全 文 ：二氢杨梅素抗脂质过氧化作用的研究
何桂霞t ou o杨伟丽t o裴 刚u o朱咏华u o杜方麓u
kt q湖南农业大学 食品科技学院 o湖南 长沙 wtstu{ ~u q湖南中医学院 药学院 o湖南 长沙 wtssszl
≈摘要  目的 }研究二氢杨梅素k⁄ ≠l抗脂质过氧化作用 ∀方法 }采用分光光度法测定 ⁄ ≠ 对由 ƒ u¨ n维生
素 ≤kƒ u¨ n2 ∂¬·≤l体系 !ƒ u¨ n2过氧化氢k ƒ u¨ n2‹u ’ul体系 !ƒ 2¨半胱氨酸kƒ u¨ n2≤¼¶l体系诱导的脂质过氧化的抑制作
用 ∀结果 }⁄ ≠ 能抑制离体大鼠脑 !心 !肝匀浆及线粒体脂质过氧化并表现出剂量依赖关系 ∀结论 } ⁄ ≠ 具有较
好的抗脂质过氧化作用 o具有进一步研究与开发价值 ∀
≈关键词  二氢杨梅素 ~脂质过氧化 ~丙二醛 ~自由基 ~抗氧化
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussvltu2tt{z2sv
藤茶 o又名显齿蛇葡萄 Αµ πελοπσισ γροσσεδεντα2
λα k‹¤±§2 ¤½½l • q× q• ¤±ªo是葡萄科蛇葡萄属的
一种野生藤本植物≈t  o具有消炎 !抑菌 !止咳 !镇痛 !
护肝 !消脂等功效 ∀藤茶中已分离出一些化学成分 o
其中含量最高的是二氢杨梅素k§¬«¼§µ²°¼µ¬¦¨·¬±o
⁄ ≠l≈u  ∀药理研究表明 o⁄ ≠ 能对抗去肾上腺素
和高 Žn所致的兔胸主动脉条的收缩反应及显著扩
血管和钙拮抗作用≈v  ~具有祛痰止咳 !降血脂 !保肝
作用≈w  ∀但其清除氧自由基与抗脂质过氧化作用尚
未见详细报道 ∀实验研究 ⁄ ≠ 对体外氧自由基发
生系统诱导离体大鼠脑 !心 !肝线粒体脂质过氧化作
用 ∀
1 材料与仪器
1 q1 药品与试剂
 ⁄„测定试剂盒 o四乙氧基丙烷k×∞°l o浓度
ts ±°²¯ # °p t o南京建成生物工程研究所 ~∞Š≤ Š
k批号 ∞2suw2ttv o¶³¨¦|{ h °¬±l o湖南金农股份有
限公司提供 ~所用试剂均为国产分析纯或生化试剂 ∀
二氢杨梅素 o白色结晶 o从藤茶中提取 o经
‹°≤ 测定 o其含量不低于 |x h o湖南中医学院中药
化学教研室制备 ∀
1 q2 仪器
岛津 ˜ ∂2uyxƒ • 分光光度计 ozxt⁄Š紫外分光
光度仪k上海仪器总厂l ~‹ ±2≤ 空气浴振荡器k哈
≈收稿日期  ussu2ts2us
≈基金项目  湖南省卫生厅中医药科研基金kus≠tzl
≈通讯作者  何桂霞 ר¯ }kszvtlxy{wzst ∞2°¤¬¯}«¨ ª∏¬¬¬¤ƒ
tyv q±¨ ·q
尔滨东明医疗仪器厂l ~Šus„ 全自动高速冷冻离
心机 ~× ⁄w„台式离心机k湖南仪器仪表总厂离心机
厂l ∀
1 q3 动物
• ¬¶·¤µ大鼠 o雄性 o体重 uss ∗ uxs ªo由湖南中
医学院实验动物中心提供 ∀
2 方法
2 q1 ⁄ ≠ 对离体大鼠组织脂质过氧化的影响
取正常大鼠禁食 t 夜 o脱臼处死 o迅速取出肝
脏 !脑 !心 o用冰冷的生理盐水漂洗 o滤纸拭干 o用冷
生理盐水在内切式组织匀浆器中制成 ts h组织匀
浆 ot sss µ# °¬±p t离心 ts °¬±o取上清液 s qx °o
给药组每管分别加入不同浓度的 ⁄ ≠ o用生理盐水
补充至 t °o使 ⁄ ≠ 终浓度分别为kx ots ous Λ°²¯
