全 文 :红景天提取物对初老大鼠海马中
神经生长因子和脑源性神经营养因子含量影响
金沈锐t 3 o秦旭华u
kt q成都中医药大学 基础医学院 生物化学与分子生物学教研室 o四川 成都 ytsszx ~
u q成都中医药大学 药学院 中药教研室 o四川 成都 ytsszxl
红景天为景天科红景天属植物 o自古以来红景天作为强
壮良药在藏汉民间广泛使用 o关于红景天的现代研究始于 us
世纪 zs年代 o前苏联学者将红景天定为 / 适应原0样物质 o并
报告具有抗缺氧 !抗疲劳 !抗辐射等药理作用 ∀近年来 o随着
对红景天研究的不断深入 o发现它对多种因素所致的记忆障
碍有对抗作用 o可促进记忆改善≈t2v o但对其改善记忆的机制
涉及不多 ∀本研究通过 ∞≥方法来测定初老大鼠海马内神
经生长因子kƒl !脑源性神经营养因子k
⁄ƒl含量在给予
红景天 wx §后的变化 o从神经营养因子的角度来探讨红景天
改善记忆力的作用机理 ∀
1 材料与方法
1 q1 药物与试剂 红景天浸膏粉的制备 o采用红景天根茎破
碎 !烘干 !粉碎kws目l后 o用 ts倍量 zs h的乙醇在 {s ε 水浴
中回流浸提 vs °¬±o重复 v 次 o合并提取液 o用筛绢kwss目l过
滤 o减压蒸馏乙醇 ot xss µ#°¬±p t离心 ts °¬±o抽滤 o滤液浓缩
干燥后得红景天浸膏粉 ∀实验时用蒸馏水将红景天浸膏粉配
制为不同浓度的混悬液予动物灌胃使用 ~ƒ ∞°¤¬和
⁄ƒ
∞°¤¬免疫分析试剂盒为美国 °µ²° ª¨¤公司产品 ∀
1 q2 动物 us ∗ uu月龄 ≥⁄大鼠 o雄性 o体重 wxs ∗ yss ªo由
成都中医药大学实验动物中心提供 ∀
1 q3 仪器 美国 ׫¨µ°²¤¥¶¼¶·¨°¶∏¯·¬¶®¤± v全自动酶标
仪 ~׫¨µ°²¤¥¶¼¶·¨°¶ • ¨¯ º¯¤¶«wu 全自动洗板机 ∀
1 q4 方法
1 q4 q1 分组 取初老大鼠 vs只按体重分层随机分为 v组 o
每组 ts只 o分别设为初老空白对照组 !红景天高 !低剂量组 ∀
1 q4 q2 给药 红景天高剂量组按每日人用量的 tw倍 o即每
日用 s qvy ª# ®ªp t剂量予大鼠灌胃 ~红景天低剂量组按每日人
用量的 v qx倍 o即每日用 s qs| ª#®ªp t剂量予大鼠灌胃 ~初老空
白对照组予等量生理盐水灌胃 ~连续灌胃给药 wx §∀
1 q4 q3 取材 于末次给药 t «后 o用 u h 的戊巴比妥将大鼠
深度麻醉后 o经主动脉插管 o用 uxs °生理盐水快速灌注后 o
断头取出大鼠脑组织 o挑出大脑内海马条带 o置于预冷的生理
盐水中 o制备海马组织匀浆 o将组织匀浆 v sss µ#°¬±p t离心
后 o取上清液备用 ∀
≈收稿日期 ussv2tu2sw
≈通讯作者 3金沈锐 oר¯ }ksu{l{{sxx{|w o ∞2°¤¬¯}¬±¶«¨ ±µ ¶²2
«∏q¦²°
1 q4 q4 测定 采用酶联免疫吸附实验k简称 ∞≥l双抗体夹
心法测 ƒ和
⁄ƒ含量 o具体操作按测试盒说明书进行 ∀
1 q4 q5 统计学方法 用 ≥°≥≥统计软件进行 τ检验 ∀
2 结果 实验结果见表 t ∀
表 t 红景天对大鼠海马 ƒ和
⁄ƒ含量的影响k ξ ? σ, ν tsl
组别
剂量
rª#®ªpt
ƒ
r±ª#pt
⁄ƒ
r±ª#pt
空白对照组 xx qus ? tx qsy ttw qs{ ? ut qux
红景天组 s qvy |t qxs ? t| qwutl tus qxy ? vy qys
