全 文 ： °2°≤测定保和丸中齐墩果酸 !熊果酸的含量
陈战国 3 o金燕子 o李 强
k陕西师范大学 化学与材料科学学院 o陕西 西安 ztssyul
≈收稿日期 ussx2tt2tw
≈通讯作者 z陈战国 o ר¯} ksu|l{xvs{wwuo ∞2°¤¬¯} ¦«½«ª
¶±±∏1 §¨∏1 ¦±
保和丸是一通治食郁 k积 l的著名方剂 o目前国
内已有多家药厂生产 ∀虽然 5中国药典 6已有其标
准 o但定性质量检测是以连翘为对照药材 o而定量检
测则以陈皮中的橙皮苷为对照成分 o检测对象缺乏
统一性也比较单一 ≈t ∀仅见有保和丸中橙皮苷含
量测定的报导 ≈u o未见齐墩果酸 !熊果酸同时测定
的报道 ∀为了进一步完善保和丸的质量标准 o作者
建立了保和丸复方制剂中有效成分齐墩果酸和熊果
酸 k来源于山楂 !连翘 l≈v2y 的 °2°≤定量测定方
法 o该方法简单 !准确 !重复性好 ∀
1 仪器与试药
美国 ª¬¯¨ ±·ttss型高效液相色谱仪 o紫外检
测器 ~德国
≥uuw≥电子天平 ∀ ∞ pxu旋转薄膜
蒸发仪 k上海亚荣生化仪器厂 l∀
齐墩果酸对照品 k批号 zs|2{|svl!熊果酸对照
品 k批号 ttszwu2usswtxl均购自中国药品生物制品
检定所 o供含量测定用 ∀甲醇为色谱纯 o醋酸 !石油
醚 !乙醚为分析纯 ~水为去离子的双蒸馏水 ∀保和丸
k浓缩丸 o≠ 批号 ussxsuxyo兰州佛慈制药厂 ~ 批
号 ussxstxvo兰州佛慈制药厂 ~≈批号 swsxtzo兰州
太宝制药有限公司 ~…批号 sxsvsvo芜湖张恒春药
业有限公司 ~ 批号 swsxtzo芜湖张恒春药业有限
公司 ~¡批号 swtssuo河南省宛西制药公司 ~¢批号
ussxsvto兰州佛慈制药厂 l∀微孔滤膜 s1wx Λ°o上
海市新亚净化器件厂生产 ∀
2 方法与结果
211 色谱条件 µ²°¤¶¬¯ ≤t{分析柱 kw1 y °° ≅ uxs
°°ox Λ°l~流动相甲醇 2水 2醋酸 k{yΒtuΒulo流速
s1{ °# °¬±pt ~检测波长 utx ±°≈z ~柱温为室温 ∀
进样量 us Λo灵敏度 s1su ƒ≥∀
212 工作曲线的绘制 准确称取齐墩果酸 tx1w
°ª!熊果酸 tx1u °ª对照品转溶于 ts °量瓶中 o加
甲醇稀释至刻度 o制成混合对照品溶液备用 ∀精密
吸取齐墩果酸 !熊果酸混合对照品溶液 s1sxos1to
s1uos1wos1{ot1sou1sow1s °于 {个 x °量瓶
中 o用甲醇稀释至刻度 o微孔滤膜过滤备用 ∀在选定
的色谱条件下 o每样重复进样 v次 o每次 us Λ∀以
对照品的质量浓度为横坐标 o所测峰面积为纵坐标
绘制工作曲线 ∀齐墩果酸回归方程 Ψ y t{y1|Ξ n
w{1x{x, ρ s1||| {(ν {)o线性范围 s1stx ∗ t1uvu
°ª# °pt ∀熊果酸回归方程 Ψ x xsu1{Ξ n
tt1zxz, ρ s1||| { (ν {)o线性范围 s1stx ∗
t1uty °ª# °pt ∀
213 供试品溶液的制备 准确称量保和丸 k浓缩
丸 l样品 vs ªo粉碎后置于索氏提取器中 o加石油醚
适量 o回流 v «o弃去石油醚 ∀加入乙醚适量 o继续在
索氏提取器中回流 w «o将回流液过滤 o弃去残渣 o再
将乙醚蒸干 o蒸干后的残渣用甲醇溶解并定容于 x
°量瓶中 o微孔滤膜过滤 o制得保和丸 k浓缩丸 l样
品提取液 ∀
214 保和丸处方药对照溶液的制备与含量测定
按保和丸的处方量 o称取 zx ª保和丸处方药 k相当
