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Comparative Study on Angiogenesis Effect of Astragalus membranaceus and Angelica sinensis in Chick Embryo Choriollantoic Membrane

黄芪、当归配伍后促鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的药效比较研究



全 文 :黄芪 !当归配伍后促鸡胚绒毛
尿囊膜血管生成的药效比较研究
雷 燕 o王军辉 o陈可冀
k中国中医研究院 西苑医院 心血管病研究室 o北京 tsss|tl
≈摘要  目的 }探讨黄芪 !当归不同配伍对鸡胚绒毛尿囊膜k¦«²µ¬²¤¯ ¤¯±·²¬¦ °¨°¥µ¤±¨ o ≤ „  l新生血管生成的
影响 ∀方法 }制备 ≤ „  模型 o观察应用黄芪与当归 xΒt配比的含药血清后 ≤ „  血管生成的情况 ∀结果 }黄芪与当
归合用后 o在血管生成表现以及血管计数方面 o均明显优于生理盐水对照组及其他配比组 ∀结论 }黄芪与当归按 xΒ
t配伍具有较好的促进 ≤ „  新生血管生成的作用 o表明当归补血汤原方配比为最佳组合 o提示中医自古倡导的方
剂配伍原则具有一定的科学内涵 ∀
≈关键词  鸡胚绒毛尿囊膜 ~血管新生 ~当归补血汤 ~黄芪 ~当归
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvls|2s{zy2sv
血管生成k¤±ª¬²ª¨ ±¨ ¶¬¶l是指从原血管床中长出
新的毛细血管的过程 o它在胚胎发育 !创伤愈合 !组
织再生和修复 !侧支循环建立 !炎症过程及肿瘤组织
等生理和病理过程中起重要作用≈t  ∀探讨血管生成
的发生机理和研制促进或抑制血管生成病变的治疗
方法和药物是近年来医学研究的热点课题 ∀本试验
的目的在于利用鸡胚绒毛尿囊膜k≤ „  l模型评价
补益中药的血管生成活性 o探讨当归补血汤中益气
药与养血药的配伍规律 ∀
1 材料和方法
1 q1 材料
选择北京白鸡受精种蛋 o购自平谷种禽养殖场 o
每枚重 xs ∗ yx ªo种蛋产后 t周内用做实验 ~混合纤
维素酯微孔滤膜ks qwx Λ°l o由上海兴亚净化材料厂
生产 ~定性滤纸 o杭州富阳特种纸厂产品 ∀
1 q2 药物
当归补血汤中黄芪 Αστραγαλυσ µε µ βραναχευσ
kƒ¬¶¦«l …∏±ª¨ o当归 Ανγελιχασινενσισk’ ¬¯√ ql ⁄¬¨ ¶¯o
均系干品 o由中国中医研究院中药所黄璐琦研究员
鉴定为正品 ∀黄芪 !当归按 tΒtktx ªΒtx ªr饮片 o下
同l ouΒtkvs ªΒtx ªl ovΒtkvs ªΒts ªl oxΒtkvs ªΒy
ªl ozΒtkvx ªΒx ªl otsΒtkvs ªΒv ªl otΒuktx ªΒvs ªl o
tΒvkts ªΒvs ªl otΒxky ªΒvs ªl otΒzkx ªΒvx ªl otΒts
≈收稿日期  ussu2tu2sw
≈基金项目  国家重大基础研究/ |zv0课题kussssxzstsl
≈通讯作者  ר¯ }kstslywstv|w{