#ptl o对照组加等体积的生理盐水 o于 vz ε 恒温
振荡孵育 t qx «后 o各管加入 us h三氯乙酸 t °终
止反应 o加 s qyz h ׅ„ t °o混匀后沸水浴中加
热反应 tx °¬±o取出后流水冷却 ∀然后 t sss µ#
°¬±p t离心 ts °¬±o用移液器吸取上清液加入比色皿
中 o于 xvu ±°测定吸收度k Αl o根据  ⁄„的摩尔吸
光系数 Ε€ t qxy ≅ tsx °²¯ p t#计算匀浆脂质过氧化
产物  ⁄„的生成量 o以 ±°²¯#ªp t组织为计量单位 o
并计算抑制率 ∀
 ⁄„抑制率k h l € k对照组 Α值 p给药组 Α值lr对照
组 Α值 ≅ tss h
2 q2 ⁄ ≠ 对 ∂¬·≤2ƒ u¨ n诱导的大鼠线粒体氧化损
伤的影响
2 q2 q1 大鼠各种组织线粒体的制备 参照文献
≈x  o以分级沉淀差速离心法分离 ∀将制备的各组织
#{{tt#
第 u{卷第 tu期
ussv年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussv
的线粒体蛋白浓度分别用冰冷的生理盐水调至 x ª#
pt o储存于 w ε 冰箱备用 ∀用考马斯亮蓝法测定蛋
白含量 ∀
2 q2 q2 对大鼠肝线粒体膨胀的影响 参考 ¤µ·¨±¶
方法≈y  o反应终体积 v qs °o含有 t qs °ª肝线粒
体蛋白 otss Λ°²¯#p t ∂¬·≤ oxs Λ°²¯ #ptƒ u¨ n及
各种浓度的药物 o用 ³‹ z qw os qt °²¯#p t °…≥补足
至 v °ovz ε 恒温水浴条件观察 t «内 xus ±°处
吸收值的变化 ∀吸收度下降表示线粒体膨胀增加 ∀
2 q2 q3 对 ≤¼¶2ƒ u¨ n诱导的大鼠线粒体脂质过氧化
反应液总体积 t °o含有 s qx °ª各种组织的线
粒体悬液 os qt °°²¯#pt ≤¼¶os qsu °°²¯#pt ƒ u¨ n
及各种浓度的药物 o用 ³‹ z qw os qt °²¯#p t°…≥补
足至 t °k对照组用 °…≥代替l o混匀后 ovz ε 恒温
振荡孵育 t «o取出 s qu °样品 o按试剂盒说明书采
用硫代巴比妥酸法测定  ⁄„ 含量 o计算  ⁄„生成
抑制率 ∀
2 q2 q4 对 ‹u’u2ƒ u¨ n诱导的大鼠线粒体脂质过氧
化 反应液总体积 t °o含有 s qx °ª各种组织的
线粒体悬液 os qv °∞⁄× „ kt °°²¯#p tl os qt °
‹u’ukw °°²¯#ptl os qv °ƒ u¨ n kt °°²¯#ptl及
各种浓度的药物 o用 ³‹ z qw os qt °²¯#p t°…≥补足
至 t °k对照组用 °…≥代替l o混匀后 ovz ε 恒温振
荡孵育 t «o取出 s qt °样品 o按试剂盒说明书采用
硫代巴比妥酸法测定  ⁄„含量 o计算  ⁄„生成抑
制率 ∀
2 q2 q5 对 ∂¬·≤2ƒ u¨ n诱导的大鼠线粒体脂质过氧
化 反应液总体积 t °o含有 s qx °ª各种组织的
线粒体悬液 o抗坏血酸 xs Λ°²¯#pt oƒ u¨ n ux Λ°²¯#
pt o及各种浓度的药物 o用 ³‹ z qw os qt °²¯ #pt
°…≥补足至 t °k对照组用 °…≥代替l o混匀后 ovz
ε 恒温振荡孵育 t «o取出 s qt °样品 o按试剂盒说
明书采用硫代巴比妥酸法测定  ⁄„ 含量 o计算
