全 文 ：#研究报告#
不同品种车前子中多糖含量比较
付志红 o谢明勇 3 o聂少平 o彭日煌 o陈军辉
k南昌大学 食品科学教育部重点实验室 o江西 南昌 vvsswzl
车前子为车前科植物车前的干燥成熟种子 ∀车前科有
v属 o约 uzs种 o车前属 Πλανταγο约有 uyx种 o广布于世界各
地≈t ∀目前在国际市场上售量较大的车前子为法车前 Π .
αφρα !印度车前 Π. οϖατα的种子 ∀长叶车前和海滨车前的种
子在朝鲜也作为车前子入药≈u ∀我国只有车前属 o5中国种
子植物科属辞典6记载有 tv种≈t o各地均产 ∀ 5中国药典6记
载≈v o车前药用的只有 u种 o即车前 Π. ασιατιχα qo又称大粒
车前和平车前 Π. δεπρεσσα • ¬¯¯§qo又称小粒车前 ∀目前我国
对车前子的应用多限于利尿通淋 o认为桃叶珊瑚苷是其主要
活性成分 o而将其种皮中含有的大量粘液质视为杂质弃而不
用 ∀为发掘我国车前子的临床新用 o合理开发和利用这一自
然资源 o笔者对5中国药典6记载作为药用的车前和平车前的
种子中的多糖含量进行了比较研究 ∀
1 实验材料
样品 }江西吉安产大粒车前子和东北产小粒车前子 o由
江西省医药保健品进出口公司提供 o均经江西中医学院范崔
生教授鉴定 ~仪器 zut分光光度计k上海第三分析仪器厂l o
ƒttsw电子天平k上海精天电子仪器厂l o电子恒温不锈钢
水浴锅k上海宏兴机械仪器实业制造公司l o旋转蒸发器k上
海申生科技有限公司l op {u型真空干燥箱k上海实验仪
器总厂l o÷ p µ型离心沉淀机k上海医用分析仪器厂l ~试
剂无水乙醇 !丙酮 !乙醚 !氯仿 !正丁醇 o均为国产分析纯 ∀
2 实验方法与结果
2 q1 车前子多糖的提取与精制
称取已干燥的车前子 vs ªo置索氏提取器中 o加入石油
醚k沸程 ys ∗ |s ε ltss °o|s ε 回流提取 t «脱脂 o抽滤 o
滤渣挥干溶剂后 o加 {s h乙醇 tss °o|x ε 水浴回流 t «o重
复提 t次 o双层滤布过滤 o滤渣加 wss °蒸馏水 o沸水浴回
流提取 t «o间歇搅拌 o双层滤布过滤 o滤渣加 uss °蒸馏
水 o沸水浴再回流提取 t «o间歇搅拌 o过滤 o合并 u次滤液 o
离心分离kw sss µ#°¬±p t ots °¬±l o≥¨ √¤ª¨ 法除蛋白 o反复进行
v次至无蛋白 o然后用流动自来水透析 w{ «o蒸馏水透析 uw
«o透析液真空浓缩kys ε oxs µ#°¬±p t o真空度 s qs|x °¤l至
tss °o浓缩液中加入无水乙醇使乙醇浓度达 zs h o于 w ε
冰箱中醇沉过夜 o再离心分离kw sss µ#°¬±p t ots °¬±l o滤渣
≈收稿日期 ussv2s|2t{
≈通讯作者 3谢明勇 oר¯ }ksz|tl{vsxwt{
依次用无水乙醇 !丙酮 !乙醚各洗u次 o真空干燥kxx ε o
s qs|x °¤l至恒重 o即得精制车前子多糖 ∀以江西吉安产大
粒车前子 vsª制得精制车前子多糖 t qy{|uª o得率为
x qyv h ∀留待备用 ∀
2 q2 标准曲线的绘制≈w
2 q2 q1 标准溶液的配制 精密称取 tsx ε 干燥至恒重的葡
萄糖标准品 s quy| u ªo置于 uxs °容量瓶中 o加蒸馏水溶解
并稀释至刻度 o配成 t qszy { ª#pt的标准溶液 o精确移取此
溶液取 u qx ox ots otx ous °分别置于 tss °容量瓶中稀释
至刻度 o摇匀 o配成系列标准溶液 ∀
2 q2 q2 蒽酮 ∃ 硫酸试液的配制 称取 s qvv ª蒽酮 o加 tss
°浓硫酸 o置于棕色瓶中 o混合摇匀置于冰箱中k现配现
用l ∀
2 q2 q3 标准曲线的制备 分别准确移取 t °系列标准溶
液于具塞试管中 o以 t °蒸馏水作空白 o每管再加入 w °