kv ªΒvs ªl等不同比例配伍 o水煎 u次 o煎液过滤 o混
合后加热浓缩至所需的浓度 ow ε 保存备用 ∀
1 q3 含药血清制备
参考文献方法≈u  ∀雄性 • ¬¶·¤µ大鼠 o体重为
kuss ? txl ªo随机分为 tt组 o每组 v只 ∀按体重灌
胃给予不同配比的黄芪 !当归合煎液k相当于人临床
用药剂量的 x倍l o一日 u次 ov §后腹主动脉取血 o
离心处理后 o取血清 u °左右 o置于无菌试管中 oxy
ε 灭活 vs °¬±o密封 op us ε 冰箱中冻存 ∀
1 q4 鸡胚孵育
种蛋以 t ϕ新洁尔灭水溶液浸洗揩干 o气室朝
上 o置于kvz ? s qxl ε 恒温箱中孵化培养 o内置湿盘
保持相对湿度在 yx h o每天翻蛋 u次 ov §后于透射
灯下观察种蛋生长情况 o剔除未受精卵 ∀
1 q5 ≤ „  模型制备≈v 
取 z §龄鸡胚 o随机分组 o每组 tx枚 o碘伏消毒
蛋气室表面 o用砂轮和解剖针启开约 t ¦°u 的窗口 o
暴露 ≤ „  o无菌胶带封口 o继续孵化 ∀隔日 o取直径
约 s qx ¦° 的混合纤维素微孔滤膜片k预先高压灭
菌l作为载体置于 ≤ „  上 o分别滴加不同配比的含
药血清 us ˏ于载体上 o对照组加 us ˏ生理盐水
k‘≥l o密封后继续孵育 zu «o以甲醇和丙酮混合液
ktΒtl室温固定 tx °¬±o以载体为中心剪下 ≤ „  约
v ¦°u o蒸馏水洗 v次 o展片于滤纸上 o晾干 ∀
1 q6 结果观察
以滤纸为背景 o体视显微镜下查看载体周围的
#yz{#
第 u{卷第 |期
ussv年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ |≥ ³¨·¨°¥¨µoussv
血管数 o比较各组血管生成 o用 ≥·¤·¨ w qs软件包分
析方差 ∀
2 结果
2 q1 ≤ „  血管生成表现形式
≤ „  自然状态的血管生成呈叶脉状 o给药组在
载体周围可见到不同程度放射状密集生长的血管
网 o而 ‘≥对照组无特异性密集血管生成 ∀提示给
药组比对照组血管密集程度增加k图 tl ∀
图 t 对照组与给药组 ≤ „  血管生成情况
„ q‘≥对照组 …q给药组
2 q2 ≤ „  血管生成计数
镜下血管计数表明 o在黄芪和当归的 tt种配比
关系中 o以黄芪与当归 xΒt组的促血管生成作用最
强 o与 ‘≥对照组比较差异有显著性k Π s qsxl ∀该
组大 !中 !小剂量的促血管生成药效观察 o也显示出
较好的量效关系 ∀实验结果如图 u所示 ∀
图 u 芪归不同配比促血管生成活性比较
¤qtΒt o¥quΒt o¦qvΒt o§qxΒt o¨qzΒt o©qtsΒt o
ªqtΒu o«qtΒv o¬qtΒx o­qtΒz o®qtΒts
3 §组 o¨ 组 o©组与 ‘≥对照组比 oΠ s qsx
给药组在血管生成表现形式及血管计数方面均
好于对照组 o表明补益中药对血管生成有促进作用 ∀
3 讨论
当归补血汤始载于李东垣的5内外伤辨惑论6 o
由黄芪与当归按 xΒt配伍而成 o为经典的益气生血
复方 ∀方中黄芪甘温补气 o当归补血和血 o二药合
用 o气血双调 o补气生血 o气足则血旺 ∀临床上常用
于劳力性心绞痛和心肌梗死后正虚邪恋 !气血双亏 !
