限公司ＫｒｏｍａｓｉｌＯＤＳ
色谱柱（４６ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ）。
人参皂苷 Ｒｇ１（第四军医大学西京医院药学部
分离纯化，纯度９７４１％）；注射用大豆磷脂（上海太
伟药业有限公司）；胆固醇（上海生物化学试剂公
司）；甲醇、氯仿（分析纯，西安化学试剂厂）；磷酸盐
缓冲液（按药典方法制备，ｐＨ６８６）。
２ 方法
２１ 影响因素和水平的确定 根据预试验及相关
资料［４７］，筛选出在人参皂苷Ｒｇ１脂质体制备过程中
对包封率和载药量有影响的３个因素，磷脂对胆固
醇的质量比（Ａ）、药物质量浓度（Ｂ）、水合介质种类
（Ｃ），每个因素选４个水平，见表１。根据正交设计
法的原理和使用原则，按表 Ｌ１６（４
５）进行试验设计，
列出试验方案见表２。
表１ 因素水平
水平
Ａ
磷脂 ∶胆固醇
／ｇ∶ｇ
Ｂ
药物质量浓度
／ｍｇ·ｍＬ－１
Ｃ
水合介质
种类
１ １∶１ １．０ 生理盐水（Ｓ）
２ ２∶１ ０．５ 纯水（Ｗ）
３ ３∶１ ０．２
磷酸盐缓冲液（Ｐ）
（ｐＨ６．８６）
４ ４∶１ ０．１ ６％葡萄糖液（Ｇ）
２２ 脂质体的制备 按表２，运用薄膜分散超声法
制备样品，即取处方量磷脂、胆固醇于５００ｍＬ圆底
表２ 正交试验结果
Ｎｏ
磷脂 ∶胆固醇
／ｇ∶ｇ
药物质
量浓度
／ｍｇ·ｍＬ－１
水合介
质种类
结果
包封率
／％
载药量
（×１０－２ｍｇ）
１ １∶１ １．０ Ｓ １８．５１ ９２．５５
２ １∶１ ０．５ Ｗ ３．３１ ８．２８
３ １∶１ ０．２ Ｐ ６．５８ ６．５８
４ １∶１ ０．１ Ｇ ６．０４ ３．０２
５ ２∶１ ０．５ Ｇ ５．０８ １２．７０
６ ２∶１ １．０ Ｐ １２．９０ ６４．５０
７ ２∶１ ０．１ Ｗ ０．９６ ０．４８
８ ２∶１ ０．２ Ｓ １７．５２ １７．５２
９ ３∶１ ０．２ Ｗ ０．８３ ０．８３
１０ ３∶１ ０．１ Ｓ ０．６８ ０．３４
１１ ３∶１ １．０ Ｇ ４．５０ ２２．４８
１２ ３∶１ ０．５ Ｐ １６．９２ ４２．３０
１３ ４∶１ ０．１ Ｐ １１．４０ ５．７０
１４ ４∶１ ０．２ Ｇ ０．０５ ０．０５
１５ ４∶１ ０．５ Ｓ １８．３７ ４５．９２
１６ ４∶１ １．０ Ｗ ７．０５ ３５．２５
烧瓶中，加一定量氯仿使溶解，于２６℃恒温水浴减
压回收溶剂使成均匀脂质膜，加入含人参皂苷 Ｒｇ１
的水合介质５ｍＬ，震荡成牛奶状脂质体混悬液，再
超声１０ｍｉｎ，即得人参皂苷Ｒｇ１脂质体。
２３ 脂质体中人参皂苷 Ｒｇ１的测定 采用研究组
已建立的测定方法［８］，流动相甲醇水（５２∶４８）；流
速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；ＵＶ检测波长 ２０３ｎｍ；进样 ２０
μＬ。线性回归方程为 Ｙ＝－１０８３×１０４＋２６５１×
１０５Ｘ，ｒ＝０９９９８，Ｙ为峰面积的平均积分值，Ｘ为对
照品进样量（ｎ＝６），平均回收率为 ９８６％，ＲＳＤ
１７％。
２４ 人参皂苷 Ｒｇ１脂质体包封率与载药量的测定
吸取混悬液于离心管中，在冷冻离心机上室温
１９０００ｒ·ｍｉｎ－１离心３０ｍｉｎ，吸取上清液，ＨＰＬＣ测
定人参皂苷 Ｒｇ１的含量。包封率 ＝（Ｃ总 －Ｃ游）／
Ｃ总；载药量＝（Ｃ总 －Ｃ游）／Ｃ脂（Ｃ总为混悬液中人参
皂苷Ｒｇ１的总量，Ｃ游为上清液中人参皂苷 Ｒｇ１的量，
Ｃ脂为磷脂膜的量）。
３ 结果
按随机顺序制备各试验条件下的人参皂苷 Ｒｇ１
脂质体，并将其按上述条件与方法测定包封率和载
药量，结果见表２。分别以包封率和载药量为指标
进行方差，见表３，４。以包封率与载药量为综合指
标，将包封率和载药量各数据除以所在组所有数据
之和得其所占比例，再以各次试验的包封率和载药
量两数据所占比例之和作为综合评定结果，进行方
