全 文 ：黄芩苷磷脂复合物制备工艺的研究
吴建梅 o陈大为 o刘艳丽
k沈阳药科大学 o辽宁 沈阳 ttsstxl
≈摘要  目的 }确定黄芩苷与磷脂形成复合物的最佳工艺 ∀方法 }以黄芩苷与磷脂的结合百分率为评估标准 o
采用单因素考察和正交设计试验进行系统的研究 ∀结果 }确定了黄芩苷磷脂复合物的最佳制备条件即在室温下以
四氢呋喃为反应溶剂 o反应时间为 t qx «o不同磷脂酰胆碱k°≤l含量的磷脂与黄芩苷的最佳反应比例不同 ∀结论 }
黄芩苷磷脂复合物的形成受溶剂 !反应物浓度和反应物投料比例的影响较大 ∀
≈关键词  黄芩苷 ~磷脂复合物 ~制备工艺
≈中图分类号  • u{v qy o× ± wys qy ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlsv2styy2sw
磷脂复合物的有关研究是自 t|{z年意大利学
者发表的专利而相继开展起来的≈t  ∀据文献报道 o
某些药物与磷脂形成复合物后 o具有改善原药物溶
解性能进而提高其体内吸收的特性 ∀然而迄今为
止 o国内几乎未见到相关的研究报道 o国外文献也多
限于专利 ∀为尝试开辟改善中药成分在体内吸收的
新途径 o我们选择了常用中药黄芩 Σχρυτελλαρια
βαιχαλενσισ Š ²¨µª¬k • ²²ª²±l的主要有效成分之一黄
芩苷k¥¤¬¦¤¯¬±l做为模型药物 o进行磷脂复合物的有
关研究 ∀文献报道 o黄芩苷的体内吸收较差≈u ∗ w  o开
展黄芩苷磷脂复合物的研究将具有重要的意义 ∀在
我们的研究中主要选用天然磷脂k包括大豆磷脂和
蛋黄磷脂l制备其与黄芩苷的复合物 o并进行有关理
化性能 !稳定性及生物学特性的研究 ~试验结果显示
磷脂复合物具有较好的研究和应用前景 ∀但为探究
磷脂复合物的形成机理 o我们又选择了高纯度的合
成磷脂k二棕榈酰磷脂酰胆碱 o即 ⁄°°≤l o制得其黄
芩苷磷脂复合物 ∀本文主要是对不同来源的磷脂和
黄芩苷反应得到磷脂复合物的制备工艺进行了较为
全面 !系统的研究 o尝试探索其中的规律 o为进行磷
脂复合物更深入的特性研究奠定基础 ∀
1 实验仪器与材料
1 q1 仪器 ˜ ∂2uust紫外分光光度计k日本岛津株
式会社l ~…2u型恒温磁力搅拌器k上海雷磁仪器厂
新泾分厂l ~{s2t型离心沉淀机k上海手术器械厂l ~
≈收稿日期  usss2sy2u|
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kv|xzs{x|l
• ƒ2{ss紫外分光光度计k北京第二分析仪器厂l ~
Š≤2tz„ 气相色谱仪k日本岛津株式会社l ~≤2• z„
记录仪k日本岛津株式会社l ∀
1 q2 药品与试剂 黄芩苷精制品≈本实验室自制 o
经紫外光谱和红外光谱鉴别 o与其对照品k中国药品
生物制品检定所 o批号 sztx2|xsyl的特征基本一致 o
以高效液相色谱法测定其平均含量为对照品的
|z q| h   ~二棕榈酰磷脂酰胆碱k⁄°°≤ o美国 ≥¬ª°¤
公司 oƒ • zvw qs o批号 tsu‹{vzz o纯度约为 || h l ~
大豆磷脂≈沈阳第一制药厂 o其中磷脂酰胆碱k°≤l
的含量为 xt q{ h   ~蛋黄磷脂k沈阳药科大学物理药
学教研室 o批号 |ztttt o|{sxt{ o其中 °≤ 含量分别
为 w{ qt和 zz qt h l ~磷钼酸k浙江菱湖食品化工厂 o
批号 |tsvs|l ~薄层层析硅胶 Šys型k中国青岛海洋
化工集团公司出品 o批号 |xsytyl ~羧甲基纤维素钠
k上海新星化学试剂公司 o批号 |usvtsl ~乙腈为色
谱纯 o其余试剂均为分析纯 ∀
2 研究内容与结果
2 q1 黄芩苷磷脂复合物制备工艺评价标准的建立
利用黄芩苷不溶于氯仿 o而磷脂和黄芩苷磷脂