于 vs ª成药 lo按 213方法制备处方药对照溶液 o定
容于 xs °量瓶中 o制得处方药对照溶液 o吸取 us
Λo注入色谱仪 o记录色谱图 o测定处方药中齐墩果
酸 !熊果酸的含量 ∀结果保和丸处方药对照溶液中
齐墩果酸的质量分数为 txt1v Λª# ªpt o熊果酸的质
量分数为 tzs1z Λª# ªpt ∀
215 阴性对照试验 依照保和丸处方量 o按 213方
法制备不含山楂 o连翘药材的阴性对照样品溶液 o吸
取 us Λo注入色谱仪 o记录色谱图 ∀结果表明 o阴
性对照溶液中不含齐墩果酸 !熊果酸 o其他峰对测定
无干扰 o见图 t∀
216 精密度试验 以同一混合对照品溶液进样 o每
次 us Λo重复进样 x次 ∀测得齐墩果酸的峰面积
平均值 t twt1vto ≥⁄ t1th kν xl~熊果酸的峰面
积平均值 t svz1{yo ≥⁄ t1w h kν xl∀
#svyt#
第 vt卷第 t|期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ t|
¦·²¥¨ µoussy
21211 蒲公英水提液的制备 ≈u 称取蒲公英药材适
量 o加水浸泡 t1x «o提取 u次 o加水量分别为 tu倍 o
ts倍 o提取时间分别为 t1xot1s «o收集提取液 o备用 ∀
21212 壳聚糖溶液的配制 取壳聚糖适量 o加 th冰
醋酸溶液配成 th的溶液 o备用 k使用前临时配制 l∀
21213 药液浓度对絮凝澄清效果的影响 取等量蒲
公英水提液 w份 o分别真空浓缩至生药量 kªl与药液
体积 k°l之比为 tΒuotΒxotΒ{otΒtso置于集热式恒
温加热磁力搅拌器上加热至 ys ε 保温 o搅拌 ktxs µ#
°¬±pt lts °¬±o加入壳聚糖溶液 k按药液中生药量计 o
每克生药加入 t1y °lo边加边搅拌 o加完后继续搅
拌 ts °¬±o取出放冷 o静置 tu «o观察溶液的澄清度与
沉淀物形状 o结果见表 t∀
表 t 药液含量对澄清效果影响
水提液浓缩程度 溶液澄清度 沉淀物形状
tΒu p 片状
tΒx n 片状
tΒ{ 6 絮状
tΒts 6 絮状注
注 }/ 20表示溶液混浊 ~/ n 0表溶液变清 ~/ 6 0表示溶液透亮
由表 t可见 o采用壳聚糖絮凝澄清时 o药液浓缩
程度在 tΒ{或 tΒts时为佳 ∀考虑 tΒts的药液体积
相对较大 o大生产时可能带来操作不便 o故确定药液
浓缩程度为 tΒ{∀
21214 壳聚糖溶液用量的考察 取缩程浓度为 tΒ{
的蒲公英水提浓缩液 ux °o共 z份 o分别加入不同
量的壳聚糖溶液 o其他操作同上 o取静置后的药液抽
滤 o滤液定容至 xs °∀精密量取滤液与絮凝前药液
适量 o按上述方法测定咖啡酸转移率 !药液透光率及
浸膏得率 o结果见表 u∀
表 u 壳聚糖溶液用量考察
考察指标
用量 tl
s ts us vs ws xs ys
透光率 rh tz1s y|1w {v1z {w1y {t1{ {t1u {t1v
咖啡酸保留率 rh yv1yw x{1t{ x|1v| ys1vs x{1z| xu1zv xy1vy
浸膏得率 rh vv1vs uv1z{ uv1vu t{1{x t{1|| t|1st t|1sx
溶液澄清度 p n 6 7 6 n n
沉淀物形状 片状 絮状 颗粒状 颗粒状 片状
注 }tl壳聚糖溶液用量按蒲公英水提浓缩液体积的百分数计算
由表 u可知 o壳聚糖用量为 vsh时 o药液透光
率最大 o药液最澄清 o且浸膏得率最小 ~其用量在