心失所养等证的治疗 ∀现代药理研究表明≈w  o两药
均有增强机体免疫功能 o抗氧化与抗衰老 o扩张冠
脉 o促进微循环 o改善心肌缺血 o增强心肌抗缺氧能
力 o降低耗氧量 o减轻心肌损伤 o抑制血小板聚集 o以
及增强机体造血功能等作用 ∀
已知黄芪 !当归对缺血性心脏病具有明确的治
疗作用 o其机理是否与血管生成有关 o这是我们应用
≤ „  模型的目的所在 ∀本研究将黄芪 !当归两药按
不同比例配伍 o运用 ≤ „  模型和中药复方血清药理
学方法 o以 ≤ „  血管生成数量为指标观察不同比例
黄芪 !当归配伍对血管生成的影响 o结果 tt种配比
关系 o以 xΒt的比例配伍效果最佳 o表明原方当归补
血汤为最佳配伍 ∀本研究结果揭示了古代医家关于
本方黄芪与当归配伍的科学性 o同时也为寻找具有
调节血管生成作用的中药复方提供了实验依据 ∀
≈参考文献 
≈t  ’ . • ¬¨¯¯¼  ≥ o ‹²¯ °ªµ¨± o ≥«¬±ª ≠ o ·¨¤¯ q „±ª¬²¶·¤·¬±}¤
‘²√¨¯ „±ª¬²ª¨ ±¨ ¶¬¶Œ±«¬¥¬·²µ·«¤·  §¨¬¤·¨¶·«¨ ≥∏³³µ¨¶¶¬²± ²©
 ·¨¤¶·¤¶¬¶¥¼ ¤ ¨ º¬¶∏±ª ≤¤µ¦¬±²°¤q≤¨¯¯ ot||w oz| }vtx q
≈u  雷 燕 o陈可冀 o李中文 o等 q血府逐瘀浓缩丸抗血小板活化的
临床疗效与体外血清药理作用的相关性研究 q中国中西医结合
杂志 oussu ouukwl }uzs q
≈v  张树成 o吴志奎 o王 蕾 o等 q研究中药血管生成活性和作用的
鸡胚绒毛尿囊膜实验模型的应用 q中国中医基础医学杂志 o
t||| oxkxl }ty q
≈w  王浴生 o邓文龙 o薛春生 q中药药理与应用 q第二版 q北京 }人民
卫生出版社 ot||{ q|{u owv| q
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第 u{卷第 |期
ussv年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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Χοµ παρατιϖε Στυδψ ον Ανγιογενεσισ Εφφεχτ οφ Αστραγαλυσ
µεµβραναχευσ ανδ Ανγελιχα σινενσισιν Χηιχκ Ε µ βρψο Χηοριολλαντοιχ Μεµ βρανε
∞Œ ≠¤± o • „‘Š ∏±2«∏¬o≤ ‹∞‘ Ž¨2­¬
k⁄¨ ³¤µ·° ±¨·²© ≤¤µ§¬²√¤¶¦∏¯¤µ⁄¬¶¨¤¶¨¶o ÷¬¼∏¤± ‹²¶³¬·¤¯ o ≤«¬±¤ „¦¤§¨ °¼ ²© ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨  §¨¬¦¬±¨ o …¨ ¬­¬±ªtsss|t o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¬¨³¯²µ¨ ·«¨ ¤±ª¬²ª¨ ±¨ ¶¬¶ ©¨©¨ ¦·²© Αστραγαλυσ µε µ βραναχευ󤱧 Ανγελιχασινενσισ º¬·«§¬©©¨ µ¨±·µ¤2
·¬²¬± ¦«¬¦®¨°¥µ¼²¦«²µ¬²¤¯ ¤¯±·²¬¦°¨°¥µ¤±¨ k≤ „  l q Μετηοδ : ≤«¬¦®¨ ± ≤ „  °²§¨¯ º¤¶¤§²³·¨§q × «¨ µ¤·¥¯²²§¶¨µ∏° ¦²±·¤¬±¬±ª
§¬©©¨ µ¨±·µ¤·¬²²© Αστραγαλυσ µε µ βραναχευ󤱧 Ανγελιχασινενσισ º¤¶³∏·§¤¬¯¼¬±·²v2§¤¼¦«¬¦®¨°¥µ¼²q≤ „ ¶¤±§≤ „  ¤±ª¬²ª¨ ±2