 ⁄„生成抑制率 ∀
3 结果
3 q1 ⁄ ≠ 对正常离体大鼠脏器组织匀浆脂质过氧
化的影响
⁄ ≠ 对正常离体大鼠脏器组织过氧化脂质的
生成均有极显著的抑制作用 o并随剂量增加作用增
强 o而且对肝脏的脂质过氧化反应的抑制作用最
强 o这可能与肝脏具有物质代谢等多种功能的组织
结构有关k如肝脏富含线粒体 !内质网和高尔基复合
体 o分别与肝细胞进行功能活动的能量提供 !蛋白质
合成和糖原合成密切相关l ∀当 ⁄ ≠ 浓度为 ts qs
Λ°²¯#p t时 o对 v种组织匀浆中  ⁄„ 生成的抑制
作用比相同浓度的 ∞Š≤ Š稍低 o结果见表 t ∀
表 t ⁄ ≠ 对大鼠组织匀浆  ⁄„
生成的影响k ξ ? σ, ν € wl ±°²¯#ªp t
组别
浓度
rΛ°²¯#p t
 ⁄„
心 肝 脑
生理盐水 uuu qw ? t{ qw uzw qy ? uv qwtl vsv qs ? uu q{ul
⁄ ≠ us qs yu qy ? tv qsul yz qz ? t| q| tsu qu ? tu qztl
kzt q{ h l kzx qv h l kyy qv h l
ts qs tss qv ? tx qwul ttv qu ? tx qutl tyt q{ ? ts qvtl
kxw q| h l kx{ q{ h l kwy qy h l
x qs tz| q{ ? us qu uss qz ? ut qstl uxs qs ? vx qstl
kt| qt h l kuy q| h l ktz qx h l
∞Š≤Š ts qs {u q{ ? tt qsul tsv qs ? t{ qzul txy qv ? tv qsul
kx{ qv h l kyu qx h l kw{ qw h l
注 } ≠与生理盐水组比较 tl Π s qsx ul Π  s qsst 括号内数字为与
生理盐水对照组比较的抑制率
3 q2 ⁄ ≠ 对 ƒ u¨ n2∂¬·≤ 诱导致大鼠肝线粒体膨
胀的影响
线粒体肿胀程度与线粒体的生理和病理性反应
有关 o过度的肿胀则是线粒体损伤的表现 ∀线粒体
膨胀与脂质过氧化有关 ∀脂质过氧化导致线粒体膜
脂质及蛋白质组分改变 o进一步改变膜的屏障功能 o
引起线粒体呼吸状态的改变 o使线粒体悬液 Αxus ±°
下降 ∀ ⁄ ≠ 具有抑制脂质过氧化 o保护线粒体结构
的作用 o结果见图 t ∀
图 t ⁄ ≠ 对大鼠肝脏线粒体膨胀的影响k ξ ? σ, ν € vl
„ q线粒体 n介质 …q线粒体 n tx qs Λ°²¯#p t ⁄ ≠ n ƒ u¨ n n ∂¬·≤
≤ q线粒体 n ts qs Λ°²¯ #p t ⁄ ≠ n ƒ u¨ n n ∂¬·≤ ⁄q线粒体 n x qs
Λ°²¯#p t ⁄ ≠ n ƒ u¨ n n ∂¬·≤ ∞q线粒体 n ƒ u¨ n n ∂¬·≤
3 q3 ⁄ ≠ 对不同体系诱导的离体大鼠线粒体脂质
过氧化的抑制作用
⁄ ≠ 对 ƒ u¨ n2≤¼¶体系 o‹u’u2ƒ u¨ n体系 o∂¬·≤2
ƒ u¨ n体系诱导心 !肝 !脑线粒体  ⁄„ 的生成均有抑
制作用 o且呈明显的量效关系k表 ul ∀在同一诱导
体系相同剂量浓度下 o⁄ ≠ 抑制作用稍弱于
∞Š≤ Š ∀
#|{tt#
第 u{卷第 tu期
ussv年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussv
表 u ⁄ ≠ 对 ≤¼¶2ƒ u¨ n o ‹u ’u2ƒ u¨ n和 ∂¬·≤2ƒ u¨ n体系诱导的离体大鼠线粒体  ⁄„生成的抑制率 h
组别
浓度
rΛ°²¯#p t
≤¼¶2ƒ u¨ n体系抑制率
心 肝 脑
‹u’u2ƒ u¨ n体系抑制率
心 肝 脑
∂¬·≤2ƒ u¨ n体系抑制率
心 肝 脑
⁄ ≠ us qs xy qu yv qx ww qw xu qx xz qw wt qt vt q| vz q{ uz q|
ts qs vt qw vw qt uy qs vw qx vx q{ u| qu uu qu u{ qu tz q|
x qs t{ qt us q| tv qw us q{ uv qs ty qt tw qy t{ qy tv qx
∞Š≤ Š us qs xz q{ yy qz wx q{ xy qt yu qu wv q{ vx qw v| q| u| q|
ts qs v{ qs wv qw vs qv vy qz ws qx vt q{ uv qy u| q{ us qs
x qs uw qs u| qw ty qu uv qs uz qz t{ q{ tz qw ut q{ tw qw
4 讨论
大量研究表明 o在正常情况下 o人体内氧自由基
的产生和清除是平衡的 o但在某些病理情况下或人
体内抗氧化体系出现故障时 o机体内氧自由基产生
过多 o会引起脂质过氧化 o代谢就会出现失衡 o导致
细胞损伤 o引起心脏病 !脑缺血 !癌症和衰老等严重
疾病 o影响人们的身体健康 ∀实践证明 o抗氧化剂能
通过各种途径有效地清除机体内自由基 o对自由基
所致病变有很好的防治作用 ∀正常脏器的组织匀浆
及线粒体在体外受到 ∂¬·≤2ƒ u¨ n等体系诱导可使
 ⁄„ 增加 ∀实验观察到 ⁄ ≠ 对心 !肝 !脑 !组织匀
浆及线粒体脂质过氧化产物  ⁄„ 的生成有强的抑
制作用 o而且对肝脏的脂质过氧化反应的抑制作用
最强 o推测 ⁄ ≠ 对肝脏的保护作用更佳 ∀ ⁄ ≠ 对
ƒ u¨ n2≤¼¶体系 o‹u ’u2ƒ u¨ n体系诱导的脂质过氧化作
用有较强的抑制作用 o而在 ∂¬·≤2ƒ u¨ n体系中是通
过产生#’ ‹ 而导致脂质过氧化作用 o其产生#’ ‹ 的
机理为 }
ƒ u¨ n n #’u ψ ƒ v¨ n n ’u Α
’u Α n u‹ n ψ ’u n ‹u ’u
ƒ u¨ n n ‹u ’u ψ ƒ v¨ n n #’ ‹ n ’ ‹ p
ƒ v¨ n在 ∂¬·≤ 的作用下可被还原成 ƒ u¨ n o从而
促进了#’ ‹ 的形成 o使产生的# ’ ‹ 的量大大增加 o
因此 o⁄ ≠ 对该体系诱导的脂质过氧化作用较弱 ∀
一般认为 o含酚羟基的化合物具有明显的清除
氧自由基的作用 o而 ⁄ ≠ 为含有 y2酚羟基的黄酮
类化合物 o提示其清除氧自由基的作用可能于其带
有多个酚羟基有关 ∀由于藤茶中 ⁄ ≠ 含量高 o提
取简单 o抗氧化作用强 o值得进一步研究 o以期开发
成为新的天然的抗氧化剂为人类的健康服务 ∀
≈参考文献 
≈t  中国科学院植物研究所 q中国高等植物图鉴k二册l补编 q北
京 }科学出版社 ot|{v qvw| q
≈u  何桂霞 o裴 刚 o周天达 o等 q显齿蛇葡萄中总黄酮和二氢杨梅
素的含量测定 q中国中药杂志 ousss ouxkzl }wuv q
≈v  周雪仙 o周天达 q氢杨梅树皮素对兔胸主动脉条平滑肌收缩反