复合物均易溶于氯仿的特性 o将一定量的黄芩苷和
磷脂在一定条件下反应后 o减压除去反应溶剂 o再加
入适量的氯仿 o充分溶解其中的磷脂及复合物 o去除
上清液 o再用少量氯仿洗涤 o收集沉淀 o干燥并称重 o
黄芩苷的初始投药量与沉淀量的差值即为与磷脂复
合的黄芩苷的量 o从而计算出黄芩苷与磷脂的结合
百分率 o计算公式如下 }
黄芩苷与磷脂的结合率 h € ΑΙ p Α∆ΑΙ ≅ tss h
#yyt#
第 uy卷第 v期
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∂ ²¯ quy o‘²qv
¤µqousst
其中 o„Œ为黄芩苷的初始投药量 ~„⁄为沉淀量 ∀
2 q2 单因素影响试验
2 q2 q1 反应溶剂的选择 设定黄芩苷与大豆磷脂
的投料比为 tΒvk Ω/ Ωl o反应温度为 ws ε o反应时
间为 t qx «o黄芩苷浓度为 us °ª# °¯ p t o以黄芩苷与
磷脂的结合百分率为评估标准 o对多种溶剂进行考
察 o结果见表 t ∀从表 t中可以看到 o以四氢呋喃和
二氧六环2甲醇kzΒvl的混合溶剂为反应溶剂时 o药
物的结合百分率均超过 xs h o且两者相比 o后者的
药物结合率更高 o反应更完全 o理应为最佳溶剂 o但
由于二氧六环价格较贵 o且其沸点较高ktst ε l o不
易完全除去而残留于复合物中 o因而采用四氢呋喃
做反应溶剂 ∀
2 q2 q2 反应时间的影响 反应溶剂为四氢呋喃 o其
余条件同2 q2 q1 o分别考察反应时间为s qx ot qs o
t qx ou qs ov qs «药物的结合百分率 o结果如表 t ∀药
物与大豆磷脂的反应于 t «后基本完全 o受时间的
影响较小 ∀
2 q2 q3 反应温度的影响 其余条件同上 o考察于不
同反应温度下黄芩苷与磷脂的结合率 o结果如表 t ∀
试验结果显示 o随温度升高 o药物的反应率略呈上升
趋势 ∀
2 q2 q4 反应物浓度的影响 考察反应物浓度k以黄
芩苷计l对药物结合率的影响 o其余条件同 2 q2 q1 o
结果见表 t ∀从表 t可见 o反应物浓度对药物的结合
率有较大影响 o在其余条件相同的情况下 o随药物浓
度的增加 o药物的结合百分率逐渐降低 ∀
2 q2 q5 黄芩苷与磷脂的投料比例对药物结合百分
率的影响 其余条件同上 o考察黄芩苷与大豆磷脂
的投料比例不同时的药物反应百分率 o结果见表 t ∀
由表 t可知 o药物的结合率随黄芩苷在体系中所占
比例的降低而增加 o黄芩苷与磷脂的投料比例对药
物的结合反应率有较大的影响 ∀
表 t 不同反应条件对黄芩苷与磷脂的结合率的影响
溶剂
介电
常数
结合率
r h
时间
r«
结合率
r h
温度
r ε
结合率
r h
浓度
r°ª# °¯ p t
结合率
r h
投料比
黄芩苷Β磷脂
结合率
r h
甲醇 vv qu uw q{ s qx yu qs us zu qu x |u qs tΒt v{ qy
乙醇 uy q{ vy qs t qs zx qu ws zy qz us zy qz tΒu wy q{
丙酮 ut qw tx qt t qx zy qz ys {u qw ws x{ qu tΒv zy qz
二氧六环2甲醇 kzΒvl tt qw tss u qs zx qx tΒw |t qw
二氯甲烷 { q| vu qw v qs zy q| tΒx tss
四氢呋喃 z qy zy qz
乙酸乙酯 y qt w{ qv
氯仿 x qt vt qz
2 q3 正交设计试验
2 q3 q1 黄芩苷大豆磷脂复合物反应条件的优化
上述试验结果表明 o药物与磷脂的投料比例k Α) !反
应温度( Β)及反应物的浓度( Χl对黄芩苷的结合率
具有一定的影响 o故以这 v个影响因素的 v个水平
进行正交设计 o见表 u ∀采用 |kvwl表 o试验结果见
