全 文 ：播 o发芽率  xs h o鲜根产量 xv{®ª#yyz°p u o干
品产量 tyz®ª#yyz°p u o第 u的年产量还会有较
大增加 ∀根和茎叶中紫锥菊甙的含量分别为
s1s{v h和 s1ss|u h o说明紫锥菊甙主要集中
在根中 ∀据文献报道 o紫锥菊甙为紫锥菊属植
物主要有效成分之一 o具有提高免疫 !抗氧化 !
抗菌等多方面活性 o但在原产地生长的紫锥菊
几乎不含紫锥菊甙 o我们通过异地引种栽培成
功地提高了紫锥菊甙的含量 o从而为我国开发
利用紫锥菊资源提供了依据 ∀我们还同时引种
栽培了狭叶紫锥菊 o有关狭叶紫锥菊与紫锥菊
的比较研究将另行报道 ∀
4 参考文献
t 刘一兵 q美国草药排行榜 q国外医药#植物药分册 qt||{ otv
kwl }t{{
u 肖培根 q国际流行的免疫调节剂紫锥菊及其制剂 q中草药 o
t||y ouzktl }wy
v 刘友义 q紫松果菊引种栽培试验初报 q中草药 ot||y oux }
w{{
w 屠鹏飞 o王分 o出山武 o等 q肉丛蓉类生药中苯乙醇甙类成
分的 • °2‹°≤ 分析 q药学学报 ot||z ovukwl }u|w
t|||2st2sy收稿
浙贝母总生物碱的月积累动态的研究
李松林 李萍 卞芸芸 朱劲松 王媚
k中国药科大学生药教研室 南京 utsssul
林鸽 k香港中文大学药理学系l
摘要 目的 }研究江苏南通产和浙江宁波产浙贝母总生物碱的月积累动态 o确定浙贝母的最佳采收
期 ∀方法 }用改进的酸性染料比色法测定不同月份的浙贝母总生物碱 ∀结果 }两产地浙贝母总生物碱月
积累动态基本一致 o总生物碱的绝对积累量以 x月份最高 ∀结论 }浙贝母以 x月份为最佳采收期 ∀
关键词 浙贝母 总生物碱 酸性染料比色法 月积累动态
浙贝母是传统止咳化痰常用中药 o为浙贝
母 Φριτιλλαρια τηυνβεργιι ¬´ q的干燥鳞茎≈t  ∀
近年来化学和药理学研究证实 o浙贝母主要次
生代谢产物为异甾体生物碱 o具有明显的镇咳
作用≈u ∗ v  ∀因此异甾体生物碱为浙贝母的主要
有效成分 ∀当前我国浙江宁波地区和江苏南通
地区是浙贝母药材主要栽培地 ∀为了评价两产
浙贝母药材质量 o为产地合理采收和加工浙贝
母提供依据 o我们用进一步改进的酸性染料比
色法≈w 对两产地浙贝母进行了总生物碱含量测
定和月积累动态比较研究 o现报道如下 ∀
1 仪器 !试剂和样品
岛津 ˜ ∂2uws 型可见紫外分光光度计k日
本l ~⁄ƒtts 型电子天平k常熟衡器厂l ±2|st
涡旋器k江苏海门其林医用仪器厂l ~氨水 !乙
醚 !氯仿 !溴甲酚绿 !邻苯二甲酸氢钾 !氢氧化
钠 !氢氧化钾和无水乙醇均为分析纯 ∀浙贝甲
素k√ µ¨·¬¦¬±¨ 或 ³¨¬°¬±¨ l中国药品生物制品检定
所提供 ∀浙贝母药材分别于每月 u|或 vs日中
午采集 o常温晒干 ∀江苏南通样品于 t||z2sw ∗
t||{2su 月采集 o浙江宁波样品于 t||z2ts ∗
t||{2s{月采集k见表 ul ∀学名经中国药科大
学生药教研室李萍教授鉴定 ∀标本存中国药科
大学生药教研室标本馆 ∀
2 方法和结果
211 方法学考察
21111 对照品溶液的制备 o精密称取 tt1y°ª
浙贝甲素置于 ts °¯ 容量瓶中 o用氯仿溶解并定
容 o得贮备液 ∀精密吸取上述贮备液 t1y °¯ o置
于 xs °¯ 容量瓶中 o用氯仿定容 o得 vz1tuΛª#
°¯ p t的浙贝甲素标准溶液 ∀
21112 各种试剂的配制 参见文献≈w  ∀
#u|x# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 ts期
21113 测定波长的选择 精密吸取浙贝甲素
标准液 v1s °¯ o置于 tss °¯ 具塞锥形瓶中 o加入
氯仿 z1s °¯ ~另取 ts1s °¯ 氯仿 o置另一 tss °¯
具塞锥形瓶中 o供制备空白液 ∀在两只锥形瓶
中各加入 x1s °¯ 蒸馏水 o以下按标准曲线的绘
制项下操作 o在 vss ∗ zss±°的波长处扫描 o结
