全 文 ：中国新药杂志 2 0 04年第 13 卷第 5 期
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讨 论
0 20 4 0印 80
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图 3 多剂量 口服 H vS R T与 H v T后阿昔洛韦的平均药时曲线
i Fg 3 M e a n p las rna co ne e n t
ra ti o n
一
tim e e u e o r v fa e y e lo v云 r
a f te rm u l ti P le o a r lo dse
o fS HV R Ta n d H V T
3 药动学参数
盐酸伐昔洛韦的体内过程符合单室模型 。 单剂
量及多剂量实验所得参数见表 1 和表 2。
衰 1 家犬单剂 .口服 2种制荆后盐趁阿昔洛韦的药动学参数
Ta bI M 日 nI) ha rma c o k le n tics Pa ra 川 ne e ts ra fte a s ri ng le oa r
l do 鱿
参 数 H VS R T (。 二 6)
T
~八
c ~乍g’ m L一 l
M R T/ 1
、
A U场 一 Tn今g’ h.m L一 1
A U q
一 二今『 h.m L一 l
3
.
5 士 1 1
3
.
1 8士 1 . 4 6
5
.
4士 1 6
5 5 3 2士 8 .9 6
9 2
.
4 2士 7 .1 5
H V T (
n= 6)
2
.
3 士 1 . 4
4
.
24士 1 .5 1
4
.
6士 0 . 8
2 6 2 2士 8 .9 2
9 2
.
1 4士 1 . 89
衰 2家犬多荆一口服 2种制剂后盐酸阿昔洛韦的药动学参数
几 b ZM 公 n p ba 们团旧 c o k ie ni tcs Pa r曰旧 e te s ra ftc rm u l ti P le o a rl d 0Se
参 数 HS V R T ( n= 6)
T
~爪
c
~乍g’ m L一 l
C 、 n布g · m L一 l
A U q
一 :今g’ h.m L一 L
F l/ %
7 4士 0 .5
4
.
5 1 士 0 .9 1
1 20士 0 .3 2
5 8
.
7 5 士 9 . 8 4
1 3 5 2士 1 4 .3
2
.
5 士 0 . 6
7 7 0士 2 .3 6
0
.
5 8士 01 5
6 45 4士 1 1 .57
4 81 3 士 1 1 0 .3
盐酸伐昔洛韦是阿昔洛韦 的缴氨酸醋 ,进人体
内后迅速降解为阿昔洛 韦发挥疗效 。 单 剂量 口 服
1 9 盐酸伐昔洛韦 , 血浆 中盐酸伐昔洛韦浓度 < 0 . 3
拌g · m L 一 ` , 服药 3 h 后在血浆中已难检出圈 , 所 以本
次实验选择测定其代谢产物阿昔洛韦的浓度 。 关于
血液中阿昔 洛韦的测定 方法 , 文献报道很 多 3[, 4〕。
本研究建立的分析方法 ,简单快捷 , 重复性好 , 灵敏
度高 ,有利于大量的血样测定工作 。 药动学参数经
方差分析和双单侧 t 检验表明 ,单剂量给药时 ,两种
制剂的 A u C 等效 , H v S R T 的 C ~ 降低 , T m ax 延长 ;
多剂量给药达稳态后的 3 个谷浓度均值 H V S R T 为
H V T 的 2 . 0 7 倍 ,波动系数 H V T 为 H V S R T 的3 . 56
倍 ,缓释片能维持较高且持久的谷浓度 ,并且波动系
数显著降低 ,达到了缓释片设计的 目的 。
[作者简介」 许小红 ( 1 9 7 4 一 ) , 男 , 博 士 , 主要研 究方 向 : 缓
控释制 剂及生物等效性评价 。 联系电话 : (0 2 8 ) 8 9 9 3 6 6 6 5 , E -
m
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ho @ 1 6 3
.