表 v o对测定结果进行方差分析 o见表 w ∀
表 u 因素与水平表
水平
Α
投料比例

Β
温度
r ε
Χ
浓度
r°ª# °¯ p t
t tΒu us ts
u tΒv ws us
v tΒw ys ws
根据方差分析的结果 o由 Α因素显著且 ΠΑt 
ΠΑu  ΠΑv ,故应选择 Α因素较高的水平 ,即药物在
反应物中占较小比例 ;由 Χ因素显著且 ΠΧt  ΠΧu 
ΠΧv ,应选择 Χ较低的水平 ,即较小的反应浓度 ; Β
因素不显著而选择反应于室温下进行 ∀结合实际条
件综合权衡后 ,选择药物与大豆磷脂的比例为 tΒv .x
( Ω/ Ωl o药物反应浓度为 ts°ª# °¯ p t o反应于室温
下进行的较优反应条件 o经试验验证其药物结合率
约为 tss h o为黄色略粘的粉末 ∀
2 q3 q2 黄芩苷蛋黄磷脂复合物反应条件的优化
由于蛋黄磷脂与大豆磷脂的性质相似 o只是组成成
分及含量有差异 o因而在上述试验基础上 o设定药物
浓度为 ts°ª# °¯ p t o根据蛋黄磷脂中 °≤ 含量的不
同 o调整药物对磷脂的投料比例 o而得到蛋黄磷脂与
黄芩苷进行复合反应的最佳条件 o试验结果见表 x ∀
#zyt#
第 uy卷第 v期
usst年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qv
¤µqousst
表 v 正交设计试验结果
试验号 结合率r h
t yz qt ? u qs
u wy q{ ? s qt
v ut qx ? u qt
w zs q| ? u qv
x xz qt ? u qs
y |v qy ? t qv
z yz q| ? s q{
{ tss ? s
| |t q{ ? s qw
注 }ν € v
表 w 数据统计分析结果
方差来源 自由度 均方 Φ 显著性
Α u tvxu u{ .ss 显著
Β u s .z{ s .stytx
Χ u ts|s uu qx| 显著
随机误差 u w{ qu{
Ε {
注 }Φt p s .ts(u ,u) € | .ss , Φt p s .sx(u ,u) € t| .ss , Φt p s qstku oul €
|| qs
表 x 黄芩苷与蛋黄磷脂复合反应的最佳比例
批号 °≤ 含量r h 重量比 摩尔比
tl 结合率
r h
|ztttt w{ qt tΒw tΒt qt tss
|{sxt{ zz qt tΒu qx tΒt qt tss
注 }tl以混合磷脂的平均分子量 z{s计算
2 q3 q3 黄芩苷2⁄°°≤ 复合物的制备 其余条件同
上 o选择v个比例即药物对⁄°°≤的摩尔比为tΒu o
tΒt ouΒt 制备黄芩苷2⁄°°≤ 复合物 o在试验中发
现 o摩尔比为 tΒu及 tΒt时 o反应液均澄明 o但前者
的终产物略滞 o后者为干爽粉末 ~摩尔比为 uΒt时 o
反应不完全 o明显可见反应液中悬浮着黄芩苷粉末 o
去除不溶于氯仿的沉淀物 o减压蒸干即得 ∀
2 q4 黄芩苷磷脂复合物中黄芩苷的回收率测定
2 q4 q1 分析方法的建立 采用紫外分光光度法 o选
择 vus ±°为黄芩苷的测定波长 o并以相应的磷脂溶
液作对照进行测定 ∀
精密称取黄芩苷对照品适量 o配成 vss Λª# °¯ p t
的甲醇溶液 o从中取出 s qt os qu os qw os qy os q{ °¯
于 ts °¯ 容量瓶中 o用甲醇稀释至刻度 o得到浓度为
v oy otu ot{ ouw Λª# °¯ p t的系列标准溶液 o以空白
甲醇为对照于 vus ±°下测定其吸收度值 o以吸收度
对浓度做线性回归 o所得方程为 }Χ€ uy .y{t Α p
s .sxzy , ρ€ s .||||( ν € v) ∀
以高 !低两个浓度 y qs和 t{ Λª# °¯ p t的标准溶
