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≈x  郑亦文 o马东来 o陈敏珠 1 木犀草素对大鼠腹腔巨噬细胞释放
‹u’u影响 1 中国药理学通报 ot||s oyktl }xy1
≈y  ∞§ª¤µ°¬¦®¤±§ ≠²±¤ Ž¨¬¶¤µ¬q „ ≥¬°³¯¨ ≤²¯²µ¬° ·¨µ¬¦  ·¨«²§©²µ
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≈z  李会强 o姚 智 o赵瑾莹 o等 1Œ2t oŒ2y及 × ‘ƒΑ  × × 检测方
法的建立 q天津第二医学院学报 ot||v o|kvl }w1
≈{  梁君山 o魏 伟 o周爱武 o等 1 白细胞介素 t的检测及白芍总甙
对其产生的影响 1 中国药理学通报 ot|{| oxkyl }vxw1
≈|  葛志东 o周爱武 o王 斌 o等 q白芍总甙 !芍药甙和白芍总甙去
除芍药甙对佐剂性关节炎大鼠的免疫调节作用 1 中国药理学通
报 ot||x ottkwl }vsv1
≈ts  陈 奇 1 中药药理研究方法学 1 北京 }人民卫生出版社 o
t||w1vxx1
≈tt  马东来 o李凤云 o邓 昊 o等 1 • „ 与 ≥∞患者 Œ2t oŒ2u的检
测等 1 中国免疫学杂志 ot||t ozkyl }vw{1
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¶·∏§¼ ·«¨ ° ¦¨«¤±¬¶° ²©¤±·¬¤µ·«µ¬·¬¶ ©¨©¨ ¦·¶²© ±∏©¨ ±ª¶«¬°µ¨¶¦µ¬³·¬²±q Μετη2
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²©«¼§µ²ª¨ ± ³¨µ²¬¬§¨ ¤±§¬±·¨µ¯¨ ∏®¬±2t¬± „„ µ¤·¶k Π s qsxl o·«¨ ³²·¨±¦¼ ¥¨¬±ª¶¬°¬¯¤µ·²³µ¨§±¬¶²±¨ qΧονχλυ2
σιον : ±∏©¨ ±ª¶«¬°µ¨¶¦µ¬³·¬²± ≤²∏¯§µ¨§∏¦¨ ·«¨ µ¬¶¬±ª¯¨ √¨¯ ²©¬±·¨µ¯¨ ∏®¬±2t ¤±§«¼§µ²ª¨ ± ³¨µ²¬¬§¨ ¬± „„ µ¤·¶o
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[ Κεψ ωορδσ] ±∏©¨ ±ª¶«¬°µ¨¶¦µ¬³·¬²±~¤§­∏√¤±·¤µ·«µ¬·¬¶~«¼§µ²ª¨ ± ³¨µ²¬¬§¨ ~¬±·¨µ¯¨ ∏®¬±2t
≈责任编辑 方文贤 
巴戟天寡糖对皮质酮损伤的 °≤tu细胞的保护作用
李云峰 o杨 明 o赵毅民 o罗质璞
k军事医学科学院 毒物药物研究所 o北京 tss{xsl
≈摘要  目的 }探讨巴戟天寡糖k  • 2|zl抗抑郁作用的可能机制 ∀方法与结果 } • 2|z或 ‘Šƒ与皮质酮 u ≅
ts p w °²¯#p t共孵 °≤tu细胞 w{ «o可防止皮质酮所致的 °≤tu神经细胞损伤 ∀进一步运用 • ×2°≤ • 方法研究表
明 o • 2|zktss °ª#®ªp tl及去甲丙米嗪kts °ª#®ªp tl慢性¬³ut§o可使大鼠前脑皮层 ‘Šƒ !脑源性神经营养因子
k…⁄‘ƒl及海马 …⁄‘ƒ °• ‘„表达升高 ∀结论 } • 2|z抗抑郁作用机理可能与神经细胞营养因子表达升高 o从而
对皮质酮诱导的神经元损伤产生保护作用有关 ∀
≈关键词  巴戟天寡糖 ~皮质酮 ~°≤tu细胞 ~神经营养因子
