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wenowandwherearewegoing?BrJCancer,2004,90(1):1
TaohongSiwudecoctionⅡinhibitstheangiogenesisandtheexpressionsof
VEGFandKDR/FLK1inC57BL/6JmicebearingB16melanoma
WANGShumei,XUXiaoyu,CHENGang,YANGLirong
(ColegeofTraditionalChineseMedicineofChongqingUniversityofMedicalsciences,Chongqing400050,China)
[Abstract] Objective:ToinvestigatetheefectsofTaohongSiwudecoctionⅡonB16melanomainmiceandtheunderlyingmecha
nism.Method:C57BL/6JmicebearingB16melanomawereusedinthisstudy.TheexperimentalgroupsweretreatedrespectivelywithTao
hongSiwudecoctionⅡ atdosesof2.5,5and10g·kg-1andcyclophosphamideat0.05g·kg-1,TaohongSiwudecoctionⅡat10g·kg-1plus
cyclophosphamideat0.025mg·kg-1.Thetumorvolumeandweight,theexpressionofVEGFandKDR/FLK1andtheamountofMVDwere
measured.Result:Thetumorvolumeandweight,theexpressionofVEGFandKDR/FLK1andtheamountofMVDwerereducedsignificantly
aftertreatmentwithTaohongSiwudecoctionⅡatthedosesof5and10g·kg-1andTaohongSiwudecoctionⅡcombinedwithcyclophosphamide
ascomparedwithnormalsalinetreatedgroup(P<0.01).Conclusion:TaohongSiwudecoctionⅡcaninhibitthegrowthofB16melanomain
miceandatenuatetheexpressionsofVEGFandKDR/FLK1,suggestingthatTaohongSiwudecoctionⅡ producestheantitumorefectviaa
possibleantiagiogenisismechanism.
[Keywords] TaohongSiwudecoctionⅡ;B16Melanoma;VEGF;KDR/FLK1;agiogenisis [责任编辑 古云侠]
[收稿日期] 20050526
[基金项目] 福建省教育厅立项项目(JB01183)
[通讯作者] 吴符火,Tel:(0591)83571180,Email:wufuhuo@
163com
丹七胶囊的药效学研究
吴符火,刘雪酶,贾 铷
(福建中医学院,福建 福州 350003)
[摘要] 目的:评价丹七胶囊活血化瘀、理气止痛,临床用于心胸痹痛、头痛、月经痛的药效作用。方法:采用
异丙肾上腺素引起大鼠心肌缺血和小鼠耗氧量增加;乙烯雌酚、催产素诱发的雌性小鼠子宫痉挛性疼痛和醋酸性
疼痛的扭体反应和大鼠高脂血症模型。观察丹七胶囊的药理作用,并与丹七片比较。结果:丹七胶囊可明显改善
异丙肾上腺素引起的大鼠心肌缺血的心电图变化和延长小鼠耐缺氧时间;对乙烯雌酚、催产素诱发的雌性小鼠子
宫痉挛性疼痛和醋酸性疼痛的扭体反应,可明显延长扭体潜伏期和扭体次数;降低高脂血症大鼠的甘油三酯(TG)、
总胆固醇(TC),提高高密度脂蛋白胆固醇(HDLc),对全血黏度、全血还原黏度和红细胞刚性指数、变形指数及电泳
指数亦有降低作用,与对照组比 P<005,P<0001,其等效剂量小于丹七片。结论:丹七胶囊具有改善心肌缺血、
提高耐缺氧能力、镇痛、降低血脂和血液黏度等作用,为丹七胶囊临床用于心胸痹痛、头痛、月经痛提供实验依据。
[关键词] 丹七胶囊;心肌缺血;耐缺氧;镇痛;血液流变性
[中图分类号]R2855 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2005)23186905
丹七胶囊来源于部颁标准丹七片,为提高疗效,减
少服用量,将丹七片按原处方比例改制为丹七胶囊剂。
该药由丹参、三七两味中药组成,具有活血化瘀、理气
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Vol30,Issue 23
