全 文 ：‹°≤ 法测定甘肃产小檗属植物不同部位的生物碱
邸多隆t o刘晔玮u o马志刚v o蒋生祥t
kt q中国科学院兰州化学物理研究所 甘肃省天然药物重点实验室 o甘肃 兰州 zvssss ~
u q河西学院 化学系 o甘肃 张掖 zvwsss ~v q兰州医学院 药学系 o甘肃 兰州 zvssssl
≈摘要  目的 }建立同时测定三颗针植物不同部位小檗碱 !药根碱 !巴马汀 !小檗胺含量的 ‹°≤ 法 o并进一步
考察 tt种甘肃产小檗属植物不同部位生物碱的分布状态 ∀方法 }检测波长小檗碱 !药根碱 !巴马汀为 vwy ±° o小檗
胺utu±° ∀流动相乙腈2s qsu°²¯#p t磷酸二氢钾水溶液 o梯度条件s ∗ {°¬± o乙腈vu h ∗ vy h ~{ ∗ us°¬± ovy h ∗ xt h ∀流速
t qs °#°¬±p t ∀结果 }小檗碱 !药根碱 !巴马汀 !小檗胺的线性方程 !相关系数 !线性范围分别为 }Ψ € w .szw ≅ tsx Ξ
n { s{s , ρ€ s q||| { os qsu{ ∗ w qzw Λª~Ψ € w .x{{ ≅ tsy Ξ n ty z{s , ρ€ s q||| y os qstu ∗ u qs Λª~Ψ € v .zwv ≅ tsy Ξ n
ut uwz , ρ€ s q||| | os qsuy ∗ s qxu Λª~Ψ € w .wzv ≅ tsy Ξ n vyv wus , ρ€ s q||| { os qstx ∗ u qxy Λª∀结论 }不同产地 !
不同品种 !不同部位三颗针植物中生物碱的含量分布有明显的差异 ∀
≈关键词  小檗属 ~生物碱 ~‹°≤
≈中图分类号  • u{w qt ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvltu2ttvt2sv
小檗属植物 Βερβερισ q俗称三颗针 o在我国有
uss多种 o大约有 xs种小檗属植物在民间供药用 ∀
甘肃是该属植物的主产区之一 o约产 vs种左右 ∀小
檗属植物中所含季胺型生物碱主要有小檗碱
k¥¨µ¥¨µ¬±¨ o简写为 …∞l !药根碱k­¤·µ²µµ«¬½¬±¨ o简写
为• l !巴马汀 k³¤¯ °¤·¬±¨ o简写为 °„l !小檗胺
k¥¨µ¥¤°¬±¨ o简写为 …„l≈t  ∀文献报道这些生物碱
的分析方法主要有薄层色谱法k׏≤l !高效液相色
谱法k‹°≤l≈u  !毛细管电泳法k≤∞l≈v  ∀虽然用高
效液相色谱法k‹°≤l测定小檗属植物中生物碱的
方法报道较多 o但大都集中于分析其中 t ∗ u种生物
碱的含量或测定 t ∗ u个部位的几种生物碱 ∀有报
道≈w 用改变检测波长 ‹°≤ 法测定小檗属植物茎木
k„l !根木k…l !茎皮k≤l !根皮k⁄l 中 …∞o• o°„ o…„
的含量 ∀本研究应用 ⁄„⁄o选择 utu ovwy ±° u个检
测波长 o同时检测小檗属植物中 …∞o• o°„ o…„ 含
量 o并应用该法考察它们在甘肃产 tt种小檗属植物
中的分布状态 o为合理开采和应用三颗针植物资源
提出了建议 ∀
1 仪器 !试剂和样品
≥°⁄2  ts„√³ ⁄„⁄k≥‹Œ „⁄ ˜l ~≤2ts„⁄√³
°∏°³k ≥‹Œ „⁄ ˜ l ~ ≤ ¤¯¶¶√³ x qsv • ²µ®¶·¤·¬²±
≈收稿日期  ussu2sy2tt
≈通讯作者  邸多隆 ר¯ }ks|vtlvzv{ytv ∞2°¤¬¯}§§¯ ¬¯∏ƒ ¼¤2
«²²q¦²° q¦±
k≥‹Œ „⁄ ˜l ~¬¦«µ²¶²µ¥ ’⁄≥ ≤²¯∏°±kw °° ≅ uxs
°° ox Λ°l ~s qwx Λ°针筒过滤器 ~{xss2 ²§¨¯紫外
可见分光光度计k上海天美仪器厂l ~trts万电子天
平k  ·¯¨¨µ2⁄usuxl ~• ∞2xu„ 型旋转蒸发仪k上海亚
荣生化仪器厂l ~≥‹…2 ¶水循环式多用真空泵k郑州
长城科工贸有限公司l ~小檗胺对照品k由兰州医学
院药学系植化教研室提供 o含量  |x h l ~盐酸药根
碱对照品k批号 zvv2|usvl !盐酸小檗碱对照品k批号
ztv2|ssvl !盐酸巴马汀对照品k批号 zvu2|ssul均由
中国药品生物制品鉴定所提供 ~乙腈为色谱纯 ~其余