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusssls|2sxxt2sw
≈收稿日期 t|||2tu2sz
开发新型 !高效 !低毒副作用的抗抑郁剂始
终是精神药理学的一个重要研究课题 o因此从植物
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第 ux卷第 |期
usss年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²q|
≥ ³¨qousss
中寻找高效抗抑郁剂成为近些年一个新的研究方
向 ∀中药巴戟天是茜草科巴戟属植物巴戟天的根经
炮制而成的较常用补益中药 o具有补肾壮阳 !强筋
骨 !祛风湿之功效≈t  ∀本所研究表明巴戟天寡糖
k  • 2|zl有抗抑郁作用≈u  o但其作用机制不明 ∀
临床研究表明 o抑郁病人的下丘脑2垂体2肾上腺
k‹°„l轴功能是亢进的 o血中糖皮质激素kª¯∏¦²¦²µ2
·¬¦²¬§¶oŠ≤l水平显著升高≈v  o人的脑神经细胞上存
在介导 Š≤ 作用的受体 o其中海马上表达水平最
高≈w  o抑郁病人海马 Š≤ 受体由于血中 Š≤ 水平持续
升高而下调 o从而使海马对 ‹°„ 轴负反馈障碍 o血
中 Š≤ 的高浓度得到维持≈x  ∀抑郁的发生可能与
Š≤ 对海马的选择性损伤有关≈y  o但机制不明 o研究
发现可能与神经生长因子 k±¨ µ√¨ ªµ²º·« ©¤¦·²µo
‘Šƒl !脑源性神经生长因子 k¥µ¤¬±2§¨µ¬√ §¨ ±¨ ∏2
µ²·µ²³«¬¦©¤¦·²µo…⁄‘ƒl表达下降有关 o而抗抑郁剂
不仅使 Š≤ 受体上调 o‹°„ 轴反馈正常 o而且使
‘Šƒ o…⁄‘ƒ表达升高≈x oz  o达到治疗目的 ∀ °≤tu细
胞株为大鼠嗜铬细胞克隆化细胞株 o分化的 °≤tu
细胞有典型的神经细胞特征 o其胞膜上 Š≤ 受体表
达丰富≈{  ∀本文根据文献方法≈| 以高浓度皮质酮
k≤²µ·¬¦²¶·¨µ²±¨ o≤²µ·l模拟抑郁症神经细胞损伤状
态 o观察了  • 2|z对皮质酮损伤的 °≤tu细胞的保
护作用 o初步在细胞及蛋白表达水平探讨了其作用
机理 ∀
1 材料
药品和试剂 正品巴戟天购自北京丰台医药批发
站 o经北京医科大学药学院蔡少青博士鉴定 o实验用
巴戟天寡糖由本所植化室制备 ∀  × ×1溴化2kw oxl2
二甲基2u2噻唑基2u ox2二苯基四氮唑2为  µ¨¦®公司
产品 ~去甲丙米嗪k§¨¶¬³µ¤°¬±¨ o⁄Œ l为 ≥¬ª°¤产
品 ~总 • ‘„ 抽提试剂盒购自华美生物公司 ~• ×2
°≤ • 试剂盒为 °µ²° ª¨¤产品 ~皮质酮及多聚赖氨酸
为 ≥¬ª°¤产品 ~⁄ ∞ 为 Š¬¥¦²产品 ∀
2 方法
211 °≤tu 细胞培养及药物实验 嗜铬细胞瘤株
°≤tu细胞由北京医科大学万有博士惠赠 ∀用含
x h胎牛血清及 x h马血清的 ⁄ ∞ 培养液k含青
霉素钠 uss ˜# °¯ p t o链霉素 tss Λª# °¯ p t o³‹ z qwl
将细胞稀释为每毫升悬液含 u ≅ tsx 个细胞 o接种于
预先用多聚赖氨酸ks qt °ª# °¯ p tl处理过的 |y孔培
养板 o每孔 tss Λ¯ o放入 ≤ ’u 孵箱k美国 ‘¤³¦²公司
生产l ovz ε ox h ≤ ’u条件下培养 v ∗ w §o待细胞长
满孔底后即可用于实验 ∀参照文献≈| 方法 o稍加改
进 o吸去细胞液 o换上含有相应浓度药物及 u ≅ tsp w
