全 文 ：冰片对真菌细胞超微结构的影响及
治疗化脓性中耳炎的临床应用
常颂平t o李玉春u
kt1 哈尔滨穆斯林医院 o黑龙江 哈尔滨 txssst ~
u q哈尔滨医科大学附属第一医院 o黑龙江 哈尔滨 txssstl
≈摘要  目的 }研究冰片治疗化脓性中耳炎的药理作用 o最佳有效浓度 ∀方法 }取患者外耳道内分泌物中分离出
的黑曲菌和实验室保留的真菌菌株 o测定冰片最低抑真菌浓度k Œ≤l o最低杀真菌浓度k  ƒ≤l ∀电子显微镜下观察冰
片作用后的细胞超微结构变化 ∀结果 }发现冰片对真菌 Œ≤ 为 x h o ƒ≤ 为 ts h ∀电镜下见冰片作用后的黑曲菌细
胞壁变厚 o模糊不清有空泡 ∀细胞浆内各种物质深染凝集 ∀呈现大量脂滴 ∀电子密度增高 o嵴排列紊乱 ∀有的细胞器
破坏 o呈现大量电子空白区 ∀有的细胞扭曲变形失去原有结构 ∀结论 }冰片可破坏真菌细胞的结构 o导致真菌溶解死
亡 o表现出抑菌杀菌功能 ∀最低抑真菌浓度为 x h o杀菌浓度为 ts h ∀
≈关键词  冰片 ~化脓性中耳炎 ~黑曲菌 ~真菌
≈中图分类号  • u{x qy ~• uzy qt ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussslsx2svsy2sv
冰片外用治疗化脓性中耳炎在多年的临床应用
中疗效已得到肯定 o其药理作用有文献报道体外实
验对金黄色葡萄球菌 o绿色链球菌和肺炎双球菌的
生长有抑制作用≈t  ∀化脓性中耳炎致病菌多为混合
感染 ∀本文取患者耳内分泌物经培养分离 o有 uu h
为真菌感染 o其中以黑曲菌为主 ∀经实验室抑菌实
验 o电子显微镜观察 o证实了冰片具有抗真菌作用 ∀
1 材料与方法
111 实验药物 冰片由黑龙江省药材公司购入 ∀
配制方法 o将冰片研成细末 o按百分比浓度溶入
wx h乙醇溶液中 ∀
112 实验菌株 患者外耳道分离出的黑曲菌k Ασ2
περγιλλυσ νιγερ) ,试验室保留的菌株红色癣菌( Τρι2
χηοπηψτον ρυβρυ µ ) !裴氏着色真菌( Φονσεχαεα πε2
δροσοι) !孢子丝菌( Σποροτριχηυ µ σχηενχκιιl ∀
113 方法 药物培养基用 w h乙醇为溶媒制沙氏
培养基 o用倍比法制成冰片药物平皿 o稀释浓度为
us h ots h ox h ou1x h ot1ux h ∀对照培养基两种 }
≠ w h乙醇沙氏培养基 o普通沙氏培养基 ∀在无菌
条件下制成真菌混悬液 ozut型分光光度计测定菌
浓度 o波长 xvs ±° o对照透光度 |s h ∀菌浓度
tsy≤ƒ ˜# °¯ p t ∀每个菌种接种两处 o每个区域 s qsx
°¯ ∀置 ux ε 恒温箱培养 { §∀
≈收稿日期  t||{2tt2sy
1 q4 观测指标 最低抑真菌浓度k Œ≤l }即标准条
件下抑制可见真菌生长的最低药物浓度 ∀最低杀真
菌浓度k  ƒ≤l }即标准条件下能杀死真菌的最低药
物浓度 ∀
115 结果判定标准 肉眼见菌落生长为阳性 o未见
菌落生长为阴性 ∀在阴性平板的相应接种区域划一
耳环移划到不含药的沙氏培养基平板上 ∀ux ε 恒
温箱培养 z §o根据最低药物浓度判定  ƒ≤ 值 ∀