试剂均为分析纯 ~三颗针样品由兰州医学院药学系
马志刚副教授采集并鉴定 o见表 t ∀
表 t 甘肃产 tt种小檗属植物
序号 品种 产地
t 匙叶小檗 Β . ϖερναε 甘肃临夏
u 短柄小檗 Β . βραχηψποδα 甘肃平凉崆峒山
v 甘肃小檗 Β . κανσυενσισ 甘肃兰州兴隆山
w 假豪猪刺 Β . σουλιεανα 甘肃成县
x 少齿小檗 Β . ποτανινιι 甘肃文县
y 透光小檗 Β . διαπηανα 甘肃和政
z 细脉小檗 Β . διχτιονευρα 甘肃兰州兴隆山
{ 小檗 Β . σαµ υρενσισ 甘肃榆中
| 直穗小檗 Β . δασψσταχηψσ 甘肃榆中
ts 置疑小檗 Β . δυβια 甘肃榆中
tt 锥花小檗 Β . αγγρεγατα 甘肃西和
2 方法与结果
2 q1 色谱条件 取生物碱对照品溶液紫外扫描 o见
图 t ∀选择检测波长为小檗碱 !药根碱 !巴马汀 vwy
#uvtt#
第 u{卷第 tu期
ussv年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussv
±° o小檗胺 utu ±° ∀流动相乙腈ps qsu °²¯ #pt磷
酸二氢钾水溶液 ~梯度条件 s ∗ { °¬±o乙腈 vu h ∗
vy h o{ ∗ us °¬±ovy h ∗ xt h ~流速 t qs °#°¬±p t ∀
在上述条件下 o对照品 !样品色谱图见图 u !图 v ∀
图 t 生物碱紫外扫描光谱图
¤q…„ ¥q• ¦q°„ §q…∞k图 u ov同l
图 u 生物碱对照品色谱图
t qutu ±°色谱图 u qvwy ±°色谱图k图 v同l
图 v 样品色谱图
2 q2 样品测定
2 q2 q1 样品溶液和对照品溶液制备 精密称取三
颗针不同部位的干燥粗粉 s .x ªo用乙醇回流提取至
无生物碱沉淀反应 o减压浓缩至近干k p s qs{  °¤o
ys ε l o用甲醇定容于 xs °的量瓶中 o即得样品溶
液 ∀分别精密称取减压干燥至恒重的 …∞o• o°„ o
…„对照品适量 o同置于 ux °容量瓶中 o用甲醇定
容 o即为对照品储备液 o在阴冷处放置 o备用 ∀临用
前用甲醇配制成适当浓度后即为对照品溶液 ∀
2 q2 q2 样品测定 分别取配制的样品溶液 !对照品
溶液 o经 s qwx Λ° 针筒过滤器过滤 o精密量取滤液
ts ˏ进样分析 o用外标法定量 o结果见表 u ∀
3 方法学评价
表 u 生物碱含量测定结果及分布状态
序号 部位 …∞ • °„ …„ 序号 部位 …∞ • °„ …„
t „ s quz| s qs|t s qszx s q{ux z „ s qsv s qsv| s qssw s qsuu
… s qwtz s qt|t s qst| s qz{| … s qs|y s qsxz s qs{u s qsuu
≤ t qvxw s qyuw s qsyu s qsxz ≤ s qzwv s qszx s qsx{ s qsyu
⁄ w q{wv t qysx s qu{ s qvwz ⁄ u q{ s qvvt s qtst v quvz
u „ s qsvt s qstt s qssu s qstz { „ s qsw| s qswt s qst s quwv
… s qtu{ s qt{t s qsvw s qssy … s qwtt s qswv s qsz s qwst
≤ s qsuv s qsvz s qssx s qsy ≤ t qz| s qvyx s qtyx s qys|
⁄ t qu{{ s qwxz s qsvv u q{x| ⁄ w qutt s qwxv s qtxz t quzx
v „ s qutw s qstz s qsvy s qux | „ s qsy| s qss| s qssz s qt|w
… s qtz| s qss| s qsvv s qstu … s qvuu s qsyt s qsxw s qsy{
≤ u qu|x s qw s qw{w t q{u ≤ s q{z{ s qusz s quu s qszu
⁄ u qwtu s qwtu s qv{v u qztt ⁄ v qsvy s quvu s quxt t quv{