°²¯#pt皮质酮的无血清 ⁄ ∞ ovz ε x h ≤ ’u 培
养 w{ «k对照组不含任何药品l o吸去培养液后用 ⁄2
‹¤±®¶液洗 u遍 o每孔加入含浓度为 s qx °ª# °¯ p t
 × × 的无血清 ⁄ ∞ o培养 w «后吸去 ⁄ ∞ o每
孔加入 ts h ≥⁄≥ tss Λ¯ o待蓝色颗粒完全溶解k约 tu
∗ ty «l o用多孔扫描分光光度计k  ≤≤rvws型 o美
国 ƒ ²¯º公司l测定标本在 xzs ±°波长处的吸光度
k„l值 o用于定量反映活细胞多少 ∀
212 慢性给药及总 • ‘„抽提 将大鼠随机分为 v
组 o分别为对照组 o⁄Œ kts °ª#®ªp tl组 o • 2|z
ktss °ª#®ªp tl组 o每组 w只 o腹腔注射给药 ut §o最
后一次给药 uw «后将大鼠断头处死 o分离海马及前
脑皮层 o按试剂盒所提供的异硫氰酸胍2酚2氯仿法
k即一步法l抽提两脑区总 • ‘„ ∀用 ⁄∞°≤ 处理水
溶解总 • ‘„后将每组同脑区总 • ‘„ 混合 op zs ε
保存待用 ∀临用前先解冻 o置冰浴 o在 ˜ ∂2uxs型分
光光度计上测量总 • ‘„ 样品 ’⁄uys及 ’⁄u{s值 o计
算总 • ‘„浓度且要求 ’⁄uysr’⁄u{s  t qy ∀取 x Λª
各组总 • ‘„ 在 t h琼脂糖凝胶k含 s qx Λª# °¯ p t溴
化乙锭l上电泳 o可见清晰的 u{ ≥ ot{ ≥ ox ≥三个条
带k图略l o基于以上两点证实总 • ‘„质量可靠 ∀
213 • ×2°≤ • 按 • ×2°≤ • 试剂盒说明进行操作 o
其中 ‘Šƒ 上游引物序列为 }x. 2× ≤ „× ≤≤ „≤≤≤ „≤2
≤≤ „Š× ≤ ×2v . ~下 游 引 物 x . 2≤ „≤ Š≤ „ŠŠ≤ × Š2
× „× ≤ × „× ≤2v. ~…⁄‘ƒ上游引物序列为 }x. 2Š× Š×2
Š„≤ „Š× „× × „Š≤ Š„Š2v. ~下游引物 x. 2≤ „Š× Š2
× „≤ „× „≤ „≤ „ŠŠ„„Š2v. ∀ ‘Šƒ 上下游引物所扩
增 °• ‘„片断长度为 vvs ¥³o…⁄‘ƒ 扩增片断长度
为 vss ³¥∀将反应管置于 ⁄‘„ ׫¨µ°¤¯ ≤¼¦¯ µ¨w{s
°≤ • 仪中进行 • ×2°≤ • }w{ ε owx °¬±合成第一链
¦⁄‘„ o|w ε ou °¬±模板变性 o然后进行了 vx个循
环反应 o每个循环为 |w ε vs ¶oxs ε t °¬±ozu ε u
°¬±o最后 zu ε z °¬±延伸 o• × p °≤ • 产物 w ε 保
存 ∀
214 • ×2°≤ • 产物分析 取 ts Λ¯ • ×2°≤ • 产物在
u h琼脂糖凝胶k含 s qx Λª# °¯ p t溴化乙锭l上电泳 o
电泳槽为 ⁄≠ ≠2 ¶vt…型水平电泳槽 o电压为 zs ∂ o
vs °¬±后取下凝胶在 ˜ ∂ ° 凝胶成像及分析系统
k美国l中进行电泳图谱扫描并分析 ∀
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3 统计方法 结果以 ξ ? σ表示 o进行单因素方差
分析和 θχ检验 ∀
4 结果
411  • 2|z对皮质酮损伤的 °≤tu细胞的保护作
用 活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性
 × × 还原为蓝紫色结晶物并沉积在细胞中 o而死细
胞无此功能 o≥⁄≥使结晶物溶解 o在 xzs ±°波长处