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差分析，结果见表５。
表３ 以包封率为指标的方差分析表
差异来源 ＳＳ Ｖ ＭＳ Ｆ Ｐ
Ａ ３２．５０ ３ １０．８３ ０．３６ ＞０．０５
Ｂ １１７．７３ ３ ３９．２４ １．３１ ＞０．０５
Ｃ ３６０．３０ ３ １２０．１０ ４．００ ＞０．０５
误差 １８０．０７ ６ ３０．０１
注：Ｆ０．０５（３，６）＝４．７６
表４ 以载药量为指标的方差分析表
差异来源 ＳＳ Ｖ ＭＳ Ｆ Ｐ
Ａ ２５７．９４ ３ ８５．９８ ０．３３ ＞０．０５
Ｂ ６６５９．８９ ３ ２２１９．９６ ８．５７ ＜０．０５
Ｃ ２４９０．５６ ３ ８３０．１９ ３．２１ ＞０．０５
误差 １５５３．３２ ６ ２５８．８９
注：Ｆ０．０５（３，６）＝４．７６
表５ 以包封率与载药量为综合指标方差分析表
差异来源 ＳＳ Ｖ ＭＳ Ｆ Ｐ
Ａ ０．００６７９５ ３ ０．００２２６５ ０．４０ ＞０．０５
Ｂ ０．０９１６０８ ３ ０．０３０５３６ ５．３４ ＜０．０５
Ｃ ０．０８０２５３ ３ ０．０２６７５１ ４．７８ ＜０．０５
误差 ０．０３３５７６ ６ ０．００５５９６
注：Ｆ０．０５（３，６）＝４．７６
根据正交试验设计的试验结果与方差分析，以
包封率为指标看，３个因素的差异均无统计学意义；
以载药量为指标看，３因素中只有药物浓度差异具
有统计学意义，且最优质量浓度为１ｍｇ·ｍＬ－１；以
包封率与载药量为综合指标看，药物浓度与水合介
质种类对包封率和载药量的影响有统计学差异，而
磷脂对胆固醇的质量比无统计学差异。因此初步筛
选出人参皂苷Ｒｇ１脂质体的优化制备条件为磷脂对
胆固醇质量比为４∶１、人参皂苷Ｒｇ１质量浓度为１ｍｇ
·ｍＬ－１、水合介质为生理盐水。
依据试验结果，按优化制备条件制备人参皂苷
Ｒｇ１脂质体，即取磷脂 ８０ｍｇ、胆固醇 ２０ｍｇ于 ５００
ｍＬ圆底烧瓶中，加３０ｍＬ氯仿使之溶解，于２５～３０
℃恒温水浴减压回收溶剂使成均匀脂质膜，加入含
人参皂苷Ｒｇ１１ｍｇ·ｍＬ
－１的生理盐水５ｍＬ，震荡成
牛奶状脂质体混悬液，超声１０ｍｉｎ，离心，ＨＰＬＣ测
定得其包封率为２２０％，载药量为每１００ｍｇ磷脂
膜含１１ｍｇ人参皂苷 Ｒｇ１。透射电镜采用磷钨酸
负染法［１３］进行，观察脂质体呈圆球状颗粒，轮廓清
晰，平均粒径约为２９８ｎｍ。
４ 讨论
脂质体的制备方法有多种［９］，主要包括薄膜分
散法、超声法等。这２种方法制得的脂质体大小不
均一，且稳定性欠佳。采用２种相结合的方法，经试
验制备的脂质体不但包封率高，且粒径较小，分布均
一性好。
在包封率的测定中，离心速度要尽可能高，且要
控制温度在室温范围内，转速太低难将颗粒小的脂
质体离至下层，温度升高易使脂质体破碎而影响包
封率的测定。
本实验对磷脂对胆固醇的质量比、药物质量浓
度、水合介质种类 ３个因素进行正交筛选，结果表
明：单独对两指标进行分析，３因素的水平取得不够
合理，致使实验分析无显著意义。就本实验所得数
据而言，以两指标综合分析，药物浓度与水合介质种
类对包封率和载药量的影响有统计学差异，而磷脂
对胆固醇的质量比无统计学差异。磷脂胆固纯质量
比对包封率、载药量无统计学差异，可能与成膜机理
有关，胆固醇的加入具有稳定磷脂双分子层膜的作
用，加入定量与过量的胆固醇对成膜无影响。包封
率一定的情况下，药物浓度对载药量的影响最大，浓
度越高载药量越高。水合介质种类的影响可能与其
介质中电荷的多少和分布有关，加入后震荡磷脂膜
包裹药物成颗粒，不同介质中颗粒的大小与分布均
匀程度有不同。
［参考文献］
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［责任编辑 鲍 雷］
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