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止痛的功效[1],临床用于心胸痹痛、头痛、月经痛。笔
者对丹七胶囊进行动物实验性心肌缺血、耐缺氧、止
痛、血液流变性等药效学试验,并设等效剂量(0525g
丹七胶囊相当于075g丹七片)与丹七片比较。
1 材料
11 动物
清洁级SD大鼠、ICR小鼠,雌雄兼用,购自上海
西普尔必凯实验动物有限公司,合格证号:沪动合证
字152号、153号。
12 药物与试剂
丹七胶囊,批号011121,丹七片,批号011123,福
州闽海药业公司提供;山楂精降脂片,宁夏启元药
业,批号011118;心得安片,常州四药制药有限公司,
批号 010222;异丙肾上腺素,上海禾丰制药有限公
司,批号000301;缩宫素注射液,安徽新力药业有限
公司马鞍山分厂,批号0111012;乙烯雌酚,广东华南
制药厂,批号020401。甘油三脂、胆固醇、血糖、高密
度脂蛋白胆固醇试剂盒:上海复星长征医学科学有
限公司;胆固醇,中国医药(集团)上海化学试剂公
司,批号F20010325。
13 仪器
LBY-N6B型全自动模块式血流变仪(北京普利生
精密仪器研究中心);日立7060半自动生化仪;BL-310
生物技能系统(成都泰盟科技有限公司)。
2 方法
21 丹七胶囊对异丙肾上腺素引起大鼠心肌缺血
心电图的影响
选体重200~250g大鼠70只随机分7组,每组
10只,雌雄各半。实验设:丹七胶囊高、中、低(105,
0525,02625g·kg-1)3个剂量组;丹七片对照组
075g·kg-1(相当于丹七胶囊 0525g·kg-1);心得
安阳性对照组48mg·kg-1。以上各剂量配成10mL
混悬液,按大鼠体重1mL·100g-1灌胃(ig);模型对
照组和正常对照组给等量饮用水,连续3d。除正常
对照组外,其他各组大鼠同时腹腔注射异丙肾上腺
素2mg·kg-1。末次 ig后(大鼠乌拉坦麻醉,仰卧,
连接心电图Ⅱ道联)1h,腹腔注射异丙肾上腺素 2
mg·kg-1,记录30s,1,2,3,5,10,20,30,45min心电
图,以ST段和T波偏移平均值,作为心肌缺血程度
和评价药物疗效的指标[2]。
22 丹七胶囊对小鼠心肌耐缺氧的影响
小鼠70只,随机分成 7组,每组 10只,雌雄各
半。实验设:丹七胶囊高、中、低(126,063,0315g
·kg-1)剂量组,丹七片组09g·kg-1,心得安阳性组
48mg·kg-1,各药均配成 20mL的混悬液,按体重
02mL·10g-1ig;模型对照组和正常对照组灌服等
量饮用水,每天1次,持续3d。末次 ig后1h,正常
对照组小鼠腹腔注射生理盐水,其他组注射异丙肾
上腺素2mg·kg-1,即放入250mL内放20g钠石灰
的广口玻璃瓶中,瓶口涂凡士林密闭,观察瓶内小鼠
因缺氧致死亡所需的时间[3]。
23 镇痛试验
231 丹七胶囊对痛经模型小鼠的镇痛作用
选雌性小鼠70只,其中60只小鼠每天给乙烯雌酚2
mg·kg-1ig,连续12d造模,随后将造模小鼠随机分
6组,每组10只;另10只小鼠为正常对照组。造模
小鼠分别设:模型对照组;丹七胶囊高、中、低剂量组
和丹七片对照组(剂量同 22);阳性药对照组去痛
片05g·kg-1。模型对照组与正常对照组给等体积
饮用水,按体重02mL·10g-1ig,每天1次,连续 3
d。末次给药后 1h,腹腔注射宫缩素致痛,观察 30
min内小鼠扭体潜伏期和扭体次数[4]。
232 丹七胶囊对醋酸致痛模型小鼠的镇痛作用
选雄性小鼠60只,随机分6组,每组10只。实验
设:丹七胶囊高、中、低剂量组和去痛片阳性对照组;
丹七片对照组(剂量同22);对照组给等量饮用水。
均按体重02mL·10g-1ig,每天1次,连续3d。末
次给药后1h,腹腔注射06%醋酸02mL/只,观察
小鼠扭体潜伏期和扭体次数[5]。
24 丹七胶囊对实验性高脂血症大鼠血脂、血糖及
血液流变性的影响
241 高脂饲料配制 将10%的猪油、1%的胆固
醇、01%去氧胆酸钠和02%丙基硫氧嘧啶加入普
通饲料粉末中制成固体高脂饲料[2]。
242 动物分组及给药 大鼠 70只随机分 7组,
每组10只,雌雄各半。实验设:正常对照组;模型对
照组;丹七胶囊高、中、低(18,09,045g·kg-1)3个
剂量组;丹七片对照组1285g·kg-1;山楂精片阳性
对照组 18g·kg-1。正常组给普通饲料,其余组给
高脂饲料喂养6周。第4周给药组开始 ig给药,模
型组和正常组给等量饮用水,连续3周。末次给药
后大鼠禁食,不禁水 12h,断头取血,测甘油三酯
(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL
c)、血糖(Glu)和全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、
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全血还原黏度、血沉(ESR)、红细胞的聚集、刚性、变
形及红细胞电泳指数等指标。
25 统计方法