液进行方法精密度测定 o结果显示两种浓度日内差
均小于 s qy h o日间差小于 t qs h ∀
2 q4 q2 样品测定 分别精密称取相当于 ts °ª黄
芩苷的黄芩苷磷脂复合物于 xs °¯ 容量瓶中 o甲醇
定容 o从中取出 s qy °¯ 于 ts °¯ 容量瓶中 o以甲醇稀
释至刻度 o配制相应的磷脂溶液为对照 o于 vus ±°
下进行测定 o结果见表 y ∀
表 y 黄芩苷磷脂复合物中黄芩苷的含量测定结果
样品 测得量r h
…2⁄°°≤ |w qx ? s qw
…2≥°≤tl |z q| ? t qs
…2∞°≤tul |v qt ? t qs
…2∞°≤uvl |u qx ? t qs
注 }≠加入量均为 ts qss °ª  ξ ? σ tl黄芩苷大豆磷脂复合
物 ul°≤ 为 zz qt h的蛋黄磷脂制备的复合物 vl °≤ 为 w{ qt h的蛋
黄磷脂制备的复合物
2 q5 黄芩苷磷脂复合物中溶剂残留量的测定
采用气相方法 o以黄芩苷2⁄°°≤ 复合物测定工
艺的溶剂残留量 ∀
2 q5 q1 气相色谱条件 wst型分析柱 ou qy °° ¬§≅
u ° o填充物为二乙烯基苯2乙基乙烯苯型高分子多
孔小球 o{s ∗ tss目 ~进样温度 txs ε ~ƒŒ⁄检测器温
度 txs ε ~柱温箱温度 tvs ε ~载气 ‘u o流速 |s °¯ #
°¬±p t ~丙酮为内标 o进样量 v Λ¯ ∀
2 q5 q2 样品测定 以水为溶剂 o丙酮为内标 o将对
照溶液和样品溶液进样 v Λ¯ o进行测定 o结果在 v批
黄芩苷2⁄°°≤ 的复合物样品中均没有检测到四氢呋
喃 ∀
3 讨论
3 q1 未见文献关于磷脂复合物制备条件系统研究
的报道 o在 …²°¥¤µ§¨¯¯¬∞等人的研究中≈t ox 仅简要
列出磷脂复合物的反应条件 o而 …«¤··¤¦«¤µ≥‘≈y 等
则以反应液是否澄明为标准 o认为最佳比例恰是反
应液完全澄清的比例 o而其他比例均有浑浊现象 ∀
我们经大量试验的摸索和验证 o确定出较能合理 !正
确地评估黄芩苷磷脂复合物制备条件优劣的方法 o
即黄芩苷与磷脂的结合百分率 ∀用这种方法 o可避
免因溶剂用量等因素使反应物在溶剂中的溶解程度
发生变化而对反应物沉淀量产生影响 ∀
#{yt#
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3 q2 从本文反应溶剂影响的试验结果可以看到 o以
介电常数较小的四氢呋喃和二氧六环Β甲醇kzΒvl为
反应溶剂时 o药物的结合率较高 o而以介电常数较大
的甲醇 !乙醇为反应溶剂时药物的结合率较低 ∀这
可能是由于溶剂的介电常数大 o所产生的反向电势
也大 o相应降低了反应物间的相互作用力 o而不利于
异号离子间的化合反应≈z o{  ∀同样也属于非质子性
溶剂的氯仿和丙酮的反应率却很低 o可能主要是因
为氯仿是黄芩苷的不良溶媒 o而丙酮是磷脂的不良
溶媒的缘故 ∀
3 q3 黄芩苷与磷脂的投料比对药物的结合率有较
大影响 o随药物在反应体系中的比例降低 o药物的结
合率呈增长趋势 ∀分析其原因 o一方面 o磷脂对药物
可能具有一定的增溶作用 ~另一方面 o两种反应物的
投料比例逐渐接近其完全反应的比例 o有利于药物
与磷脂之间充分地相互作用 o生成磷脂复合物 ∀天
然磷脂是以 °≤ 为主要成分的多种组分的混合体 o仅
有平均分子量 o约为 z{s ∀从试验结果可见 o不同 °≤
含量的磷脂与黄芩苷进行反应的最佳重量比例不
同 o但其摩尔比均接近 tΒt o由此认为黄芩苷应主要
与磷脂中的 °≤ 进行反应 ∀
3 q4 反应物浓度对黄芩苷的结合率也有较大的影
响 o浓度较小时 o药物的结合率较高 ∀药物在溶液中
的反应 o须经碰撞才能发生≈{  o适当的药物浓度可提
供良好的反应环境而利于反应的发生 ∀
≈参考文献 
