全 文 ：基金项目:教育部博士点专项科研基金项目 (20122227110003);吉林省卫生计生委科学技术研究项目 (2012s007) ;吉林省教育厅
“十二五”科学技术研究项目。
作者简介:侯晓琳 (1978 －)，女，吉林延吉市，博士，副教授，硕士研究生导师，主要从事神经系统疾病的中医药治疗。
通信作者:尚坤 (1978 －)，女，吉林延吉市，博士，副教授，硕士研究生导师，主要从事神经系统疾病的中医药治疗及相关药理研究。
延冰片中脱氢紫堇碱的含量测定
侯晓琳 刘芳馨 鲍慧玮 张 晨 尚 坤*
长春中医药大学药学院，吉林 长春 130117
【摘 要】 目的:延冰片是由延胡索、冰片以及辅料等组成的片剂，临床用于治疗冠心病，心绞痛。研究旨在制定延冰片中脱氢紫
堇碱的含量限度。方法:以脱氢紫堇碱作为延冰片成品的跟踪指标，采用高效液相色谱法测定其含量。结果:延冰片以脱氢紫堇碱作为定
性鉴别标准，脱氢紫堇碱的含量不得少 4. 25mg /g。结论:该方法测定脱氢紫堇碱的含量可行性良好，可作为延冰片质量控制的指标之一。
【关键词】 延冰片;脱氢紫堇碱;含量测定
【中图分类号】Ｒ284. 1 【文献标志码】A 【文章编号】1007 － 8517 (2015)18 － 0017 － 03
The Content determination of Dehydrocorydaline in Ｒhizoma corydalis borneol
HOU Xiaolin LIU Fangxin BAO Huiwei ZHANG Chen SHANG Kun*
Changchun University of Traditional Chinese Medicine，Changchun 130117，China
Abstract:Objective Ｒhizoma corydalis borneol tablets dosage form consists of corydalis rhizome，borneolum syntheticum and
auxiliary material，and other two taste of traditional Chinese medicine，mainly used for coronary heart disease，the treatment of angina
pectoris． The purpose of this paper is to develop content limit extension of dehydrocorydaline in rhizoma corydalis borneol． Methods
Using orthogonal design method，taking the extract the alkaloids content as index，The quality standards for Dehydrocorydaline，borneol
tablets dosage form． Quantitative analysis of its content by HPLC． Ｒesults The formulation for Dehydrocorydaline as qualitative identi-
fication standard，the content of dehydrocorydaline shall not be less than 4. 25mg /g． To develop a limit for the product． Conclusion
This experiment optimized production technology is considered feasible and reasonable，And the quality is stable and controllable． As
one of the indicators of the quality control of Ｒhizoma corydalis borneol．
Key words:Ｒhizoma corydalis borneol;Dehydrocorydaline;Content determination
延胡索为罂粟科紫堇属多年生草本植物延胡索的干燥
块茎，又称玄胡、元胡、玄胡索，主要分布于河北、山东、
江苏、浙江、内蒙古等地，与山芥、将离、川贝等并称
“浙八味”［1］。延胡索具有活血止痛、利气的功效，是活血
化瘀、理气止痛、镇静催眠之佳品，尤以止痛、镇痛之功
效著称于世［2，3］，临床常用于治疗心律失常、冠心病、心绞
痛、气滞血瘀等诸痛。其主要成分为延胡索总生物碱［4，5］。
《本草纲目》中记载，延胡索有 “活血、止痛、理气、通
小便”四大之功效。实验依据延冰片片剂处方中各味药材
有效成分的研究，采用高效液相色谱法 (HPLC)测定三批
延冰片试样中脱氢紫堇碱的含量，同时制定延冰片片剂中
脱氢紫堇碱的含量限度［6］。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 Agilent 1260 高效液相色谱仪;EL － 204 十万分
之一分析天平。
1. 2 试剂 脱氢紫堇碱对照品 (批号:MUST － 15032613，
中国药品生物制品检定所);延胡索药材 (长春宏检药材公
司提供);乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件［7］ 参考相关文献及预试验，色谱条件为:
流动相:乙腈 －水 (含 0. 1% 三乙胺和 0. 4% 冰乙酸)(22
∶78) ;检测波长:338nm;柱温:30℃;流速:1. 0ml /min。
2. 2 波长 (λmax)选择 精密移取脱氢紫堇碱对照品溶
液和供试品溶液，以无水乙醇溶液为空白，在 200 ～ 450nm
波长处扫描，结果见图 1、2。
由图 1、2 可知，脱氢紫堇碱对照品溶液和供试品溶液
在 338nm有最大吸收，通过查阅文献和实验数据分析，最
终以 338nm为测定波长。
2. 3 溶液的制备
·71·中国民族民间医药 2015 年 9 月第 24 卷第 18 期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy，2015，Vol. 24，No. 18
2. 3. 1 对照品溶液的制备 取脱氢紫堇碱对照品适量，加
甲醇制成每 1ml含 0. 2mg的溶液，即得。
2. 3. 2 延冰片溶液的制备 取本品粉末 0. 5g (过三号筛)，