数据以珋x±s表示,采用 SPSS80软件进行 t
检验,以 P<005为显著性差异。
3 结果
31 丹七胶囊 0525~105g·kg-1组对异丙肾上
腺素引起大鼠心肌缺血心电图ST段和T波的改变,
有明显保护作用。丹七胶囊0525g·kg-1效果优于
丹七片075g·kg-1(表1,2)。
表1 丹七胶囊对异丙肾上腺素引起大鼠心肌缺血心电图ST段的影响(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
ST段偏移平均值/mV
30s 2min 5min 10min 20min 45min
模型对照组 - 037±009 035±009 034±009 035±007 034±008 035±008
正常对照组 - 022±0052) 022±0042) 022±0052) 022±0052) 022±0042) 023±0052)
丹七胶囊组 105 026±0072) 026±0062) 027±0051) 027±0061) 028±0061) 026±0061)
0525 026±0062) 027±0061) 026±0061) 027±0061) 026±0041) 027±0061)
02625 033±009 033±008 033±008 032±008 033±009 035±007
丹七片组 075 032±008 029±007 020±007 030±007 031±008 030±007
心得安组 0048 024±0062) 023±0052) 024±0062) 024±0062) 024±0062) 024±0062)
注:与模型对照组比较1)P<005,2)P<001
表2 丹七胶囊对异丙肾上腺素引起大鼠心肌缺血心电图T波的影响 (珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
T波平均值/mV
30s 2min 5min 10min 20min 45min
模型对照组 - 022±005 023±006 022±004 022±004 023±005 022±004
正常对照组 - 034±0043) 035±0043) 034±0053) 035±0043) 035±0053) 035±0053)
丹七胶囊组 105 031±0072) 031±0062) 031±0072) 030±0062) 030±0081) 031±0072)
0525 024±005 024±004 025±004 025±004 025±005 025±004
02625 022±004 022±004 022±003 022±004 022±003 023±004
丹七片组 075 023±005 023±005 023±006 023±006 023±005 023±006
心得安组 0048 033±0042) 032±0072) 032±0072) 032±0072) 032±007 032±0062)
注:与模型对照组比较1)P<005,2)P<001,3)P<0001(表3~8同)
32 丹七胶囊063~126g·kg-1,给小鼠连续 ig3
d,对注射异丙肾上腺素小鼠的耐缺氧时间可明显延
长。丹七胶囊 0525g·kg-1的效果相当于丹七片
075g·kg-1(表3)。
表3 丹七胶囊对注射异丙肾上腺素小鼠
耐缺氧时间的影响(珋x±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 耐缺氧时间/min
模型对照组 - 215±196
正常对照组 - 242±2901)
丹七胶囊组 126 249±1912)
063 242±2661)
0315 228±239
丹七片组 090 257±1703)
心得安阳性对照组 0048 286±3343)
33 镇痛试验 丹七胶囊 126g·kg-1,给小鼠连
续 ig3d,对痛经模型和醋酸致痛模型小鼠可明显延
长扭体潜伏期和减少扭体次数,表明有镇痛作用。
丹七胶囊 063g·kg-1效果相当于丹七片 090g·
kg-1(表4)。
34 丹七胶囊045~180g·kg-1,给大鼠连续ig21
d能明显降低高脂血症大鼠 TG,TC,HDLc和全血
黏度及红细胞刚性、变形和电泳指数。丹七胶囊
090g·kg-1不如丹七片 1285g·kg-1效果明显(表
5~8)。
4 结论
实验结果表明:①丹七胶囊对异丙肾上腺素引
起的大鼠心肌缺血有明显的改善作用;②对实验性
高脂血症大鼠有降低 TG,TC和提高 HDLc的作用,
对全血黏度、全血还原黏度和红细胞刚性指数、变形
指数及电泳指数亦有降低作用;③丹七胶囊能显著
延长小鼠耐缺氧时间,对宫缩素引起的雌性小鼠子
宫痉挛性疼痛和醋酸引起的刺激性疼痛亦有一定的
缓解作用。丹七片改胶囊剂后,保持原片剂的药效,
胶囊剂的等效剂量小于丹七片。本实验结果为丹七
胶囊活血化瘀的功效及临床用于心胸痹痛、头痛、月
经痛提供了实验依据。