≈t  Š¤¥¨··¤ …o …²°¥¤µ§¨¯¯¬∞o °¬©©¨ µ¯ Š q ≤²°³¯ ¬¨¨ ¶²© ƒ¯ ¤√¤±²¯¬ª2
±¤±¨ ¶ º¬·« °«²¶³«²¯¬³¬§¶o °µ¨³¤µ¤·¬²± ׫¨ µ¨²© ¤±§ „¶¶²¦¬¤·¨§
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≈u  毛凤斐 o屠锡德 o朱家璧 o等 q黄芩苷大鼠小肠吸收的研究 q南京
药学院学报 ot|{w otxktl }yt q
≈v  毛凤斐 o屠锡德 o朱家璧 o等 q黄芩苷在人体内吸收的研究 q南京
药学院学报 ot|{v outktl }yt q
≈w  毛凤斐 o朱家璧 o屠锡德 o等 q黄芩苷人体内吸收研究 q中成药研
究 ot|{t oktul }y q
≈x  …²°¥¤µ§¨¯¯¬∞o  ∏¶·¬¦« Š q…¬¯²¥¤¯¬§¨ ⁄¨ µ¬√¤·¬√ ¶¨o ׫¨ µ¨ „³³¯¬2
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³²µ·²© ≥¤¯¬¦¼¯¬¦„¦¬§o⁄¬¦¯²©¨ ±¤¦¤±§Œ±§²° ·¨«¤¦¬± „¦µ²¶¶≥±¤®¨
≥·µ¤·∏° ≤²µ±¨ ∏° qŒ±·°«¤µ° ot||u oz| }uyv q
≈z  沈建民 o武振卿 q药物结构与制剂 q北京 }中国医药科技出版社 o
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≈{  天津大学物理化学教研室 q物理化学 q第三版 q下册 q北京 }高等
教育出版社 ot||v qvws q
Στυδψ ον τηε Πρεπαρατιον οφ Βαιχαλιν Χοµ πλεξ ωιτη Πηοσπηολιπιδ
• ˜ ¬¤±2° ¬¨o≤ ‹∞‘⁄¤2º ¬¨oŒ˜ ≠¤±2¯¬
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¦«²²¶¨ ·«¨ ²³·¬°¬½¤·¬²± ¦²±§¬·¬²±¶©²µ·«¨ ©²µ°¤·¬²± ²© ¥¤¬¦¤¯¬± ¦²°³¯ ¬¨ º¬·«
³«²¶³«²¯¬³¬§q Μετηοδ : „ µ¨¤¶²±¤¥¯¨¦µ¬·¨µ¬²± ²©¤¦¦∏µ¤·¨ √¨¤¯∏¤·¬²± º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §o¥¼ º«¬¦«¶∏¦«©¤¦·²µ¶¤¶
·¨°³¨µ¤·∏µ¨ o·«¨ µ¤·¬²²©¥¤¬¦¤¯¬±·² ³«²¶³«²¯¬³¬§¤±§·«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²©µ¨¤¦·¤±·¶º µ¨¨ ¬¨¤°¬±¨ §¤±§·«¨ ²µ2
·«²ªµ¤³«¬¦§¨¶¬ª± º¤¶∏¶¨§q Ρεσυλτ : ׫¨ ¥¨¶·¦²±§¬·¬²±¶ º µ¨¨ ²¥·¤¬±¨ §·«µ²∏ª«¶·¤·¬¶·¬¦¤¯ ¤±¤¯¼¶¬¶¤±§ ³µ²²©
·¨¶·qΧονχλυσιον : ׫¨ ©²µ°¤·¬²± ²© ¥¤¬¦¤¯¬± ¦²°³¯ ¬¨ º¬·« ³«²¶³«²¯¬³¬§ º¤¶ªµ¨¤·¯¼ ¬±©¯∏¨ ±¦¨§¥¼ ·«¨ ¶²¯√ ±¨·o
¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ¤±§µ¨¤¦·¤±·µ¤·¬²q
[ Κεψ ωορδσ] ¥¤¬¦¤¯¬±~³«²¶³«²¯¬³¬§¦²°³¯ ¬¨~³µ¨³¤µ¤·¬²±
≈责任编辑 李 禾 
作者更正
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