tsh ∗ wsh时 o咖啡酸保留率变化不大 ∀另外 o溶液
澄清度与透光率高时 o咖啡酸保留率亦较高 o故从检
测快速简便的角度考虑 o以下实验主要以药液透光
率 !溶液澄清度作为评价指标 ∀
21215 搅拌速度的考察 取缩程浓度为 tΒ{的蒲
公英水提浓缩液 ux °共 w份 o以不同的速度搅拌 o
加入占药液体积 vsh 的壳聚糖溶液 o其他操作同
上 ∀精密量取滤液适量 o测定药液透光率 ∀结果表
明 o搅拌速度为 txs ∗ uss µ# °¬±pt时 o澄清效果良
好 o见表 v∀
21216 温度的考察 取缩程浓度为 tΒ{的蒲公英
水提浓缩液 ux °共 w份 o分别加热至 xsoysozso
{s ε 保温 o搅拌 ts °¬±ktxs µ# °¬±pt lo以下操作同
上 ∀结果表明 o以 ys ε 时絮凝澄清效果为佳 o见表
v∀
21217 ³的考察 取缩程浓度为 tΒ{的蒲公英水
提浓缩液 k³ x1slux °o共 w份 o分别用氨试液调
节药液的 ³为 x1soy1soz1so{1so加热至 ys ε 保
温 o以下操作同上 ∀结果表明 o药液 ³为 x1s ∗ y1s
时可获得良好的絮凝澄清效果 o见表 v∀
表 v 搅拌速度 !絮凝温度与絮凝 ³考察
考察因素 透光率 rh 药液澄清度 沉淀物形状
搅拌速度 rµ# °¬±pt tss z{1| n 片状
txs z|1y 6 颗粒状
uss z|1u 6 颗粒状
uxs zz1x n 片状
絮凝温度 rε xs z{1x n 片状
ys z|1y 6 颗粒状
zs z{1y n 片状
{s zz1x n 片状
絮凝 ³ x1s z{1| 6 颗粒状
y1s {s1u 7 颗粒状
z1s zx1t n 片状
{1s yz1x 2 絮状
213 絮凝澄清工艺与醇沉工艺的比较 根据上述
试验选定的絮凝条件 o取缩程浓度为 tΒ{的蒲公英
水提浓缩液 ux °o调节药液 ³ y1so加热至 ys ε
保温 o搅拌 ts °¬±ktxs µ# °¬±pt lo加入占药液体积
vsh的壳聚糖溶液 o加完后继续搅拌 ts °¬±o取出放
冷 o静置 tu «o抽滤 o定容至 xs °∀另取缩程浓度
为 tΒt的蒲公英水提浓缩液 ux °o在搅拌下加入
|xh乙醇使药液含醇量达 zsh o静置 uw «o抽滤 o定
容至 xs °∀取絮凝澄清滤液与醇沉滤液适量 o分
别测定咖啡酸含量 k同时测定絮凝与醇沉前药液含
量 o以计算保留率 l!药液透光率与浸膏得率 o结果
见表 w∀
#vvyt#
第 vt卷第 t|期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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表 w 絮凝澄清与醇沉的比较 h
工艺 咖啡酸保留率 透光率 浸膏得率
絮凝 x|1y {t1t uw1w
醇沉 xv1v zu1s uu1v
3 小结与讨论
通过对影响絮凝澄清工艺的多种因素进行考
察 o初步确定了壳聚糖用于蒲公英水提液絮凝澄清
的工艺条件 o即药液缩程浓度为 tΒ{k生药量 Β药液
体积 loth壳聚糖溶液加入量为药液体积的 vsh o
搅拌速度约为 txs ∗ uss µ# °¬±pt o絮凝温度为 ys
ε o药液 ³为 y1s∀另外 o药液浓度 !壳聚糖溶液加
入量 !及药液 ³对蒲公英水提液絮凝澄清的效果
影响较大 o提示实际生产操作中应注意严格控制相
应的工艺条件 ∀
与传统的醇沉工艺进行对比 o采用壳聚糖絮凝
