全 文 ：°≤∞法和 °≤ 法测定蒲黄中黄酮甙的含量
杨永华 王实强 张水寒 k湖南省中医药研究院 长沙 wtsssyl
摘要 目的 }采用高效毛细管电泳法和高效液相色谱法测定蒲黄中异鼠李素2v2 Ο2新橙皮糖甙和香
蒲新甙的含量 ∀方法 }°≤∞用缓冲液 s1su°²¯#p t硼砂2s1sx°²¯#p t十二烷基硫酸钠的 ts h乙腈 o电
压 us®∂ o柱温 vs ε o检测波长 uzs±° o进样量 vs®°¤#¶~°≤ 用 ≤t{柱 o流动相 乙腈2水ktxΒ{xl o检测波
长 uxw±° ∀结果 }两种黄酮甙的含量在 s1t h ∗ s1y h ∀结论 }两种方法均可用于蒲黄的质量控制 ∀
关键词 蒲黄 °≤∞ °≤ 含量测定 异鼠李素2v2 Ο2新橙皮糖甙 香蒲新甙
蒲黄为常用中药之一 o5中国药典6t||x版
规定其来源为香蒲属多种植物的花粉 ∀近年来
药理和临床研究证明 o蒲黄可改善微循环 o防治
冠心病等 o其主要有效成分为黄酮甙类 ∀有关
蒲黄中黄酮类含量测定方法报道有高效液相色
谱法≈t ou 和薄层扫描法≈v ow ∀我们采用高效毛
细管电泳法 k °≤∞l和高效液相色谱法
k°≤l对香蒲属的 x种植物宽叶香蒲 !无苞香
蒲 !东方香蒲 !水烛香蒲 !长苞香蒲花粉中的 u
种主要黄酮甙k异鼠李素2v2 Ο2新橙皮糖甙和香
蒲新甙进行了含量测定研究 o同时测定了 ts个
地区的 t{个商品蒲黄样品 ∀
1 仪器与试药
°≤∞2v⁄型高效毛细管电泳仪k美国惠普
公司l o石英毛细管柱 xsΛ° ≅ xy¦°k惠普公
司l o≤2y 型高效液相色谱仪k日本岛津公
司l o≤t{柱 x°° ≅ uss°° o粒度 xΛ°k大连依特
公司l ∀
对照品异鼠李素 v2 Ο2新橙皮糖甙k ´l和
香蒲新甙k µl从蒲黄中提取分离 o经紫外光谱 !
红外光谱 !质谱 !核磁共振氢谱 !碳谱确证其结
构 o纯度经 °≤ 法测定大于 |{ h ∀
商品药材购自各地医院和药店 o植物药材
样品为产地采集 o标本存放在本院植物标本室 o
所用试剂为色谱纯和分析纯 ∀
2 方法和结果
211 色谱条件
°≤∞条件 }缓冲液 s1su°²¯ # pt硼砂2
s1sx°²¯#p t十二烷基硫酸钠k≥⁄≥l的 ts h乙
腈 o电压 us®∂ o柱温 vs ε o检测波长 uzs±° o进
样量 vs®°¤#¶∀ °≤∞色谱图见图 t ∀
°≤ 条件 }流动相 乙腈2水ktxΒ{xl o流速
t qs °¯ # °¬±p t o柱温 ux ε o检测波长 uxw±° o进
样量 tsΛ¯ ∀ °≤ 色谱图见图 u ∀
图 t °≤∞图谱
q对照品
q样品
t q异鼠李素 v2 Ο2新橙皮糖甙 u q香蒲新甙
图 u °≤ 图谱
q对照品
q样品
t q异鼠李素 v2 Ο2新橙皮糖甙 u q香蒲新甙
3 国家/九五0攻关课题
#u{y# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tt期
212 标准曲线与线性关系
精密称取对照品 ´和 µ各 x°ª置 xs °¯ 量
瓶中 o甲醇溶解并稀释至刻度为对照品溶液 ∀
°≤∞}精密量取对照品溶液 u ow oy o{ o
ts °¯ 分别置于 ts °¯ 量瓶中 o加甲醇至刻度 ∀
测定峰面积 o以对照品浓度为横坐标 o峰面积为
纵坐标 o绘制标准曲线k结果见表 tl ∀
°≤ }精密吸取 u ow oy o{ otsΛ¯ 对照品溶
液 o测定其峰面积 o以对照品量为横坐标 o峰面
积为纵坐标 o绘制标准曲线k结果见表 tl ∀
表 t 标准曲线和线性关系
方法 对照品 回归方程 ρ 线性范围
°≤∞ ´ Ψ s1|x|y Ξ n s1tywy s1|||x t{1{ ∗ |w