116 电镜标本制作≈u  取 ts h冰片培养基和普通
沙氏培养基分别接种黑曲菌 oux ε 恒温箱培养 z §∀
将菌块切成小块 o戊二醛固定 o常规方法制作 ∀
2 结果
211 Œ≤ 结果 黑曲菌 ts h o红色癣菌 x h o孢子
丝菌 x h o裴氏着色真菌 x h ∀  ƒ≤ 结果为 }黑曲菌
ts h o红色癣菌 ts h o孢子丝菌 x h o裴氏着色真菌
x h ∀
212 电子显微镜观察结果 图 t显示 o对照菌株的
孢子呈圆形 o细胞壁较薄k约 tws ±°l ∀菌丝光滑 o
细胞核结构清晰 o线粒体圆形 o嵴螺旋形 ∀图 u 显
示 o冰片作用后的黑曲菌细胞膜变厚k约 wts ±°l o
模糊不清有空泡 ∀细胞内侧呈现菌粒 o细胞浆内各
种物质深染凝集 o呈现大量脂滴 o电子密度增高 ∀线
粒体变性 o嵴排列紊乱以致消失 ∀有的细胞壁已完
全破裂 o呈现大量电子空白区 ∀有的细胞扭曲变形
皱缩 o失去原有结构 ∀见图 t ou ∀
#ysv#
第 ux卷第 x期
usss年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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图 t 未经冰片作用的黑曲霉菌结构
t q黑曲菌孢子呈圆形 !椭圆形 o细胞壁较薄k约 tws ±°l o线粒体
呈圆形 !椭圆形 o嵴呈平行排列k ≅ t qz万l u q菌丝较光滑 o外膜多
数完整 ∀胞浆均匀一致 o线粒体清晰可见 o呈螺旋形k ≅ t qx万l
图 u 冰片作用后的黑曲霉菌结构变化
t q黑曲菌孢子细胞壁变厚k约 wts ±°l o模糊不清 o细胞内各
种 物质深染凝集 o电子密度增高 o嵴排列紊乱 o可见电子空白区
k ≅ t qu万l u q菌丝各种物质深染凝集 o呈现大量脂滴k≤ • l o细胞
内呈现菌粒k ≅ ysssl v q菌丝 !细胞壁破碎 o细胞浆内出现大量电
子空白区k∞× „l o也可见致密颗粒k ≅ t qz万l w q菌丝皱缩 o扭曲变
形 o形状不整k ≅ ysssl
3 临床应用
311 ts h复方冰片液的制备和使用 冰片 ts ª研
成粉末 o四环素粉 t ªo溶入 wx h 乙醇 tss °¯ 中 ∀
将患者外耳道分泌物清洗干净 o把无菌纱条浸入药
液中 o再放入鼓膜穿孔部位附近 ∀每日更换 t次 ∀
312 病例诊断标准 耳流脓史 o临床检查见外耳道
脓性分泌物 o鼓膜穿孔 o鼓室充血或水肿 ∀ ÷ 光片显
示无胆脂瘤形成 ∀
313 疗效判定 用药后以 v ∗ ts §干耳为有效 ∀
检查依据 }外耳道干燥无分泌物 o鼓膜穿孔无变化 o
鼓室内无充血无水肿 ∀
本院自 t|{| ∗ t|||年统计治疗病例 u sty例 o
有效 t |s{人 o无效 ts{人 o有效率为 |x h ∀无不良
反应 o止痛效果显著 ∀
4 讨论
冰片属挥发性药物 o能开窍醒神 o清热消肿止
痛 o是祖国医学传统用药 ∀在有机化学中称为莰醇 o
难溶于水 o可溶于含水乙醇中 o由两个异戊二烯单位
的化合物组成 o属于多烯族化合物 ∀具有抗真菌作
用的抗生素如制霉菌素 o二性霉素 …也是多烯族化
合物≈v  ∀大多数挥发油对真菌有抑制作用 o以含醇 !