co m
。
[通讯作者 1 李铜铃 ( 195 3 一 ) , 女 , 教授 , 博士 生导师 , 主要
研 究方 向 : 药物新制剂及生物等效性评价 。 联系 电话 : ( 0 2 8 )
8 5 5 0 3 6 6 0
。
FI 达艳态时的波动系数
4 生物等效性评价
根据方差分析和双单侧 t 检验结果 ,单剂量组 :
H V S R T 与 H V T 的 A U C 差异无显著性 , 但 c m a二与
T m ax 差异有显著性 , H V S R T 的 C m ax 有所降低 , T m ax
有所 延 长 , 有 缓 释特 征 。 以 H V T 为参 比制 剂 ,
H V S R T 相 对 生 物 利 用 度 (F 。 一 T n) 为 ( 97 . 02 土
1 2
.
5 4 ) % ;多剂量达稳态时 H V S R T 波动系数 lF 为
( 1 3 5
.
2 士 14 . 3 )% ,与 H V T 的 ( 4 8 1 . 3 土 10 1 . 3 )% 差
异有显著性 (尸 < 0 . 01 ) ,有明显的缓释特征 。
参 考 文 献
赵辨 . 抗病毒新药— 万乃洛韦 ( V al ac icl vo i r ) 【J ] . 临床皮肤科杂志 , 19 9 8 , 2 7 ( 3 ) 二1 90 一 19 0 .
J a e o b so
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M A
.
V al a e ie l o v i
r
( B W 2 5 6 U 8 7 ) : t h e L
一
V al y e s t e r o f ac y
-
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l r仁J ] . J 人么叉 2 vi ro z , 1 9 9 3 , 4 1 ( S u p p l ) : 5 1 5 0 一 5 1 53 .
梁茂植 , 余勤 , 黄英 ,等 . R P ~ H l〕 L C 法测定人血浆中阿昔洛韦的
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气 IJJIJ飞.一几`11
234
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( 收稿 日期 : 2 0 0 3 一 0 7 一 2 0 )
透皮促进剂对祖师麻膏药透皮吸收的影响
高 建 ,杨秋生 ,李宇航
(首都医科大学药物研究所药理教研 室 ,北京 10 0 0 5 4)
〔摘要 」 目的 : 筛选祖师麻膏药的透皮促进剂 , 提高其透 皮利用率。 方法 :采用 T P 一 3 扩散 池 , 选择离体 大鼠皮
肤为渗透屏障 , 从接收池取样 , 用 H P L C 检测法测定样 品 中瑞香素的含量 , 比较氮酮 、 薄荷 脑和冰片对祖 师麻 膏药
透皮吸 收的影响 。 结果 : 4 % 的氮酮对瑞香 素的促渗透 作用最 强 。 结论 : 4 % 的氮酮 明显促 进祖 师麻 膏药中主 要有
效成分瑞香素的透皮效率 。
【关键词」 祖 师麻膏药 ;瑞香素 ;透皮促进剂 ; 氮酮 ; 薄荷脑 ;冰片
[中图分类号了R9 4 4 . 9 ; 2R 8 5 . 5 [文献标识码 〕 A 〔文章编号 ] 1 0 03 一 3 7 3 4 (2 0 0 4 )0 5 一 0 4 16 一 0 3
4 1 6 一
中国新药杂志 20 0 4年第 13 卷第 5 期
E fe fc to f t ra ns de rm a le ne ha nc e rs o na bs o r P ta ne e o f Zu s him a g a o y ao
G A O Jia n
,
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he 雌 , L l Y -u h a n g
( I n s t派r u t e of M改t e ir a , M云d艺ca D e扣 r tm e n t of hP a r m a co l明 ) , 肠 P i at l nU i ve sr i yt of
几拒己i ca l S c i e n ces , eB ij i n g 1 0 0 0 5 4 , hC i n a )
〔A b s t r a e t ] O bj ce t i v e : T o im p or v e t h e a b so r p t a n e e o f z u s h im a g ao y a o b y s e er e n i眼 s e v e ar l t r a n s -
d e rm a l e n e h a n e e r
.