µ Ψ s1y{{y Ξ n s1s|w|x s1|||z ty1w ∗ {u
°≤ ´ Ψ xtz1yw Ξ p tz|w1{t s1|||| t{{ ∗ |ws
µ Ψ wuu1vt Ξ p tw|u1zy s1|||{ tyw ∗ {us
注 }≠ ´ q异鼠李素2v2 Ο2新橙皮糖甙 oµ q香蒲新甙 k下
同l ∀ °≤∞o°≤ 线性范围的单位分别为 Λª# °¯ p t o±ª
213 精密度和重复性试验
吸取对照品溶液 o分别进样 x次 o测定并计
算峰面积和相对标准偏差 o结果见表 u ∀
取同批药材样品 x份 o测定 ´和 µ的含量 o
计算其相对标准偏差 o结果见表 u ∀
表 u 精密度和重复性试验结果 h
°≤∞法
´ µ
°≤ 法
´ µ
精密度 ΡΣ∆ t1{| t1zt s1zx t1sv
重复性 ΡΣ∆ u1|t v1yv t1zt u1xz
214 加样回收试验
精密称取同批药材样品 x份 o分别定量加
入对照品溶液测定 o结果见表 v ∀
表 v 加样回收结果 h
°≤∞法
´ µ
°≤ 法
´ µ
平均回收率 |{1ux |z qxy |z1zz |{1wu
ΡΣ∆ w1ty v1|v u1t| v1{w
215 样品测定
取本品约 s1xªk同时另取本品测定水分l o
精密称定 o置 xs °¯ 量瓶中 o加甲醇 wx °¯ o超声
处理 vs°¬±o放冷至室温 o甲醇稀释至刻度 o滤
过 o收集续滤液为供试品溶液 ∀测定了 x个不
同植物来源和 t{个商品蒲黄中黄酮甙的含量 o
结果见表 w ∀
表 w 蒲黄样品中黄酮甙含量测定结果 °ª#ªp t
样品 来源
°≤∞法
´ µ
°≤ 法
´ µ
样
品 来源
°≤∞法
´ µ
°≤ 法
´ µ
宽叶香蒲 Τ1 λατιφολια 湖南江华 v1uz u1sz v1vt u1tw z 江苏南京 u1sv t1xv u1t| t1yy
无苞香蒲 Τ1 λαξ µ αννιι 宁夏银川 x1wv v1{v x1x| v1zx { 江苏南京 w1tv v1sz w1sy u1|v
东方香蒲 Τ1 οριενταλια 湖南江华 u1zy v1uy u1{u v1vt | 海南海口 t1yx s1{u t1zw s1|y
水烛香蒲 Τ . ανγυστιφολια 宁夏银川 w1uw u1{| w1uy u1|v ts 陕西西安 w1xu v1vt w1yv v1ws
长苞香蒲 Τ1 ανγυστατα 湖南华容 x1vt v1yx x1vz v1ys tt 陕西西安 v1{z u1|w v1z{ u1yw
商品蒲黄 tu 广东广州 u1{u t1|y u1{x u1su
t 湖南长沙 t1xz t1vs t1y| t1vw tv 广西南宁 t1ws t1ut t1xw t1vs
u 湖南长沙 t1wv t1tu t1xt t1us tw 广西南宁 w1v| v1ts w1x{ v1uu
v 山东维坊 x1z{ w1zx x1zv w1y| tx 北京 v1xv u1{t v1x{ u1{x
w 山东维坊 x1wt w1{ x1w| w1y| ty 北京 x1u{ w1ts x1ut w1ty
x 四川成都 v1zx u1yt v1{v u1zu tz 贵州贵阳 v1vs u1xt v1u{ u1xz
y 四川成都 t1ux s1yz t1vw s1|z t{ 贵州贵阳 w1|| v1xu w1|v v1x|
3 讨论
311 高效毛细管电泳法k°≤∞l是近年来发展
迅速的一种新的分析方法 o我们采用胶束动电
毛细管电泳法k ∞≤≤l对蒲黄中的黄酮甙进行
含量测定 o并与 °≤ 法比较 o两方法对蒲黄中
的黄酮甙的分离均较好 o测定结果无明显差异 ∀
°≤∞法的优势在于分离效率高 o°≤ 法分离
蒲黄中黄酮甙的理论塔板数为 u ≅ tsv 左右 o而