蒽酮2硫酸试液 o立即摇匀 o置于冰水浴中 o然后一起置于沸
水浴中加热 z °¬±o之后用流动自来水迅速冷却至室温 o放置
ts °¬±后 o于 yus ±°处测定吸光度 o以吸光度k Αl对葡萄糖
浓度k Χl作回归处理 o得回归方程 }Χ s .ssxxx n s .uyy Α ,
ρ s q||| v ∀
2 q2 q3 换算因子的测定 精密称取 xx ε 真空干燥至恒重
的精制车前子多糖 us °ªo置于 xs °容量瓶中 o加蒸馏水溶
解并稀释至刻度 o摇匀 o制得车前子多糖贮备液 o蒽酮2硫酸
比色法测定其吸光度k Αl o由回归方程求出此精制车前子多
糖贮备液中葡萄糖浓度 o测得其葡萄糖含量 o按下式计算换
算因子 ∀
φ Ωrk Χ# ∆l kt2tl
式中 }Ω为称取多糖的重量 °ªoΧ为精制车前子多糖贮
备液中葡萄糖浓度 ª#pt o∆为多糖的稀释因素 °∀
因车前子多糖干燥后溶解性降低 o故按 2 q2 q1 中的方法
制得多糖透析液真空浓缩后取等量 us °浓缩液 u份 o经醇
沉洗涤后 o一份直接加蒸馏水溶解k复水性稍好l o定容 o比
色 o测定多糖含量 ~另一份真空干燥至恒重 o称得精制车前子
多糖的干重 o由二者计算平均换算因子 ∀
对江西吉安产大粒车前子 o将真空干燥的多糖溶于水 o
测得换算因子 φ u qwt| ~利用等体积多糖提取液 o醇沉洗涤
后 o一份直接加蒸馏水溶解 o另一份真空干燥至恒重 o测得换
算因子分别为 φ u qwxz o则 φ u qwv{ ∀其他车前子多糖的
#t{x#
第 u|卷第 y期
ussw年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ y∏±¨ oussw
换算因子 φo结果吉安大粒车前子为 u qwv{ o东北小粒车前子
为 t q|wz s ∀
2 q2 q4 样品中车前子多糖含量的测定
2 q2 q4 q1 样品溶液的制备 精密称取车前子样品 x ªo加入
{s h乙醇 tss °o|x ε 水浴回流 t «o趁热抽滤 o滤渣用 {s h
热乙醇洗 u次kvs °≅ ul o再重复 t次 ∀挥干溶剂后 o滤渣
连同滤纸置于烧杯中 o加 tss °蒸馏水 ys ε 水浴温浸 t «o
提取 x次直至提取液中多糖含量用蒽酮2硫酸比色法检测时
非常低时为止 o合并滤液 o离心分离kw sss µ#°¬±p t ots °¬±l o
上清液置于 xss °容量瓶中 o用少量蒸馏水洗涤残渣 o洗液
与上清液合并以蒸馏水定容至刻度 o用移液管移取 ts °溶
液置于 xs °容量瓶中 o以蒸馏水定容至刻度 o摇匀备用 ∀
2 q2 q4 q2 样品中多糖含量的测定 精密吸取 2 q2 q4 q1 所得
样品溶液 t °于具塞试管中 o按照 2 q2 q2 q3 下的方法测定
吸光度k Αl o由回归方程计算供试液中葡萄糖浓度k Χl o按下
式计算样品中车前子多糖的含量 ∀
样品中车前子多糖的含量k h l Χ# ∆#φ/ Ω ≅ tss kt2ul
式中 }≤为供试液中葡萄糖浓度k°ª#°ptl o∆ 为多糖
的稀释因素 oφ为换算因子 oΩ为供试车前子的质量k°ªl ∀
2 q2 q5 重现性试验 精密称取 x份江西吉安产大粒车前子
各 x ªo按照 2 q2 q4 q1 下的方法同时制备 x份样品溶液 ∀精密
移取各样品溶液各 t °o分别置于具塞试管中 o按照 2 q2 q2 q
3下的测定方法测定吸光度k Αl o计算车前子多糖的含量 o检
验此测定方法的重现性 o结果车前子多糖含量的平均值为
{ qtz{ h o相对标准偏差 ≥⁄ u qv{ h k ν xl ∀
2 q2 q6 稳定性试验 精密吸取按 2 q2 q4 q1 中样品溶液制备
方法制备的江西吉安产大粒车前子提取液 t °于具塞试管
中 o按照 2 q2 q2 q3 下的测定方法测定吸光度k Αl o每隔 u «时