澄清工艺对蒲公英水提液进行精制 o效果较为满意 ∀
不但药液的澄清度高 o而且有效成分的保留率亦高 ∀
另外 o壳聚糖絮凝澄清工艺相对于醇沉工艺 o具有操
作简便 !生产安全 !周期短 o生产成本低等优点 ∀
蒲公英水提液经光谱扫描 o表明在波长 wss ±°
以上区域的吸收值较小 o且吸收曲线较为平坦 ∀由
于在此波长区域 o某个波长药液吸收值或透光率的
大小难以反映药液中所含化学成分浓度的高低 o但
却可以反映药液的澄清或混浊程度 k药液中存在的
微粒可部分阻挡光线透过而影响药液的透光率 lo
故本实验在此波长区域选择了 wxs ±°作为药液透
光率的测定波长 o以便通过透光率的测定对絮凝澄
清的效果作出定量的分析 ∀
≈参考文献
≈t 季宇彬 1中药有效成分药理与应用 ≈ 1哈尔滨 }黑龙江科学
技术出版社 ot||x}|t1
≈u 谭红胜 o夏新华 o楚生辉 1正交试验法优选蒲公英水提工艺
≈ 1中药材 ousswouzkvl}utt1
≈v 中国药典 ≈≥ 1一部 1usss}u{|1 ≈责任编辑 鲍 雷
≈收稿日期 ussx2tu2us
≈通讯作者 3 栾立标 oר¯}ksuxl{xvv||wsotv|xt|vx{vwo∞2
°¤¬¯} ∏¯¤± ¬¯¥¬¤² tuy1¦²°
°≤分离测定四逆汤中 v种双酯型生物碱及其 y种水解产物
孙婷婷 o栾立标 3
k中国药科大学 药学院 药剂教研室 o江苏 南京 utsss|l
四逆汤为中医的经典名方 o由附子 k制 l!干姜及
炙甘草 k蜜炙 l组成 o具有温中祛寒 !回阳救逆的功效 ∀
现代药理研究表明该药具有强心 o抗休克 o增加冠脉
血流量的作用 ≈t ∀该方的君药为附子 o其主要成分为
乌头类生物碱 k包括乌头碱 !新乌头碱和次乌头碱 lo
此类生物碱属于双酯类生物碱 o毒性极大 ∀酯类生物
碱分子中的酯键是产生毒性的关键部位 o在水中加热
易水解 o首先生成苯甲酰乌头原碱 o进一步反应产生
乌头原碱 o两类水解产物毒性极小 o但仍有药理活
性 ≈u ∀因此 o能有行之有效的方法准确检测出该药中
的各种活性成分是十分重要的 o对确保临床用药的安
全性有效性以及四逆汤这一经典药方的新剂型研发
都有极为重大的意义 ∀本研究的方法能严格检出该
药中 |种不同的生物碱的含量 o尤其是首次提出分别
测量乌头类生物碱的 y种不同水解产物的方法 o为进
一步严格控制该药的质量提供依据 ∀
1 仪器与试药
岛津 ≤ p ts×高效液相色谱仪 op usss色
谱工作站 o ª¬¯¨ ±·ttss≤ 2⁄⁄2 ≥⁄o∞uws型电
子天平 k瑞士 ∞××∞ 公司 lo ³≥ p ux数显 ³
计 oƒ p t型电热干燥箱 oƒ± p |zv型旋转薄膜蒸
发仪 o≥ p ⁄k} l型循环水式真空泵 ∀
新乌头碱 !次乌头碱 !乌头碱对照品由中国药品
生物制品检定所提供 k批号分别为 sz||2|wsvosz|{2
|wsvottszus2usswtsl~附子 k制 l!干姜 !甘草 k蜜
炙 l由南京大华中药店提供 o由本校中药学院副教
授张勉鉴定 ~甲醇为色谱纯 ~水为去离子水 ~其他试
剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
#wvyt#
第 vt卷第 t|期
ussy年 ts月
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ t|
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