红景天组 s qs| yu qut ? ty qws ttu qzu ? vs qyx
注 }与空白对照组比较 tlΠ s qst
3 讨论
当前 o我国人民生活水平不断提高 o人口寿命延长 o一些
老年性疾病也呈上升之势 o如老年性痴呆等 o带来了大量社会
问题 ∀因而 o研究和开发具有预防和改善记忆障碍的药物具
有重要意义 ∀
大脑内神经生长因子kƒl !脑源性神经营养因子k
⁄2
ƒl作为人类最早发现并进行了深入研究的神经营养因子 o在
神经系统发育 !损伤 !修复及正常功能维系过程中起着十分重
要的作用 ∀ ƒ o
⁄ƒ的作用广泛复杂 o近年来许多动物实
验研究表明 oƒ水平的升高能够促进神经递质如乙酰胆碱
的合成 o并对胆碱能神经元起营养作用 o具有防治脑老化的功
效 ∀给予外源性 ƒ 可明显改善动物的学习记忆能力≈w ∀
⁄ƒ也参与了长时程记忆的形成过程 o并对维持学习记忆的
能力发挥重要的作用≈x ∀目前 o国外已将 ƒ试用于老年性
痴呆和顽固性癫痫的治疗 ∀由于外源性 ƒ 等制品不能直
接通过血脑屏障 o需进行脑内灌注给予 o这就造成了 ƒ 等
制品在使用上的困难和局限性 ∀
海马是一个与学习记忆功能密切相关的结构 o位于新皮
层尾端边缘之下 o是长时程记忆形成的决定性纽带≈y ∀海马
内 ƒ o
⁄ƒ水平与学习记忆功能的关系是密切相关的 ∀
因而 o我们认为海马内 ƒ o
⁄ƒ水平的变化可以用来从一
个侧面去阐释红景天改善记忆的机理 ∀同时 o实验时选用全
雄性 ≥⁄大鼠进行 o利于排除雌性大鼠性周期对海马内 ƒ o
⁄ƒ水平的影响 ∀本研究结果提示 }红景天提取物可能具有
一定提高记忆力的功效 o其升高初老大鼠海马内 ƒ的作用
#s{w#
第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ x
¤¼oussw
可能是其改善记忆的机理之一 ∀
≈参考文献
≈t 谢桂琴 o孙秀兰 o田苏平 o等 q红景天素对实验性老年性痴呆大
鼠防治作用的研究 q中国行为医学科学 oussv otuktl }t{ q
≈u 刘志伟 o吴谋成 o陈 平 q菱叶红景天对小鼠记忆影响及耐缺氧
实验 q营养学报 oussv ouxktl }tst q
≈v 游冬青 o邹鲁峰 o陈 杞 o等 q红景天复方对小鼠学习记忆影响
及抗缺氧实验 q时珍国医国药 ousss ottkxl }v|u q
≈w 徐晓虹 o章子贵 o吴馥梅 q神经生长因子改善衰老性记忆障碍及
突触机制的探讨 q药学学报 ousss ovxktsl }zu| q
≈x ¤¯¯o׫²°¤¶o∞√ µ¨¬·
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ροσχι , usss ovkyl }xvv q
≈y 陈宜张 q分子神经生物学 q北京 }人民军医出版社 ot||x qvxv q
≈责任编辑 方文贤
猪苓龙葵水提物的抗肿瘤药效
陈汝盛t o厉将斌u 3 o郭晓健u o张志宏u o郭应禄u o陈晓光v
kt q浙江省磐安县人民医院玉山分院 o磐安 vuuvsu ~
u q北京大学 第一医院 泌尿外科 o北京大学 泌尿外科研究所 o北京 tsssvw ~
v q中国协和医科大学 中国医学科学院 药物研究所 o北京 tssssxl
某些中药方剂≈t 用于治疗泌尿系肿瘤如膀胱癌 !前列腺
癌等 o有一定疗效 ∀猪苓和龙葵是常用药 o具有利尿通淋解
毒之功效 o在作者的临床观察中发现 o长期应用该两种药物
为主的中药方剂配合手术切除或放化疗等 o具有一定的症状