测定 t次 o连续 { «时考察其稳定性 ∀结果提取液显色后吸
光度在 { «内无明显变化 o其吸光度平均值为 s qu{s u o相对
标准偏差 ≥⁄ t qyw h ∀
2 q2 q7 加样回收率试验 精密称取 x份江西吉安产大粒车
前子各 u qx ªo加入精制车前子多糖约 uss °ªo按照 2 q2 q4 q1
样品溶液的制备和 2 q2 q2 q3 下的测定方法操作 o测定吸光度
k Αl o据2 q2 q5的结果 o该车前子中多糖的平均含量为
| qt{ h o计算回收率 ∀结果见表 t ∀
2 q2 q8 不同样品的车前子中多糖含量的比较 精密称取所
采集的各种车前子样品 o各 v份 o按 2 q2 q4 q1 样品溶液的制
备和 2 q2 q2 q3 下的测定方法操作 o测定吸光度kΑl o从回归方
程中计算供试液中葡萄糖浓度k Χl o据式kt2tl和式kt2ul计
算出样品中多糖的含量 ∀结果见表 u ∀
表 t 加样回收率测定结果k ν vl
取样量
rª
原含量
rª
加样量
rª
测得量
rª
回收率
r h
平均值
r h
≥⁄
r h
u qxsv t s qusw z s qust y s qwss x |z qt
u qw|z y s qusw v s qusw z s qws{ | || q|
u qxtt { s qusx w s qusv v s qwsx y |{ qx |z q{ t qwt
u qxs| z s qusx u s qusu | s qwst w |y qz
u qw|t | s qusv { s quss w s qv|z { |y q{
表 u 不同车前子中多糖含量的比较k ν vl
产地 含量r h ≥⁄r h
吉安大粒车前k生品l | qtx u quy
吉安大粒车前k盐炒l y qyv t qwv
东北小粒车前k生品l y qyt t qtu
东北小粒车前k盐炒l y qwx u qvy
3 小结
3 q1 多糖含量的测定有苯酚2硫酸法 !地衣酚2硫酸法 !≥²°²2
ª¼¬2¨ ¶¯²±法蒽酮2硫酸法等多种方法 ∀本实验是利用多糖在
浓硫酸作用下 o水解生成单糖 o并迅速脱水生成羟甲基糠醛 o
羟甲基糠醛与蒽酮缩合成蓝色化合物 o该化合物颜色深浅与
糖的浓度成正比 ∀实验表明 o此法简便 o且供试液在 { «内
显色稳定 o重现性较好 ∀但要注意实验前必须先用 {s h 乙
醇回流提取除去样品中的单糖 !双糖 !低聚糖 !苷类 !生物碱
及醇溶性蛋白等干扰性成分 ∀
3 q2 测定结果表明 o车前子多糖是车前子中含量较高的一
种成分 ∀同属不同品种的车前子其多糖含量存在较大差异 o
吉安大粒车前k生品l的多糖含量为k| qtx ? s quszl h o东北
小粒车前k生品l的多糖含量为ky qyt ? s qszwl h o由此可见 o
大粒车前的含量高于小粒车前 ∀从表 u结果也可以看出 o车
前子中多糖含量因盐炒后下降 o其原因有待进一步考察 ∀
3 q3 车前在我国分布广泛 o资源丰富 ∀江西省的吉安 !吉
水 !泰和一带是的大粒车前子的主产地≈x o漫山遍野都可生
长 o原料易得 o可作为开发植物多糖的主要原料之一 ∀
≈参考文献
≈t 候宽昭 q中国种子植物科属辞典 q北京 }科学出版社 ot|{u qu{v q
≈u 郑太坤 o王 华 o王秀英 q中药车前的研究概况 q辽宁中医杂
志 ot|{x ok{l }wt q
≈v 中国药典 q一部 qt||s qw| q
≈w 张惟杰 q糖复合物生化研究技术 q第二版 q杭州 }浙江大学出版
社 ot||{ qtu q
≈x 李 诚 q车前子现象剖析 q中药事业报 ot||{2ts2t|ku版l q
≈责任编辑 王康正
#u{x#
第 u|卷第 y期
ussw年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ y∏±¨ oussw