加甲醇提取，定容于 25ml 的容量瓶中，摇匀，过滤，
备用。
2. 3. 3 延胡索药材溶液的制备 取本品粉末 (过三号筛)
约 1g，精密称定，加甲醇提取，后定容于 25ml 的容量瓶
中，摇匀，过滤，取续滤液过滤膜，即得。
2. 4 样品的色谱图 分别精密吸取对照品溶液、延冰片溶
液、延胡索药材溶液各 10 μl，注入液相色谱仪，测定，即
得。结果见图 3、4、5。
2. 5 方法学考察
2. 5. 1 线性范围的考察 分别吸取对照品溶液 (浓度为
0. 01944mg /ml)4、6、10、12、14、18μl注入液相色谱仪，
依法测定。以对照品进样量为横坐标 (x)，以峰面积为纵
坐标 (y)，进行线性回归，得到回归方程为:y = 77. 6x +
0. 378，Ｒ2 = 1。表明进样量与峰面积呈现的线性关系表现
为良好。见表 1、图 6。
表 1 线性关系考察结果
对照品进样量 /μl 峰面积
4 308. 4
6 466. 4
10 778. 8
12 933. 4
14 1086. 3
18 1395. 4
2. 5. 2 精密度试验 分别取对照品溶液 (浓度为
0. 01944mg /ml)10 μl，连续进样 6 次，测定其峰面积。精
密度试验的相对标准偏差为 0. 13%，符合药典标准。见
表 2。
表 2 精密度试验结果表
试验号 峰面积 平均值 ＲSD /%
1 775. 4
2 777. 9
3 776. 9 777. 1833 0. 1336
4 777. 5
5 777
6 778. 4
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2. 5. 3 稳定性试验 分别取对照品溶液 (浓度为
0. 01944mg /ml)和供试品溶液，分别于 0、2、4、6、8、12
h后注入高效液相色谱仪，进样量 10μl。其对照品和供试
品溶液稳定性的相对标准偏差分别为 0. 91%和 0. 17%，说
明二者在 12 h内稳定性较好，符合药典标准。见表 3。
表 3 稳定性试验结果
时间 /h 对照品峰面积 供试品溶液峰面积
0 778 426
2 795. 3 426. 2
4 777 427. 6
6 778. 9 426. 1
8 778. 6 426. 7
12 777. 3 427. 5
ＲSD 0. 91% 0. 17%
2. 5. 4 重现性试验 取延冰片 (批号:20131101)样品，
精密称量，平行处理 6 份作为供试品溶液，注入液相色谱
仪，进样量为 10μl。延冰片片剂中脱氢紫堇碱的平均含量
5. 2591mg /g，其相应的相对标准偏差为 0. 70%，符合药典
标准。见表 4。
表 4 重现性试验结果
试验号 称样量 / g 脱氢紫堇碱含量 /mg /g
1 0. 5008 5. 2285
2 0. 4992 5. 2124
3 0. 5003 5. 2850
4 0. 4997 5. 3103
5 0. 5005 5. 2737
6 0. 5002 5. 2446
ＲSD 0. 70%
2. 5. 5 加 样 回 收 率 试 验 取 延 冰 片 (批 号:
20131101，含量为 5. 2591mg /g)样品 6 份，精密称
定，分 别 加 入 的 脱 氢 紫 堇 碱 对 照 品 (浓 度 为
0. 01944mg /ml)0. 25 g，按 “2. 3”项下供试品溶液的
制备方法进行制备并依法测定，计算其加样回收率。
结果延冰片的回收率均在 95% ～ 105% 之间，平均回
收率是 99. 25%，均符合药典标准。见表 5。
表 5 脱氢紫堇碱回收率试验结果
试验号 称样量 / g 样品含量 /mg 对照品加入量 /mg 测得含量 /mg 回收率 /% 平均回收率 /%
1 0. 2470 1. 2990 1. 3001 2. 5342 95. 01
2 0. 2512 1. 3211 1. 3195 2. 6921 103. 90
3 0. 2502 1. 3158 1. 3174 2. 5757 95. 63
4 0. 2528 1. 3295 1. 3263 2. 7102 104. 10
5 0. 2407 1. 2659 1. 2659 2. 4688 95. 03
6 0. 2506 1. 3179 1. 3164 2. 6584 101. 83
99. 25
2. 6 含量测定 精密称取 3 批不同批号的延冰片样品，按
“2. 3”项下供试品溶液的制备方法进行制备并依法测定。
结果三批延冰片片剂样品中脱氢紫堇碱的平均含量为
5. 32mg /g。见表 6。
表 6 延冰片中脱氢紫堇碱的含量测定结果
批号 含量 /mg /g 平均含量 /mg /g
20131101 5. 255
20131102 5. 360 5. 32
20131103 5. 355
3 讨论
试验对流动相的筛选做了大量尝试，试用了不同溶剂
及不用比例、不同 pH 的溶液进行试验，结果以乙腈 －水
(含 0. 1% 三乙胺和 0. 4% 冰醋酸) (22∶ 78)为流动相最
佳，峰形、分离度、出峰时间等较好。
药方延胡索中脱氢紫堇碱的含量、转移率、加速与长
期稳定性均符合要求。在 2010 版《中国药典》一部延胡索
含量测定项下，检测成分为脱氢紫堇碱，而脱氢紫堇碱药
材最低限度为 0. 08%，含量偏低。综上所述，延冰片中脱
氢紫堇碱的平均含量为 5. 32mg /g，而含量限度可在平均含
量下浮 20%范围内容制定，即延冰片中含脱氢紫堇碱的含
量不得少于 4. 25mg /g。
参考文献
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科技出版社，2010．
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制分会 2011 年学术年会论文集，2011．
［4］ 江纪武． 植物药有效成分手册 (精装) ［M］． 北京:人民卫生出版
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［6］ 张萍． 延胡索提取物治疗冠心病室性心律失常的机理研究 ［D］． 北京:
北京中医药大学，2012．
［7］ 王红，田明，王一，等． 高效液相色谱法测定延胡索总生物碱滴丸中巴
马汀碱和脱氢紫堇碱含量 ［J］． 中医药学报． 2013，4 (1):96 － 98．
(收稿日期:2015. 06. 23)
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