测定其光吸收值k„xzs ±°l o可间接反映活细胞数量 ∀
°≤tu细胞经 u ≅ tsp w °²¯#pt皮质酮处理 w{ «后 o
„xzs ±°值显著低于正常对照组 o表明细胞受到损伤
或部分细胞已死亡 o但当 ‘Šƒ 或  • 2|z 存在时 o
„xzs ±°值较之于皮质酮处理组显著升高 o表明 °≤tu
细胞损伤明显减弱 o活细胞增多 o剂量依赖关系明显
k表 t !表 ul ∀
表 t ‘Šƒ对皮质酮k≤²µ·l损伤的 °≤tu细胞的保护作用
组别 剂量r˜# °¯ p t „xzs±° „xzs±°变化率r h
正常对照 s qzz ? s qtytl tss
≤²µ· s quw ? s qsw vt qu
≤²µ·n  • 2|z s qs{ s qzv ? s qs|tl |w q{
s qws s q{z ? s qsutl ttv qs
注 }≠ ξ ? σ  ν € y ≈与皮质酮损伤组比较 t) Π s qsst
表 u  • 2|z对皮质酮k≤²µ·l损伤的 °≤tu细胞的保护作用
组别 剂量r°ª# °¯ p t „xzs±° „xzs±°变化率r h
正常对照 t qss ? s qsxtl tss
≤²µ· s qzw ? s qsz zw
≤²µ·n  • 2|z t qux t qtw ? s qtvtl ttw
u qxs t quy ? s qs|t oul tuy
x qss t qvy ? s qsyt oul tvy
注 }≠ ξ ? σ  ν € y ≈ 与皮质酮损伤组比较 t) Π s .sst ;
…与正常对照组比较 u) Π s qst
表 v ⁄Œ 及  • 2|z对大鼠前脑皮层 !海马 ‘Šƒ o…⁄‘ƒ °• ‘„表达水平的影响
营养因子
占对照的百分比
海马
⁄Œ  • 2|z
前脑皮层
⁄Œ  • 2|z
…⁄‘ƒ ttz qy{ ? tt qvwtl tuv qyy ? tu qvttl twz q|w ? vu q{sul tzv qww ? zt qvwul
‘Šƒ p p uv| qus ? xv quxtl uyx qzv ? ttw q|wtl
注 }≠ ξ ? σ  ν € w ∗ x ≈与正常对照组比较 t) Π s .sst u) Π s qsx
412  • 2|z 对大鼠海马 !前脑皮层 ‘Šƒ o…⁄‘ƒ
°• ‘„表达的影响 利用 ‘Šƒ o…⁄‘ƒ 特异的上下
游引物 o对对照组 !⁄Œ 组及  • 2|z组大鼠海马及
前脑皮层总 • ‘„进行 • ×2°≤ • o扩增出特定长度的
¦⁄‘„片断 o扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳后可显
示出清晰的条带 o比较其相对量的多寡即可在一定
程度上反映 °• ‘„表达的变化 ∀ ⁄Œ 及  • 2|z慢
性给药 ut §使大鼠前脑皮层 ‘Šƒ 及 …⁄‘ƒ °• ‘„
表达显著升高 ∀而海马中有些不同 o…⁄‘ƒ °• ‘„
水平显著升高 o‘Šƒ °• ‘„ 片段未扩增出来 o说明
海马 ‘Šƒ °• ‘„ 表达水平较低 o主要由 …⁄‘ƒ 发
挥效应k表 vl ∀
5 讨论
临床观察到抑郁症患者血浆皮质酮水平升高 o
皮质酮水平与抑郁症严重程度有关≈v ox  o抗糖皮质激
素治疗对重症抑郁症患者效果明显≈ts  o经抗抑郁剂
治疗后亦使血浆皮质酮水平下降≈v ox  o因而可以说血
浆及脑脊液中的皮质酮水平的持续升高对抑郁症的
发生可能起到至关重要的作用 ∀研究表明 o持续高
浓度皮质酮可以导致淋巴细胞 !皮层及海马神经细