果表明 o在 yt{1x±°处有最大吸收 o故选择测
定波长为 yt{1x±° ∀
21114 样品固有颜色对测定吸收值的影响
用 ³‹w1x的邻苯二甲酸氢钾缓冲液代替 ³‹w1x
的 s1sw h溴甲酚绿缓冲液 o按样品制备与测定
项下操作 o在 yt{1x±° 处测定 o结果无背景吸
收 o说明样品颜色对测定无影响 ∀
21115 呈色稳定性试验 精密吸取标准液
v1s °¯ 和样品上清液 t1s °¯ o分别按样品测定方
法项下操作 o在 s ox ots otx ous oux ovs ows oxs o
ys o|s otus°¬±o测定吸收值 o结果标准溶液和样
品溶液在 u«内稳定 ∀
21116 标准曲线的绘制 精密吸取浙贝甲素
标准溶液 s1x ot1s ot1x ou1s ou1x ov1s °¯ 分别置
于 y 只 tss °¯ 具塞锥形瓶中 o分别加入 |1x o
|1s o{1x o{1s oz1x oz1s °¯ 氯仿 o再分别加入
x1s °¯ 蒸馏水和 u1s °¯ ³‹w1x的 s1sw h溴甲酚
绿缓冲液 o密塞 o剧烈振摇 v°¬±后 o移入 ys °¯
分液漏斗中 o静置 s1x«o精密吸取氯仿液 x1s °¯
置于已加入 t1s °¯ s1sst°²¯ #pt氢氯化钾无
水乙醇溶液的具塞刻度试管中 o摇匀 o随行空白
对照 o在 yt{1x±°处测定吸收度用最小二乘法
以吸收值为纵坐标 o溶液浓度为横坐标 o求得回
归方程为 }Α € s1stxt n w1zz ≅ tsp v Χoρ €
s1|||| o浙 贝 甲 素 线 性 范 围 为 t1{xy ∗
tt1tvyΛª# °¯ p t ∀
21117 精密度试验和回收率实验 精密称取
浙贝母粉末kxs目lx份 o各 s1tªo按样品溶液
制备和测定方法项下操作 o结果 ΡΣ∆ 为 w1u h
kν € xl ∀精密称取已知含量浙贝母粉末kxs
目ls1tªo加入对照品溶液 u1x °¯ o按样品溶液
制备和测定方法项下操作 o结果加样回收率为
|z1u h k ν € vl ∀
21118 样品提取溶剂和提取方法的比较 分
别以下列 w种溶剂系统提取样品 ≠ ts h氨水碱
化 o乙醚提取 ~ ts h 氨水碱化 o氯仿提取 ~≈
ts h氨水碱化 o乙醚2氯仿2无水乙醇kuxΒ{Βu1xl
提取 ~…盐酸乙醇ktΒussl提取 ∀提取方法有 ¤
冷浸法 }精密称取浙贝母粉末kxs 目ls1tªo置
于具塞刻度试管中 o分别加入上述 w种提取溶
剂 o密封 o涡旋 vs¶后称重 o冷浸 uw«o用溶剂补
足重 ∀¥索氏提取法 }精密称取浙贝母粉末kxs
目lu1sªo装在滤纸筒中 o用氨水碱化 t1x«后 o
索氏提取至提取液无生物碱反应k约 v«l ∀先
用冷浸法考察 w种不同溶剂的提取效果 o再用
提取得率最高的溶剂比较冷浸法和索氏提取法
的提取效果 ∀结果见表 t ∀
表 t 不同提取溶剂和不同提取方法
对浙贝母总生物碱含量的影响 h
提取溶剂 提取方法 生物碱含量
ttl ¤ s1uy
u ¤ s1ut
v ¤ s1ux
w ¤ s1sz
t ¥ s1uw
注 }ν € v tlt ou ov同文内
表 t结果表明 o用 ts h氨水碱化乙醚冷浸
法提取总生物碱含量最高 o且操作方法简便 ∀
212 样品测定
21211 样品液的制备 精密称取经 ys ε 干燥
t«样品粉末kys目ls1tªo置于具塞刻度试管
中 o精密加入 x1s °¯ 乙醚和 s1t °¯ ts h氨水溶
液 o密塞 o涡旋 vs¶称重 o冷浸 uw«o用溶剂补足
重量得样品液 ∀
21212 浙贝母总生物碱含量月积累测定 精
密吸取样品上清液 t1s °¯ o置于具塞锥形瓶中 o
用氮气吹干溶剂 k或水浴蒸干l o加蒸馏水
x1s °¯ o³‹w1x的 s1sw h溴甲酚绿缓冲液 u1s °¯
和氯仿 ts1s °¯ 剧烈振摇 v°¬±后 o转移至 ys °¯
分液漏斗中 o静置 vs°¬±o精密取氯仿液 x1s °¯ o