¶¨¬¶º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨¤·zu «¤©·¨µ¬±¦∏¥¤·¬²±q Ρεσυλτ : …¨ ··¨µ ©¨©¨ ¦·¶º µ¨¨ ²¥·¤¬±¨ §¬±·«¨ ©²µ°¤·¬²± ²©¦¤³¬¯¯¤µ¼ ¤±§·«¨ ¦²∏±·²© ¥¯²²§
√ ¶¨¶¨¯¬± ªµ²∏³¶·µ¨¤·¨§¥¼ Αστραγαλυσ µε µ ηραναχευ󤱧 Ανγελιχασινενσι󬱷«¨ µ¤·¬²²©©¬√¨·²²±¨ o¦²°³¤µ¨§ º¬·«·«¨ ‘≥ ¦²±·µ²¯
ªµ²∏³¤±§·«¨ ²·«¨µµ¤·¬² ªµ²∏³¶²© Αστραγαλυσ µε µ ηραναχευσ ¤±§ Ανγελιχα σινενσισq Χονχλυσιον : Αστραγαλυσ µε µ ηραναχευσ ¤±§
Ανγελιχα σινενσισ¬± xΒt µ¤·¬² «¤√¨¦¨µ·¤¬± ³µ²°²·¬√¨ ©¨©¨ ¦·²±·«¨ ©²µ°¤·¬²± ²©¦¤³¬¯¯¤µ¼ q× «¨ ⁄¤±ªª∏¬…∏¬∏¨ ⁄¨ ¦²¦·¬²± «¤¶·«¨ ¥¨¶·
µ¤·¬²q
[ Κεψ ωορδσ] ¦«²µ¬²¤¯ ¤¯±·²¬¦°¨°¥µ¤±¨ k≤ „  l ~¤±ª¬²ª¨ ±¨ ¶¬¶~⁄¤±ªª∏¬…∏¬∏¨ ⁄¨ ¦²¦·¬²±~Αστραγαλυσ µε µ βραναχευσ; Ανγελι2
χα σινενσισ ≈责任编辑 古云霞 
征订启事
5中国实验方剂学杂志6是经国家科技部批准 o由国家中医药管理局主管 o中国中医研究院中药研究所和中国中西医结合
学会中药专业委员会主办的国家级专业性学术刊物 o系/中国科技核心0期刊 ~/中国学术期刊综合评价数据库0来源期刊 ~/中
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学 !药物动力学 !药物化学 !制剂学 !质量分析 !配伍研究 !临床研究 !学术专论以及方剂主要组成药物的研究结果与最新进展 ∀
双月刊 oty开本 oyw页 o标准刊号 Œ≥≥‘tssx2||sv ~≤ ‘tt2vw|xr• ∀每期定价 {元 o全年 w{元 ∀国内外公开发行 o邮发代号 u2
wtz ~国外代号 …wyxx ∀邮购地址 }北京市东直门内北新仓 t{号 o5中国实验方剂学杂志6编辑部 o邮编 }tsszss o联系人 }何希
荣 o电话 }kstslywstwwtt转 u{w| ∀
5上海中医药杂志6是由上海中医药大学 !上海市中医药学会主办的中医学术期刊 o月刊 o大 ty开 o国际标准刊号 Œ≥≥‘
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期刊 o国内定价每期 y元 o全年 zu元 ∀国内订阅代号 w2tv o全国各地邮局均可订购 ∀国外代号 2twt o中国国际图书贸易总公
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安校区l5上海中医药杂志6编辑部收 ∀邮编 usssvu o电话ksutlxwuvtuzw o传真ksutlywtzu|vw o电子信箱­¦¯ªµ¤¦¨ ƒ tyv q¦²° ∀
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是从事中草药科研 !生产 !检验 !教学 !市场营销 !信息服务等部门必备的检索工具 ∀双月刊 o每期定价 vs元 o全年订价 t{s元 ∀
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