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表4 丹七胶囊对醋酸致痛和痛经模型小鼠扭体潜伏期和扭体次数的影响(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
醋酸致痛 痛经模型组
扭体潜伏期/min 扭体次数 扭体潜伏期/min 扭体次数
模型对照组 - 25±16 482±73 75±38 326±104
正常对照组 - 153±343) 134±573)
丹七胶囊组 126 59±292) 374±961) 103±41 207±961)
063 42±26 431±123 87±40 285±170
0315 28±13 475±130 76±34 278±109
丹七片组 18 47±30 423±118 77±37 295±85
去痛片组 05 86±333) 276±693) 116±62 178±1173)
表5 丹七胶囊对高脂血症大鼠TG,TC,HDLc和Glu的影响(珋x±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 TG/mmol·L-1 TC/mmol·L-1 HDLc/mmol·L-1 Glu/mmol·L-1
模型对照组 - 149±028 408±072 089±024 386±052
正常对照组 - 091±0213) 179±0283) 118±0221) 332±0691)
丹七胶囊组 18 106±0163) 333±0801) 126±0182) 381±066
09 106±0242) 347±0521) 120±0111) 324±0591)
045 140±032 338±0471) 098±020 353±054
丹七片组 1285 104±0252) 293±0522) 122±0172) 326±0421)
山楂精片组 18 086±0133) 377±076 122±0242) 329±0471)
表6 丹七胶囊对高脂血症大鼠全血黏度、血浆黏度、红细胞压积的影响(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
全血黏度/mPa·s
低切 中切 高切
血浆黏度
/mPa·s
红细胞压积
/%
模型对照组 - 1054±154 578±078 454±061 153±007 3890±166
正常对照组 - 794±0913) 423±0453) 348±0303) 150±004 3680±402
丹七胶囊组 18 638±1263) 367±0353) 306±0283) 153±007 3820±332
09 773±0863) 403±0523) 325±0353) 150±009 3670±2661)
045 838±0762) 467±0332) 380±0232) 149±006 3755±397
丹七片组 1285 912±1131) 511±0371) 408±0271) 147±006 3940±135
山楂精片组 18 762±1113) 434±0503) 364±0292) 155±006 3700±368
表7 丹七胶囊对高脂血症大鼠全血还原黏度和血沉的影响(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
血沉
/mm·h-1
全血还原黏度/mPa·s
低切 中切 高切
血沉方程
(K值)
模型对照组 - 700±507 2343±404 1120±210 801±159 2102±1527
正常对照组 - 670±437 1784±4132) 748±1803) 546±l302) 1713±899
丹七胶囊组 18 830±589 1291±3083) 570±0933) 407±0653) 2370±1902
09 630±221 1827±2322) 691±1563) 476±0993) 1774±842
045 600±304 1847±2952) 850±1392) 617±1062) 1640±689
丹七片组 1285 820±530 1950±3411) 926±1201) 665±0871) 2512±1633
山楂精片组 18 1010±549 1642±2633) 758±1413) 566±0862) 2686±1073
表8 丹七胶囊对高脂血症大鼠红细胞聚集、刚性、变形和电泳指数的影响(珋x±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 红细胞聚集指数 红细胞刚性指数 红细胞变形指数 红细胞电泳指数
模型对照组 - 233±078 558±110 094±010 699±105
正常对照组 - 228±016 365±0932) 078±0142) 529±0692)
丹七胶囊组 18 207±031 271±0473) 064±0073) 557±1052)
09 228±026 318±0763) 071±0123) 624±086
045 220±015 408±0752) 082±0111) 592±0681)