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一
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.
S a m p le w e r e e o l le e t e d for m t h
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-
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d a P h n e t i n e e o n e e n t ar t io n i n s a m P le s w a s d e t e r m i n e d b y H P L C
.
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n e n t s o f Z u s h im a g ao y ao
.
〔K盯 w o dr s 〕 Z u s h i m a g a o y ao : d a p h n e t i n e ; t r a n s d e mr a l e n e h a n e e sr ; aoz n e ; m e n t ho l ; bo r neo l
祖师麻膏药是祖师麻经提取加工后制成 的膏
药 , 具有 良好的祛风除湿 、 活血止痛等功效 , 可治疗
风湿性 、类风湿性关节炎 、跌打损伤等症 。 祖师麻的
主要有效成分为香豆素类 , 如瑞香素 、 瑞香昔 、 紫丁
香昔等 , 其 次为皂 昔类川 。 在有 关研究中我们发
现 , 祖师麻膏贴于人体使用 24 h 后 ,药布上残存的香
豆素类成分 占使用前的近 90 % 左右 , 贴 4 8 h 后有效
成分仍残留 80 % 以上 ,这表明膏药中大部分有效成
分未被吸收 。 为提高膏药 中有效成分 的利用 率 ,本
研究以祖师麻 中主要有效成分瑞香素为指标 , 比较
研究 了不同透皮促进剂对祖师麻膏中香豆素类成分
的透皮增效作用 。
材料和仪器
祖师麻膏药为本实验室 自制产品 ; 瑞香素为含
量测定用对照品 ,购 自中国药品生物制品检定所 ;氮
酮 、 冰片 、 薄荷脑均为药用级或分析纯试剂 。 T P 一 3
型智能透皮扩散仪 ; W at er s 液相色谱系统 。
品 5 . o m g ,置 25 m L 量瓶 中 ,加 30 % 乙 醇至刻度 ,振
摇使溶解完全 ,得 o . 2 m g’ m L 一 `的对照品溶液 , 再精
密吸取 2 . s m L 此对照 品溶 液置 50 m L 量瓶 中 , 以
30 % 乙醇稀释至刻度 ,得 0 . 01 m g’ m L 一 `的对照品溶
液 。 取 0 . 0 1m g · m L 一 ` 的对 照品溶 液 1 , 2 , 4 , 6 , 8 ,
巧 , 2 0拜L 注入液相色谱系统 , 按选定的条件测定峰
面积 , 以进样量 ( 以 拼g 计 )为 自变量 ,峰 面积为因变
量 ,进行线性 回归 ,计算回归 方程为 : Y 二 5 10 9 38
X + 10 5 1 8
, : = 0
.
9 9 9 4
。 结 果 表 明 : 瑞 香 素在
0
.
01 一 0 . 2拜g 的进样量范围内线性关系 良好 。
1
.
3 测定方法的重现性 精密吸取每毫升相当于
药材 1 9 的祖师麻提取浓缩液 0 . s m L 置 10 m L 量瓶
中 ,加 30 % 乙醇稀释至刻度 ,摇匀 , 精密吸取 1 . o m L
并准确稀释至 10 m L , 以微孔滤膜过 滤后 吸取 5产L
进样 ,测定浓缩 液中瑞香素含量 。 同法平行测定 6
次 ,计算测定结果的相对标准偏差 。 结果表明 , 6 次
测定结果的相对标准偏差为 1 . 21 % , 方法的重现性
良好 。 其液相色谱图见图 1 。
方法与结果
1 样品中瑞香素的含 t 测定方法的建立
1
.
1 色谱条件 参考文献〔2」, 经预试验确定了样
品中瑞 香素的高 效液相 色谱 法 测定 条件 : W at er s
S ym m e t r y C 1 8柱 ( 1 5 0m m X 3 . g m m , 5拼m ) ; W a t e r s
6 0 0 E 输 液 泵 ; W a t e r s 9 9 6 型 P D A 检测 器 ; W a t e r s
7 17 型 自动进样器 ; 柱温 2 5℃ ; 流动相组成为甲醇 -
0
.