置于已加入 s1sst°²¯ #pt氢氧化钾 t1s °¯ 无
水乙醇溶液的具塞刻度试管中 o摇匀 o随行空白
对照 o在 yt{1x±°处 o测定吸收度 o代入标准曲
线计算含量 o结果见表 u ∀
#v|x# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 ts期
表 u 浙贝母总生物碱含量月积累动态 h
月份 宁波产 南通产
t s1xz s1zy
u s1yz s1{v
v s1xx )
w s1wttl s1wt
x s1xy s1vz
y s1xu s1vy
z s1ww s1uy
{ s1wx s1w{
| ) s1x{
ts s1xs s1xx
tt s1ww s1w{
tu s1wy s1zs
注 }/ ) 0样品缺 ν € v tl虫蛀样品
21213 浙贝母总生物碱绝对量之月积累测算
随机抽取南通产浙贝母每月样品鳞茎 us粒 o
称重 o分别与当月总生物碱含量相乘计算 us粒
鳞茎总生物碱的绝对量 o结果见表 v ∀
表 v 南通产浙贝母总生物碱绝对量之月积累
月份 us粒重 ª 总生物碱重量 °ª
t tt1x {z1zy
u tu1s ||1w{
v ) )
w y|1| u{w1yy
x {|1z vvs1ts
y x{1t usz1||
z wz1w tuw1yy
{ ) )
| wv1u uxs1xy
ts ww1t uxx1vt
tt ty1t zy1|y
tu uu1{ tx|1vz
注 }ν € v / ) 0样品缺或量不足
由表 v可知 o浙贝母生晒品总生物碱绝对
量以 x月份为最高 ∀
3 讨论
311 浙贝母的生长期是从每年的 ts月份种鳞
茎种下开始 ∀表 u结果表明 o浙贝母总碱出现
消长现象 o我们认为可以作如下解释 ots月份
栽下的种茎 ott otu月份开始发芽 ot ou月份则
长根 o这时种茎消耗了大量贮藏的淀粉 o但种茎
个体并未明显长大 o因此次生代谢产物总生物
碱的含量逐月增加 ov ow月份植株生长迅速 o鳞
茎则逐月长大 o此时虽然次生代谢旺盛 o产生大
量生物碱 o但鳞茎贮藏淀粉的量也迅速增加 o鳞
茎个体增大 o因此生物碱的含量测有所下降 ox
月份地上部分枯萎 o次生代谢逐渐停止 o生物碱
的绝对量变化不大 o但 x oy oz月份鳞茎中的淀
粉还有少量的积累 o因此生物碱的相对含量反
而有所下降 oz 月份生物碱含量达到最低点 ∀
{ o| ots月份鳞茎中淀粉自身分解成糖为来年
的生长做准备 o个体重量减轻 o因而生物碱含量
又相对有所增加 ∀
传统认为浙贝母以 x月份地上部分枯萎时
采集最好 o而我们观察到的 x月份总碱含量并
不是最高 ∀为了验证传统采集时间的科学性 o
我们以南通样品为例测算了浙贝母总生物碱的
绝对量的月积累 o结果表示以 x月份总生物绝
对积累量为最高 o说明传统 x月份采集浙贝母
是非常合理的 ∀
312 含量测定过程中用氯仿萃取酸性染料半
生物碱离子对时 o氯仿萃取液中微量的水分对
测定结果影响较大 o作者建立该方法时原先将
萃取液过滤试图除去微量水分 o但滤液仍需放
置近 t1x«以上才能测出稳定的吸收值≈w  ∀本
文先后用过滤 !静置 !加入不同浓度的氢氧化钾
无水乙醇溶液等方法考察氯仿中水分对测定结
果的影响 o结果表明 o萃取液在静置 vs°¬±后 o
加入 s1sst°²¯#pt氢氧化钾无水乙醇溶液 o在
yt{1x±°处吸收值非常稳定 o从而省去了过滤
操作 o节省了操作时间 o并提高了结果重现性 ∀
4 参考文献
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学学报 ot|{x ouskwl }vsy
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母部生物碱含量测定 q中国药科大学学报 ot||s outkxl }
vt|
t|||2st2sy收稿
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