°≤∞法达到 tsx 以上 ~无需大量有机溶剂 ~分
析复杂样品时不会污染柱子 ~方法操作简便 ∀
°≤∞法可以替代 °≤ 法测定蒲黄中的黄酮
甙 ∀
#v{y# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tt期
312 x种不同原植物的花粉和 t{批商品药材
中均含有这两种化合物 o而且含量较高 o药理研
究证明两种化合物均为蒲黄的有效成分 o我们
将两种化合物的含量作蒲黄质量标准中的含量
测定指标 ∀部分商品药材中含量偏低 o可能是
混杂有其它杂质k如花丝l所致 ∀
4 参考文献
t 高光耀 o廖矛川 o冯毓秀 q中药蒲黄黄酮成分高效液相色谱
测定及质量评价 q药学学报 ot||{ ovvkwl }vss
u 刘斌 o陆蕴如 q高效液相色谱法测定蒲黄中 u种黄酮苷的
含量 q药物分析杂志 ot||{ ot{kul }{s
v 杨永华 o刘桂焕 o徐华雄 o等 q窄叶香蒲与长苞香蒲化学成
分的分析研究 q中药通报 ot|{y ottktul }v|
w 贾世山 o杨树民 q中药蒲黄黄酮类成分的含量测定 q中草
药 ot|{{ ot|ktl }wz
t||{2tu2sz收稿
薄层扫描法测定天然牛黄中胆酸含量的研究
常增荣 邸峰 周富荣k北京市药品检验所 北京 tsssvxl
摘要 目的 }测定牛黄中胆酸的含量 ∀方法 }硅胶 薄层板 o异辛烷2醋酸丁酯2冰醋酸2甲酸k{ΒwΒu
Βtl展开 oΚ≥ v{s±° oΚ yxs±° o反射法锯齿形扫描 ∀结果 }回收率为 |y qxw h oΡΣ∆为 t qy{ h ∀结论 }
该方法可作为牛黄中胆酸的质量控制方法 ∀
关键词 薄层扫描 牛黄 水解 胆酸
牛黄为牛科动物牛干燥的胆结石 ∀ 5中国
药典6t||x年版牛黄中胆酸采用比色法测定含
量 o由于其它成分的干扰 o样品和对照品显色后
最大吸收不同 o使测定结果和真实值有一定的
差距 o故改用薄层扫描法测定胆酸的含量 ∀据
文献报道 o牛黄中胆汁酸类分为游离胆汁酸和
结合胆汁酸 o游离胆汁酸中主要为胆酸和去氧
胆酸及少量的鹅去氧胆酸 o结合胆汁酸中主要
为牛磺胆酸 !甘氨胆酸及少量的牛磺去氧胆酸 !
牛磺鹅去氧胆酸 !甘氨去氧胆酸 !甘氨鹅去氧胆
酸 ∀由于牛黄中游离和结合型胆酸的比例在自
然存放中有变化 o故采用水解后薄层扫描法测
定游离和结合胆汁酸中主成分胆酸的总和 ∀
1 仪器 !试剂与样品
牛黄由北京同仁堂集团公司提供 o经本所
周富荣主任药师鉴定均为牛科动物牛 Βοσ
ταυρσδοµεστιχυσ °¨¯¬±干燥的胆结石 ∀
岛津 ≤≥2|sss型薄层扫描仪 o定量毛细管
点样器k⁄µ∏°²µ²¯ ≤²l o硅胶 薄层板k烟台化
工研究所l o对照品由中国药品生物制品检定所
提供k批号为 sz{2{|tsl o试剂均为分析纯 ∀
2 实验方法
2 q1 薄层条件及扫描条件
硅胶 薄层板 o展开系统曾试用 ≠ 异辛烷
醋酸丁酯2冰醋酸kwΒuΒtl o异辛烷2醋酸丁酯2
冰醋酸2甲酸k{ΒwΒuΒtl o≈异辛烷2醋酸乙酯2冰
醋酸kxΒxΒtl o…异辛烷2醋酸丁酯2冰醋酸kwΒvΒ
ul o结果展开系统 分离效果最好 ∀展距 tw ∗
tz¦°时分离达到完全 ∀经光谱扫描测定 oΚ≥
v{s±° oΚ yxs±° o反射法锯齿形扫描 o≥÷
v ∀薄层层析图谱见图 t ∀
图 t 对照品及供试品薄层层析图谱
t q供试品 u q胆酸 v q去氧胆酸 w q鹅去氧胆酸
2 q2 对照品及供试品液的制备
胆酸对照品加甲醇制成 s qw{°ª# °¯ p t的溶
液为对照品溶液 ∀
#w{y# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tt期