和生化指标改善作用 o并可能有助于延长生存期 ∀为进一步
证实其抗肿瘤作用 o为临床应用提供实验依据 o对其水提取
物进行了药效学研究 ∀
1 材料
1 q1 药物 猪苓龙葵水提物粉末 o处方猪苓 us ª!龙葵 vs ªo
每 tu ª药粉相当于 tss ª生药 o由中国医学科学院药物研究
所提供 o在阴凉干燥处保存 ∀体内实验时用 s qx h羧甲基纤
维素钠k≤ ≤l配成混悬液 o供灌胃使用 o现用现配 ∀环磷酰
胺k≤×÷l o用生理盐水配成所需浓度 ∀
1 q2 实验试剂 °tyws培养基 o胰酶 o均为
≤产品 ~
小牛血清 o杭州四季青公司产品 ~醋酸 o三氯乙酸 o乙醇均为
分析纯 ∀
1 q3 肿瘤细胞株 小鼠肝癌 uu和小鼠 ¨º¬¶肺癌体内瘤株
由中国医学科学院药物研究所药理室传代保存 ∀前列腺癌
°≤2v o⁄2twx o× °2≤u和膀胱癌 ∞细胞株则由北京大学
泌尿外科研究所传代保存 ∀
1 q4 动物 昆明种小鼠 !≤xz小鼠由中国医学科学院实验
动物所繁育场提供 o并于中国医学科学院药物研究所二级动
物房饲养 ∀
2 方法
≈收稿日期 ussw2st2tx
≈通讯作者 3厉将斌 oר¯ }kstslyytzxzts oƒ¤¬}kstslyytzxzts o
∞2°¤¬¯ }¯¥||| ut¦±q¦²°
2 q1 体外细胞实验用药物药液 实验药物粉末当用于体外
细胞实验时 o则按以下处理步骤制成保存液 }≠ 取 xs °ª药
粉溶于 x °重蒸馏水中 ~ 密封后于 vz ε 恒温摇床中震摇
u «~≈ 随即以 tu sss µ#°¬±p t离心 tx °¬±~…取上清液用 s quu
Λ°滤膜过滤后分装于各冻存管中 o密封贮存于 p us ε o以
此作为保存液 ∀每临用时 o置于室温下复温 us °¬±后使用 ∀
2 q2 体外细胞增殖抑制实验 用 ≥
法≈u2w 计算药物对细
胞生长的抑制率 o并求出药物的半数生长抑制浓度kxsl ∀
2 q3 体内肿瘤生长抑制实验 选用昆明种k或 ≤xzl雄性小
鼠 xs只 ot{ ∗ uu ª∀将接种后 z §的相应瘤株kuu o¨º¬¶肺
癌l荷瘤小鼠颈椎脱臼处死 o在无菌条件下取出腹水 o用生理
盐水 tΒv稀释 o于腋窝皮下接种瘤液 s qu °∀接种后 uw «o
将动物随机分为 x组 o每组 ts只 ∀设空白对照组 o环磷酰胺
阳性对照组 o水提物粉末分别相当于生药 t qy ov qu oy qw ª#
®ªpt的高中低 v个不同剂量治疗组 ∀阴性对照组给予等体
积 s qx h ≤ ≤ o环磷酰胺腹腔注射 t次 ys °ª#®ªp t ∀水提物
灌胃给药 o每日 t次 o连续给药 x §o停药 t次 o再连续给药 w
§∀末次给药后 uw «o颈椎脱臼处死动物 o分别称体重 !瘤重 o
计算肿瘤抑制率 o进行疗效评价 ∀
肿瘤生长抑制率k h l k对照组平均瘤重 p治疗组平均
瘤重lr对照组平均瘤重 ≅ tss h
2 q4 统计学处理 计数资料采用非配对学生氏 τ检验 ∀
3 结果
3 q1 体内肿瘤生长抑制作用
3 q1 q1 对小鼠肝癌 uu的抑制作用 水提物灌胃给药能在相
当程度上起到抑制小鼠肝癌 uu生长的作用 o并有较好的剂
量效应关系k表 tl ∀
3 q1 q2 对小鼠 ¨º¬¶肺癌的抑制作用 水提物灌胃给药能
#t{w#
第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ x
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