含醛成分者效果较好 ∀冰片是从含挥发油类植物中
提取 o亦属于醇类 ∀电子显微镜下可见黑曲菌在冰
片作用下 o细胞膜 !细胞浆受到破坏变化 o线粒体变
性 o细胞扭曲变形 ∀可以认为冰片作用于细胞壁 o使
其通透性增强 o药物进入细胞内 o使线粒体破坏 o细
胞氧化磷酸化和细胞能量偶联系统破坏 o能量产生
减低 o导致细胞浆内出现电子空白区 o真菌死亡溶
解 o表现出抑菌杀菌功能 ∀
有文献报道 o冰片在体外实验能抑制金黄色葡
萄球菌 !绿色链球菌和肺炎双球菌的生长 ∀最低有
效浓度为 s qx h ≈t  ∀但冰片对真菌的作用尚无报
道 ∀本试验测定冰片对真菌最低抑菌和杀菌浓度为
x h ots h o电镜下观察冰片作用后细胞结构的变化 o
证实了冰片的抗真菌作用 ∀化脓性中耳炎为混合感
染 o致病菌有溶血性链球菌 !金黄色葡萄球菌等多种
细菌 o还有黑曲菌等真菌 ∀以往用单一的抗菌素滴
耳液治疗效果欠佳 ∀而冰片对以上多种细菌和真菌
均有抑制作用 o我院应用配制的冰片四环素复合液
在临床观察 ts ¤之久 o疗效切实可靠 o对卡他性中
耳炎 !外耳道湿疹亦有明显效果 o其作用机理有待于
进一步研究 ∀
≈参考文献 
≈t  成都中医学院 1 中药学 1 上海 }上海科技出版社 ot|{t1tyw q
≈u  赫梅生 o詹丽芬 o张玉芝 o等 q白僵菌孢子致肺部病变实验病理
学研究 q中华病理学杂志 ot|{| qkul }ttt q
≈v  上海第一医学院 1 实用抗菌素学 1 上海 }上海科技出版社 o
t|{t1tyw q
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第 ux卷第 x期
usss年 x月
中 国 中 药 杂 志
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Οβσερϖατιον οφ Χελλ Υλτραστρυχτυσειν
Συππυρατιϖε Οτιτισ Μεδια Τρεατεδ ωιτη Βοσνεολ ανδ Αππλιχατιον
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·µ²± §¨ ±¶¬·¼¬±¦µ¨¤¶¨§¤±§·«¨ µ¬§ª¨ ¤µµ¤±ª¨ ° ±¨·º¤¶¬± §¬¶²µ§¨µq≥²°¨²µª¤±¨ ¯¯ ¶¨º µ¨¨ §¨¶·µ²¼ §¨o¤±§ °¤±¼ ¤µ2
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σιον :…²µ±¨ ²¯ ¦¤± §¨¶·µ²¼·«¨ ¶·µ∏¦·∏µ¨ ²©©∏±ª∏¶¦¨¯¯¶o°¤®¨ ©∏±ª∏¶§¬¶¶²¯√¨¤±§§¬¨²∏·¤±§·«∏¶©¨ ¤·∏µ¨¶¤©∏±ª∏¶
¬±«¬¥¬·¬±ª¤±§®¬¯¯¬±ª©∏±¦·¬²±q׫¨ ²³·¬°¤¯ ¬±«¬¥¬·¬±ª¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¬¶x h ¤±§®¬¯¯¬±ª¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ts h q
[ Κεψ ωορδσ] ¥²µ±¨ ²¯ ~¶∏³³∏µ¤·¬√¨²·¬·¬¶° §¨¬¤~Ασπεργιλλυσ νιγερ~©∏±ª∏¶
≈责任编辑 古云霞 
正交试验法分析复方参仙升脉饮的配伍关系
孟 杰t o龙致贤t o何 软t o李 涛u
kt1 北京中医药大学 o北京 tsssu| ~ u1 河南省鹿邑县人民医院 o河南 鹿邑 wzzuxsl
≈摘要  目的 }分析中药复方参仙升脉饮的配伍关系和配伍剂量 o为中药方剂的君臣佐使理论及配伍剂量提供
一些量化说理依据 ∀方法 }给昆明种小白鼠尾静脉注射维拉帕米造成缓慢性心律失常模型 o参仙升脉饮可升高该模
型小鼠的心率 ∀通过四因素三水平的正交试验表安排实验次数 o以心率升高率为指标比较各因素 !水平之间的差异 ∀
结果 }以各因素k药物l的最佳药效的剂量水平进行重新组合的新方 o其药效较原方明显增强k Π s qsxl ∀结论 }通过
实验因素k药物l的主次关系比较 o对中药复方参仙升脉饮的配伍关系和配伍剂量进行分析 o不仅为该新方的配伍关
系提供了可信的说理依据 o而且也为中药复方的优化精选提供了一个可行的方法 ∀
≈关键词  正交试验 ~中药复方 ~参仙升脉饮 ~药效实验 ~配伍 ~剂量
≈中图分类号  • u{| qt ~ • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussslsx2svs|2sv
参仙升脉饮是一个治疗心肾阳虚 !寒凝脉迟证
k西医属于病窦综合征及缓慢性心律失常的范畴l的
≈收稿日期  t|||2ts2u|
≈基金项目  国家中医药管理局科研基金课题k|yƒsttl
有效方药 ∀为了科学配伍复方 o合理使用药物 o进一
步提高该方的疗效 o我们通过正交试验 o用药效学指
标考察了该方的不同配伍剂量 o发现了一个比原方
配伍用量小 !药效高的新配伍复方 o从而为该方的进
#{sv#
第 ux卷第 x期
usss年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qx¤¼ ousss