w „ s qtwx s qstv s qstz s qusz ts „ s qsvu s qstt s qssw s qstu
… s qzu| s qts| s qtst s qv|x … s qtzx s qswt s qstu s qsuz
≤ s qzu s qts{ s qs{y s qsuz ≤ s qwuy s qsv{ s qstu u qsyx
⁄ u qw|t s qw{| s qs|y t qsy ⁄ t qw{z s qs|z s qsu| s qt{v
x „ s qtzv s qutv s qsvy s qusv tt „ s qu|z s qtwu s qswv s qtux
… s qtt| s qtyt s qstx s qtyz … s qvxz s qtzz s qsxx s qtsy
≤ s qtxv s qxwx s qstu s qxwv ≤ t qwwx s q{s{ s qt{z s q{ut
⁄ s qtyu s qyv{ s qss{ s qyt ⁄ u qy|u t qv|w s quu{ s q|uu
y „ s qtzw s qsyw s qsuv s qvvy
… s qxy| s qs|t s qs|{ s qtvx
≤ s q{uw s qt|y s qszv s q{uv
⁄ v qxz s qwwz s qtvu s qwyz
注 }„ q茎木 ~…q根木 ~≤ q茎皮 ~⁄q根皮
#vvtt#
第 u{卷第 tu期
ussv年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussv
3 q1 线性关系和线性范围的考察 精密量取对照
品储备液 o用甲醇稀释配制成 x 个浓度水平 o…∞o
• o°„ o…„ 对照品溶液浓度范围分别在 s qssu { ∗
s qwzw os qsst u ∗ s qus os qssu y ∗ s qsxu os qsst x ∗
s quy ª#pt ∀经 s qwx Λ°针筒过滤器过滤 o精密量
取滤液 ts ˏ进样分析 o以峰面积为纵坐标 o进样量
kΛªl为横坐标 o计算回归方程 !线性范围及相关系数
分别为 …∞}Ψ € w .szw ≅ tsx Ξ n { s{s , ρ€ s q||| { o
sqsu{ ∗ w qzwΛª~• }Ψ € w .x{{ ≅ tsy Ξ n tyz{s ,
ρ€ s q||| y os qstu ∗ u qs Λª~°„ }Ψ € v .zwv ≅ tsy Ξ
nut uwz , ρ€ s q||| | os qsuy ∗ s qxuΛª~…„ }Ψ €
w .wzv ≅ tsy Ξ n vyv wus , ρ € s q||| { os qstx ∗ u qxy
Λª∀
3 q2 精密度实验 精密量取对照品溶液 o在确定的
色谱条件下连续进样 x次 ow种生物碱峰面积的相对
标准偏差 • ≥⁄h分别为 …∞ s qz{ h o• t quy h o°„
u qwv h o…„t qtw h ∀
3 q3 加样回收试验 取已知含量的样品 o称取 v
份 o编号 t ou ov ∀各加入一定量的对照品溶液 o按确
定的方法提取得到样品溶液 o进样分析 o计算回收
率 o结果 …∞ o• o°„ o…„的平均回收率分别是
tss q{z h otsu qsv h otsu qwx h otss qxu h ~加样回
收试验的 • ≥⁄h分别是t qwv h ou qs| h ov qzw h o
t qv| h ∀
4 结果与讨论
4 q1 由图 t 可知 o小檗胺的最大吸收波长为 utu
±° o其他 v种生物碱有 v个最大吸收波长 o分别为
uvs ouz{ ovwy ±° oo故在 ⁄„⁄上选择两个波长同时
检测 w种生物碱 ∀为了在最短的分析时间内获得最
佳的分离效果 o本研究用梯度洗脱方法进行离分析 o
结果较好 ∀经方法学评价 o表明重现性好 o方法简
单 !可靠 ∀
4 q2 由表 u可知 …∞o• o°„ o…„ w种生物碱在 tt
种小檗属植物中各部位含量的分布状态 ∀ …∞在各
部位的平均含量的分布状态为根皮 茎皮 根木 
茎木 ∀• 在各部位平均含量的分布状态为茎皮 
根皮 根木 茎木 ∀ °„ 在各部位的平均含量的分
布状态为茎皮 根皮 根木 茎木 ∀ …„ 在各部位