丹七片组 1285 223±024 452±0631) 085±0071) 568±0711)
山楂精片组 18 209±020 364±0523) 078±0083) 567±0532)
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第30卷第23期
2005年12月
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Vol30,Issue 23
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(DeptofPharmacy,FujianColegeofTraditionalChineseMedicine,Fuzhou350003,China)
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removingbloodstasis,regulationDanqiandrelievingpainsoastobeusedtotreatthoracicobstruction,headache,menstrualpaininclinic.
Method:TocomparethepharmacologicefectsofDanqicapsuleDanqitabletintheratswithacutemyocardialischemiaandthemicewiththe
increasedoxygenconsumptioninducedbyisoproterenolinjectedsubcutaneouslyThepainmodelswerepreparedbyinjectionofaceticacidand
uterospasmmodelinthefemalemousewasinducedbydiethylstilbestrolandpitocin.Ahyperlipidemiamodelwasalsomadeintherats.Re
sult:DanqicapsulecouldsignificantlyimproveECGinmyocardialischemiaofratsinducedbyisoproterenolandprolongthemicesurvivaltime
underhypoxicsituation.Intheexperimenttoobservethepainresponsewithbodytwistasaindexinducedbyaceticacidanduterospasmin
ducedbydiethylstilbestrolandpitocin,Danqicapsulecouldsignificantlyshortenthelatencyandthetimecourseofbodytwist.Thecontentsof
triglyceride(TG)andtotalcholesterol(TC)weredecreased,whilethelevelofhighdensityliporoteincholesterol(HDLc)wasincreasedafter
treatmentofDanqicapsuleinintheratswithhyperlipidemia.Hemorheologicaldatashowedthatthebloodviscosity,bloodreductiveviscosity,
erythrocyterigidityindexandelectrophoresistimeweresignificantlydecreasedbyDanqicapsuleintheanimalmodelmentionedaboveascom
paredwithcontrolgroup(P<005orP<001).Inaddition,thedoseofDanqicapsuleislessthanthatofDanqitabletforproducingequiv
alentefect.Conclusion:Danqicapsuleplaysagoodroleinimprovingmyocardialischemia,increasingthetolerantabilityagainstoxygendefi
ciency,aleviatingpainanddescendingthelevelsofbloodfatandbloodviscosity
[Keywords] Danqicapsule;myocardialischemia;hypoxia;painrelief;hemorheology
[责任编辑 古云侠]
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第30卷第23期
2005年12月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol30,Issue 23
December,2005