应 q现代应用药学 ot||z otwkul }wv q
≈w  钟正贤 o覃洁萍 o周桂芬 o等 q广西瑶族藤茶中双氢杨梅树皮素
的药理研究 q中国民族医药杂志 ot||{ owkvl }wu q
≈x  龚国清 o刘同征 o李立文 o等 q西红花酸的体外抗氧化作用的研
究 q中国药科大学学报 ousst ovukwl }vsy q
≈y  路雪雅 q§2儿茶精对抗坏血酸和硫酸亚铁诱导鼠肝线粒体损伤
的作用 q生物物理学报 ot||z otvktl }vx q
Στυδιεσ ον τηε Εφφεχτ οφ ∆ιηψδροµ ψριχετιν ον Αντιλιπιδ2περοξιδατιον
‹∞ Š∏¬2¬¬¤t ou o ≠ „‘Š • ¬¨2¯¬t o°∞Œ Š¤±ªu o ‹ ˜ ≠²±ª2«∏¤u o⁄˜ ƒ¤±ª2¯ ∏u
kt q≤²¯¯¨ ª¨ ²© ƒ²²§≥¦¬¨±¦¨ ¤±§ × ¦¨«±²¯²ª¼ o ‹∏±¤± „ªµ¬¦∏¯·∏µ¤¯ ˜±¬√ ¬¨¶¬·¼ o≤«¤±ª¶«¤wtstu{ o ‹∏±¤± o≤«¬±¤~
u q‹∏±¤± ≤²¯¯¨ ª¨ ²© ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨  §¨¬¦¬±¨ o≤«¤±ª¶«¤wtsssz o ‹∏±¤± o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼·«¨ ©¨©¨ ¦·¶²© ⁄¬«¼§µ²°¼µ¬¦¨·¬±k⁄ ≠l ²± ¤±·¬¯¬³¬§2³¨ µ²¬¬§¤·¬²± q Μετηοδ : × «¨ ¤±·¬¯¬³¬§2³¨µ2
²¬¬§¤·¬²± ²© ⁄ ≠ ²± «¨ ¤µ·o¯¬√ µ¨o¥µ¤¬± ·¬¶¶∏¨ «²°²ª¨ ±¤·¨ ¤±§ °¬·²¦«²±§µ¬¤ º¤¶ ° ¤¨¶∏µ¨§¥¼ ·«¨ §¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²© °¤¯²±§¬¤§¨ «¼§¨
k  ⁄„l¬±§∏¦¨§¥¼ ƒ u¨ n2 ∂¬·≤ oƒ u¨ n2‹u ’u oƒ 2¨≤¼¶º¬·« ׅ„ ¶³¨ ¦·µ²° ·¨µ¬¦° ·¨«²§qΡεσυλτ : ⁄ ≠ ¦²∏¯§¬±«¬¥¬··«¨ ¬¯³¬§³¨µ²¬¬§¤2
·¬²± ²© «²°²ª¨ ±¤·¨ ¤±§ °¬·²¦«²±§µ¬¤q × «¨ ¬±«¬¥¬·¬²± ¬¨«¬¥¬·¨§¦²±¦¨±·µ¤·¬²±2§¨ ³¨ ±§¨ ±·°¤±±¨ µq Χονχλυσιον : ⁄ ≠ «¤¶ª²²§¤±2
·¬¯¬³¬§2³¨ µ²¬¬§¤·¬²± ©¨©¨ ¦·oº«¬¦«¬¶º²µ·«¶·∏§¬±ª©∏µ·«¨µq
[ Κεψ ωορδσ] §¬«¼§µ²°¼µ¬¦¨·¬± ~ ¬¯³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²±~ °¤¯²±§¬¤§¨ «¼§¨ ~©µ¨¨µ¤§¬¦¤¯¶~¤±·¬²¬¬§¤·¬²± ≈责任编辑 古云侠 
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第 u{卷第 tu期
ussv年 tu月
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