的平均含量的分布状态为根皮 茎皮 根木 !茎木 ∀
由于小檗属植物茎皮中 …∞的含量虽然较根皮中低 o
但也十分可观 ∀• o°„ 在茎皮中的含量较根皮高 o
…„在根皮中的含量和茎皮中接近 o故建议尽量使用
地上部分 ∀
≈参考文献 
≈t  马志刚 o杨永建 o李云霞等 q甘肃产小檗属植物茎皮的生药学研
究k ´l q兰州医学院学报 ot||s otykvl }vx q
≈u  吕光华 o陈新民 o肖培根 q改变检测波长 ‹°≤ 法测定小檗碱属
植物中的生物碱 q药学学报 ot||x ovskwl }u{s q
≈v  吕光华 o王立为 o陈建民 q小檗属植物中的生物碱成分测定及资
源利用 q中草药 ot||| ovskyl }wu| q
∆ετερµινατιον οφ Φουρ Αλκαλοιδσιν Βερβερισ Πλαντσ Βψ ΗΠΛΧ
⁄Œ ⁄∏²2¯ ²±ªt oŒ˜ ≠ ∞2º ¬¨u o  „ «¬2ª¤±ªv oŒ„‘Š ≥«¨ ±ª2¬¬¤±ªt
kt q¤±½«²∏Œ±¶·¬·∏·¨ ²© ≤«¨ °¬¦¤¯ °«¼¶¬¦¶o≤«¬±¨ ¶¨ „¦¤§¨ °¼ ²© ≥¦¬¨±¦¨¶o¤±½«²∏ zvssss o Š¤±¶∏o≤«¬±¤~
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: Œ± ²µ§¨µ·² ¤¶¶¨¶¶ Βερβερισo¤¶¬°³¯¨¤±§ ©¨©¨ ¦·¬√¨«¬ª«2³¨µ©²µ°¤±¦¨ ¬¯´∏¬§¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¬¦k‹°≤l
° ·¨«²§ º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §q Μετηοδ : …¼ ¤³³¯¼¬±ª ‹°≤ º¬·« ªµ¤§¬¤·¬²± ¨¯∏·¬²±o·«¬¶ ° ·¨«²§ º¤¶§¨ √¨¯²³¨ §©²µ§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©©²∏µ
®¬±§¶²©¤¯®¤¯²¬§¶¬±¦¯∏§¬±ª¥¨µ¥¤°¬±¨ o¤·µ²µµ«¬½¬±¨ o¥¨µ¥¨µ¬±¨ ¤±§³¤¯ °¤·¬±¨ ¬± ° ·¨«¤±²¯¬¦ ¬¨·µ¤¦·¶©µ²° µ²²·¥¤µ®oµ²²·o¶·¨° ¥¤µ®
¤±§¶·¨° ²© Βερβερισq Ρεσυλτ : × «¨ ¤¯®¤¯²¬§¶¥¨µ¥¤°¬±¨ o­¤·µ²µµ«¬½¬±¨ o¥¨µ¥¨µ¬±¨ ¤±§³¤¯ °¤·¬±¨ ¶«²º± ª²²§ ¬¯±¨ ¤µ¦²µµ¨ ¤¯·¬²±¶¬± ·«¨
µ¤±ª¨ ²© s qsu{ ∗ w qzw Λª kρ€ s q||| {l ~s qstu ∗ u qs Λªkρ€ s q||| yl ~s qsuy ∗ s qxu Λªkρ€ s q||| |l ~s qstx ∗ u qxy Λªkρ€
s q||| {l oµ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼ q × «¨ ¦²µµ¨ ¤¯·¬²± ¦²¨ ©©¬¦¬¨±·¶²©·«¨ ¦¤¯¬¥µ¤·¬²± ¦∏µ√¨©²µ·«¨ ¤±¤¯¼·¨¶ ¬¨¦¨ §¨¨ §s q||| { qΧονλυσιον :× «¨ ²³·¬2
°¬½¨ § ‹°≤ ° ·¨«²§ º¤¶¤³³¯¬¨§·²¤±¤¯¼½¨ √¤µ¬²∏¶¶¤°³¯ ¶¨o¤±§·«¨ µ¨¶∏¯·¶¶«²º±·«¤··«¨ ¦²±·¨±·²©¤¯®¤¯²¬§¶º µ¨¨ ²¥√¬²∏¶§¬©©¨µ2
±¨¦¨ ¬± Βερβερισ©µ²° §¬©©¨ µ¨±·¤µ¨¤o§¬©©¨ µ¨±·¶³¨¦¬¨¶¤±§§¬©©¨ µ¨±·³¤µ·¶q
[ Κεψ ωορδσ] Βερβερισ~¤¯®¤¯²¬§~ ‹°≤
≈责任编辑 王康正 
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第 u{卷第 tu期
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