胞损伤≈tt  o抑郁症的发生可能与此有关 ∀本实验用
高浓度皮质酮损伤 °≤tu神经细胞 o明显可见细胞的
损伤与死亡 o而巴糖及 ‘Šƒ 可以防止这种损伤的发
生 o说明这种保护作用可能是巴糖抗抑郁作用的机
理之一 o并且可能是通过巴糖引起的神经营养因子
的表达升高完成的 o因为大鼠中脑k缝核附近l注射
…⁄‘ƒ t周可以在获得性无助实验及强迫游泳实验
中产生与经典抗抑郁剂一样的抗抑郁效应≈tu  ∀
巴糖为水溶性菊淀粉型低聚糖 o对它的效应及
作用机制的探讨有重要意义 o上述结果对在传统补
益中药中发掘高效低毒抗抑郁剂提供了新的思路 ∀
≈参考文献 
≈t  中国医学科学院药物所 1 中药志k ´l o北京 }人民卫生出版社 o
t|{u otsu1
≈u  蔡兵 o崔承彬 o陈玉华 o等 1 巴戟天中菊淀粉型低聚糖类单体成
分对小鼠的抗抑郁作用 1 中国药理学与毒理学杂志 ot||y ots
kul }ts|1
≈v  …¤µ§¨ ± ‘q ²§∏¯¤·¬²± ²© Š¯ ∏¦²¦²µ·¬¦²¬§• ¦¨¨³·²µŠ ±¨¨ ∞¬³µ¨¶¶¬²±
¥¼ „±·¬§¨ ³µ¨¶¶¤±·⁄µ∏ª¶q°«¤µ°¤¦²³¶¼¦«¬¤·ot||y ou| }tu q
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≈|  刘景根 o李 瑞 o刘国卿 o等 1 蝙蝠葛苏林碱及异构体对 °≤tu
细胞缺血性损伤的保护作用 1 药学学报 ot||{ ovvkvl }tyx1
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Προτεχτιϖε Εφφεχτ οφ Βαϕιτιαν ολιγοσαχχηαριδε ον ΠΧtu Χελλσ
Λεσιονεδ βψ Χορτιχοστερονε
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k  • 2|zl qΜετηοδσ ανδ ρεσυλτσ:„©·¨µ¬±¦∏¥¤·¬±ª º¬·«·«¨ °≤tu ¦¨¯¯¶¬±·«¨ ³µ¨¶¨±¦¨ ²©¦²µ·¬¦²¶·¨µ²±¨ ku ≅ tsp w
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≈责任编辑 方文贤 
中医药学刊 usst年征订启事
经国家新闻出版署批准 o由国家中医药管理局主管的5中医函授通讯6自 usst年 t月起更名为5中医药学刊6 ∀
5中医药学刊6辟有/古医籍博览0 !/仲景学说研究0 !/ 名医一绝0 !/ 研究生论坛0 !/ 专题笔谈0 !/ 实验研究0 !/ 学术争鸣0 !
/古方新用0 !/医方发挥0 !/临床研究0 !/医史文献0 !/针灸与经络0 !/中医文化0 !/医古文知识0 !/中药研究0 !/中医教育0 !/中
国尿疗研究0 !/试题精编0 !/杏林雨丝0 !/读者信箱0 !/读者#作者#编者0等四十余个栏目 ∀本刊为双月刊 o|y页 o国内每册定
价 x qss元 ∀国内总发行 }沈阳市邮政局报刊发行局 o邮发代号 {2t{u ∀国外总发行 }中国国际图书贸易总公司 ∀国外邮发代号
… ttyv ∀全国各地邮局均可办理订阅 ∀本刊可以试读 o来函免费邮寄 ∀
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中 国 中 药 杂 志
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