1% H 3 P q ( 2 0
: 8 0 ) :检测波长 3 2 8 n m 。
1
.
2 标准曲线及线性范 围 准确称取瑞香素对照
` ~ ~ ~一 - ~ J~ 一一~ ~ 人~ ~一- 洁 -一~ - - J 时~ ~ - - ~ ~ ~ ~ 山- 一~ ~ ~ ~曰0 5 1 0 15 20 25 30
t l m in
l 瑞香索 ( : R = 1 1 . 4 3而 n )
图 1 祖师麻提取浓缩液液相色谱图
F ig i 玉D , L C e h r o ma 吨 r a m o f Z u s hi ma e x t ar e t
1
.
4 加样回收率 精密吸取 已知含量的祖师麻提
取浓缩液 6 份 , 每份 O . 25 m L , 置 10 m L 量瓶中 ,各精
一 4 17 一
C hi nes J
o u 了朋』o f Ne w D r呀 5 2 0 0 4, V o l . 13 N o . 5
密加人 0 . 5m g’ m L 一 `的瑞香素对照品溶液 2 . o m L ,
加 3 0 % 乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,精密吸取 1 . Om L 并
准确稀释至 10 m L , 以微孔 滤膜过滤后吸取 5拌L 进
样 ,计算回收率 。 得平均回收率为 97 . 犯 % , 相对标
准偏差 1 . 6 5% 。 表明该方法的回收率 良好 。
2 离体鼠皮的制备s1[
取健康 W i s t a r 大鼠 5 只 ,雌雄不限 , 体重 1 5 0 一
2 0 0 9
,麻醉后用剃须刀将鼠背部毛小口刮除 , 冲洗干
净 , 24 h 后将大鼠处死 , 剪下背部皮肤 ,剥 离皮下脂
肪及猫液组织 ,选取完整皮肤 ,用生理氯化钠溶液冲
洗干净 , 一 4 0℃ 以下低温冰箱中贮存 ,备用 。
3 实验样品的制备
选取最为常用 的 3 种透皮促进剂进行对 比研
究 。 取祖师麻 药材适 量 , 以 70 % 乙 醇 回流提取 2
次 ,浓缩成每 m L 相当于药材 1 9 的药液 , 分成 4 份 ,
其中 3 份分别加人 2 % 的氮酮 、 2 % 的冰片和 2 % 的
薄荷脑 , 另一份不加 ,作为供试样 品 。
4 最佳透皮促进剂的优选
取制备好的鼠皮 , 剪成适当大小的 4 片 ,分别置
于透皮试验仪的 4 个供给池 与接收池 之间 , 以铁夹
夹牢 ,接收池中加满含 30 % 乙醇的生理氯化钠溶液
为接收液 ,供给池中分别准确加人上述 4 种供试品
l m L
,将接收池置 于 37 ℃ 的恒温水浴 中 , 并加磁力
搅拌 ,开始实验 , 随时排除接收池 中气泡 , 分别于实
验开 始后 1 , 2 , 4 , 6 , 8 , 12 , 2 4 , 3 6 h 吸 取各 接收 液
l m L
,并以 同温 的含 30 % 乙醇 的生理氯 化钠溶 液
l m L 补足接收液 ,测定各接收液中瑞香素的含量 ,
计算各时间瑞香素的累积透过量 , 比较不同透皮促
进剂的效果 。
3 种不同透皮促进剂促进药物累积透皮量的结
果见表 1 。
衰 1 不同透皮促进 荆对瑞香斑的透皮促进效果比较
T . b 1 E f f吧e t s o r d i f f e r e n t t门以sd e r m a l , r h a n改比 o n th e
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l a bso rP tan ce
o f da 仙 ne t i ne
中国新药杂志 2 0 0 4年第 13 卷第 5 期
内优化透皮促进剂最合适的用量 。 取祖师麻药材适
量 , 以 7 0 % 乙醇回流提取 2 次 ,浓缩成 l m L 相 当于
药材 19 的药液 ,分成 5 份 ,分别加人 1 % , 2 % , 3 % ,
4 %
,
5 % 的最佳透皮促进剂 , 同 “ 4 ”项 的方法实验 , 比
较透皮促进剂不同用量对药物透皮量影响 。
不同氮酮用量对瑞香素透皮促进作用的比较结
果见图 2 。
滩321
D的O0肠沁n口éù升d`.l卜氏0众
宁匕、喇划级窦璐
0
.
0 D0 . 州 . ` 二二~ 目 . . . ~ ` 一一
0 5 I Q 15 劝 2 5
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图 2 氮酮用量对祖师麻青药中瑞香素累积透过量的影响
F ig 2 E f托 e t s o f d i f fe r e n t
amo
u n t o f ` ” n e o n tha t r a n ds e mr a l
a卜叨 r p tan e e o f d a p h n e t i n e in Z us 瓦 anr g a o y ao
从图 2 可 ,在 1% 一 5 % 的用量 范围内 , 瑞香素
的累积透过量随氮酮用量 的增加而增加 ,但当药物
中氮酮的用量达 3 % 以上后 , 增加 幅度 明显减 小 ,
4 % 与 5% 的差异 已经很小 , 因此 ,最终确定 4 % 为最
佳氮酮用量 。
讨 论
综合分析 实验结果 可知 , 在祖 师麻膏中添加
4 % 的氮酮可以显著提高其主要有效成分的透皮效
率 ,提高幅度在 1 倍左右 , 这对提高药物使用率 、 节
约药物资源 、提高用药经济性都有重要意义 。 当然 ,
本研究还只是基 于体外实验得出的结论 , 与真实的
在体实验结果会存在一定的差异 ,另外 , 由于主要成
分透过率提高而导致的药物有效性 、安全性方面的
改变等问题也有待进一步的研究 。
[作者简介 1 高建 ( 19 7 2 一 ) , 女 , 硕士 , 主要从事药理 学教学
与科研工作 。 联系电话 : (0 10 ) 63 05 1 45 3 , E 一 m a i l: g a oj i a no k@
t 0 111
.
C O n l 。
种 类 累积透过量
/ m g
l h Zh 4 h 6h s h 1 2h 2 4 h 3 6h
无透皮剂 0 0 15 0 . 0 35 0 0 85 0 . 1 47 0 . 1 90 0 . 287 0 . 53 7 0 . 65 8
冰 片 0 0 1 6 0 . 0 3 7 0 . 10 4 0 17 1 0 . 2 2 1 0 . 34 2 0 . 63 2 0 87 4
薄荷脑 0 . 0 2 1 0 . 0 35 0 . 0 97 0 . 1 93 0 . 2 7 7 0 . 4 11 0 . 75 9 0 , 9 99
氮 酮 0 0 1 6 0 . 0 3 9 0 . x 4 5 0 . 2 5 4 0 . 3 4 1 0 . 4 93 0 . 9 1 1 1 . 2 1 8
由表 1 可见 , 氮酮 、 薄荷脑 、 冰片对祖师麻膏药
中瑞香素都有透皮促进作用 , 在前 4 h 中 , 3 种透皮
促进剂的作用差异较小 ,但 4 h 之后 ,差异逐渐明显 ,
氮酮的透皮促进作用明显强于薄荷脑和冰片 。
5 最佳透皮促进剂用 t 的确定
在确定最佳透皮促进剂后 , 在 1% 一 5 % 的范围
一 4 1 8 一
今 考 文 献
王浴生 ,邓文龙 ,薛春生 . 中药药理与应 用〔M ] . 第 2 版 . 北京 :
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几.JI
Jù
.今ùr. LllL
(收稿 日期 : 2 0D 3 一 1 2 一 2 0 修 回 日期 : 2 0 0 4 一 0 3 一 0 4 )